Xenodiagnóstico artificial "post-mortem" em chagásicos crônicos

A fim de obter metodologias que permitam estabelecer, com segurança, o diagnóstico "post-mortem " da infecção chagásica, adaptou-se o xenodiagnóstico artificial a necropsiados com diferentes tempos de óbito. O testefoi positivo em três (30%) de dez chagásicos autopsiados. O tempo decorrido entre o êxito letal e o início do repasto pelos triatomineos destes chagásicos foi de duas horas, duas horas e quinze minutos e sete horas, respectivamente. Discutem-se os fatores que podem explicara sobrevivência do Trypanosoma cruzi no hospedeiro morto bem como as aplicações práticas do achado.

O teste imunoenzimático elisa no líquido pericárdico: novo método para o diagnóstico post-mortem da doença de Chagas

Realizou-se o teste imunoenzimático ELISA, paralelamente à reação de imunofluorescência, para a detecção de anticorpos antí-Trypanosoma cruzi, em 137 amostras de líquidos pericárdicos humanos, colhidos na necropsia. Os resultados foram cotejados com os achados anatomopatológicos. Observou-se que: (1) os dois testes foram positivos em 30 casos e negativos em 105; (2) o teste ELISA foipositivo em 2 casos nos quais a immofluorescència revelou-se negativa; num desses casos, havia sinais morfológicos de doença de Chagas; (3) a média geométrica dos títulos obtidos com o teste ELISA foi significativamente maior que a da imunofluorescência; (4) o índice de concordância entre os dois testes apresentou o valor de 0,985. O presente relato parece-nos inédito quanto ao uso do teste imunoenzimático no líquidoperícárdicopara o diagnóstico post- mortem da doença de Chagas.

A pesquisa bacteriológica post-mortem

The A. A. made bacteriological invesigations in 145 cases of autopsy. These investigations were carried out on the blood and spleen. The cultures were positive in 67 cases and in 21 of these there was body contamination. In the other cases the isolated bacteria were the proved or probable cause of the disease. For the Staphylococcus alone (isolated in 9 cases) we cannot give a definite opinion. We think that presence of bacteria in the blood and in the spleem implies bacteriemia at the moment of death, according to the observations of Hunt and co-workers. In our cases such presence was related to that of anatomical lesions of bacterial origin. When the bacteria were present only in the spleen we think that there had been bacteriemia, not present at the moment of the death. We only observed the contamination by contiguity when the bacteria were present in the blood of the heart. The isolated bacteria were always related to the presence of anatomical lesions. In only 4 cases was this not observed. We were impressed by the great number of negative results even in bodies kept for more than 24 hours. In only 21 cases was body contamination present. In rare cases the bacteria were isolated from the lesions and not from the blood and spleen. We think that apart from the interest of invesigaion, the bacteriological examinations in body material will be able to clear up the diagnosis of many obscure and unnoticed infections. In almost all our cases we obtained that result.

Mycobacterium bovis identification by a molecular method from post-mortem inspected cattle obtained in abattoirs of Mato Grosso do Sul, Brazil

The presence of Mycobacterium bovis in bovine carcasses with lesions suggestive of tuberculosis was evaluated. Seventy-two carcass samples were selected during slaughter inspection procedures in abattoirs in the state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Seventeen (23.6%) of samples showed colonies suggestive of mycobacteria that were confirmed to be acid-fast bacilli by Ziehl-Neelsen staining. Polymerase chain reaction (PCR) using primers specific for M. bovis identified M. bovis in 13 (76.5%) isolates. The PCR-restriction enzyme pattern analysis using gene encoding for the 65-kDa protein and two restriction enzymes identified the remaining four isolates that were represented by two M. tuberculosis complex and two nontuberculous mycobacteria. The results are indicative of infection of slaughter cattle by M. bovis and other mycobacteria in the state of Mato Grosso do Sul.

