Changes in tau phosphorylation levels in the hippocampus and frontal cortex following chronic stress

Studies have indicated that early-life or early-onset depression is associated with a 2- to 4-fold increased risk of developing Alzheimers disease (AD). In AD, aggregation of an abnormally phosphorylated form of the tau protein may be a key pathological event. Tau is known to play a major role in promoting microtubule assembly and stabilization, and in maintaining the normal morphology of neurons. Several studies have reported that stress may induce tau phosphorylation. The main aim of the present study was to investigate possible alterations in the tau protein in the hippocampus and frontal cortex of 32 male Sprague-Dawley rats exposed to chronic unpredictable mild stress (CUMS) and then re-exposed to CUMS to mimic depression and the recurrence of depression, respectively, in humans. We evaluated the effects of CUMS, fluoxetine, and CUMS re-exposure on tau and phospho-tau. Our results showed that a single exposure to CUMS caused a significant reduction in sucrose preference, indicating a state of anhedonia. The change in behavior was accompanied by specific alterations in phospho-tau protein levels, but fluoxetine treatment reversed the CUMS-induced impairments. Moreover, changes in sucrose preference and phospho-tau were more pronounced in rats re-exposed to CUMS than in those subjected to a single exposure. Our results suggest that changes in tau phosphorylation may contribute to the link between depression and AD.

Chemical, morphological, rheological and thermal properties of Solanum lycocarpum phosphorylated starches

The increasing need for starches with specific characteristics makes it important to study unconventional starches and their modifications in order to meet consumer demands. The aim of this work was to study physicochemical characteristics of native starch and phosphate starch of S. lycocarpum. Native starch was phosphated with sodium tripolyphosphate (5-11%) added with stirring. Chemical composition, morphology, density, binding ability to cold water, swelling power and solubility index, turbidity and syneresis, rheological and calorimetric properties were determined. Phosphorus was not detected in the native sample, but the phosphating process produced modified starches with phosphorus contents of 0.015, 0.092 and 0.397%, with the capacity of absorbing more water, either cold or hot. Rheological data showed the strong influence of phosphorus content on viscosity of phosphate starch, with lower pasting temperature and peak viscosity higher than those of native starch. Enthalpy was negatively correlated with the phosphorus content, requiring 9.7; 8.5; 8.1 and 6.4 kJ g-1 of energy for the transition from the amorphous to the crystalline state for the starch granules with phosphorus contents of 0; 0.015; 0.092 and 0.397%, respectively. Cluster analysis and principal component analysis showed that starches with 0.015 and 0.092% phosphorus have similar characteristics and are different from the others. Our results show that the characteristics of phosphate modified S. lycocarpum starch have optimal conditions to meet the demands of raw materials, which require greater consistency in stickiness, combined with low rates of retrogradation and syneresis.

Os Hesperiidae (Lepidoptera, Hesperioidea) da RPPN Klagesi, Santo Antônio do Tauá, Pará, Brasil: nova contribuição para o conhecimento da biodiversidade da área de endemismo Belém

Embora a região Belém seja uma das áreas mais exploradas da Amazônia com coletas desde o século XVIII, grande parte das informações se encontra dispersa em coleções internacionais, o que dificulta a reunião de dados e interpretações biogeográficas. Visando ampliar o conhecimento da fauna de lepidópteros da região, o presente estudo levantou uma lista de 225 espécies de Hesperiidae encontradas na RPPN Klagesi durante aproximadamente 24 anos de amostragens esporádicas, embora mais freqüentemente na última década. São adicionadas 113 espécies previamente não relacionadas para a região, a qual passa a ser a área de maior riqueza conhecida de Hesperiidae dentre todas as regiões de endemismo da Amazônia brasileira até então inventariadas. No entanto, o conhecimento da diversidade de Hesperiidae em outras áreas de endemismo é tão restrito, que a riqueza de espécies deve ser utilizada apenas como indicador de esforço amostral ao invés de inferências biogeográficas. Três das regiões de endemismo ainda não apresentam nenhum inventário de fauna (Xingú, Napo e Imeri), enquanto as demais são reconhecidas por um ou poucos inventários. Portanto, para que a lepidopterofauna amazônica seja realmente conhecida e utilizada em estudos de biogeografia e conservação, são necessários esforços direcionados nestas regiões ainda totalmente desconhecidas ou mesmo a reunião de informações sobre coletas já realizadas, cujo material se encontra disperso em coleções pelo mundo.

