Aspectos ultraestruturais do processo de divisão do Toxoplasma gondii

Neste trabalho é feita uma revisão sobre alguns aspectos biológicos do Toxoplasma gondii, principalmente sobre a ultraestrutura da forma interfásica e as modificações ultraestruturais que ocorrem no parasito durante o seu processo de divisão. Considera-se inicialmente o processo de divisão binária admitindo-se, porém, a possibilidade de que as imagens interpretadas como senão de divisão binária representem estágios da divisão por endodiogenia. Quanto à endodiogenia descrevem-se as alterações que ocorrem na "parasito mãe" durante o processo de formação dos dois "parasitos filhos". Este processo é semelhante no Toxoplasma gondii, Besnoitia jellisoni, Sarcocystis tenella e Frenkelia. Discute-se a possibilidade da formação de mais de dois "parasitos filhos" por um processo de endopoligenia, bem como o processo de esquizogonia. Os resultados mais recentes mostram que não existe esquizogonia nas formas vsgetativas do Toxoplasma gondii, senão que as imagens interpretadas como tal, ao microscópio ótico, são o resultado de endodiogenias sucessivas em que os endozoitas formados permanecem ligados entre si pela região posterior. A esquizogonia é, no entanto, encontrada nas formas que se desenvolvem no interior de células epiteliais do intestino do gato, que é o hospedeiro definitivo do Toxoplasma gondii. Discute-se o conceito de esquizogonia, comparando-o em três protozoários: Eimeria bovis, E. callospermophili e Plasmodium juxtanucleare, que apresentam diferenças entre si quanto ao processo de iniciação da individualização dos "parasitos filhos". Refere-se à recente hipótese que considera a endodiogenia como o processo fundamental de divisão dos esporozoárlos, ocorrendo na fase final da esquizogonia. Finalmente é acentuado o papel que a microscopia eletrônica aliada às modernas técnicas de citoquímica e imunocitoquimica poderá desempenhar no sentido de um melhor conhecimento da biologia do Toxoplasma gondii e da fisiopatogenia da Toxoplasmose.

Evaluation of immunomodulatory and anti-inflammatory effects and phytochemical screening of Alternanthera tenella Colla (Amaranthaceae) aqueous extracts

Alternanthera tenella Colla extracts are used in Brazilian traditional folk medicine to treat a variety of infectious diseases as well as inflammation and fever. In this work, the immunomodulatory, anti-inflammatory and potential toxic effects of cold (CAE) and hot (HAE) aqueous extracts of A. tenella were investigated in vivo. In addition, we analyzed the phytochemical properties of both extracts. BALB/c mice were immunized in vivo with sheep red blood cells and concomitantly inoculated intraperitoneally (i.p.) with each extract (50, 100 or 200 mg/kg). Specific antibody-producing cells were enumerated using plaque-forming cell assays (PFC) and anti-SRBC IgG and IgM serum levels were measured via enzyme-linked immunosorbent assay. Body and lymphoid organ weights were determined after treatments in order to evaluate toxic effects. Carrageenan-induced paw edema was employed to investigate anti-inflammatory activity in mice inoculated i.p. with CAE or HAE (200 or 400 mg/kg). Phytochemical screening was performed using spectrometric and chromatographic approaches and revealed that CAE possessed higher tannin and flavonoid levels than HAE. PFC numbers were increased after treatment with CAE (100 mg/kg) four days after immunization, as were the serum antibody titers after four and seven days, suggesting immunostimulatory activity through modulation of B lymphocyte functions. Body and organ weights did not show major changes, suggesting that extracts administered to mice did not induce significant toxicity. Both extracts had significant anti-inflammatory activity in the paw edema assay. These results suggested that aqueous extracts from A. tenella contained several chemical compounds that possess positive and/or negative modulator effects on the immune system, which appeared to correlate with tannin and flavonoid levels in those extracts. In summary, these studies provide important insight into the biological activities of A. tenella.

4-(hidroximetil)-benzenossulfonato de potássio: metabólito inédito isolado da alga marinha Bostrychia tenella (Rhodomelaceae, ceramiales)

Chemical investigation of the dichloromethane/methanol extract of the marine alga Bostrychia tenella has led to the isolation of two aromatic compounds, the new sulfate metabolite potassium 4-(hydroxymethyl)-benzenosulfonate (1) and the compound 1-methoxyphenethyl alcohol (2), described previously as a synthetic product. Their structures were determined by spectroscopic methods including NMR, MS, IR and by comparison with literature data.

