Nonspecific down-regulation of CD8+ T-Cell responses in mice expressing human Papillomavirus Type 16 E7 oncoprotein from the keratin-14 promoter

The E7 oncoprotein of human papillomavirus 16 (HPV16) transforms basal and suprabasal cervical epithelial cells and is a tumor-specific antigen in cervical carcinoma, to which immunotherapeutic strategies aimed at cytotoxic T-lymphocyte (CTL) induction are currently directed. By quantifying major histocompatibility complex class I tetramer-binding T cells and CTL in mice expressing an HPV16 E7 transgene from the keratin-l l (K14) promoter in basal and suprabasal keratinocytes and in thymic cortical epithelium, we show that antigen responsiveness of both E7- and non-E7-specific CD8(+) cells is down-regulation compared to non-E7 transgenic control mice. We show that the effect is specific for E7, and not another transgene, expressed from the K14 promoter, Down-regulation did not involve deletion of CD8(+) T cells of high affinity or high avidity, and T-cell receptor (TCR) VP-chain usage and TCR receptor density were similar in antigen-responsive cells from E7 transgenic and non-E7 transgenic mice. These data indicate that E7 expressed chronically from the K14 promoter nonspecifically down-regulates CD8+ T-cell responses. The in vitro data correlated with the failure of immunized E7 transgenic mice to control the growth of an E7-expressing tumor challenge, We have previously shown that E7-directed CTL down-regulation correlates with E7 expression in peripheral but not thymic epithelium (T, Dean et al., J, Virol. 73:6166-6170, 1999), The findings have implications for the immunological consequences of E7-expressing tumor development and E7-directed immunization strategies. Generically, the findings illustrate a T-cell immunomodulatory function for a virally encoded human oncoprotein.

Thiopalmitoylation of myelin proteolipid protein epitopes enhances immunogenicity and encephalitogenicity

Proteolipid protein (PLP) is the most abundant protein of CNS myelin, and is posttranslationally acylated by covalent attachment of long chain fatty acids to cysteine residues via a thioester linkage. Two of the acylation sites are within epitopes of PLP that are encephalitogenic in SJL/J mice (PLP104-117 and PLP139-151) and against which increased immune responses have been detected in some multiple sclerosis patients. It is known that attachment of certain types of lipid side chains to peptides can result in their enhanced immunogenicity. The aim of this study was to determine whether thioacylated PLP peptides, as occur in the native protein, are more immunogenic than their nonacylated counterparts, and whether thioacylation influences the development of autoreactivity and experimental autoimmune encephalomyelitis. The results show that in comparison with nonacylated peptides, thioacylated PLP lipopeptides can induce greater T cell and Ab responses to both the acylated and nonacylated peptides. They also enhanced the development and chronicity of experimental autoimmune encephalomyelitis. Synthetic peptides in which the fatty acid was attached via an amide linkage at the N terminus were not encephalitogenic, and they induced greater proportions of CD8(+) cells in initial in vitro stimulation. Therefore, the lability and the site of the linkage between the peptide and fatty acid may be important for induction of encephalitogenic CD4(+) T cells. These results suggest that immune responses induced by endogenous thioacylated lipopeptides may contribute to the immunopathogenesis of chronic experimental demyelinating diseases and multiple sclerosis.

Alterations in Plasmodium falciparum genotypes during sequential infections suggest the presence of strain specific immunity

Many of the asexual stage Plasmodium falciparum proteins that are the targets of host protective responses are markedly polymorphic. The full repertoire of diversity is not defined for any antigen. Most studies have focused on the genes encoding merozoite surface proteins 1 and 2 (MSP1, MSP2). We explored the extent of diversity of some of the less studied merozoite surface antigens and analyzed the degree of complexity of malaria field isolates by deriving nucleotide sequences of several antigens. We have determined the genotype of apical membrane antigen 1 (AMA1) in a group of 30 field samples, collected over 29 months, from individuals living in an area of intense malaria transmission in Irian Jaya, identifying 14 different alleles. AMA1 genotyping was combined with previously determined MSP2 typing. AMA1 had the greatest power in distinguishing between isolates but methodological problems, especially when mixed infections are present, suggest it is not an ideal typing target. MSP1, MSP3, and glutamate-rich protein genotypes were also determined from a smaller group of samples, and all results were combined to derive an extended antigenic haplotype. Within this subset of 10 patients, nine different genotypes could be discerned; however, five patients were all infected with the same strain. This strain was present in individuals from two separate villages and was still present 12 months later. This strain was predominant at the first time point but had disappeared at the fourth time point. This significant change in malaria genotypes could be due to strain-specific immunity developing in this population.

