Characterisation of dystrophin in carriers of Duchenne muscular dystrophy.

Dystrophin, the protein product of the Duchenne muscular dystrophy (DMD) gene, was studied in needle biopsy samples taken from the quadriceps muscle of 15 asymptomatic carriers of DMD (13 adults and 2 young girls) and one symptomatic adult carrier. Antibodies to N- and C-terminal regions of dystrophin were used for both Western blot analysis and immunocytochemistry and a monoclonal antibody to beta-spectrin used to assess membrane integrity. All asymptomatic adult carriers showed some abnormality in dystrophin immunostaining but very few negative fibres were present. A clear mosaic of dystrophin positive and negative fibres was seen only in the adult symptomatic carrier and the two young girls. On a Western blot, all carriers studied had dystrophin of normal molecular weight, but most had reduced abundance. In adult carriers, the amount of dystrophin relative to normal controls varied, but it was unrelated to age, serum creatine kinase (CK) levels or to the degree of pathology. Carriers with normal CK showed abnormalities in dystrophin expression. The dystrophin immunoblotting profile of the 2 young girls was very similar to that of their mothers, but the mosaic pattern of immunostaining was not apparent in the older carriers. In conclusion, dystrophin immunostaining and Western blot analysis of biopsy samples from asymptomatic carriers is often abnormal and they may be useful additional aids for establishing carrier status, particularly in younger girls.

Abordagem inicial de lesões mamárias por biopsia helicóide: estudo experimental

OBJECTIVE: Evaluating the kit-Bh performance in carrying out of breast biopsies. METHODS: They were randomly selected a sample of 30 patients with breast cancer undergoing mastectomy, based on the results of a pilot study from February 2008 to April 2010. They were excluded women with had not palpable, stone-hard consistency tumors, previous surgical manipulation or that contains liquid. Using the helicoid biopsy Kit (kit Bh) and an equipment Core biopsy with cannula and needle and 14 gauge respectively, it was collected a fragment of sound equipment in the area and in tumors in each specimen, totaling 120 fragments for histological study. For data analysis, it was defined a 95% confidence level and used the SPSS-13 version, the Kappa index and the parametric Student t test. RESULTS: Mean age of patients was 51.6 years (± 11.1 years). The infiltrating ductal carcinoma showed a higher incidence, 26 cases (86.7%). The Core biopsy had a sensitivity of 93.3%, specificity of 100% and accuracy 96.7%, while the helicoid biopsy had a sensitivity of 96.7%, specificity of 100% and accuracy 98.3%. By comparing the histology of tumors and the fragments of biopsies, there was high degree of agreement in diagnoses (kappa of 0.93 with p <0.05) CONCLUSION: Both devices provided the histological diagnosis of lesions with high accuracy. Results of this study showed that the helicoid biopsy is a reliable alternative in 22 the preoperative diagnosis of breast lesions. Further studies in vivo better will define the role of Kit Bh in the diagnosis of these lesions

Preliminary study on age- and sex-dependent alterations in the composition of skeletal muscle fibers of Brasileiro de Hipismo horses

The aim of this work was to characterize the distribution of myofibers in the gluteus medius muscle of inactive horses of the Brasileiro de Hipismo (BH) breed at different ages by means of histochemical analyses, according to sex and depth of the biopsy. A total of 78 inactive horses (9 castrated males, 35 stallions, and 34 females) of the BH breed, aged 1 to 4 years, were used. A percutaneous muscle biopsy was obtained with a 6.0-mm Bergstrom-type needle, which allowed the removal of muscle fragments at depths of 20 and 60 mm. Myofiber types were determined based on myofibrillar adenosine triphosphatase (mATPase) and nicotinamide dinucleotide tetrazolium reductase (NADH-TR) techniques. Morphometry of the fibers was determined based on cross-sectional area (CSA), mean frequency (F), and relative cross-sectional area (RCSA). The current study demonstrated that BH horses 3 and 4 years of age show a greater percentage of, and area occupied by, type IIA fibers and lower percentage of type IIX fibers in the gluteus medius muscle compared with horses 1 and 2 years of age. No difference was found between sexes in the frequency of and area occupied by the different fiber types at any of the depths and ages studied. In this study, females showed a greater CSA for all fibers in comparison with males, at 1 year of age. The results of the current study indicate that the gluteus medius muscle of inactive BH horses shows modifications in its structural and biochemical composition during the growth of the animals, leading to a better oxidative capacity.

