Development of duplex-PCR for identification of Aeromonas species

Introduction The number of reports of intestinal infections caused by Aeromonas spp. has increased significantly in recent years. In most clinical laboratories, identification of these bacteria is carried out by general phenotypic tests that sometimes do not accurately differentiate Aeromonas and Vibrio. Methods A duplex-polymerase chain reaction (PCR) was developed directed to 2 targets identifying Aeromonas spp. pathogenic to humans. Results The duplex-PCR results were reproducible and specific for Aeromonas spp. pathogenic to humans. Conclusions This method will allow differentiation between Vibrio and Aeromonas spp. in patients with in cholera-like symptoms and can also be used in water quality monitoring.

Parâmetros diretos do duplex scan no diagnóstico da estenose da artéria renal: estudo de validação e otimização dos pontos de corte

OBJETIVO: Testar o desempenho dos parâmetros diretos do duplex scan no diagnóstico da estenose da artéria renal (EAR) e verificar se os pontos de corte recomendados pela literatura são os mais adequados para se discriminar a gravidade da lesão. MÉTODOS: Estudo prospectivo, incluindo 62 pacientes portadores de EAR, submetidos ao duplex scan, seguido da arteriografia seletiva. O pico de velocidade sistólico (PVS) e a relação renal-aorta (RRA) foram mensurados. A análise estatística incluiu a curva ROC (receiver operating characteristic curve), t test student não pareado a sensibilidade, especificidade, os valores preditivos positivo e negativo, e a acurácia. RESULTADOS: A arteriografia revelou EAR 0-59% em 31 artérias (24%); EAR 60-99% em 91 artérias (72%) e 5 oclusões (4%). A análise de ROC mostrou que o PVS e a RRA apresentaram desempenho semelhante na detecção da lesão, cujas áreas sob as curvas foram 0,96 e 0,95, respectivamente. Considerando os pontos de corte recomendados pela literatura, o PVS de 180 cm/s apresentou sensibilidade de 100% e especificidade de 81%, enquanto que a RRA de 3,5 apresentou sensibilidade de somente 79%, com 93% de especificidade. Estes parâmetros foram analisados de forma conjugada (critério direto), revelando 79% de sensibilidade e 97% de especificidade. Os pontos de corte otimizados foram: PVS de 189 cm/s e RRA de 2,6, demonstrando 100%, 87%, 96% e 87% de sensibilidade e especificidade para o PVS e para a RRA, respectivamente. CONCLUSÃO: O uso isolado do PVS otimizado apresentou o melhor desempenho na detecção e na graduação da EAR.

Duplex Hemodinamic evaluation of hepatosplenic mansoni schistosomiasis

Conventional ultrasonography highly contributes to a non invasive diagnosis of HS schistosomiasis (Cerri et al., 1984). The introduction of Dopple allowed new advances in the knowledge of the portal dinamics of this disease (Taylor et al., 1985; Moriyasu et al., 1986). The aim of this paper was to analize the hemodinamic behavior of the portal vessels, considering caliper, maximum flow speed, direction of flow and preferential disposition of the collateral vessels. Thirty two patients with schistosomiasis mansoni with confirmed hepatosplenic form (HSSM), were analyzed. Fourteen patients with the intestinal form, have been analyzed as a control group. The results demonstrated that the maximum speed of the portal vein in the two groups has not been significantly diferent. Nevertheless, the diameter of the PV in the hepatosplenic group has been larger. The splenic vein presented speed and caliper larger than the superior mesenteric vein. The hepatic artery has been detectly in only 40% of the cases. The hepatic veins presented normal caliper and spectral pattern. The duplex proved to be an useful technich complementar and non-invasive, in the study of the HSSM.

Duplex-PCR assay for the detection of adenovirus and respiratory syncytial virus in nasopharyngeal samples

Human adenovirus (HAdV) and human respiratory syncytial virus (HRSV) are important etiologic agents of acute respiratory infections. In this study, a duplex polymerase chain reaction (PCR) assay was developed for the simultaneous detection of HAdV and HRSV in clinical samples. Sixty previously screened nasopharyngeal aspirates were used: 20 HAdV-positive, 20 HRSV-positive and 20 double-negative controls. Eight samples were positive for both viruses. The duplex PCR assay proved to be as sensitive and specific as single-target assays and also detected the mixed infections with certainty. The identification of both viruses in a single reaction offers a reduction in both cost and laboratory diagnostic time.