Phase variation in meningococcal lipooligosaccharide biosynthesis genes

Neisseria meningitidis expresses a range of lipooligosaccharide (LOS) structures, comprising of at least 13 immunotypes (ITs). Meningococcal LOS is subject to phase variation of its terminal structures allowing switching between ITs, which is proposed to have functional significance in disease. The objectives of this study were to investigate the repertoire of structures that can be expressed in clinical isolates, and to examine the role of phase-variable expression of LOS genes during invasive disease. Southern blotting was used to detect the presence of LOS biosynthetic genes in two collections of meningococci, a global set of strains previously assigned to lineages of greater or lesser virulence, and a collection of local clinical isolates which included paired throat and blood isolates from individual patients. Where the phase-variable genes lgtA, lgtC or IgtG were identified, they were amplified by PCR and the homopolymeric tracts, responsible for their phase-variable expression, were sequenced. The results revealed great potential for variation between alternate LOS structures in the isolates studied, with most strains capable of expressing several alternative terminal structures. The structures predicted to be currently expressed by the genotype of the strains agreed well with conventional immunotyping. No correlation was observed between the structural repertoire and virulence of the isolate. Based on the potential for LOS phase variation in the clinical collection and observations with the paired patient isolates, our data suggest that phase variation of LOS structures is not required for translocation between distinct compartments in the host. (C) 2002 Published by Elsevier Science B.V. on behalf of the Federation of European Microbiological Societies.

Ex vivo profiling of CD8(+)-T-cell responses to human cytomegalovirus reveals broad and multispecific reactivities in healthy virus carriers

Human cytomegalovirus (HCMV) can establish both nonproductive (latent) and productive (lytic) infections. Many of the proteins expressed during these phases of infection could be expected to be targets of the immune response; however, much of our understanding of the CD8(+)-T-cell response to HCMV is mainly based on the pp65 antigen. Very little is known about T-cell control over other antigens expressed during the different stages of virus infection; this imbalance in our understanding undermines the importance of these antigens in several aspects of HCMV disease pathogenesis. In the present study, an efficient and rapid strategy based on predictive bioinformatics and ex vivo functional T-cell assays was adopted to profile CD8(+)-T-cell responses to a large panel of HCMV antigens expressed during different phases of replication. These studies revealed that CD8(+)-T-cell responses to HCMV often contained multiple antigen-specific reactivities, which were not just constrained to the previously identified pp65 or IE-1 antigens. Unexpectedly, a number of viral proteins including structural, early/late antigens and HCMV-encoded immunomodulators (pp28, pp50, gH, gB, US2, US3, US6, and UL18) were also identified as potential targets for HCMV-specific CD8(+)-T-cell immunity. Based on this extensive analysis, numerous novel HCMV peptide epitopes and their HLA-restricting determinants recognized by these T cells have been defined. These observations contrast with previous findings that viral interference with the antigen-processing pathway during lytic infection would render immediate-early and early/late proteins less immunogenic. This work strongly suggests that successful HCMV-specific immune control in healthy virus carriers is dependent on a strong T-cell response towards a broad repertoire of antigens.

Hist??ria das reformas administrativas no Brasil: narrativas, teoriza????es e representa????es

O trabalho se prop??e a oferecer uma modesta contribui????o ao estudo da hist??ria das reformas administrativas realizadas no Brasil a partir da primeira metade do s??culo XX. Mais do que apresentar uma cronologia de fatos e um repert??rio de projetos, recupera as narrativas e an??lises dos estudiosos do tema para identificar as diferentes explica????es para os sucessos e insucessos do passado e estabelecer um sistema de categorias que seja ??til ?? compreens??o da din??mica hist??rica. Relatos, narrativas, teoriza????es, interpreta????es e ideologias se confundem. Em qualquer um dos casos, constituem representa????es do mundo administrativo brasileiro, quer dizer, apresentam-se como formas simb??licas de um Estado em transforma????o.