Regeneração de plantas após fusão de protoplastos de tangelo 'Page' e toranja 'Lau Tau'

Buscou-se a hibridação somática entre tangelo 'Page' e toranja 'Lau Tau' visando à produção de porta-enxerto semelhante à laranja-azeda, por esta espécie ser considerada um provável híbrido entre C. reticulata e C. grandis. Após isolamento, fusão e cultivo de protoplastos, obtiveram-se brotações que foram enxertadas in vitro, em laranja 'Hamlin'. Dezessete plantas foram aclimatizadas em casa de vegetação. A análise de citometria de fluxo confirmou a constituição diplóide dessas plantas. Marcadores moleculares RAPD das plantas regeneradas apresentaram padrão de bandas similar ao de tangelo 'Page'. Entretanto, todas as plantas apresentaram conformação fenotípica diferente dos genitores.

Vascular O-GlcNAcylation augments reactivity to constrictor stimuli by prolonging phosphorylated levels of the myosin light chain

O-GlcNAcylation is a modification that alters the function of numerous proteins. We hypothesized that augmented O-GlcNAcylation levels enhance myosin light chain kinase (MLCK) and reduce myosin light chain phosphatase (MLCP) activity, leading to increased vascular contractile responsiveness. The vascular responses were measured by isometric force displacement. Thoracic aorta and vascular smooth muscle cells (VSMCs) from rats were incubated with vehicle or with PugNAc, which increases O-GlcNAcylation. In addition, we determined whether proteins that play an important role in the regulation of MLCK and MLCP activity are directly affected by O-GlcNAcylation. PugNAc enhanced phenylephrine (PE) responses in rat aortas (maximal effect, 14.2±2 vs 7.9±1 mN for vehicle, n=7). Treatment with an MLCP inhibitor (calyculin A) augmented vascular responses to PE (13.4±2 mN) and abolished the differences in PE-response between the groups. The effect of PugNAc was not observed when vessels were preincubated with ML-9, an MLCK inhibitor (7.3±2 vs 7.5±2 mN for vehicle, n=5). Furthermore, our data showed that differences in the PE-induced contractile response between the groups were abolished by the activator of AMP-activated protein kinase (AICAR; 6.1±2 vs 7.4±2 mN for vehicle, n=5). PugNAc increased phosphorylation of myosin phosphatase target subunit 1 (MYPT-1) and protein kinase C-potentiated inhibitor protein of 17 kDa (CPI-17), which are involved in RhoA/Rho-kinase-mediated inhibition of myosin phosphatase activity. PugNAc incubation produced a time-dependent increase in vascular phosphorylation of myosin light chain and decreased phosphorylation levels of AMP-activated protein kinase, which decreased the affinity of MLCK for Ca2+/calmodulin. Our data suggest that proteins that play an important role in the regulation of MLCK and MLCP activity are directly affected by O-GlcNAcylation, favoring vascular contraction.