Aborto ovino associado com infecção por Sarcocystis sp

Infecções por protozoários têm distribuição mundial e podem causar aborto, nascimentos prematuros e ou morte fetal em diversas espécies animais. Em julho de 2004, oito ovinos Corriedale apresentaram problemas reprodutivos caracterizados por aborto e natimortalidade no terço final da gestação. Dessas oito perdas, um natimorto macho foi enviado ao Setor de Patologia Veterinária para necropsia. Alterações macroscópicas não foram observadas durante a necropsia. Lesões histológicas foram observadas principalmente no cérebro e coração e se caracterizaram por encefalite não-supurativa multifocal acentuada associada à presença de protozoários no interior de células endoteliais e vasos sanguíneos e miocardite não-supurativa focal leve. Alguns desses organismos apresentaram formato de roseta. O teste de imunoistoquímica anti-Toxoplasma gondii foi negativo, mas houve reação cruzada com anticorpo anti-Neospora caninum. O exame de imunofluorescência direta para Leptospira sp. foi negativo. A bacteriologia aeróbica e micro-aeróbica não revelou crescimento significativo. Esses achados foram compatíveis com o diagnóstico de Sarcocystis sp.

Sarcocystis cruzi (Apicomplexa: Sarcocystidae) no cachorro-do-mato (Cerdocyon thous)

Esporocistos de Sarcocystis foram identificados nas amostras fecais de um cachorro-do-mato. Eles foram dados por via oral para um bezerro em aleitamento, sendo observados cistos com morfologia compatível com os de Sarcocystis cruzi na musculatura cardíaca e esquelética, três meses após a infecção. Musculatura cardíaca deste bezerro foi dada para um segundo cão doméstico livre de coccídios, que eliminou esporocistos compatíveis com os de Sarcocystis em suas fezes, tendo com períodos pré-patente e patente 11 e 12 dias após a infecção respectivamente. Para comparar a morfologia dos esporocistos e cistos, um segundo cão, também livre de coccídios, foi alimentado com musculatura cardíaca de um bovino infectando naturalmente e positivo para cistos de S. cruzi. Esporocistos compatíveis com os eliminados pelo primeiro cão foram encontrados nas fezes. Apesar dos esporocistos eliminados pelo cachorro-do-mato serem significativamente diferentes dos eliminados pelos cães infectados experimentalmente, pode se considerar com base na morfologia dos esporocistos, cistos e na transmissão biológica que a espécie encontrada nas fezes do cachorro-do-mato é Sarcocystis cruzi.

Anticoccidial effects of acetic acid on performance and pathogenic parameters in broiler chickens challenged with Eimeria tenella

The objective of the present study was to evaluate the anticoccidial effect of the different concentrations of the acetic acid in the broiler chickens in comparison with the amprolium anticoccidial. A total of 198 chicks were placed 11 per pen with three pens per treatment. The different concentrations (1%, 2% and 3%) of acetic acid and amproilum (at the dose rate of 125ppm) were given to the experimental groups in drinking water from 10-19th days of age. One group was kept as infected non medicated control and one as non infected non medicated control. All the groups were inoculated orally with 75,000 sporulated oocysts at the 12th day of age except non infected non medicated control. Anticoccidial effect was evaluated on the basis of performance (weight gain, feed conversion ratio) and pathogenic (oocyst score, lesion score and mortality %age) parameters. Among acetic acid medicated groups, the maximum anticoccidial effect was seen in the group medicated with 3% acetic acid followed by 2% and 1% acetic acid medicated groups. Amprolium and 3% acetic acid were almost equivalent in suppressing the negative performance and pathogenic effects associated with coccidiosis (Eimeria tenella) challenge. In summary, acetic acid has the potential to be used as alternative to chemotherapeutic drugs for Eimeria tenella control. Concentration-dependent anticoccidial effect of acetic acid suggests that further studies should be carried out to determine the possible maximum safe levels of acetic acid with least toxic effects to be used as anticoccidial.

