970 resultados para Enzimas proteolíticas
Resumo:
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
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Pós-graduação em Zootecnia - FMVZ
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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
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O trabalho teve como objetivo principal identificar a produção de enzimas xilanolíticas de um fungo encontrado no solo amazônico a partir do seu crescimento em diferentes fontes de carbono e em dois tipos de meio de cultivo: meio semi sólido e meio líquido Vogel. No mei semi sólido o crescimento do fungo aconteceu durante 7 dias, já no meio líquido foi feito em quatro tempos diferentes: 24, 36, 48 e 52 horas. As fontes de carbono usadas para ambos os meios foram: Após o crescimento os meios foram filtrados e foram realizadas a dosagem de proteína pelo método de Lowry e a determinação da atividade específica. Os filtrados foram concentrados através de tratamento com caulin, diálise e precipitação com acetona. Com os filtrados selecionados pode-se determinar o pH e a temperatura ótimas para a xilanase através de curvas de pH e temperatura. O fungo estudado produz enzimas do complexo xilanolítico, sendo que os melhores resultados foram encontrados usando a xilana no meio líquido e o sabugo de milho no meio semi sólido. Para a enzima encontrada o pH de atividade ótima é no valor 5,0 e foram encontrados dois picos de temperaturas ótima, na faixa de 30ºC e 60ºC, o que pode indicar a presença de mais de uma enzima do complexo xilanolítico
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O aumento do estresse oxidativo tem sido positivamente associado às doenças cardiometabólicas, como hipertensão arterial. Por outro lado, o exercício físico aeróbio de moderada intensidade promove efeitos benéficos tanto na prevenção quanto no tratamento das doenças cardiometabólicas. Os efeitos benéficos estão relacionados à maior produção de óxido nítrico (NO) e/ou sua maior biodisponibilidade e aumento na expressão de enzimas antioxidantes. Sendo assim, o objetivo do trabalho foi analisar o efeito do treinamento físico aeróbio (TFA) na intensidade da máxima fase estável de lactato (MFEL) sobre parâmetros cardiorrespiratórios e cardiovasculares, atividade de enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e catalase, e concentração de nitrito/nitrato (NOx-) e malondialdeído (MDA) em adultos acima dos 40 anos de idade. Fizeram parte do estudo 55 voluntários normotensos (NT – 49,7±0,6 anos) e 32 voluntários hipertensos (HT – 52,7±1,1 anos). O desenho experimental foi realizado através do ensaio clínico controlado cruzado por dezesseis semanas. Os voluntários permaneceram oito semanas sem a realização de TFA, sendo realizadas avaliações antes (período inicial – PI) e após esse período (período intermediário – PINT). Nas oito semanas seguintes todos foram submetidos a 3 sessões/semana de TFA na intensidade da MFEL em esteira ergométrica e após foi novamente realizada a avaliação (período final – PF). As avaliações consistiram de medições da pressão arterial (PA) de repouso (método auscultatório), frequência cardíaca (FC) de repouso e exercício (Polar® - RSX-800CX), testes de VO2 máximo (teste de 1 milha) e coletas de sangue (12 horas de jejum noturno). Amostras de plasma e soro foram utilizadas para análises da atividade da SOD, catalase, concentrações NOx- e MDA. O protocolo para determinação da MFEL foi de acordo com Beneke et al (2003). Para análise estatística foi...
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The conservation of raw milk for long periods of time under refrigeration can result in the lost of its quality. This happens because bacterias, capable of developing in low temperatures, as psichrotrophics, in milk, associates with its enzymatic activities, are capable to degradate it. Although the pasteurization of milk sufficiently diminishes the transmission of the illnesses, that generally eliminates such microorganisms, is not a total efficient process because many enzymes produced for such bacterias are termostable, being able to resist the treatment and to remain active, leading to the loss of the quality of milk and its derivatives. The Normative Instruction 51 of 2002 established that milk must be cooled and stored in the production property, what resulted increasing the incidence of such bacteria in population destined milk. In some parts of the world contaminated milk is causing serious risks to the health of the population, assuming great importance in Public Health, mainly in relation to the hygienic-sanitary conditions of the product. ANVISA establishes, thus, maximum bacteriological concentration that must be evidenced before commercializing the product, guaranteeing the quality of milk as proper for consumption. Based on these aspects, the objective of this work is the microbiological analysis of 30 milk samples type C, collected in bakeries of the city Botucatu, in the state of São Paulo. Analysis were made to determinate the most likely number of termotolerants coliforms, as well the number of colony units of psichrotrophics bacterias, the presence of Salmonella and the enumeration of positive Staphylococcus aureus, at the moment of purchase and validity of the products
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As enzimas estão presentes em todas as células vivas, onde exercem a função de catalisadores das reações que compõem as vias catabólicas e anabólicas do metabolismo celular. Esses biocatalisadores são moléculas de proteínas e seu poder catalítico está associado à conformação nativa, que depende de condições específicas de pH, temperatura e força iônica do meio. Os micro-organismos são bastante atrativos para a indústria, pois possibilitam a produção de enzimas por processos fermentativos em larga escala com regularidade necessária e simplicidade na requisição nutricional. Assim, embora alguns biocatalisadores sejam extraídos de tecidos animais e vegetais, as enzimas industriais são, em sua maior parte, obtidas a partir de micro-organismos. Este trabalho teve como objetivo a produção das enzimas lipase e β-glucanase a partir dos fungos Aspergillus niger e Trichoderma reesei, respectivamente, em diferentes meios de cultura, para determinar as condições de maior produção da enzima em questão. As enzimas produzidas em agitador orbital foram obtidas a partir da filtração do produto da fermentação, precipitação com sulfato de amônio e liofilização. Após a produção e precipitação a atividade das enzimas e a concentração de proteínas foram quantificadas, os parâmetros cinéticos foram determinados frente a diferentes pHs, temperaturas e força iônica do meio. A lipase apresentou melhor atividade a 30°C e em pH 6,0. A presença dos íons Mg2+ e Zn2+ levaram a um aumento na atividade da enzima. A β-glucanase apresentou maiores atividades quando submetidas a 37°C e pH 5,0. Os íons Mg2+, Cu2+ e Ca2+ induziram melhor a atividade enzimática.