Acesso endoscópico transnasal aos tumores selares

A cirurgia dos tumores selares é tradicionalmente um campo de atuação dos neurocirurgiões. O uso do endoscópio permitiu acesso transnasal direto ao seio esfenoidal sem a necessidade de descolamento do septo nasal, com menor desconforto e morbidade pós-operatória inferior aos métodos tradicionais. OBJETIVO: Verificar as dificuldades técnicas, intercorrências e complicações pós-operatórias, no manejo otorrinolaringológico do acesso endoscópico transnasal à sela túrcica. MATERIAL E MÉTODO: Foram analisados retrospectivamente os prontuários dos pacientes submetidos à cirurgia da região selar, entre março de 2001 e dezembro de 2005. Foram incluídos 91 pacientes submetidos a um total de 95 procedimentos por via transnasal endoscópica. Desenho científico: Clínico retrospectivo. RESULTADOS: Foi possível a realização da técnica endoscópica transnasal em todos os pacientes estudados. Não houve necessidade de remoção da concha média ou de desvios septais em nenhum dos casos. A principal intercorrência foi fístula liquórica durante a remoção de tumores (13,68%). As complicações pós-operatórias foram: sangramento nasal (8,42%), fístula liquórica (8,42%), e meningite (2,11%). CONCLUSÃO: O acesso endoscópico transnasal aos tumores selares pôde ser realizado de forma minimamente invasiva, preservando-se as estruturas nasais nos 95 procedimentos estudados, independente da idade do paciente, características e etiologia do tumor.

O líquido cefalorraquiano inicial nas meningencefalites por Cryptococcus neoformans

A criptococose, conhecida desde 1905, é doença grave, causada pelo Cryptococcus neoformans. Nesta entidade o estudo do líquido cefalorraquiano é muito importante visto que o sistema nervoso está envolvido em 81% dos casos5. O propósito do presente trabalho é o de evidenciar as alterações do líquido cefalorraquiano inicial nas meningencefalites criptocócicas e demonstrar a importância de exame minucioso do líquido cefalorraquiano para o diagnóstico precoce desta doença. O material é constituído por 46 observações de pacientes com diagnóstico de meningencefalite criptocócica. O quadro inflamatório crônico, caracterizado por pleocitose predominantemente linfocitária, hiperproteinorraquia e glicose diminuída foi observado em 54% das amostras de líquido cefalorraquiano. Em 69% dos casos o líquido cefalorraquiano mostrava hipertensão. A glicose estava diminuída em 61% dos pacientes e a taxa de cloretos em 16%. Eosinófilos em baixa percentagem foram observados em 48% dos casos. O criptococo foi identificado no líquido cefalorraquiano de 98% dos pacientes; é salientada a importância da pesquisa a fresco do fungo pelo método da tinta da China, sempre que uma amostra de líquido cefalorraquiano revelar pleocitose. Esta é uma conduta básica para o diagnóstico precoce da criptococose do sistema nervoso.

Escore eletrocardiográfico: aplicação em ergometria para avaliação do precondicionamento isquêmico

FUNDAMENTO: O tempo para 1,0 mm de depressão do segmento ST (T-1,0 mm), adotado para caracterizar o precondicionamento isquêmico (PCI) em testes ergométricos sequenciais, é consistente e reprodutível, porém, possui várias limitações. OBJETIVO: Aplicar um escore eletrocardiográfico de isquemia miocárdica em testes ergométricos sequenciais, comparando-o com o clássico índice T-1,0 mm. MÉTODOS: Avaliamos 61 pacientes, com idade média de 62,2 ± 7,5 anos, sendo 86,9% homens. Foram analisados 151 exames, sendo 116 de pacientes que completaram duas fases de avaliação. A primeira fase compreendia dois testes ergométricos sequenciais para documentação do PCI e a segunda fase, após uma semana, mais dois testes sob efeito de repaglinida. Dois observadores aplicaram o escore de forma cega. RESULTADOS: Observou-se concordância perfeita inter e intraobservador (Kendall Tau-b = 0,96, p < 0,0001, Kendall Tau-b = 0,98,p < 0,0001, respectivamente). Os valores de sensibilidade, especificidade, valor preditivo negativo, valor preditivo positivo e acurácia foram de 72,41%, 89,29%, 75,8%, 87,5% e 81,0%, respectivamente. CONCLUSÃO: O escore de isquemia é um método consistente e reprodutível para documentação do PCI, representando uma alternativa factível ao índice T-1,0 mm.

