Depressed nNOS expression during spine transition in the developing hippocampus of FMR1 KO mice

Nitric oxide (NO), synthesized as needed by NO synthase (NOS), is involved in spinogenesis and synaptogenesis. Immature spine morphology is characteristic of fragile X syndrome (FXS). The objective of this research was to investigate and compare changes of postnatal neuronal NOS (nNOS) expression in the hippocampus of male fragile X mental retardation 1 gene knockout mice (FMR1 KO mice, the animal model of FXS) and male wild-type mice (WT) at postnatal day 7 (P7), P14, P21, and P28. nNOS mRNA levels were analyzed by real-time quantitative PCR (N = 4-7) and nNOS protein was estimated by Western blot (N = 3) and immunohistochemistry (N = 1). In the PCR assessment, primers 5&#8217;-GTGGCCATCGTGTCCTACCATAC-3&#8217; and 5&#8217;-GTTTCGAGGCAGGTGGAAGCTA-3&#8217; were used for the detection of nNOS and primers 5&#8217;-CCGTTTCTCCTGGCTCAGTTTA-3&#8217; and 5&#8217;-CCCCAATACCACATCATCCAT-3&#8217; were used for the detection of &#946;-actin. Compared to the WT group, nNOS mRNA expression was significantly decreased in FMR1 KO mice at P21 (KO: 0.2857 ± 0.0150, WT: 0.5646 ± 0.0657; P < 0.05). Consistently, nNOS immunoreactivity also revealed reduced staining intensity at P21 in the FMR1 KO group. Western blot analysis validated the immunostaining results by demonstrating a significant reduction in nNOS protein levels in the FMR1 KO group compared to the WT group at P21 (KO: 0.3015 ± 0.0897, WT: 1.7542 ± 0.5455; P < 0.05). These results suggest that nNOS was involved in the postnatal development of the hippocampus in FXS and impaired NO production may retard spine maturation in FXS.

Shiftworking families: parents' working schedule and sleep patterns of adolescents attending school in two shifts

OBJECTIVE: To explore whether parents' engagement in shift work affects the sleep habits of their adolescent children who attend school in two shifts. METHODS: The data were drawn from an extensive survey of sleep and daytime functioning of adolescents attending school one week in the morning and the other in the afternoon. The participants were 1,386 elementary and high school students (11-18 years old) whose parents were both employed. The data were analyzed using MANOVA, with parents' work schedule, adolescents' gender and type of school as between-subject factors. RESULTS: Parents' working schedule significantly affected the sleep patterns of high school adolescents. When attending school in the morning, adolescents whose parents were both day workers woke up somewhat later than adolescents with one shiftworking parent. In addition, they slept longer than adolescents whose parents were both shift workers. On weekends, adolescents whose parents both worked during the day went to bed earlier than adolescents whose parents were both shiftworkers. They also had smaller bedtime delay on weekends with respect to both morning and afternoon shifts than adolescents for whom one or both parents worked shifts. A significant interaction between parents' working schedule, adolescents' gender and type of school was found for sleep extension on weekends after afternoon shift school. CONCLUSIONS: Parental involvement in shift work has negative effects on the sleep of high school adolescents. It contributes to earlier wake-up time and shorter sleep in a week when adolescents attend school in the morning, as well as to greater bedtime irregularity.

Leishmania spp. parasite isolation through inoculation of patient biopsy macerates in interferon gamma knockout mice

Isolation of Leishmania parasite and species identification are important for confirmation and to help define the epidemiology of the leishmaniasis. Mice are often used to isolate pathogens, but the most common mouse strains are resistant to infection with parasites from the Leishmania (Viannia) subgenus. In this study we tested the inoculation of interferon gamma knockout (IFN&#947; KO) mice with biopsy macerates from Leishmania-infected patients to increase the possibility of isolating parasites. Biopsies from twenty five patients with clinical signs of leishmaniasis were taken and tested for the presence of parasites. Immunohistochemical assay (IHC) and conventional histopathology detected the parasite in 88% and 83% of the patients, respectively. Leishmania sp. were isolated in biopsy macerates from 52% of the patients by culture in Grace's insect medium, but 13% of isolates were lost due to contamination. Inoculation of macerates in IFN&#947; KO mice provides isolation of parasites in 31.8% of the biopsies. Most isolates belong to L. (Viannia) subgenus, as confirmed by PCR, except one that belongs to L. (Leishmania) subgenus. Our preliminary results support the use of IFN&#947; KO mice to improve the possibility to isolate New World Leishmania species.