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Among the sexual hormones the estrogens are receiving major attention due to their biological activity. Such biological response is atributed to the best conformation recognized by their receptors, resulting in maximum responses. The estrogens are also considered responsible for most of disruptor´s effects caused by their presence in aquatic ecosystems. The 17β-estradiol hormone is produced by vertebrates during the reproductive phase of their lives and its presence has been detected in superficial waters. The objective of this study was to evaluate the cause-effect of tilapia exposition to the hormone 17β-estradiol through the analysis of biotransformation enzymes in liver and gills, complemented with the quantification of 17β-estradiol and estrone in water samples collected from fish ponds integrated to swine production. The present study was conducted under laboratory conditions, in a randomized experimental design with three levels of 17β-estradiol (E2) (0, 5, 15 µg L-1), with three replicates. After 7 days of exposure time, liver and gills were extracted to analyze three isoforms of cytochrome P450: EROD, BROD, PROD and the activity of Glutathione S-Transferase (GST). The results showed that the EROD activity (CYP1A), normally induced by the metabolism of aromatic compounds, did not present statistical differences among the treatments exposed to E2, what means that the hormone did not induce isoform 1A in fish under these particular experimental conditions. PROD activity was significantly altered in both concentrations, by means of 5 and 15 µg L-1, when compared to control. This result can indicate an important role of PROD on the metabolism of E2 present in water. Regarding to the BROD activity, it could be observed differences statistically significant between control and both groups of treatments. Two or more CYP isoforms can contribute to the metabolism of the same compound, what makes BROD a candidate as a next bioindicator of the exposure to E2 in aquatic ecosystems. Analysis of variance could confirm the effect of E2 statistically significant on the GST activity in liver tissues with >90% of significance (Prob>F = 0.0753). Furthermore, it was possible to observe that the values of GSTs activities in liver and gills in both, control and treatments, follow a tendency, that means, enzymatic activity in gills increase as the increasing of the activity in the liver tissues. In this study, the 17β–estradiol was found in measurable concentrations in three sampled points, and these values were similar to the findings of other authors at different locations in Brazil. In addition, those values are much higher than the minimum concentration that presented observable effects (10 ng L-1).
Simulação computacional da extração líquido-líquido fracionada de enzimas para produção de biodiesel
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Liquid-liquid extraction is utilized for purification of biomolecules by Aqueous Biphasic Systems (ABS), since this process does not damage the biotechnological potential of these compounds. In this work, using the free software Scilab®, the fractionated liquid-liquid extraction was studied aiming a lipase (target enzyme) partition in a water + PEG + DEX system. Lisozime was considered as contaminant. As computer simulations has been extensively used when a first estimation of technical feasibility of process is desired, this work demonstred that the system is viable for recovery the 80 % till 90 % the target enzyme, but should be noted that the trial aimed only the fractionation of the enzyme target of a contaminant, not its concentration, which should be done by another process.
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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
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Enzyme stabilization is one critic point in basic and applied enzymology. The increasing interest in applying enzymes in industrial processes has fostered the search for biocatalysts with new properties or extreme stability. Enzyme stabilization can be achieved by different methods: isolating enzyme variants from organisms living in appropriate extreme environments (extremozymes), by protein engineering, chemical modification, use of additives, immobilization. This brief review aims to give a better understanding of those methods employed for enzyme stabilization.
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Pós-graduação em Zootecnia - FCAV
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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)