Anticoccidial activity of hydrochloric acid (HCl) against Eimeria tenella in broiler chickens

The present study was planned to evaluate the anticoccidial activity of the different concentrations of the HCl against Eimeria tenella infection in broiler chickens in comparison with the amprolium anticoccidial. For this purpose, a total of 198 chicks were placed 11 per pen with three pens per treatment. The different concentrations of HCl (1000ppm, 2000ppm and 3000ppm) and amproilum (at the dose rate of 125ppm) were given to the experimental groups in drinking water from 10 to 19th days of age. One group was kept as infected non medicated control and one as non infected non medicated control. At the 12th day of age, all the groups were inoculated orally with 75,000 sporulated oocysts except non infected non medicated control. Anticoccidial activity was evaluated on the basis of performance (weight gain, feed conversion ratio) and pathogenic (oocyst score, lesion score and mortality %age) parameters. Among HCl medicated groups, the maximum anticoccidial effect was seen in the group medicated with 1000ppm HCl followed by 2000ppm and 3000ppm HCl medicated groups. Amprolium and 1000ppm HCl were almost equivalent in suppressing the negative performance and pathogenic effects associated with coccidiosis (Eimeria tenella) challenge. In summary, the lower doses of HCl have the potential to be used as alternative to chemotherapeutic drugs for Eimeria tenella control. It is therefore suggested that further studies should be carried out to determine the possible minimum safe levels of HCl with least toxic effects to be used as anticoccidial.

Estudos anatômicos de folhas de espécies de plantas daninhas de grande ocorrência no Brasil: IV - Amaranthus deflexus, Amaranthus spinosus, Alternanthera tenella e Euphorbia heterophylla

Neste trabalho é apresentado um estudo da anatomia das folhas de espécies de plantas daninhas de grande ocorrência no Brasil: Amaranthus deflexus, Amaranthus spinosus, Alternanthera tenella e Euphorbia heterophylla, visando melhor compreensão das barreiras que cada espécie impõe à penetração dos herbicidas e outros compostos utilizados em aplicações foliares. As folhas completamente expandidas do terceiro ao quinto nó foram coletadas de plantas de ocorrência espontânea no campo. Das folhas de cada espécie foram obtidas três amostras da região mediana, com aproximadamente 1 cm², as quais foram utilizadas em estudos da estrutura, clarificação e em observações em microscópio eletrônico de varredura. Todas as espécies avaliadas são anfiestomáticas. As principais barreiras foliares potenciais à penetração de herbicidas observadas nas plantas daninhas A. deflexus e A. spinosus foram, respectivamente, grande espessura da cutícula da face adaxial e da cutícula das duas faces. Já em relação a A. tenella, grande espessura da cutícula das duas faces, elevado teor de cera epicuticular e alta densidade tricomática foram os principais obstáculos potenciais detectados. E. heterophylla apresentou como possíveis principais barreiras foliares à penetração de agroquímicos o alto teor de cera epicuticular, a elevada densidade de laticíferos e a grande espessura da cutícula da face adaxial.

Profundidade de semeadura afetando a emergência de plântulas de Alternanthera tenella

A compreensão a respeito de informações básicas sobre a biologia de plantas daninhas pode contribuir significativamente na construção de estratégias mais adequadas para seu manejo, além de possibilitar o desenvolvimento de ferramentas de controle não-químico. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da profundidade de semeadura e da cobertura do solo sobre a emergência de Alternanthera tenella. Os tratamentos foram realizados em esquema fatorial 7x2, considerando-se sete níveis de profundidade (0, 1, 2, 3, 4, 5 e 10 cm) e duas situações de cobertura de solo (com e sem palha). A palha utilizada para cobertura do solo foi de aveia-preta (Avena strigosa), em quantidade equivalente a 2 t ha-1. A semeadura foi feita em colunas de PVC, colocando-se 50 sementes por coluna. A emergência das plântulas foi anotada diariamente até 28 dias após a semeadura. Ao final desse período, calculou-se a porcentagem total de emergência para cada tratamento e o índice de velocidade de emergência (IVE). A emergência das plântulas de A. tenella é influenciada pela profundidade do solo na qual as sementes se encontram. Na ausência e na presença de palha, a emergência é reduzida a partir de 4 e 5 cm de profundidade, respectivamente, e não há emergência a 10 cm de profundidade. Sementes posicionadas na superfície do solo apresentam velocidade de emergência igual ou superior à daquelas colocadas nas demais profundidades, independentemente da presença de palha na superfície do solo.