The use of stents in the treatment of traumatic intimal flaps: case report

Treatment of arterial traumatic intimal lesions is controversial due to its unknown natural history. Current therapeutical options include arterial reconstruction and clinical observation. The idea of using stents to correct intimal flaps is based on their use to correct dissections, flaps, and arterial irregularities after angioplasty. We report the successful treatment of a traumatic intimal flap of the superficial femoral artery, caused by gunshot trauma, with a Palmaz stent in the acute period. One year after the operation, a duplex scan revealed normal flow in the artery and complete exclusion of the intimal flap; distal pulses were palpable, and the patient was completely asymptomatic.

Persistence of the embryonic lateral marginal vein: report of two cases

PURPOSE: Congenital venous malformations of the lower limbs represent a particular challenge for the vascular surgeon. Persistence of fetal veins is a rare malformation, and the most common is the persistence of the lateral marginal vein usually observed in patients with Klippel-Trenaunnay Syndrome. The persistence of this embryonic vein as an isolated venous malformation without the other characteristics of the Klippel-Trenaunnay Syndrome has not yet been reported. This paper describes two cases. METHODS: Two patients, a 17-year-old male patient and a 16-year-old female, have had since their birth a large venous trunk in the lateral aspect of the right leg and thigh. The limbs underwent duplex scanning and phlebography. The surgical removal of the lateral marginal vein was performed. RESULTS: Surgical treatment resulted in very good functional and aesthetic results. Follow-up at 26 months showed no evidence of varicose vein recurrence. CONCLUSIONS: To achieve good results, surgical intervention may be indicated in cases of orthopedic deformity, hemorrhage, symptomatic, and unaesthetic lesions.

Qualidade nutricional de três espécies de clorofícias cultivadas em laboratório

Três espécies de algas clorofíceas, Scenedesmus quadricauda (Brèbisson, 1835), Ankistrodesmus gracilis (Korsikov, 1953) e Pediastrum duplex (Meyen, 1829), foram cultivadas no laboratório, usando como meio de cultura adubo químico N:P:K na proporção 20:5:20, respectivamente. O valor nutricional das algas foi avaliado pela concentração de clorofila-a e pelo carbono orgânico. As três espécies algais apresentaram alto valor nutricional, particularmente Scenedesmus quadricauda, que apresentou a maior percentagem de carbono em relação ao peso seco (21%), sendo considerada como alimento adequado para os organismos filtradores.

Avaliação de aterosclerose em transplantados renais através de métodos não invasivos

FUNDAMENTO: A disfunção endotelial pode ser considerada um evento precoce da aterogênese. OBJETIVO: Avaliar a aterosclerose em transplantados renais através do escore de cálcio coronariano, do duplex scan das carótidas e da reatividade braquial através do ultra-som. MÉTODOS: Avaliamos trinta transplantados renais do sexo masculino com função renal estável, idade média de 41,3 anos. RESULTADOS: A detecção da carga aterosclerótica nesta população foi significativa quando utilizada a técnica da reatividade braquial (86,7%), menos freqüente baseando-se na presença de placa carotídea (33,3%) ou no escore de cálcio coronariano (20%). Placa carotídea foi considerada quando a espessura era superior a 12 mm. O escore de cálcio coronariano foi anormal quando acima de oitenta pela escala de Agatston, sendo observado em um percentual baixo (21,7%) dos pacientes, possivelmente porque a tomografia pode não ser o método ideal para detectar aterosclerose em doentes renais, por não distinguir calcificações intimais da camada média. O controle clínico adequado, a baixa faixa etária e fatores relacionados ao tempo de diálise pré-transplante ou ao efeito antiinflamatório das drogas pós-transplante podem retardar o aparecimento das calcificações. CONCLUSÃO: A avaliação da carga aterosclerótica através do duplex scan das carótidas (33,3%) e do escore de cálcio coronariano (20%) não foi freqüente, não havendo correlação com o elevado índice de detecção de disfunção endotelial observado com o exame da reatividade braquial (86,7%).

