Locking in alternate conformations of the integrin αLβ2 I domain with disulfide bonds reveals functional relationships among integrin domains

We used integrin αLβ2 heterodimers containing I domains locked open (active) or closed (inactive) with disulfide bonds to investigate regulatory interactions among domains in integrins. mAbs to the αL I domain and β2 I-like domain inhibit adhesion of wild-type αLβ2 to intercellular adhesion molecule-1. However, with αLβ2 containing a locked open I domain, mAbs to the I domain were subdivided into subsets (i) that did not inhibit, and thus appear to inhibit by favoring the closed conformation, and (ii) that did inhibit, and thus appear to bind to the ligand binding site. Furthermore, αLβ2 containing a locked open I domain was completely resistant to inhibition by mAbs to the β2 I-like domain, but became fully susceptible to inhibition after disulfide reduction with DTT. This finding suggests that the I-like domain indirectly contributes to ligand binding by regulating opening of the I domain in wild-type αLβ2. Conversely, locking the I domain closed partially restrained conformational change of the I-like domain by Mn2+, as measured with mAb m24, which we map here to the β2 I-like domain. By contrast, locking the I domain closed or open did not affect constitutive or Mn2+-induced exposure of the KIM127 epitope in the β2 stalk region. Furthermore, locked open I domains, in αLβ2 complexes or expressed in isolation on the cell surface, bound to intercellular adhesion molecule-1 equivalently in Mg2+ and Mn2+. These results suggest that Mn2+ activates αLβ2 by binding to a site other than the I domain, most likely the I-like domain of β2.

An NO derivative of ursodeoxycholic acid protects against Fas-mediated liver injury by inhibiting caspase activity

Caspases are key mediators in liver inflammation and apoptosis. In the present study we provide evidence that a nitric oxide (NO) derivative of ursodeoxycholic acid (UDCA), NCX-1000 ([2-(acetyloxy)benzoic acid 3-(nitrooxymethyl)phenyl ester]), protects against liver damage in murine models of autoimmune hepatitis induced by i.v. injection of Con A or a Fas agonistic antibody, Jo2. Con A administration causes CD4+ T lymphocytes to accumulate in the liver and up-regulates FasL expression, resulting in FasL-mediated cytotoxicity. Cotreating mice with NCX-1000, but not with UDCA, protected against liver damage induced by Con A and Jo2, inhibited IL-1β, IL-18, and IFN-γ release and caspase 3, 8, and 9 activation. Studies on HepG2 cells demonstrated that NCX-1000, but not UDCA, directly prevented multiple caspase activation induced by Jo2. Incubating HepG2 cells with NCX-1000 resulted in intracellular NO formation and a DTT-reversible inhibition of proapoptotic caspases, suggesting that cysteine S-nitrosylation was the main mechanism responsible for caspase inhibition. Collectively, these data suggest that NCX-1000 protects against T helper 1-mediated liver injury by inhibiting both the proapoptotic and the proinflammatory branches of the caspase superfamily.

Nitric oxide inhibits creatine kinase and regulates rat heart contractile reserve.

Cardiac myocytes express both constitutive and cytokine-inducible nitric oxide syntheses (NOS). NO and its congeners have been implicated in the regulation of cardiac contractile function. To determine whether NO could affect myocardial energetics, 31P NMR spectroscopy was used to evaluate high-energy phosphate metabolism in isolated rat hearts perfused with the NO donor S-nitrosoacetylcysteine (SNAC). All hearts were exposed to an initial high Ca2+ (3.5 mM) challenge followed by a recovery period, and then, either in the presence or absence of SNAC, to a second high Ca2+ challenge. This protocol allowed us to monitor simultaneously the effect of SNAC infusion on both contractile reserve (i.e., baseline versus high workload contractile function) and high-energy phosphate metabolism. The initial high Ca2+ challenge caused the rate-pressure product to increase by 74 +/- 5% in all hearts. As expected, ATP was maintained as phosphocreatine (PCr) content briefly dropped and then returned to baseline during the subsequent recovery period. Control hearts responded similarLy to the second high Ca2+ challenge, but SNAC-treated hearts did not demonstrate the expected increase in rate-pressure product. In these hearts, ATP declined significantly during the second high Ca2+ challenge, whereas phosphocreatine did not differ from controls, suggesting that phosphoryl transfer by creatine kinase (CK) was inhibited. CK activity, measured biochemically, was decreased by 61 +/- 13% in SNAC-treated hearts compared to controls. Purified CK in solution was also inhibited by SNAC, and reversal could be accomplished with DTT, a sulfhydryl reducing agent. Thus, NO can regulate contractile reserve, possibly by reversible nitrosothiol modification of CK.