Efeito da luz e da temperatura na germinação de Alternathera tenella, Conyza bonariensis e Digitaria ciliaris

Este trabalho teve o objetivo de avaliar a influência da luz e da temperatura na germinação de três espécies de plantas daninhas comuns em lavouras brasileiras. As espécies estudadas foram Alternanthera tenella, conyza bonariensis e Digitaria ciliaris, nas quais se testou a influência de quatro variações de temperatura (15/25, 20/30, 20/35 e 30/40 ºC), com e sem a presença de luz, no percentual de germinação e no índice de velocidade de germinação (IVG). As sementes foram coletadas em canteiros experimentais, sendo elas selecionadas para permitir a homogeneização amostral. Posteriormente, 50 sementes de cada espécie foram colocadas em caixas do tipo gerbox, previamente preparadas com papel duplo umedecido de germinação "germitest". As caixas foram armazenadas em germinadores verticais tipo BOD, com controle de temperatura. As temperaturas foram mantidas na proporção de 16/8 horas diurna e noturna, respectivamente. As avaliações iniciaram-se aos três dias após incubação, sendo consideradas germinadas as sementes com protusão radicular igual ou superior a 1 mm. Constatou-se efeito significativo da luz para a germinação de todas as espécies, principalmente para D. ciliaris. A. tenella apresentou germinação elevada em todas as variações de temperatura testadas, embora 30/40 ºC tenham restringido a germinação de C. bonariensis. Os tratamentos também afetaram o IVG, cujo comportamento foi similar ao percentual de germinação, sendo o maior efeito constatado em D. ciliaris.

Temperatura e luz na germinação das sementes de apaga-fogo (Alternanthera tenella)

A biologia de plantas daninhas tropicais ainda é, em grande parte, desconhecida, especialmente em relação aos fatos que podem ser aproveitados do ponto de vista do controle cultural. Objetivou-se com este trabalho avaliar a influência da temperatura e da luz na germinação das sementes de Alternanthera tenella. Os tratamentos consistiram em quatro temperaturas (20, 25, 30 e 35 ºC) na ausência de luz e na manutenção da temperatura constante de 25ºC na presença e ausência de luz. O teste de germinação foi constituído por quatro repetições de 100 sementes para cada tratamento, colocadas para germinar em caixas plásticas do tipo gerbox e mantidas em câmaras de germinação do tipo BOD. As avaliações de germinação foram diárias e no mesmo horário, computando-se as plântulas normais, quando apresentavam radícula e folhas cotiledonares visíveis. Calcularam-se a germinação total e o índice de velocidade de germinação (IVG) após o período de 34 dias, e os resultados correspondem à média de dois experimentos. Foi observado que o aumento da temperatura proporcionou aumento na porcentagem e na velocidade de germinação das sementes até 28,2 ºC, decrescendo a partir dessa temperatura. Na temperatura de 25 ºC, verificou-se que a luz causou incremento na porcentagem e na velocidade de germinação das sementes de apaga-fogo.

Immunomodulatory properties of Alternanthera tenella Colla aqueous extracts in mice

Plants from the genus Alternanthera are thought to possess antimicrobial and antiviral properties. In Brazilian folk medicine, the aqueous extract of A. tenella Colla is used for its anti-inflammatory activity. The present study investigated the immunomodulatory property of A. tenella extract by evaluating the antibody production in male albino Swiss mice weighing 20-25 g (10 per group). The animals received standard laboratory diet and water ad libitum. The effect of A. tenella extract (5 and 50 mg/kg, ip) was evaluated in mice immunized with sheep red blood cells (SRBC 10%, ip) as T-dependent antigen, or in mice stimulated with mitogens (10 µg, Escherichia coli lipopolysaccharide, LPS, ip). The same doses (5 and 50 mg/kg, ip) of A. tenella extract were also tested for antitumor activity, using the Ehrlich ascites carcinoma as model. The results showed that 50 mg/kg A. tenella extract ip significantly enhanced IgM (64%) and IgG2a (50%) antibody production in mice treated with LPS mitogen. The same dose had no effect on IgM-specific response, whereas the 5 mg/kg treatment caused a statiscally significant reduction of anti-SRBC IgM-specific antibodies (82%). The aqueous extract of A. tenella (50 mg/kg) increased the life span (from 16 ± 1 to 25 ± 1 days) and decreased the number of viable tumor cells (59%) in mice with Ehrlich ascites carcinoma. The present findings are significant for the development of alternative, inexpensive and perhaps even safer strategies for cancer treatment.

