Desfechos maternos e perinatais em gestantes com líquido amniótico diminuído

OBJETIVO: Determinar os desfechos maternos e perinatais em gestantes com o líquido amniótico diminuído segundo o índice de líquido amniótico (ILA). MÉTODOS: Realizou-se estudo de coorte com 176 pacientes admitidas na enfermaria de alto risco do Instituto de Medicina Integral Prof. Fernando Figueira (IMIP. O líquido amniótico foi mensurado pelo índice de líquido amniótico , sendo classificado como diminuído, quando entre 5,1 e 7,9 cm; oligohidrâmnio moderado, entre 3,1 e 5,0 cm; e grave, quando menor ou igual a 3,0 cm. Para se determinar a diferença entre os três grupos das variáveis categóricas estudadas, foram utilizados o teste de chi-quadrado e exato de Fisher, quando pertinentes, e, para as variáveis numéricas, utilizou-se o teste de Mann Whitney, em um nível de significância de 5%. RESULTADOS: As malformações fetais ocorreram mais frequentes quando o oligohidrâmnio foi grave, enquanto as síndromes hipertensivas foram associadas ao oligohidrâmnio moderado. Observou-se semelhança entre os três grupos em relação à rotura prematura das membranas e outras causas. O líquido amniótico reduzido foi encontrado com maior frequência quando a idade gestacional do diagnóstico foi ≥32ª semana. Em relação aos desfechos perinatais, a incidência de índice de Apgar <7 no 1ºe 5ºminuto do óbito perinatal, da icterícia neonatal e da hipoplasia pulmonar foi mais elevada na presença do oligohidrâmnio moderado a grave. CONCLUSÕES: As causas e os desfechos maternos e perinatais em gestantes com líquido amniótico reduzido varia em relação a sua classificação pelo ILA, estando o oligohidrâmnio grave associado aos desfechos perinatais adversos e às malformações fetais.

A novel reiterated family of transcribed oligo(A)-terminated, interspersed DNA elements in the genome of Trypanosoma cruzi

We report the molecular characterization of a novel reiterated family of transcribed oligo(A)-terminated, interspersed DNA elements in the genome of Trypanosoma cruzi. Steady-state level of transcripts of this sequence family appeared to be developmentally regulated, since only in the replicative forms the parasite showed expression of related sequences with a major band around 3 kb. The presence of frame shifts or premature stop codons predicts that transcripts are not translated. The sequence family also contains truncated forms of retrotransposons elements that may become potential hot spots for retroelement insertion. Sequences homologous to this family are interspersed at many chromosomes including the subtelomeric regions.

Evaluation of DNA Recombinant Methodologies for the Diagnosis of Plasmodium falciparum and their Comparison with the Microscopy Assay

Since 1984, DNA tests based on the highly repeated subtelomeric sequences of Plasmodium falciparum (rep 20) have been frequently used in malaria diagnosis. Rep 20 is very specific for this parasite, and is made of 21 bp units, organized in repeated blocks with direct and inverted orientation. Based in this particular organization, we selected a unique consensus oligonucleotide (pf-21) to drive a PCR reaction coupled to hybridization to non-radioactive labeled probes. The pf-21 unique oligo PCR (pf-21-I) assay produced DNA amplification fingerprints when was applied on purified P. falciparum DNA samples (Brazil and Colombia), as well as in patient's blood samples from a large area of Venezuela. The performance of the Pf-21-I assay was compared against Giemsa stained thick blood smears from samples collected at a malaria endemic area of the Bolívar State, Venezuela, at the field station of Malariología in Tumeremo. Coupled to non-radioactive hybridization the pf-21-I performed better than the traditional microscopic method with a r=1.7:1. In the case of mixed infections the r value of P. falciparum detection increased to 2.5:1. The increased diagnostic sensitivity of the test produced with this homologous oligonucleotide could provide an alternative to the epidemiological diagnosis of P. falciparum being currently used in Venezuela endemic areas, where low parasitemia levels and asymptomatic malaria are frequent. In addition, the DNA fingerprint could be tested in molecular population studies

Garlic viral complex: identification of Potyviruses and Carlavirus in Central Brazil

Garlic viruses often occur in complex infections in nature. In this study, a garlic virus complex, collected in fields in Brazil, was purified. RT-PCR was performed using specific primers designed from the consensus regions of the coat protein genes of Onion yellow dwarf virus, a garlic strain (OYDV-G) and Leek yellow stripe virus (LYSV). cDNA of Garlic common latent virus (GCLV) was synthesized using oligo-dT and random primers. By these procedures individual garlic virus genomes were isolated and sequenced. The nucleotide sequence analysis associated with serological data reveals the presence of two Potyvirus OYDV-G and LYSV, and GCLV, a Carlavirus, simultaneously infecting garlic plants. Deduced amino acid sequences of the Brazilian isolates were compared with related viruses reported in different geographical regions of the world. The analysis showed closed relations considering the Brazilian isolates of OYDV-G and GCLV, and large divergence considering LYSV isolate. The detection of these virus species was confirmed by specific reactions observed when coat protein genes of the Brazilian isolates were used as probes in dot-blot and Southern blot hybridization assays. In field natural viral re-infection of virus-free garlic was evaluated.

Herança da resistência ao Watermelon mosaic virus em melancia (Citrullus lanatus L.)