Caracterização das lesões por Cysticercus bovis, na inspeção post mortem de bovinos, pelos exames macroscópico, histopatológico e pela reação em cadeia da polimerase (PCR)

Considerando a necessidade do conhecimento da cisticercose bovina e do aperfeiçoamento dos métodos de diagnóstico desta doença, objetivou-se verificar a ocorrência do Cysticercus bovis nos diversos locais anatômicos, tais como: cabeça, coração, esôfago, diafragma, língua, fígado e carcaça, examinados pelo Serviço de Inspeção Federal. O diagnóstico foi feito por macroscopia, microscopia e PCR com extração de DNA por fervura para a identificação do metacestóide. Dos 22043 bovinos abatidos, 713 (3,23%) estavam infectados. O coração foi o sítio anatômico mais afetado, com 1,90% (420/22043), seguido da cabeça, 1,11% (245/22043), do esôfago, 0,08% (18/22043), da carcaça, 0,07% (15/22043), do diafragma, 0,03% (7/22043), do fígado, 0,02% (5/22043) e da língua, 0,01% (3/22043). Dos cistos obtidos, 58,35% (416/713) estavam mortos e 41,65% (297/713), vivos. As diferenças entre os sítios anatômicos e a condição morfológica dos cistos foram significativas (p < 0,05). Dos 416 cistos mortos, 253 foram examinados por apresentarem características de: lesões nodulares firmes, brancacentas, com material amarelado, por vezes com aspecto calcário, no interior. O exame microscópico revelou granulomas comumente representados por centro necrótico e/ou mineralizado, envolto por histiócitos dispostos em paliçada, células gigantes multinucleadas, infiltrado misto, predominantemente de mononucleares, e fibrose. Por vezes, a periferia das lesões tinha características de tecido de granulação e mineralização em forma de lâminas lineares. Os restos parasitários foram identificados como um material hialino acelular, contendo elementos ovais e circulares, basofílicos, acidófilos e incolores, denominados corpúsculos calcários. Em algumas lesões foram observados raros corpúsculos, dispersos na reação inflamatória. Nódulos fibrosos, ricos em infiltrado linfóide ou crônico ativos, foram frequentemente visualizados. Dos cistos vivos examinados, 65% (13/20) foram positivos para C. bovis , confirmando o diagnóstico ambulatorial e a eficácia do método de PCR utilizado. Em virtude da positividade observada para C. bovis nos exames histopatológico e PCR, particularmente em fígado e esôfago, sugere-se que seja reformulado o artigo 176 do Regulamento de Inspeção Industrial e Sanitária de Produtos de Origem Animal, incluindo estes locais na rotina de inspeção nos matadouros.

Uso de métodos complementares na inspeção post mortem de carcaças com suspeita de tuberculose bovina

O objetivo foi utilizar métodos complementares de diagnóstico (histopatológicos, bacteriológicos e moleculares), no julgamento de lesões suspeitas de tuberculose observadas durante a inspeção post mortem de rotina em abatedouros. Foi acompanhado o abate e a inspeção de 41.193 bovinos, sadios ao exame ante mortem, em sete abatedouros no estado de Mato Grosso. Carcaças de 198 (0,48%) animais apresentaram lesões, sendo 182 (92,0%) classificadas como granulomatosas ou piogranulomatosas na avaliação histopatológica. Entretanto, na baciloscopia, não foi evidenciada a presença de bacilo álcool-ácido resistente (BAAR). Mycobacterium bovis foi isolado em três (1,5%) lesões, provenientes de linfonodos retrofaringeanos de bovinos com até três anos de idade. Quando usado a PCR múltipla (m-PCR) diretamente nos fragmentos de tecido, detectou-se a presença de DNA de M. bovis em 14 (7,0%) lesões, incluindo as três amostras identificadas na análise bacteriológica. O julgamento das lesões pelo exame macroscópico concordou em 93,0% (184/198) com os resultados obtidos por meio da PCR. A fim de evitar equívocos durante a avaliação, principalmente das lesões paucibacilares, como as encontradas neste estudo, recomenda-se a utilização de testes complementares rápidos e confirmatórios. A m-PCR, associada à inspeção post mortem de rotina, demonstrou ser uma técnica promissora para a vigilância da tuberculose bovina em abatedouros, contribuindo para o sucesso do programa de erradicação da tuberculose bovina.

Nem tudo que parece ser, é lesão: aspectos anatômicos, não lesões, artefatos, lesões sem significado clínico e alterações post mortem encontrados na necropsia de suínos domésticos e selvagens (Sus scrofa)