Aprendizagem por imitação através de mapeamento Visuomotor baseado em imagens omnidirecionais

Este trabalho propõe uma metodologia de aprendizagem que permite a um robô aprender uma tarefa adaptando-a e representando-a de acordo com a sua capacidade motora e sensorial. Primeiramente, um mapeamento sensoriomotor é criado e converte informação sensorial em informação motora. Depois, através de imitação, o robô aprende um conjunto de ações elementares formando um vocabulário motor. A imitação é baseada nas representações motoras obtidas com o mapeamento sensoriomotor. O vocabulário motor criado é então utilizado para aprender e realizar tarefas mais sofisticadas, compostas por seqüências ou combinações de ações elementares. Esta metodologia é ilustrada através de uma aplicação de mapeamento e navegação topológica com um robô móvel. O automovimento é utilizado como mapeamento visuomotor, convertendo o fluxo óptico em imagens omnidirecionais em informação motora (translação e rotação), a qual é usada para a criação de um vocabulário motor. A seguir, o vocabulário é utilizado para mapeamento e navegação topológica. Os resultados obtidos são interessantes e a abordagem proposta pode ser estendida a diferentes robôs e aplicações.

A recepção da obra de Paulo Coelho pela crítica literária e pelo leitor

Propõe-se um estudo acerca da recepção da obra de Paulo Coelho pela crítica literária e pelo leitor, envolvendo a indústria cultural, sob a perspectiva da Sociologia da Literatura. A pesquisa justifica-se pela grande proporção de leitores que a obra atinge: traduzida para 81 idiomas e lida em 168 países, tendo boa aceitação por diferentes perfis de leitores e por muitos críticos literários de outros países. No Brasil, a produção do escritor é recebida com uma certa reserva pela crítica literária. As intervenções da indústria cultural são discutidas por meio de um diálogo estabelecido entre Theodor W. Adorno, Max Horkheimer, Pierre Bourdieu, Umberto Eco, Luiz Costa Lima e Muniz Sodré. Em seguida, estabelece-se uma discussão sobre valor estético em relação à literatura contemporânea. Posteriormente, são mostradosos elementos temáticos recorrentes e a proximidade da narrativa coelhana com a oralidade, a partir da influência das canções compostas em parceria com Raul Seixas e da operação dos gêneros parábola e fábula.A recepção da crítica é analisada, baseando-se em estudos de Mário Maestri, Eloésio Paulo, teses e dissertações, artigos, entre outros. A recepção do leitor tem como aporte teórico Antonio Candido e Roger Chartier, dentre outros, apoiando-se na Estética da Recepção, especificamente nos estudos de Hans Robert Jauss e Regina Zilberman. É analisada a recepção da obra de Paulo Coelho pelos leitores da rede social Skoob, a fim de verificar o gênero, a idade,o nível de escolaridade, a condição socioeconômica e cultural e as impressões de leitura destes. Compreendendo esses sujeitos-leitores, historicamente, e valendo-se de outros aspectos (em vez dos estéticos) apontados pela Sociologia da Literatura, é possível estabelecer diálogos entre as preferências desses leitores com obras já legitimadas pela teoria e crítica literárias, ampliando o repertório destes e contribuindo para a mediação e a promoção da leitura, no Brasil.

Ansiedade materna manifestada durante o tratamento odontológico de seus filhos

A ansiedade manifestada pela criança durante o atendimento odontológico constitui um elemento potencialmente prejudicial à realização do tratamento bucal. O objetivo deste trabalho foi descrever e analisar os comportamentos de dez mães durante sessões seqüenciais de atendimento odontológico de seus filhos. Todas as sessões foram filmadas em videoteipe com marcas sonoras a cada 15 segundos, indicando os momentos em que foram efetuados os registros dos comportamentos. Um mapeamento geral do repertório de comportamentos permitiu apontar padrões comuns a todas as participantes e padrões específicos, indicadores de maior ansiedade de algumas participantes. Proporcionalmente, o procedimento de anestesia injetável evocou maior freqüência de comportamentos indicadores de respostas de ansiedade das mães. O cirurgião-dentista, atento aos comportamentos de pais e acompanhantes de crianças, pode adotar estratégias que reduzam a ansiedade dos pais, aumentando a freqüência de comportamentos colaborativos da criança com o tratamento. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT

The public performance : impact to music learning in conservatoire tradition

Paper presented at the Conference “The Reflective Conservatoire – 2nd International Conference: Building Connections”. Guildhall School of Music and Drama and Barbican Conference Centre, London. 28 February – 3 March 2009

Viola da terra, património e identidade açoriana

Dissertação de Mestrado, Património, Museologia e Desenvolvimento, 3 de Julho 2013, Universidade dos Açores.