Foi estudado o controle genético da resistência do genótipo não-comercial de melancia, PI 595201, ao vírus do mosaico da melancia (Watermelon mosaic virus, WMV). Avaliaram-se os genitores, a cultivar Crimson Sweet (P1 - suscetível) e a introdução PI 595201 (P2 - resistente), bem como as populações F1, F2, e os retrocruzamentos para ambos os parentais, RC11 (F1 x P1) e RC12 (F1 x P2). A severidade dos sintomas, depois da inoculação mecânica com WMV, foi avaliada de acordo com uma escala de notas de 1 (folhas sem sintomas) a 5 (mosaico intenso e deformações foliares). A cultivar Crimson Sweet apresentou média geral acima de 4,0, enquanto a introdução PI 595201 apresentou média 1,0, confirmando a reação contrastante das linhagens parentais. A hipótese de herança monogênica foi rejeitada, mostrando ser a resistência da introdução PI 595201 de controle oligo ou poligênico, com indicativo de dominância completa no sentido de maior resistência ao vírus. A estimativa de herdabilidade no sentido amplo foi acima de 0,8. A estimativa do número de genes, controlando o caráter, foi 4,16. O modelo aditivo-dominante é sugerido para explicar o controle genético da resistência.

Resultados gestacionais e neonatais em mulheres com rastreamento positivo para diabetes mellitus e teste oral de tolerância à glicose - 100g normal

OBJETIVO: avaliar a frequência de resultados gestacionais e neonatais desfavoráveis em mulheres com rastreamento positivo e diagnóstico negativo para diabetes mellitus gestacional. MÉTODOS: trata-se de um estudo de corte transversal, retrospectivo e descritivo realizado entre 2000 e 2009. Foram incluídas no estudo 409 gestantes com rastreamento positivo para diabetes mellitus. As variáveis estudadas foram: maternas (idade, índice de massa corpórea, antecedente de cesárea, macrossomia ou diabetes mellitus em gestação anterior, antecedente pessoal e familiar de diabetes mellitus e hipertensão arterial crônica) e neonatais (poli-hidrâmnio, idade gestacional por ocasião do parto, prematuridade, cesárea, recém-nascido (RN) grande para idade gestacional (GIG), macrossomia, índice de Apgar, síndrome do desconforto respiratório, hipoglicemia e hiperbilirrubinemia). Inicialmente foi realizada análise descrita uni e multivariada para a ocorrência de fatores de risco e desfechos neonatais. Foram descritas as prevalências e respectivos intervalos de confiança a 95%. RESULTADOS: em 255 (62,3%) das gestantes a via de parto foi cesárea. Quanto aos resultados perinatais, 14,2% dos RN foram classificados como prematuros e 19,3% dos RN como GIG. Os fatores de risco correlacionados com RN GIG foram sobrepeso ou obesidade, idade materna e antecedente de macrossomia em gestação anterior. CONCLUSÕES: na população com fatores de risco positivos ou glicemia de jejum alterada na primeira consulta do pré-natal, mesmo com curva glicêmica normal observa-se taxa de RN GIG elevada assim como índice de cesárea acima dos valores habitualmente presentes nas populações consideradas de baixo risco. As grávidas com tais características constituem um grupo diferenciado.

Differential gene expression profiles of hepatocellular carcinomas associated or not with viral infection

Chronic hepatitis B (HBV) and C (HCV) virus infections are the most important factors associated with hepatocellular carcinoma (HCC), but tumor prognosis remains poor due to the lack of diagnostic biomarkers. In order to identify novel diagnostic markers and therapeutic targets, the gene expression profile associated with viral and non-viral HCC was assessed in 9 tumor samples by oligo-microarrays. The differentially expressed genes were examined using a z-score and KEGG pathway for the search of ontological biological processes. We selected a non-redundant set of 15 genes with the lowest P value for clustering samples into three groups using the non-supervised algorithm k-means. Fisher’s linear discriminant analysis was then applied in an exhaustive search of trios of genes that could be used to build classifiers for class distinction. Different transcriptional levels of genes were identified in HCC of different etiologies and from different HCC samples. When comparing HBV-HCC vs HCV-HCC, HBV-HCC/HCV-HCC vs non-viral (NV)-HCC, HBC-HCC vs NV-HCC, and HCV-HCC vs NV-HCC of the 58 non-redundant differentially expressed genes, only 6 genes (IKBKβ, CREBBP, WNT10B, PRDX6, ITGAV, and IFNAR1) were found to be associated with hepatic carcinogenesis. By combining trios, classifiers could be generated, which correctly classified 100% of the samples. This expression profiling may provide a useful tool for research into the pathophysiology of HCC. A detailed understanding of how these distinct genes are involved in molecular pathways is of fundamental importance to the development of effective HCC chemoprevention and treatment.

Aplicação da biologia molecular na abordagem da síndrome de Bartter: relato de caso

O presente trabalho teve como objetivo mostrar a utilidade da biologia molecular para o diagnóstico da síndrome de Bartter (SB) por meio do relato de caso de duas irmãs e propor um algoritmo para abordagem molecular dessa síndrome. Os dois casos relatados apresentaram prematuridade, gestação complicada com poli-hidrâmnio e baixo peso ao nascer. Durante o primeiro ano de vida, as crianças apresentaram poliúria, polidipsia e atraso no crescimento, o que levou à investigação de doenças tubulares renais e erros inatos do metabolismo. Os exames laboratoriais sugeriram SB, mas a confirmação diagnóstica só foi obtida pela detecção de mutação em homozigose no exon 5 do gene KCNJ1, resultando em substituição do aminoácido alanina por valina no códon 214 (A214V) nas duas fitas de DNA nas duas irmãs e de mutação em heterozigose em seus pais. O diagnóstico de certeza da SB muitas vezes é difícil de ser obtido. Dessa forma, por meio dos casos relatados, mostrou-se a utilidade de métodos moleculares para o diagnóstico de certeza da SB, e foi proposto um algoritmo para a utilização racional dessas técnicas.