Saving the Monopsony: Exclusivity, Innovation and Market Power in the Media Sector. Research Papers in Law, 7/2006

From the Introduction. The Media Sector has experienced a technological revolution in the last 15 years. Digital encoding of television signals made possible a more efficient use of the radiospectrum. Digital terrestrial television (hereinafter, “DTT”) allows now for the reception of a significant number of free-to-air channels.1 Moreover, the use of new transmission platforms (hereinafter,“platforms”), namely cable and direct-to-home satellite (hereinafter, “DTH”) paved the way for the arrival in Europe of pay-TV operators, which finance their activities mainly via subscription fees. This changing technological landscape is subject to further evolution in the near future, as incumbent telecommunications operators become increasingly interested in making available broadcasting content2 as part of their broadband offer and 3G mobile handsets can be used for the reception of TV signals....The present paper seeks to ascertain whether the Commission “regulatory approach” towards the exclusive sale of premium content is a sound one, in particular in view of the constant technological evolution outlined above. The assumptions underlying landmark Commission decisions will be compared with recent developments of the media sector in Italy. In the NewsCorp./Telepiù case, decided in 2003, the Commission imposed very strict conditions to allow the merger giving birth to Sky Italia, on the assumption that the operation created a lasting near-monopsony in the different upstream markets for the acquisition of premium intervened against the media conglomerate Mediaset (which controls, inter alia, the main three private free-to-air channels in Italy) for an alleged abuse of dominant position.17 In fact, and contrary to the forecasts made by the Commission, Mediaset was in a position to acquire the broadcasting rights of the main Italian football teams, thereby excluding the incumbent (and near-monopolist) pay-TV operator, Sky Italia. This may go to show that the reality of the sector is more complex and evolves faster than one may infer from the Commission practice, thus putting into question its stance regarding exclusivity. The experience of the evolution of the Italian media sector will be used as the starting point for the evaluation of alternative regulatory options.

Expert survey on priorities for the information society in the Caribbean

An on-line survey of experts was conducted to solicit their views on policy priorities in the area of information and communication technologies (ICT) in the Caribbean. The experts considered the goal to “promote teacher training in the use of ICTs in the classroom” to be the highest priority, followed by goals to “reduce the cost of broadband services” and “promote the use of ICT in emergency and disaster prevention, preparedness and response.” Goals in the areas of cybercrime, e-commerce, egovernment, universal service funds, consumer protection, and on-line privacy rounded out the top 10. Some of the lowest ranked goals were those related to coordinating the management of infrastructure changes. These included the switchover for digital terrestrial television (DTT) and digital FM radio, cloud computing for government ICT, the introduction of satellite-based internet services, and the installation of content distribution networks (CDNs). Initiatives aimed at using ICT to promote specific industries, or specific means of promoting the digital economy, tended toward the centre of the rankings. Thus, a general pattern emerged which elevated the importance of focusing on how ICT is integrated into the broader society, with economic issues a lower priority, and concerns about coordination on infrastructure issues lower still.