Host-symbiont interactions in the deep-sea vent mussel Bathymodiolus azoricus : a molecular approach

Tese de Doutoramento, Ciências do Mar, especialidade de Biologia Marinha, 19 de Dezembro de 2015, Universidade dos Açores.

De Vaganova a Bournonville : a interdisciplinaridade entre as aulas de Técnica de Dança Clássica, Repertório Clássico e Oficina Coreográfica - 7º ano da Escola de Dança do Conservatório Nacional

Relatório Final de Estágio apresentado à Escola Superior de Dança, com vista à obtenção do grau de Mestre em Ensino de Dança.

Relatório de estágio: mestrado em ensino da música

Resumo I - O projecto “Piano e outros Instrumentos/orquestra” consiste na implementação do formato Piano e Orquestra em complemento às aulas individuais e aos ensaios de conjunto. O trabalho foi dirigido a um grupo de três alunos com idades de 9, 12 e 16 anos, do curso de Iniciação, Básico e Secundário da EMNSC (Escola de Música de Nossa Senhora do Cabo). Foram criados momentos distintos em cada fase. Estimulou-se o desenvolvimento de competências musicais e de estratégias metacognitivas visando a evolução dos alunos e a eficácia na realização do estudo individual. O Projecto foi criado com o objectivo de desenvolver as competências musicais, a motivação para realização do estudo individual e de grupo, o espírito e a audição crítica, o controlo dos factores psicológicos, a ansiedade, o aumento da autoconfiança, a aprendizagem, a melhoria da atitude positiva no momento da execução pública e o incremento do interesse pelas actividades relacionadas com a prática musical. A realização deste projecto visou analisar o grau de motivação, o desenvolvimento e a aquisição de competências musicais dos alunos de piano que frequentaram semanalmente aulas individuais, aulas extra de preparação, ensaios com Orquestra “Da Capo”, ensaios com a Orquestra Maior, duos com violoncelo e com canto. Um dos objectivos era comparar o grau de motivação e desenvolvimento dos alunos quando estudam obras nas aulas individuais que constituem o programa curricular e, por outro lado, quando o fazem em peças seleccionadas especificamente para este Projecto. Esta experiência visou proporcionar um conhecimento nos diversos domínios da música, uma visão diferente da funcionalidade do piano em conjunto com os outros instrumentos, a descoberta das sonoridades do piano contrastante e ao mesmo tempo, integrante com outros instrumentos, as formas de funcionamento dos instrumentos de corda, de sopro, dos assuntos relacionados com a afinação e pretendendo-se assim apurar o sentido de fazer parte integrante de um todo.

Particularidades do ensino do canto a adolescentes no contexto da Escola de Música do Conservatório Nacional: relatório de estágio

Resumo I - O presente Relatório de Estágio foi elaborado no âmbito da Unidade Curricular (UC) de Estágio do Ensino Especializado (EEE) do Mestrado em Ensino da Música da Escola Superior de Música de Lisboa, ramo de especialização em Canto. Incide sobre a Prática Pedagógica desenvolvida com três alunos de Canto da Escola de Música do Conservatório Nacional (EMCN), no ano letivo de 2012/2013, em diferentes níveis de desenvolvimento vocal, adolescentes, ou tendo saído há pouco tempo da adolescência. Nesta secção, encontram-se enumeradas as principais linhas pedagógicas seguidas, assim como os principais motivos das opções tomadas. Descreve-se também a forma como foi organizado e planeado o trabalho técnico e musical desenvolvido com os alunos, adequado à fase de desenvolvimento físico e vocal de cada um, além do conjunto de atividades escolares realizadas, as quais tiveram como finalidade promover o seu desenvolvimento artístico.