Laparoscopy hepatic biopsy through cauterization

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Leiomiossarcoma de retroperitônio: relato de caso

Os autores relatam um caso de leiomiossarcoma de retroperitônio, provavelmente originário da parede da veia cava inferior, em que foram realizados numerosos exames por imagem, com resultados contraditórios e conduta cirúrgica muito retardada. Comenta-se ainda sobre a necessidade de estabelecer-se rapidamente o diagnóstico da lesão, por meio de exames de imagem com biópsia dirigida, e a necessidade de ressecção completa da lesão, sempre que possível, ou mesmo a realização de ressecções parciais seguidas de tratamento complementar.

Thyroid cell proliferation in Graves' disease - Use of MIB-1 monoclonal antibody

OBJECTIVE: To measure thyroid cell proliferation in patients with Graves' disease (GD) before and during treatment with antithyroid drugs.STUDY DESIGN: Patients were assessed by fine needle aspiration biopsy before (n=20) and after 4 (n=19) and 12 months of treatment (n=15) with propylthiouracil or methimazole. Cell proliferation index (CPI) was estimated by immunocytochemistry using MIB-1. CPI was studied in relation to the cytologic parameters of the smears; clinical parameters, such as Wayne's Clinical Index (WCI) and time without treatment; laboratory parameters, such as (131)Iuptake and dosage of serum free thyroxin and thyroid-stimulating hormone; and thyroid ultrasound.RESULTS: CPI varied from 0.00% to 25.00% before treatment, 0.00% to 23.00% at 4 months and 0.00% to 14.84% at 12 months. CPI median values were 6.50%, 4.30% and 3.30%, respectively (before and after 4 months and 12 months of treatment). CPI had a positive correlation with WCI and FT4 at 12 months of treatment.CONCLUSION: Thyroid CPI in GD varies from case to case. However, due to its decreasing pattern during follow-up and its positive correlation with thyrotoxicosis severity, CPI may indicate the functional status of the gland and contribute to a better understanding of GD.

Segurança e eficácia da técnica de biopsia pulmonar transtorácica percutânea para avaliação histopatológica do parênquima pulmonar de ovinos clinicamente sadios

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Complications and risk factors in transrectal ultrasound-guided prostate biopsies

CONTEXTO E OBJETIVO: A biópsia da próstata não é um procedimento isento de riscos. Existe preocupação com respeito às complicações e quais seriam os melhores antibióticos usados antes do procedimento. O objetivo foi determinar a taxa de complicações e os possíveis fatores de risco para complicação na biópsia da próstata. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo prospectivo clínico, realizado no Hospital das Clínicas de Botucatu. MÉTODOS: Foram realizadas biópsias em 174 pacientes que apresentavam anormalidade ao exame digital da próstata ou antígeno prostático específico maior que 4 ng/ml ou ambos. Todos os pacientes realizaram enema e antibioticoprofilaxia previamente ao exame. As complicações foram anotadas após o término do procedimento e em consultas posteriores. Algumas condições foram investigadas como possíveis fatores de risco para biópsias de próstata: idade, câncer da próstata, diabetes melito, hipertensão arterial sistêmica, antecedentes de prostatite, uso de ácido acetilsalicílico, volume prostático, número de biópsias e uso de sonda vesical. RESULTADOS: As complicações hemorrágicas foram mais comuns (75,3%) enquanto que as infecciosas ocorreram em 19% dos casos. O tipo mais freqüente foi a hematúria, ocorrendo em 56% dos pacientes. A infecção do trato urinário ocorreu em 16 pacientes (9,2%). Sepse foi observada em três pacientes (1,7%). Não houve óbitos. em 20% dos pacientes não foram observadas complicações após o exame. A presença da sonda vesical foi fator de risco para complicações infecciosas (p < 0,05). O número maior de amostras nas biópsias foi relacionado à hematúria, sangramento retal e complicações infecciosas (p < 0,05). As demais condições investigadas não se relacionaram com complicações pós-biópsia da próstata. CONCLUSÕES: As complicações pós-biópsia da próstata foram em sua maioria autolimitadas. A taxa de complicações graves foi baixa, sendo a biópsia de próstata guiada pelo ultra-som segura e eficaz. A retirada de um maior número de fragmentos na biópsia relaciona-se com hematúria, sangramento retal e complicações infecciosas. A sonda vesical foi um fator de risco para complicações infecciosas.