Evaluation of a Post Discharge Intervention on 30-Day Re-admission and Emergency Room Use in Patients with Diabetes A Pilot Program

Thesis (Master's)--University of Washington, 2016-06

The release of nitric oxide from S-nitrosothiols promotes angiogenesis

Free nitric oxide (NO) reacts with sulphydryl residues to form S-nitrosothiols, which act as NO reservoirs. We sought to determine whether thiol-preserving agents and antioxidants, such as dithiothreitol (DTT) and vitamin C, induce NO release from S-nitrosylated proteins in endothelial cell cultures to promote angiogenesis. NO release was measured directly in cell supernatants using a Sievers NO Analyser, and in vitro angiogenesis was assessed by quantifying capillary-like tube network formation of porcine aortic endothelial cells (PAEC) on growth factor-reduced Matrigel. Incubation of PAEC with DTT or vitamin C significantly increased NO release in a concentration-dependent manner. However, the nitric oxide synthase (NOS) inhibitors, L-NNA and L-NIO, had no effect on DTT- or vitamin C-induced NO release, and there was no concomitant increase in the phosphorylation of endothelial NOS at serine-1177 following DTT or vitamin C treatment. DTT and vitamin C increased capillary-like tube network formation by nine- and two-fold, respectively, and the addition of copper ions doubled the effect of vitamin C. Surprisingly, DTT maintained endothelial tube networks for up to one month under serum-free conditions, and selective inhibitors of guanylyl cyclase (ODQ) and PKG (KT-5823) blocked this, demonstrating the requirement of cyclic GMP and PKG in this process. Both DTT and vitamin C are capable of releasing sufficient NO from S-nitrosothiols to induce capillary morphogenesis. This study provides the first evidence that increased denitrosylation leads to increased bioavailability of NO, independent of NOS activity, to promote sustained angiogenesis.

Uncovering changes in the redox protein interactome of PTEN

Phosphatase and tensin homolog (PTEN) is a redox-sensitive, dual-specificity protein phosphatase involved in regulating a number of cellular processes including metabolism, apoptosis, cell proliferation and survival. It acts as a tumor suppressor by negatively regulating the PI3K/Akt pathway. While direct evidence of a redox regulation of PTEN downstream signaling has been reported, the effect of cellular oxidative stress or direct PTEN oxidation on the PTEN interactome is still poorly defined. To investigate this, PTEN-GST fusion protein was prepared in its reduced form and an H2O2-oxidized form that was reversible by DTT treatment, and these were immobilized on a glutathione-sepharose-based support. The immobilized protein was incubated with cell lysate to capture interacting proteins. Captured proteins were eluted from the beads, analyzed by LC-MSMS and comparatively quantified using label-free methods. After subtraction of interactors that were also present in the resin and GST controls, 97 individual protein interactors were identified, including several that are novel. Fourteen interactors that varied significantly with the redox status of PTEN were identified, including thioredoxin and peroxiredoxin-1. Except for one interactor, their binding was higher for oxidized PTEN. Using western blotting, altered binding to PTEN was confirmed for 3 selected interactors (Prdx1, Trx, and Anxa2) and DDB1 was validated as a novel interactor with unaltered binding. Our results suggest that the redox status of PTEN causes a functional variation in the PTEN interactome which is important for the cellular function of PTEN. The resin capture method developed had distinct advantages in that the redox status of PTEN could be directly controlled and measured.

Reversible oxidation of phosphatase and tensin homolog (PTEN) alters its interactions with signaling and regulatory proteins