Variabilidade da frequência cardíaca em neonatos prematuros e de termo

FUNDAMENTO: Várias publicações têm demonstrado a importância do sistema nervoso autônomo por meio dos componentes simpático e parassimpático na gerência da interação entre as diferentes partes do organismo humano. Esses estudos aplicaram técnicas lineares e não lineares (Teoria do Caos) de avaliação em diferentes situações, doenças e faixas etárias, tendo como ferramenta a variabilidade da frequência cardíaca (VFC). OBJETIVO: Aplicar os conhecimentos das dinâmicas linear e não linear na avaliação de neonatos prematuros (NPT), analisando sua VFC e comparando com neonatos de termo (NT) saudáveis. MÉTODOS: Quarenta e oito neonatos prematuros com diferentes idades gestacionais tiveram seus batimentos cardíacos captados com auxílio do equipamento Polar Advanced S810i e sua VFC obtida pelo registro dos intervalos RR. A VFC foi analisada nos domínios do tempo (SDNN, RMSSD, SD1/SD2), da frequência (VLF, LF, HF e a relação LF/HF) e do caos (TAU e sua normalização [TAU(n)], Expoente de Lyapunov e Entropia). Os NPT foram comparados com um grupo de 78 NT saudáveis e sem intercorrências perinatais com auxílio do teste não paramétrico de Kruskal-Wallis. RESULTADOS: Detectou-se diferença estatisticamente significante entre os grupos para todas as variáveis estudadas, tanto no domínio do tempo como nos da frequência e do caos. CONCLUSÃO: Neonatos prematuros exibem comportamento menos complexo da variabilidade da frequência cardíaca que neonatos de termo, fato comprovado nos domínios do tempo, da frequência e do caos. O estudo da variabilidade cardíaca nesse grupo pode ser considerado uma ferramenta a mais na avaliação da maturação autonômica e, consequentemente, da progressão para eutrofia.

Obesity does not Lead to Imbalance Between Myocardial Phospholamban Phosphorylation and Dephosphorylation

Background: The activation of the beta-adrenergic system promotes G protein stimulation that, via cyclic adenosine monophosphate (cAMP), alters the structure of protein kinase A (PKA) and leads to phospholamban (PLB) phosphorylation. This protein participates in the system that controls intracellular calcium in muscle cells, and it is the primary regulator of sarcoplasmic reticulum calcium pump activity. In obesity, the beta-adrenergic system is activated by the influence of increased leptin, therefore, resulting in higher myocardial phospholamban phosphorylation via cAMP-PKA. Objective: To investigate the involvement of proteins which regulate the degree of PLB phosphorylation due to beta-adrenergic activation in obesity. In the present study, we hypothesized that there is an imbalance between phospholamban phosphorylation and dephosphorylation, with prevalence of protein phosphorylation. Methods: Male Wistar rats were randomly distributed into two groups: control (n = 14), fed with normocaloric diet; and obese (n = 13), fed with a cycle of four unsaturated high-fat diets. Obesity was determined by the adiposity index, and protein expressions of phosphatase 1 (PP-1), PKA, PLB, phosphorylated phospholamban at serine16 (PPLB-Ser16) were assessed by Western blot. Results: Obesity caused glucose intolerance, hyperinsulinemia, hypertriglyceridemia, hyperleptinemia and did not alter the protein expression of PKA, PP-1, PLB, PPLB-Ser16. Conclusion: Obesity does not promote an imbalance between myocardial PLB phosphorylation and dephosphorylation via beta-adrenergic system.