Fitossociologia de plantas daninhas em monocultivo de milho e em consórcio com diferentes Fabaceae

O milho está entre os cereais mais cultivados e utilizados pela população mundial. Com o objetivo de efetuar o levantamento da comunidade de plantas daninhas no cultivo de milho em monocultivo e em consórcio, com diferentes Fabaceae, cultivado sob diferentes manejos, este trabalho foi realizado durante o período da primavera/verão de 2011/2012. Avaliaram-se os tratamentos: milho em monocultivo com adubação NPK na semeadura e com capina, milho em monocultivo sem adubação NPK na semeadura e com capina, milho em monocultivo com adubação NPK na semeadura sem capina, milho + mucu-preta, milho + crotalária e milho + feijão-de-porco. A capina aumenta o Índice de Valor de Importância (IVI) do falso massambará (Sorghum arundinaceum) no monocultivo, enquanto para o apaga-fogo (Alternanthera tenella colla) a adubação promove controle eficiente. O consórcio com a mucuna preta favorece o aumento do IVI do camalote (Rottboelia exaltata), já o consórcio com a crotalária favorece o falso massambará (Sorghum arundinaceum). As plantas de milho em monocultivo apresentaram maior altura (ALM) e peso de matéria seca (PMSM). Contudo, o monocultivo proporcionou plantas daninhas mais altas (ALPD), além de maiores no peso da matéria seca de plantas daninhas de folhas estreitas (PMSPDE). A capina no monocultivo elevou a ALM e o PMSM, apesar de elevar também a ALPD e o PMSPDE. O monocultivo com adubação com NPK na semeadura apresenta ALPD menor que o sem adubação completa; entretanto, o PMSPDE aumentou com a adubação. A adubação com NPK na semeadura no monocultivo eleva o PMSM. O consórcio do milho com a mucuna preta apresenta efeito semelhante sobre as variáveis analisadas em comparação aos outros consórcios avaliados, assim como os consórcios do milho com a crotalária e do milho com o feijão-de-porco apresentam efeitos semelhantes sobre as variáveis analisadas.

Exame parasitológico de fezes de gatos (Felis catus domesticus) domiciliados e errantes da Região Metropolitana do Rio de Janeiro, Brasil

Foram estudadas 131 amostras de fezes de gatos de comportamento domiciliado e errante da Região Metropolitana do Rio de Janeiro, obtendo-se uma positividade de 63,4% das amostras, com maior ocorrência no grupo de animais errantes. Foi observado predomínio de parasitismo por Ancylostoma sp (43,5%), Toxocara sp (19,1%) e Cystoisospora sp (43,5%) em ambos os grupos. Também foram encontrados ovos de Uncinaria sp (1,5%), Toxascaris leonina (7,6%), cistos de Giardia sp (6,1%) e esporocistos de Sarcocystis sp (0,8%). A alta prevalência de enteroparasitas na amostra estudada ressalta a importância de um maior controle parasitológico nesses animais, para proteção da saúde animal e humana.

Experimental Infection of Swine by Isospora suis Biester 1934 for Species Confirmation

A survey of Isospora suis performed in 177 faecal samples from 30 swine farms detected thin wall type I. suis oocysts in seven samples. This type of oocyst measuring 23.9 by 20.7 mm had a retracted thin wall similar to that of the genus Sarcocystis. This type of oocysts, isolated from four different faecal samples, was inoculated in four-five-days-old piglets free of contamination in order to verify the life cycle and pathogenicity of the species. The pigs were kept in individual metal cages and fed with cow milk. Daily faecal collections and examinations were performed until the 21st day after infection. MacMaster and Sheather' s methods were used for oocyst counting and identification. Infected piglets produced yellowish-pasty diarrhoea with slight dehydration. The prepatent and patent periods were respectively from 6 to 9 and 3 to 10 days after infection. Oocyst elimination was interrupted on the 10th and 11th days after infection with biphasic cycles. Thin and thick wall oocysts were detected in the same faecal samples. Thin walls were not observed in unsporulated oocysts. The observations suggest that this type of oocysts could appear in specific strains which occur in the later stages of their development. These oocysts seem to be responsible for clinical and pathogenic signs of neonatal isosporosis in pigs.