PRIM: Proximity imaging of green fluorescent protein-tagged polypeptides

We report a serendipitous discovery that extends the impressive catalog of reporter functions performed by green fluorescent protein (GFP) or its derivatives. When two GFP molecules are brought into proximity, changes in the relative intensities of green fluorescence emitted upon excitation at 395 vs. 475 nm result. These spectral changes provide a sensitive ratiometric index of the extent of self-association that can be exploited to quantitatively image homo-oligomerization or clustering processes of GFP-tagged proteins in vivo. The method, which we term proximity imaging (PRIM), complements fluorescence resonance energy transfer between a blue fluorescent protein donor and a GFP acceptor, a powerful method for imaging proximity relationships between different proteins. However, unlike fluorescence resonance energy transfer (which is a spectral interaction), PRIM depends on direct contact between two GFP modules, which can lead to structural perturbations and concomitant spectral changes within a module. Moreover, the precise spatial arrangement of the GFP molecules within a given dimer determines the magnitude and direction of the spectral change. We have used PRIM to detect FK1012-induced dimerization of GFP fused to FK506-binding protein and clustering of glycosylphosphatidylinositol-anchored GFP at cell surfaces.

The first step of aminoacylation at the atomic level in histidyl-tRNA synthetase

The crystal structure of an enzyme–substrate complex with histidyl-tRNA synthetase from Escherichia coli, ATP, and the amino acid analog histidinol is described and compared with the previously obtained enzyme–product complex with histidyl-adenylate. An active site arginine, Arg-259, unique to all histidyl-tRNA synthetases, plays the role of the catalytic magnesium ion seen in seryl-tRNA synthetase. When Arg-259 is substituted with histidine, the apparent second order rate constant (kcat/Km) for the pyrophosphate exchange reaction and the aminoacylation reaction decreases 1,000-fold and 500-fold, respectively. Crystals soaked with MnCl2 reveal the existence of two metal binding sites between β- and γ-phosphates; these sites appear to stabilize the conformation of the pyrophosphate. The use of both conserved metal ions and arginine in phosphoryl transfer provides evidence of significant early functional divergence of class II aminoacyl-tRNA synthetases.

Direito e neoliberalismo

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Una aproximación al estudio de los riesgos psicosociales en trabajadores de la Administración Pública del Municipio de 25 de Mayo (2015)

Esta tesina está dirigida a analizar la relación existente entre la organización del trabajo y sus consecuencias para la salud de los empleados de la Administración Pública del Municipio bonaerense de 25 de Mayo, contribuyendo al estudio de los riesgos psicosociales. Buscamos acercar a los lectores a la problemática recorriendo el dificultoso camino que los gobiernos locales han venido transitando durante los últimos años. Ofrecemos una descripción sobre el empleo público, poniendo de manifiesto las prácticas nocivas que se han arraigado en él y que resultan perjudiciales para los trabajadores. Y nos centramos en una de las principales causas de enfermedades en los ambientes de trabajo: los riesgos psicosociales. Nuestro argumento central señala que una deficiente organización del trabajo tiene consecuencias negativas sobre la salud de los trabajadores generando este tipo de riesgos. Por lo tanto, en tiempos en que la exposición a ellos se ha hecho más intensa, creemos que es necesario adoptar herramientas para identificarlos rápidamente y así proceder con su evaluación y control con el fin de evitar futuros problemas para la integridad física y mental de los trabajadores. A lo largo de este trabajo de carácter exploratorio cuyas hipótesis derivadas esperamos puedan ser contrastadas por futuras investigaciones más exhaustivas- hemos recurrido a entrevistas semi estructuradas y al Cuestionario ISTAS-21 para obtener información directa de los empleados de la Administración Pública de 25 de Mayo: buscamos saber qué piensan acerca de sus trayectorias, sus tareas, sus relaciones, su entorno, las condiciones de su trabajo y qué opinan sobre los trabajadores del Estado; dado que cualquier reflexión sobre los riesgos psicosociales debe incluir la experiencia de los propios trabajadores

Valoración clínica y microbiológica del láser Er, Cr: YSGG en la terapia periodontal no quirúrgica

Se observa en la literatura una gran controversia alrededor de la capacidad del láser para aportar mejorías al tratamiento periodontal no quirúrgico. El objetivo de este estudio es valorar si, en el tratamiento periodontal básico, el láser es más eficaz que el raspado y alisado radicular en cuanto a la mejoría de parámetros tanto clínicos (profundidad de sondaje, sangrado al sondaje y nivel de inserción) como microbiológicos (presencia o ausencia de A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, T. forsythia). 10.3. MATERIALES Y MÉTODOS Se seleccionan 36 pacientes con enfermedad periodontal crónica generalizada de grado moderado-severo y se reparten en dos grupos: 18 pacientes para el grupo control, en el que se realiza el tratamiento periodontal convencional con instrumentación manual, y 18 pacientes para el grupo experimental, en el que se realiza el tratamiento con el láser Er,Cr:YSGG. Los datos clínicos analizados son: el índice de placa, el índice gingival, la recesión gingival, el nivel de inserción y la profundidad de sondaje. En el laboratorio se analiza, por medio de la PCR, la muestra microbiológica del surco gingival. Los participantes también rellenan un cuestionario sobre la hipersensibilidad dental y las molestias en general percibidas durante el tratamiento. Todos los datos se toman al principio del estudio y a las seis semanas de haber finalizado el tratamiento. Se utiliza el método UNIANOVA para el análisis estadístico entre los dos grupos...

(Table 2) Dinoflagellate cysts in surface sediment samples of METEOR cruises M20/2, M23/1, M34/2 and M34/2

The organic walled cyst content of 41 surface sediment samples from the south-eastern South Atlantic Ocean have been studied to create a dataset that can be used for palaeoceanographic reconstructions. In order to obtain insight into which environmental factors influence the distribution of individual cyst species, the cyst associations have been compared with oceanographic characteristics of the overlying water masses, i.e. temperature, salinity, density and stratification gradients. The associations and relationships have been established by visual examination of the dataset and the multivariate ordination techniques, Detrended Correspondence Analysis and Canonical Correspondence Analysis. Special attention has been given to the factors of transport and preservation of the cysts. Five associations have been recognised as being characteristic of (1) areas influenced by coastal upwelling and/or river outflow, (2) open ocean, (3) Agulhas Current and southern Benguela Current, (4) Benguela Current and (5) Walvis Bay, shelf break area. The factors dominant in influencing either directly or indirectly the cyst distributions appear to be the stratification in the upper 50 m of the water column, nutrient concentration and seasonality. Variations in sea surface temperatures and salinities have only minor effect on cyst distribution.

1983 Men's Gymnastics Team

Back Row: Coach Newt Loken, Mike McKee, Rick Kaufmann, Dave Miller, Steve Scheinman, captain Milan Stanovich, Kevin McKee, Mike McNelis, Nevin Hedlund, asst. coach Bob Darden

Front Row: Richard Saleh, Richard Landman, Scott Ramsay, John (Alex) Will, Ari Golan, Greg Nelson, Drew Bugyis

Not Pictured: Dino Manus

Dyni Muxellani I. V. doct. celeberrimi Commentarius in Regulas Iuris Pontificii /

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Dini Muxellani ... Consilia /

Texto a dos col.

Quando furono scritte le satire di Lodovico Adimari.

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