A interpretação das alterações encontradas na necropsia é uma etapa importante para o sucesso do diagnóstico final. Este trabalho tem como objetivo descrever e ilustrar os aspectos anatômicos, não lesões, artefatos, lesões sem significado clínico e alterações post mortem encontradas em suínos domésticos e selvagens. Além disso, também se recomenda técnicas de colheita de tecidos para o diagnóstico de doenças que acometem essa espécie. Os principais aspectos anatômicos e não lesões descritos são fímbrias linguais, quadrilátero esofágico, toro pilórico e demarcação do padrão lobular do fígado (sistema gastrintestinal); tonsilas do palato mole, tecido linfoide associado ao estômago, placas de Peyer do intestino delgado e dobras da margem do baço (sistema hematopoiético); mediastino proeminente do testículo e aréolas da placenta (sistema reprodutor); atelectasia pulmonar e apêndice decidual (feto); e glândulas carpais (sistema tegumentar). Os artefatos de eutanásia abordados são petéquias na superfície do pulmão e rim, falsa anemia por sangria, hemorragia subdural por concussão cerebral, pseudo-infartos do baço e aspecto cerebriforme do intestino delgado. As lesões de pouco significado clínico descritas são cistos renais, linfonodos com pigmento de ferro, papilomas e hemangiomas no escroto, ossos no mesentério e hiperemia da mucosa gástrica. As alterações post mortem comumente encontradas são livor mortis, músculos pálidos, pseudomelanose e líquido serosanguinolento nas cavidades torácica e abdominal em fetos.

Acompanhamento das alterações post-mortem (Glicólise) no músculo do jacaré do pantanal (Caiman crocodilus yacare)

Realizaram-se avaliações químicas, histológicas e medidas de pH ao longo do tempo da degradação do glicogênio no músculo longissumus dorsi do jacaré. A metabolização do glicogênio muscular durou em torno de 50 horas, situando-se o pH muscular inicial entre 6,6 e 6,7 e estabilizando-se, depois de 36 a 48 horas, em torno de 5,5-5,6. Oitenta a 85% do glicogênio inicial foi metabolizado nas primeiras 20-25 horas pós-abate. Histologicamente o teste do PAS revelou, ao longo do tempo de armazenamento refrigerado, um decréscimo dos grânulos de glicogênio.

Alterações bioquímicas post-mortem de matrinxã Brycon cephalus (Günther, 1869) procedente da piscicultura, mantido em gelo

No presente trabalho, foram estudadas as alterações bioquímicas post-mortem que ocorreram em matrinxã Brycon cephalus (Günther, 1869) procedente da piscicultura e mantido em gelo em Manaus - AM. Foi determinado o tempo de estocagem em gelo por meio das avaliações sensoriais físicas e gustativas, das análises de pH, Nitrogênio das Bases Voláteis Totais (N-BVT) e bacteriológicas durante 29 dias. Foram determinados os índices de rigor-mortis, as concentrações de ATP e seus produtos de degradações e o valor K. De acordo com a composição química, o peixe foi classificado como "semi-gordo". Os peixes entraram em rigor-mortis aos 75 minutos após a morte por hipotermia, tendo permanecido durante 10 dias. As avaliações sensoriais (físicas e gustativas) mostraram que os peixes apresentaram condição de consumo até 26 dias. As análises de ATP e de seus produtos de degradação mostraram que a referida espécie foi considerada formadora de inosina (HxR), nas condições de experimento. O valor K mostrou que os exemplares de matrinxãs permaneceram "muito frescos" até 16 dias de estocagem em gelo, concordante com a avaliação sensorial gustativa.

Records of Chrysomya albiceps in Northern Italy: an ecological and forensic perspective

Knowledge of the carrion-breeding insects present at a local level is important and necessary for defining the post-mortem interval. Climate changes and globalisation are affecting species ranges and population dynamics. In this note, we report the incidence of Chrysomya albiceps (Diptera: Calliphoridae) on dead human bodies and carrion in Northern Italy. These data confirm the spread of this species in the Northern regions. The partial sequencing of a 583-bp region of the cytochrome oxidase subunit 1 gene of an Adriatic population did not reveal any difference compared to the same genomic region in the African and South American populations of this species.

Occurrence of Hymenoptera on Sus scrofa carcasses during summer and winter seasons in southeastern Brazil

Considerable importance has been given to nest construction and larval food transport to the nest as a precondition for the eusociality of insects. Most adult hymenopterans feed on liquids, although bees and a few wasps may also feed on pollen. Carrion represents an additional source of protein for some species and they will scavenge for dead animals in the wild. This paper aims at analyzing Hymenoptera visitors on a pig carcass during the process of decomposition, in the summer of 2005 and the winter of 2006 in Brazil, and comparing the results with other studies in the Neotropical region. To our knowledge, this is the first study which described the occurence of Agelaia pallipes, Polybia paulista and Scaptotrigona depilis on decomposing carcasses in southeastern Brazil. It also raises the hypothesis of possible applications of Hymenoptera to achieve more precise PMI estimations, apart from other insects already known as having great importance in such estimates.