Phosphatase and tensin homolog (PTEN) is involved in a number of different cellular processes including metabolism, apoptosis, cell proliferation and survival. It is a redox-sensitive dual-specificity protein phosphatase that acts as a tumor suppressor by negatively regulating the PI3K/Akt pathway. While direct evidence of redox regulation of PTEN downstream signaling has been reported, the effect of PTEN redox status on its protein-protein interactions is poorly understood. PTEN-GST in its reduced and a DTT-reversible H2O2-oxidized form was immobilized on a glutathione-sepharose support and incubated with cell lysate to capture interacting proteins. Captured proteins were analyzed by LC-MSMS and comparatively quantified using label-free methods. 97 Potential protein interactors were identified, including a significant number that are novel. The abundance of fourteen interactors was found to vary significantly with the redox status of PTEN. Altered binding to PTEN was confirmed by affinity pull-down and Western blotting for Prdx1, Trx, and Anxa2, while DDB1 was validated as a novel interactor with unaltered binding. These results suggest that the redox status of PTEN causes a functional variation in the PTEN interactome. The resin capture method developed had distinct advantages in that the redox status of PTEN could be directly controlled and measured.

Epilepszia betegségteher felmérés Magyarországon

Tanulmányomban a 2008 októberében kezdődött Epilepszia Betegségteher Felmérés Magyarországon módszertanát és eredményeit szeretném bemutatni és összehasonlítani a nemzetközi adatokkal. Az epilepszia a felnőtteknél a neurológiai betegségek közül a második leggyakoribb megbetegedés (Magyarországon kb.50-60.000 fő). A keresztmetszeti, kérdőíves felmérés az Egészség-gazdaságtani és Egészségügyi Technológiaelemzési Kutatóközpont és három budapesti Epilepszia Centrum együttműködésében zajlott, több mint 100 beteg bevonásával. A kérdőív egy általános epilepszia kérdőívből és két generikus életminőség kérdőívből (EQ-5D és SF-36) állt. Az eredmények alátámasztották, hogy a terápia-rezisztens betegek éves társadalmi költsége az átlagnál jóval magasabb, főleg a rokkant nyugdíj költsége miatt, és jelentős életminőség romlás is megfigyelhető, elsősorban a rohamtól való félelem miatt.

Megtakarítások és külső finanszírozás az amerikai gazdaságban. A hitelpiaci válság háttere (1997-2007) (Savings and external financing in the American economy. The background to the credit-market crisis (1997–2007))

A tanulmány nem az aktuális hitelpiaci válság enyhítésének kérdésével foglalkozik, hanem az amerikai gazdaság elmúlt négy évtizedének általános és az utolsó tíz évének konkrét beruházási-megtakarítási és növekedési tendenciáit igyekszik feltárni. Azt vizsgálja, hogy milyen mélyebb, belföldi eredetű szerkezeti okai vannak a nemzetközivé dagadt jelzáloghitel-válságnak. A cikk a nyitott gazdaság külső finanszírozással összefüggő mérlegazonosságainak alapján arra a következtetésre jut, hogy az ingatlanpiaci visszaesés és a kibocsátás zsugorodása az Egyesült Államok gazdaságában már több mint másfél évtizede kialakult kedvezőtlen, de még tovább romló belföldi megtakarítási folyamatok következménye. A jelzálogpiac krízise és a lakásépítés drámai visszaesése a túlfogyasztásra és túlhitelezésre ösztönző pénzügyi környezet eredménye. A lakáspiaci és a hitelezési ciklusok pénzügyi innovációkkal történő megnyújtása inkább növelte, mint csökkentette a kibocsátásingadozás érzékenységét. A legfőbb hitelezők Kína, Japán, Németország inkább dolláralapú amerikai vállalati felvásárlásokkal ellensúlyozták a dollárgyengülésből elszenvedett veszteségeiket. 1997-2007 között az Amerikából külföldön befektetett dolláraktívák - javarészt a valuta leértékelődése nyomán - jelentős hozamemelkedést élveztek, és számottevően tompították a belföldön képződött jövedelmek csökkenését. A dollárleértékelődés az eszköz- (és nemcsak az áruexport) oldalon is előnyöket hozott számos nagyvállalatnak. / === / Rather than dealing with the immediate policy steps to dampen the crisis, this paper attempts to reveal the worsening savings/consumption pattern of the US economy over the last ten years. Based on the closed logic of open-economy GDP-accounting, it argues that the current crisis is deeply rooted in shrinking public and private savings trends discernible as early as 1997. The current mortgage-market crisis and deep fall in new residential housing are products of a distorted financial environment that encourages over-borrowing and over-consumption. Expansion of the credit cycle through successive financial innovations has increased, not decreased output volatility. But the main foreign lenders to the US—Japan, China and Germany—have managed to offset their losses on US securities by buying into US companies. Large US firms have also benefited from rapid dollar depreciation as USD-denominated yields on their foreign assets experienced strong run-ups. The weak dollar has also helped American firms with large assets on foreign markets. So there were strong benefits for the US, not just on the goods-export side, but on the asset side, an aspect rarely emphasized.