Fine needle aspiration (FNA) cytology of pilomatrixoma: report of 14 cases and review of the literature

We describe 14 cases of pilomatrixoma which were diagnosed preoperatively on FNA cytology. In contrast to the literature, our series showed male preponderance and some of the tumours in unusual locations such as thigh and breast. In three patients the rumours were larger than 5 cm. The clinical diagnosis varied from tumour not otherwise defined to sarcoma. The cytologic presentation had features which allowed a correct diagnosis in all cases and included basaloid cells surrounded by delicate pink fibres, shadow cells, giant cells, naked nuclei and calcium deposits. It is concluded that the FNA cytology of pilomatrixoma is characteristic and will allow a conclusive diagnosis even in cases with an aberrant clinical presentation.

Avaliação da expressão da proteína bcl-2 no carcinoma de mama: estudo em punção aspirativa por agulha fina; correlação com grau histológico em espécimes cirúrgicos correspondentes

INTRODUÇÃO: O gene bcl-2 codifica uma proteína envolvida no processo de controle da apoptose. Inicialmente descrito em linfomas e posteriormente em tecidos epiteliais, sua expressão é freqüentemente encontrada em carcinomas de mama, associada a fatores de prognóstico favorável. Como a punção aspirativa por agulha fina (PAAF) tem sido utilizada como um método confiável na investigação de carcinomas de mama, acessamos a expressão de bcl-2 em material assim obtido e correlacionamos sua positividade com o grau histológico, avaliado em material cirúrgico correspondente, das respectivas pacientes, seguindo a classificação de SBR (Scarff, Bloom e Richardson). OBJETIVOS: Avaliar a expressão de bcl-2 em PAAF e correlacionar com grau histológico. METODOLOGIA: A positividade do bcl-2 foi analisada, por imunocitoquímica, em 118 casos consecutivos de PAAF e correlacionada com grau histológico em material cirúrgico correspondente, segundo classificação de SBR. RESULTADOS: A positividade para bcl-2 foi encontrada em 77 de 118 casos de PAAF (65,25%) e foi inversamente proporcional ao grau histológico (84,37%, p = 0,0022). CONCLUSÃO: A expressão de bcl-2 em PAAF correlaciona-se com fator de bom prognóstico. O índice de positividade encontrado, assim como a correlação inversa com grau histológico, está de acordo com dados publicados previamente. O fácil e rápido manejo do material obtido por PAAF permite a aplicação de técnicas complementares, de maneira confiável, como demonstra este estudo. A positividade do bcl-2 correlacionada com baixo grau histológico, assim como com outros fatores de bom prognóstico, pode, no futuro, proporcionar informação preditiva e prognóstica para pacientes candidatas a tratamento quimioterápico neo-adjuvante.