Preditores de mortalidade hospitalar em pacientes com embolia pulmonar estáveis hemodinamicamente

FUNDAMENTO: A embolia pulmonar apresenta alta mortalidade em pacientes com hipotensão arterial ou choque circulatório. Entretanto, em pacientes hemodinamicamente estáveis, a associação de algumas variáveis clínicas com a mortalidade ainda não está claramente estabelecida. OBJETIVOS: Derivar um modelo de estratificação do risco de mortalidade intra-hospitalar em pacientes com embolia pulmonar hemodinamicamente estáveis. MÉTODOS: Estudo de coorte multicêntrico prospectivo de 582 pacientes consecutivos que foram admitidos em unidades de emergência ou de terapia intensiva, com suspeita clínica de embolia pulmonar, e que tiveram o diagnóstico confirmado por meio de um ou mais dos seguintes exames: arteriografia pulmonar, angiotomografia computadorizada helicoidal, angioressonância magnética, ecodopplercardiograma, cintilografia pulmonar ou duplex-scan venoso. Os dados sobre características demográficas, comorbidades e manifestações clínicas foram coletados e incluídos em uma análise de regressão logística para compor o modelo de predição. RESULTADOS: A mortalidade global foi de 14,1%. Foram identificadas como variáveis independentes de risco de óbito: idade > 65 anos; repouso no leito > 72h; cor pulmonale crônico; taquicardia sinusal e taquipnéia. Após a estratificação por faixas de risco, observaram-se mortalidades de 5,4%, 17,8% e 31,3%, respectivamente nos subgrupos de baixo, moderado e alto riscos. O modelo mostrou sensibilidade de 65,5% e especificidade de 80%, com uma área sob a curva de 0,77. CONCLUSÃO: Em pacientes hemodinamicamente estáveis com embolia pulmonar, a idade > 65 anos, o repouso no leito > 72h, o cor pulmonale crônico, a taquicardia sinusal e a taquipnéia foram preditores independentes da mortalidade intra-hospitalar. Entretanto o modelo de predição necessita ser validado em outras populações para sua incorporação à prática clínica.

Índice de resistividade renal como preditor da revascularização renal para hipertensão renovascular

FUNDAMENTO: A estenose arterial renal (EAR) é uma causa potencialmente reversível de hipertensão arterial sistêmica (HAS) e nefropatia isquêmica. Apesar da revascularização bem sucedida, nem todos os pacientes (pt) apresentam melhora clínica e alguns podem piorar. OBJETIVO: O presente estudo se destina a avaliar o valor do índice de resistividade renal (IR) como preditor dos efeitos da revascularização renal. MÉTODOS: Entre janeiro de 1998 e fevereiro de 2001, 2.933 pacientes foram submetidos ao duplex ultrassom renal. 106 desses pacientes apresentaram EAR significativa e foram submetidos a angiografia e revascularização renal. A pressão arterial (PA) foi medida antes e depois da intervenção, em intervalos de até 2 anos e as medicações prescritas foram registradas. Antes da revascularização, o IR foi medido em 3 locais do rim, sendo obtida uma média dessas medições. RESULTADOS: Dos 106 pacientes, 81 tiveram IR<80 e 25 RI>80. A EAR foi corrigida somente por angioplastia (PTA) em 25 pts, PTA + stent em 56 pts e cirurgicamente em 25 pts. Dos pacientes que se beneficiaram da revascularização renal; 57 dos 81 pacientes com IR <80 apresentaram melhora em comparação a 5 de 25 com IR > 80. Usando um modelo de regressão logística múltipla, o IR esteve significativamente associado à evolução da PA (p = 0,001), ajustado de acordo com os efeitos da idade, sexo, PAS, PAD, duração da hipertensão, o tipo de revascularização, número de fármacos em uso, nível de creatinina, presença de diabete melito, hipercolesterolemia, volume sistólico, doença arterial periférica e coronariana e tamanho renal (OR 99,6-95%CI para OR 6,1-1.621,2). CONCLUSÃO: A resistividade intrarrenal arterial, medida por duplex ultrassom, desempenha um papel importante na predição dos efeitos pós revascularização renal para EAR.

Predominance of Trypanosoma rangeli infection in children from a Chagas disease endemic area in the west-shore of the Panama canal

A total of 206 serum samples from children (3-14 years old) living in the Amador County (La Chorrera District, Province of Panama) were screened by indirect immunofluorescence antibody test (IFAT) for the presence of antibodies against Trypanosoma cruzi. Positive sera were confirmed by recombinant enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and Western blot analysis. The presence of blood trypanosomes was investigated by hemoculture and subsequently identify by a duplex polymerase chain reaction (PCR) followed by dot blot hybridization. The results indicated a prevalence of 9.7% for trypanosome infections, a seroprevalence of 2.9% against T. cruzi and a predominance of T. rangeli infection (6.8%). The immunological and clinical implications of these findings are discussed.