Válság és hitelderivatívák. A szintetikus fedezett adósságkötelezettségek (CDO-k) árazása és kockázataik (Crisis and loan derivatives. The pricing and risks of synthetic collateralized debt obligations)

A dolgozat első részében röviden áttekintjük a 2007-ben kezdődött pénzügyi válság lefolyását és a válsághoz vezető okokat. A bemutatás során igyekszünk végig a mögöttes folyamatokra és azok mozgatórugóira koncentrálni, ezzel megragadva a válság egyfajta "elméletét". A bemutatásból láthatóvá válik a hitelderivatívák kiemelt szerepe a válság során. A dolgozat második részében az egyik legnépszerűbb hitelderivatív termék, a szintetikus fedezett adósságkötelezettségek (CDO-k) matematikai modellezését és annak problémáit mutatjuk be. Sokak szerint ezek a matematikai modellek okozták - vagy legalábbis felerősítették - a válságot. Az elemzés során megmutatjuk, hogy nemcsak a modellezési eszközök nem voltak megfelelők, hanem az árazás elve sem állta meg a helyét a kockázatsemleges árazási keretben. Ez az eredmény élesen rámutat a mögöttes elméletek válságára. / === / The first part of the paper examines briefly the financial crisis of 2007 and its causes, focusing on its driving processes and key motifs. This shows clearly the importance and centrality of credit derivatives in the crisis. The second part presents a mathematical modelling of one of the most popular credit derivative products: synthetic collateralized debt obligations, along with the drawbacks and problems of the modelling process. It is widely claimed that these products caused or at least precipitated the crises. The authors show not only that the modelling tools were inappropriate, but that the principle for pricing did not match adequately the risk-neutral valuation framework.

Közintézményi reformok szemléleti háttere és fejlődési pályái az ezredfordulón

A cikk a közszolgáltatások szempontjából elemzi az állam szerepét a XXI. században. Megállapítja, hogy a modern demokráciát nemcsak a jogszerűség, hanem az eredményesség is legitimálja. Ennek érdekében a 90-es években a fejlett nyugati államokban elkezdődött az állami-közszolgáltató rendszerek reformja. Ezek közös jellemzője volt, hogy menedzsmentreformokkal kezdődtek, amelyek kiegészültek közpolitikai reformokkal és közigazgatási jogi innovációkkal. A reformlépések sorozatának lényegi törekvése a közszolgáltató rendszerek és szervezetek olyan alapvető átalakítása, amely jelentősen megnöveli a hatékonyságot, az eredményességet, az alkalmazkodóképességet és az innovációs kapacitásokat. Megtöri a szolgáltatási monopóliumokat olyan versenykörülmények kialakításával, amelyben az állami, a magán és a civil társadalom szolgáltató szervezetei versenyeznek. A közszolgálati menedzsment megújítása a modern polgári demokráciák állampolgáraihoz, mint igényes közszolgáltatási fogyasztókhoz közelít.