Insects of forensic importance from Rio Grande do Sul state in southern Brazil

The experiment was conducted throughout the year 2005, at the Universidade Federal de Pelotas campus. The objectives of the study were to analyze the decomposition of rabbit (Oryctolagus cunniculus L.) with mean weight 2.67 Kg carcass and describe the interaction of insects acting on it, as well as the insect's potential use in legal medicine. We collected 5.239 insect specimens; 1.827 of them were obtained from larvae collected from carcasses and reared. The specimens were identified and 20 species were of forensic importance. The species Lucilia eximia (Wiedemann, 1819) and Chrysomya albiceps (Wiedemann, 1819) (Diptera, Calliphoridae) were better indicators of post-mortem interval (PMI) because they occurred in all seasons and were the first to reach the carcass. Hemilucilia semidiaphana (Rondani, 1850), H. segmentaria (Fabricius, 1805) (Diptera, Calliphoridae), Muscina stabulans (Fallén, 1817) and Synthesiomyia nudiseta (Wulp, 1883) (Diptera, Muscidae) can disclose death time because they occur only in certain months of the year. Oxyletrum discicolle (Brullé, 1840) (Coleoptera, Silphidae) and Dermestes maculates De Geer, 1774 (Coleoptera, Desmestidae) were found in advanced stages of decomposition.

Insects associated with exposed decomposing bodies in the Colombian Andean Coffee Region

In Colombia, mainly classic forensic medicine methods were used to clarify crimes until 2004. However, other disciplines, including forensic entomology, started to be considered only after the New Accusatory System introduction in Bogotá and the Coffee Region in 2005. In order to provide tools for obtaining evidentiary material elements in judicial trials, it is presented here the succession of insects throughout the decomposition process of an exposed carcass of Sus scrofa Linnaeus 1758 (Suidae) and the Occurrence Matrix of colonizing species. This process was evaluated under ambient conditions in the Andean rural area of the city of Pereira, in the Mundo Nuevo district, located in a pre-montane Wet Forest area, from October to November 2006. A sampling period of 27 days and 3198 individuals were collected. We found these colonizing species in the following stages of decomposition: Lucilia eximia (Wiedemann, 1819) fresh; Hemilucilia semidiaphana (Rondani, 1850), Oxelytrum discicolle (Brullé, 1840), and Cochliomyia macellaria (Fabricius 1775) bloated; Chrysomya albiceps (Wiedemann 1819), Compsomyiops verena (Walker, 1849), Ophyra aenescens (Wiedemann, 1830) and Musca domestica Linnaeus, 1758 active; Fannia sp. advanced and Stearibia nigriceps (Meigen, 1826) remains. This study provides support tools to define the Post Mortem Interval that may be used by experts from government institutions and laboratories officially accredited.

Preliminary study of insects associated to indoor body decay in Colombia

Preliminary study of insects associated to indoor body decay in Colombia. This is the first report studying insects associated to indoor body decay process of a white pig (Sus scrofa) (Artiodactyla, Suidae) in a controlled indoor environment in an urban area of Florencia city, Amazonia Piedmont, Colombia. For a period of 54 days, 9,220 individuals (immature and adults), distributed in 3 orders, 5 families, 10 genera, and 10 species were collected using entomological nets and tweezers. Five decaying stages are described (fresh, bloated, active decay, advanced decay and remains). During the fresh stage we recorded Cochliomyia macellaria (Fabricius, 1775), Chrysomya albiceps (Wiedemann, 1819), Ophyra aenescens (Wiedemann, 1830), Oxysarcodexia sp., Lepidodexia sp. and Lasiophanes sp.; during the bloating stage C. macellaria, C. albiceps, Lucilia eximia (Wiedemann, 1819), Hemilucillia semidiaphana (Rondani, 1850), Musca domestica Linnaeus, 1758, O. aenescens, Oxysarcodexia sp., Lepidodexia sp., Dermestes maculatus De Geer, 1774 and Lasiphanes sp.; during the active decay C. macellaria, C. albiceps, L. eximia, M. domestica, O. aenescens, Lepidodexia sp. D. maculatus and Lasiophanes sp.; during the advanced decay C. macellaria, C. albiceps, M. domestica, Lepidodexia sp. and Lasiophanes sp.; and during the remains stage C. albiceps, D. maculatus and Lasiophanes sp. The insects were sorted out in 3 ecological categories; necrophagous, predators and parasites and sarco-saprophagous. According to Chao and Jack estimators, total richness was observed on day 20, with 100% of the expected species.