Viability study of a multiplex diagnostic platform for Chagas disease

A new multiplex assay platform was evaluated to detect Trypanosoma cruzi infection using the recombinant antigens CRA, FRA, CRAFRA fusion and parasite lysate. The antigens presented different sensitivity and specificity in a singleplex test when compared to a serial dilution of two pools comprising 10 positive serum samples and one pool of 10 negative samples. The recombinant protein CRA presented lower sensitivity (55%) in contrast to the 100% specificity and sensitivity of FRA, CRAFRA and T. cruzi lysate. These antigens also showed good results in a duplex test and the duplex test with CRAFRA/T. cruzi lysate showed better performance with 100% specificity and sensitivity, as well as a lower cut-off value in comparison to the other duplex test, FRA/T. cruzi lysate. Hence, when the antigens were used in duplex format, both tests showed decreased cut-off values and no interference between different bead sets, resulting in increasing sensitivity and specificity. The results of these multiplex tests show that they could be an alternative to singleplex detection for Chagas disease, and also indicate the necessity of using multiplex diagnostic tools to increase the sensitivity and specificity for diagnostic tests. Emerging data from the T. cruzi genome and from its ORFeome project will also allow the identification of new antigens for this disease detection application.

Estudo do jato urinário intravesical com Doppler colorido em pacientes com e sem refluxo vesicoureteral

OBJETIVO: O presente estudo teve como objetivo comparar os achados da uretrocistografia miccional com o ultra-som Doppler duplex colorido, em pacientes com suspeita de refluxo vesicoureteral. MATERIAIS E MÉTODOS: A pesquisa foi realizada através do estudo dos ângulos dos jatos urinários intravesicais, nos planos axial e longitudinal. Foi analisada, também, a distância (em centímetros) entre os meatos ureterais. RESULTADOS: Do total de 32 pacientes estudados (com média de idade de 5 anos e 2 meses), 18 pacientes apresentaram refluxo vesicoureteral (10 com refluxo unilateral, sendo 4 no lado direito e 6 no lado esquerdo, e 8 com refluxo bilateral) e 14 pacientes não apresentaram refluxo. Os valores angulares dos jatos urinários intravesicais e as distâncias entre os meatos ureterais foram obtidos para todos os pacientes e foram calculados a média, o desvio-padrão e o coeficiente de variação. CONCLUSÃO: Os dados evidenciaram tendência de que a lateralização do meato ureteral seja sinal de predisposição ao refluxo vesicoureteral. A análise estatística não-paramétrica de Mann-Whitney não evidenciou diferenças significativas (p > 0,05) entre os grupos (ângulos de inclinação dos jatos urinários intravesicais e distância entre os meatos ureterais).

Angiografia com gás dióxido de carbono

Carbon dioxide gas (CO2) is generally considered a safe alternative contrast media for digital subtraction angiography in patients with renal insufficiency ar hypersensitivity to iodinated contrast material. In this article we report one case in wich this technique was used successfully in a 48 years old man with elevated levels of creatinine and blood urea nitrogen suffering from a trofic isquemic lesion in lhe right toe. The method was used preoperatively after an inconclusive duplex scan of lhe limb. No complications related to the method of imaging were found and the patient submitted to a bypass grafting revascularization procedure.

Study of carotid disease in patients with peripheral artery disease

Objective: To study the stenosis of the carotid arteries in patients with symptomatic peripheral arterial disease.Methods: we assessed 100 consecutive patients with symptomatic peripheral arterial disease in stages of intermittent claudication, rest pain or ulceration. Carotid stenosis was studied by echo-color-doppler, and considered significant when greater than or equal to 50%. We used univariate analysis to select potential predictors of carotid stenosis, later taken to multivariate analysis.Results: The prevalence of carotid stenosis was 84%, being significant in 40% and severe in 17%. The age range was 43-89 years (mean 69.78). Regarding gender, 61% were male and 39% female. Half of the patients had claudication and half had critical ischemia. Regarding risk factors, 86% of patients had hypertension, 66% exposure to smoke, 47% diabetes, 65% dyslipidemia, 24% coronary artery disease, 16% renal failure and 60% had family history of cardiovascular disease. In seven patients, there was a history of ischemic cerebrovascular symptoms in the carotid territory. The presence of cerebrovascular symptoms was statistically significant in influencing the degree of stenosis in the carotid arteries (p = 0.02 at overall assessment and p = 0.05 in the subgroups of significant and non-significant stenoses).Conclusion: the study of the carotid arteries by duplex scan examination is of paramount importance in the evaluation of patients with symptomatic peripheral arterial disease, and should be systematically conducted in the study of such patients.