Análise de poliembrionia em Citrus, máxime em toranjas

1 - This paper is a joined publication of the Dept. of Genetics, Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz", University of São Paulo, and Secção de Citricultura e Frutas Tropicais, Instituto Agronômico, de Campinas, and deal with the number of seed per fruit and the polyembryony in Citrus, with special reference to the pummelos (C. grandis). 2 - For C. pectinifera, hibrid limon x acid lime, C. histrix and Citrus sp. the mean of seeds per fruit is 5,8 - 17,3 - 30,2 -94,6; for 14 pummelos the average was 100 and the range of variation 11 to 185 seeds per fruit. For the four above mentioned Citrus the cotyledons were classified into 3 types: big (near 8 mm.), medium (near 6 mm) and small (near 4 mm) and for the pummelos there was only one size of cotyledons, about 10 mm (table 1). 3 - The polyembryony was determined by two processes: a) counting of the embryos in the mature seed; b) counting after germination in flats or seed-beds. The rasults obtained are in table 2; the process a gave larger results than process b.The following pummelos are monoembryonics: melancia, inerme, Kaune Paune, sunshine, vermelha, Singapura, periforme, Zamboa, doce, Indochina, Lau-Tau, Shantenyau and Siamesa. Sometime it was found a branching of the main stem that gave a impression of polyembryonic seeds. 4 - It was shown by the x2 test that the distribution of embryo numbers fits the Poisson's series (table 2) in both processes. 5 - It is discussed in table 2 the variability of polyembryony for the following cases: a) between plants, within years. The teste for the differences of mean of polyembryony between 3 plants of C. pectinifera is statistically significant in 1948 and 1949; b) between yields of the same plant, within year. The same case of C. pectinifera may be used for this purpose; c) between process, within year. It is shown in table 3, for C. pectinifera and the hibrid "limon x acid lime" that there is a statistically signicicant between both process above mentioned.

Identification of casein kinase 1, casein kinase 2, and cAMP-dependent protein kinase-like activities in Trypanosoma evansi

Trypanosoma evansi contains protein kinases capable of phosphorylating endogenous substrates with apparent molecular masses in the range between 20 and 205 kDa. The major phosphopolypeptide band, pp55, was predominantly localized in the particulate fraction. Anti-alpha and anti-beta tubulin monoclonal antibodies recognized pp55 by Western blot analyses, suggesting that this band corresponds to phosphorylated tubulin. Inhibition experiments in the presence of emodin, heparin, and 2,3-bisphosphoglycerate indicated that the parasite tubulin kinase was a casein kinase 2 (CK2)-like activity. GTP, which can be utilized instead of ATP by CK2, stimulated rather than inactivated the phosphorylation of tubulin in the parasite homogenate and particulate fraction. However, GTP inhibited the cytosolic CK2 responsible for phosphorylating soluble tubulin and other soluble substrates. Casein and two selective peptide substrates, P1 (RRKDLHDDEEDEAMSITA) for casein kinase (CK1) and P2 (RRRADDSDDDDD) for CK2, were recognized as substrates in T. evansi. While the enzymes present in the soluble fraction predominantly phosphorylated P1, P2 was preferentially labeled in the particulate fractions. These results demonstrated the existence of CK1-like and CK2-like activities primarily located in the parasite cytosolic and membranous fractions, respectively. Histone II-A and kemptide (LRRASVA) also behaved as suitable substrates, implying the existence of other Ser/Thr kinases in T. evansi. Cyclic AMP only increased the phosphorylation of histone II-A and kemptide in the cytosol, demonstrating the existence of soluble cAMP-dependent protein kinase-like activities in T. evansi. However, no endogenous substrates for this enzyme were identified in this fraction. Further evidences were obtained by using PKI (6-22), a reported inhibitor of the catalytic subunit of mammalian cAMP-dependent protein kinases, which specifically hindered the cAMP-dependent phosphorylation of histone II-A and kemptide in the parasite soluble fraction. Since the sum of the values obtained in the parasite cytosolic and particulate fractions were always higher than the values observed in the total T. evansi lysate, the kinase activities examined here appeared to be inhibited in the original extract.