PSA and androgen-related gene (AR, CYP17, and CYP19) polymorphisms and the risk of adenocarcinoma at prostate biopsy

The aim of the present study was to examine the impact of polymorphisms in prostate-specific antigen (PSA) and androgen-related genes (AR, CYP17, and CYP19) on prostate cancer (PCa) risk in selected high-risk patients who underwent prostate biopsy. Blood samples and prostate tissues were obtained for DNA analysis. Single-nucleotide polymorphisms in the 50-untranslated regions (UTRs) of the PSA (substitution A > G at position -158) and CYP17 (substitution T > C at 50-UTR) genes were detected by polymerase chain reaction (PCR)-restriction fragment length polymorphism assays. The CAG and TTTA repeats in the AR and CYP19 genes, respectively, were genotyped by PCR-based GeneScan analysis. Patients with the GG genotype of the PSA gene had a higher risk of PCa than those with the AG or AA genotype (OR = 3.79, p = 0.00138). The AA genotype was associated with lower PSA levels (6.44 +/- 1.64 ng/mL) compared with genotypes having at least one G allele (10.44 +/- 10.06 ng/mL) (p = 0.0687, 95% CI - 0.3146 to 8.315, unpaired t-test). The multivariate analysis confirmed the association between PSA levels and PSA genotypes (AA vs. AG+GG; chi(2) = 0.0482) and CYP19 (short alleles homozygous vs. at least one long allele; chi(2) = 0.0110) genotypes. Genetic instability at the AR locus leading to somatic mosaicism was detected in one PCa patient by comparing the length of AR CAG repeats in matched peripheral blood and prostate biopsy cores. Taken together, these findings suggest that the PSA genotype should be a clinically relevant biomarker to predict the PCa risk.

Experimental poisoning by Senecio brasiliensis in calves: quantitative and semi-quantitative study on changes in the hepatic extracellular matrix and sinusoidal cells

A matriz extracelular (MEC) desempenha um papel importante em lesões hepáticas crônicas e tem sido estudada em modelos de intoxicação experimental. em bovinos, no entanto, não há estudos específicos sobre a MEC hepática normal ou com lesões crônicas. Por isso, foi desenvolvido um modelo de intoxicação experimental hepático usando Senecio brasilliensis, uma planta que contém alcalóides pirrolizidínicos e causa lesão hepática dependente da dose. Cinco bezerros receberam por via oral, 0.38g/kg de folhas secas por 24 dias. Biópsias hepáticas foram obtidas a cada 15 dias durante 60 dias. Sinais clínicos de complicações digestivas surgiram da terceira semana do experimento. Um bezerro morreu aos 45 dias e os outros quatro foram avaliados até os 60 dias. As biópsias hepáticas foram processadas para microscopia óptica, imuno-histoquímica e microscopia eletrônica de transmissão. No trigésimo dia, as lesões hepáticas eram progessivas caracterizadas por vacuolização hepatocelular, necrose, apoptose, megalocitose, e fibrose centrolobular, pericelular e portal. Foram realizadas avaliações quantitativas e semi-quantitativas de componentes da MEC hepática antes e após o aparecimento das lesões. Foi realizada morfometria do colágeno total e do sistema de fibras elásticas. Colágeno total e colágenos tipos I e III aumentaram progressivamente em todos os locais do fígado. Mudanças na localização, quantidade e disposição do sistema de fibras elásticas foram também observadas. Houve um aumento significativo de células de Kupffer aos 30 dias e de células sinusoidais totais aos 45 e 60 dias. As lesões hepáticas neste experimento foram progressivas mesmo após a remoção da planta. Lesões de fibrose severa foram localizadas principalmente nos espaços porta, seguido por fibrose veno-oclusiva e pericelular. Os colágenos tipo I e tipo III foram observados no fígado normal e no fígado dos bezerros afetados, com predomínio do tipo I. Nos bezerros afetados o aumento do colágeno total e do sistema de fibras elásticas foi paralelo ao aumento no número das células sinusoidais.