A beosztás és a nemek hatása a változások érzékelésére egy lean projekt tapasztalatai egy magyar autóipari beszállítónál (Efficient possibilities of the customer complaints: compensation and apology)

Tanulmányukban a szerzők egy magyar tulajdonú autóipari beszállító lean (továbbiakban karcsú) átalakulását vizsgáljuk. Bár az új rendszer bevezetése alig több mint egy éve kezdődött el a vállalatnál, mégis a rövid idő ellenére komoly eredményekről számolhatnak be. Különösen látványos a pénzügyi mutatók és a vevői elégedettség területén elért javulás. Kutatásuk célja kettős volt: (1) megvizsgálni, hogyan érzékelik a vezetők és a beosztottak a változásokat, valamint (2) összehasonlítani a vállalat két üzemében dolgozó nők és férfiak átalakítással kapcsolatos reakcióit és érzeteit. Az eredmények alapján elmondható, hogy a vezetők és a beosztottak, csakúgy, mint a két nem képviselői, nagyon eltérően gondolkodnak a változásokról és az átalakítás sikerének hátteréről. Eredményeik tükrében megállapítható, hogy a vizsgált szervezetnél a női munkavállalóknál a hit, a férfiaknál az elkötelezettség az a tényező, amely leginkább hatással van a sikerérzetre. A kutatás tapasztalatait felhasználva tanácsokat fogalmaznak meg a karcsú menedzsment sikeres bevezetésével kapcsolatosan. ______________ Relatively little research attention has been given to what happens after service failure, how the organizations respond to the failure and how this response affects customers’ subsequent behaviours and attitudes. This article proposes to take an in-depth look at the different organizational responses to customer complaints. On the basis of the equity theory the concept of justice has been used that involves distributive, procedural and interactional justice. Using 2x2x2 factorial design experiment based on scenarios the main findings of the research is that interactional justice (explanation and apology) is as important as distributive justice (compensation). On the other hand the result is dependent on the failure type: different recovery effort is efficient in the case of outcome or process failure.

Vállalati jellemzők és összefüggéseik a válság időszakában – A „Versenyben a világgal” kutatási program 2009. évi felmérésében résztvevő vállalatok jellemzése

Tanulmányunkban a Versenyben a világgal kutatási program 2009-ben készült felmérésének 300 vállalatra kiterjedő mintáját elemeztük, a résztvevő vállalatok kiválasztott jellemzőit és e jellemzők összefüggéseit vizsgálva. A munka fő célja – hasonlóan a 2004-es versenyképességi felmérés mintájáról készült korábbi elemzéshez (Wimmer – Csesznák, 2005) – olyan vállalatcsoportok, kategóriák kialakítása volt, mely alapul szolgálhat a különböző kutatók által készítendő további elemzésekhez. Az előzetesen megfogalmazott elvárás az volt, hogy a kiválasztott jellemzők alapján egységes, minden kutató által azonosan értelmezett vállalatcsoportokat hozzunk létre. A hét vizsgált jellemző egy része objektív, mérhető vagy tényszerű szempontokra épül (pl. méret, tulajdonos, ágazat), míg mások a vállalatvezetők véleményén alapulnak (pl. a változásokhoz való viszony, vagy a vállalati teljesítmény megítélése a versenytársakhoz képest). Tanulmányunkban bemutatjuk a minta jellemzésére kialakított kategóriákat, majd ezek alapján jellemezzük a Versenyképesség-kutatás 2009. évi felmérésében résztvevő vállalatokat, s röviden összevetjük a minta jellemzőit az előző, 2004-ben vizsgált vállalati kör jellemzőivel. A tanulmány harmadik részében a kiválasztott jellemzők közötti kapcsolatokat, összefüggéseket vizsgáljuk, képet adva ezzel a magyar gazdaságban működő vállalatok bizonyos jellemzőiről is a 2008-ban kezdődött gazdasági válság első időszakában. _____ Our study analyses the main characteristics of the companies involved in the the Competitiveness Research Program survey carried out during 2009. The research was organised by the Competitiveness Research Centre at the Corvinus University of Budapest.