Susceptibility of Triatoma brasiliensis from state of Ceará, Northeastern Brazil, to the pyrethroid deltamethrin

After controlling Triatoma infestans in Brazil, other species of triatomine that were considered minor in the transmission of Chagas disease became important. The persistence of Triatoma brasiliensis in Northeastern Brazil, associated with reinfection of domestic environments recently sprayed with pyrethroids, may be a signal of susceptibility alteration of this species to this insecticide. Specimens of T. brasiliensis from the municipality of Tauá, state of Ceará, were captured before and one year after spraying. They were submitted to bioassays using deltamethrin. The LD50 ranged from 0.19-0.33 ng of deltamethrin/nymph. The resistance ratio among samples from Tauá varied from 1.16-1.79 in the samples captured before the spraying and 1.00-1.74 in the samples captured one year after spraying, demonstrating that the two populations were equally susceptible to deltamethrin. The small difference in susceptibility between the two captures suggests that T. brasiliensis obtained in the second capture are from new invasions of the domestic environment and that the insecticide did not select resistant individuals. Therefore, it is suggested that T. brasiliensis control be carried out supplementing the regular use of pyrethroids with complementary measures, such as improvement of the dwellings and health education.

Domestic, peridomestic and wild hosts in the transmission of Trypanosoma cruzi in the Caatinga area colonised by Triatoma brasiliensis

The role played by different mammal species in the maintenance of Trypanosoma cruzi is not constant and varies in time and place. This study aimed to characterise the importance of domestic, wild and peridomestic hosts in the transmission of T. cruzi in Tauá, state of Ceará, Caatinga area, Brazil, with an emphasis on those environments colonised by Triatoma brasiliensis. Direct parasitological examinations were performed on insects and mammals, serologic tests were performed on household and outdoor mammals and multiplex polymerase chain reaction was used on wild mammals. Cytochrome b was used as a food source for wild insects. The serum prevalence in dogs was 38% (20/53), while in pigs it was 6% (2/34). The percentages of the most abundantly infected wild animals were as follows: Thrichomys laurentius 74% (83/112) and Kerodon rupestris 10% (11/112). Of the 749 triatomines collected in the household research, 49.3% (369/749) were positive for T. brasiliensis, while 6.8% were infected with T. cruzi (25/369). In captured animals, T. brasiliensis shares a natural environment with T. laurentius, K. rupestris, Didelphis albiventris, Monodelphis domestica, Galea spixii, Wiedomys pyrrhorhinos, Conepatus semistriatus and Mus musculus. In animals identified via their food source, T. brasiliensis shares a natural environment with G. spixii, K. rupestris, Capra hircus, Gallus gallus, Tropidurus oreadicus and Tupinambis merianae. The high prevalence of T. cruzi in household and peridomiciliar animals reinforces the narrow relationship between the enzootic cycle and humans in environments with T. brasiliensis and characterises it as ubiquitous.

Análise espaço-temporal do uso da terra em parte do semi-árido cearense

A cobertura vegetal exerce papel imprescindível à proteção e conservação dos recursos naturais, principalmente no que diz respeito aos solos. Este estudo teve como objetivo avaliar e analisar a dimensão espacial e temporal da ação antrópica na cobertura vegetal de parte do semi-árido cearense, utilizando imagens LANDSAT TM-5, de 1985 e 1994, e técnicas de geoprocessamento, para verificar a hipótese de que a degradação ambiental vem sendo intensificada. Foram confeccionadas cartas de vegetação, uso da terra, solos e hidrografia, obtendo-se cartas de sobreposição, por meio das quais se constatou o aumento de áreas degradadas nas diferentes unidades fitoecológicas. No período de uma década, comprovou-se o processo progressivo da degradação nas áreas dos municípios de Independência, Pedra Branca, Mombaça e Tauá, tendo as áreas do município de Pedra Branca apresentado menor degradação. A unidade fitoecológica mais degradada, dentre as estudadas, foi a Caatinga Arbórea Aberta, desencadeando processos de degradação e transformação das unidades circunvizinhas. Grande parte da área foi atingida por processos de degradação ambiental, com forte pauperização da biodiversidade, acompanhados por um rebaixamento geral das formações vegetais.