Síndrome da meningite asséptica por enterovírus e Leptospira sp em crianças de Salvador, Bahia

Objetivando verificar a freqüência de enterovírus (EV), leptospiras e arbovírus como agentes causais da síndrome da meningite asséptica (SMA), em períodos não-epidêmicos, e comparar os pacientes com e sem diagnóstico etiológico determinado, foram selecionados 112 pacientes de idade entre 3 meses e 15 anos, com suspeita clínica de SMA, referenciados para Hospital Couto Maia, especializado em Doenças Infecciosas e Parasitárias (Salvador, Bahia), Em 44,6% (n=50) a etiologia foi determinada: enterovírus em 37,7% (n=42) dos casos, pelo teste de PCR Amplicor, por cultura do líquor e/ou de fezes; a Leptospira sp. em 7,1% (n=8), pelo método da micro-aglutinação, e nenhum caso de arbovírus foi detectado (inibição da hemaglutinação passiva). Entre os 14 enterovírus dos 22 isolados, foram identificados seis diferentes sorotipos, sendo o Echovirus-4 predominante (27,2%; 6/22) entre outros (Coxsackie B2, B3, B6 e B9; EV 71). Conclui-se que, os enterovírus foram os agentes mais freqüentes, e que a leptospirose deve ser lembrada no diagnóstico diferencial da SMA. Uma vez que as características clínicas e liquóricas dos pacientes dos grupos com e sem determinação do agente etiológico foram semelhantes, pode-se supor que o diagnóstico presuntivo de SMA é de provável etiologia viral ou pela leptospira.

Factors associated with Leptospira sp infection in a large urban center in northeastern Brazil

Leptospirosis is a zoonotic disease that has emerged to cause epidemics in urban communities in developing countries. However, little is known about the infection in the general population. A seroprevalence survey was performed on a random sample of 1,390 subjects in Salvador, Brazil. Data on environmental and socioeconomic factors were collected. The microagglutination test of serum samples was used to show any prior Leptospira infection. The overall seroprevalence was 12.4%. Among the seropositive individuals, 111 (61%) had high titers for serovars of the Icterohaemorrhagiae serogroup. Seroprevalence increased with age and was similar for males and females. A positive correlation between Leptospira infection and low educational level was found. These findings indicate that a significant proportion of this urban population is exposed to pathogenic Leptospira. Public health actions for leptospirosis control will need to target not only the traditional groups at risk of infection with severe forms of this disease, but also the general population that is at risk.

Espacialização da leptospirose em Aracaju, Estado de Sergipe, no período de 2001 a 2007

INTRODUÇÃO: A leptospirose, enfermidade causada por uma espiroqueta patogênica do gênero Leptospira, é uma das zoonoses mais difundidas no mundo, considerada um importante problema de saúde pública. Este trabalho tem como objetivo descrever o padrão espacial da leptospirose na Cidade de Aracaju, no período de 2001 a 2007, buscando identificar as áreas de risco para ocorrência da leptospirose. MÉTODOS: Utilizou-se a razão de Kernel, que consiste na criação de uma razão entre duas superfícies, para visualizar a superfície de risco da doença, onde no numerador coloca-se os casos, georreferenciados para setor censitário, e no denominador o kernel da população dessas áreas. Através deste método, foi possível delimitar áreas de maior densidade de casos, e compará-las visualmente com fator socioeconômico, como renda média. RESULTADOS: Comparando os períodos de chuva com os períodos de seca, verificou-se que não ocorre a presença de padrão espacial semelhante nos dois períodos, não coincidindo com as áreas consideradas de maior risco para ocorrência da doença. Através dos parâmetros estabelecidos, neste estudo, foi permitido verificar a importância da aplicação de técnicas de análise espacial na área de saúde pública. CONCLUSÕES: O kernel se mostrou uma ferramenta útil na obtenção de uma análise global da situação epidemiológica da leptospirose em Aracaju, o que viabiliza sua utilização pelas secretarias de saúde municipal e estadual.

Puerperal brain cryptococcoma in an HIV-negative woman successfully treated with fluconazole: a case report

Cryptococcus spp. cerebral abscesses are uncommon in immunocompetent subjects. The recommended induction treatment is the administration of amphotericin B plus flucytosine combined with resection for lesions &#8805;3cm. In this paper, we describe an HIV-negative woman diagnosed with a large cryptococcoma in the immediate postpartum period. The lesion was not resected, and due to amphotericin B intolerance, she received an extended course of fluconazole monotherapy. There was no disease recurrence during the 4 years of follow-up. The abrupt onset of her symptoms following delivery suggests that she developed a postpartum immune reconstitution syndrome. This case also demonstrates that in specific situations fluconazole monotherapy can be attempted in immunocompetent patients with cryptococcoma.

Estudo de parâmetros físicos, químicos e hídricos de um Latossolo Amarelo, na região Amazônica

Estudou-se os atributos físicos, hídricos e químicos de um Latossolo sob sistema de agroflorestal na região Amazônica. O solo foi descrito morfologicamente e amostras com estrutura deformada foram coletadas para caracterização física e química. A análise das propriedades hidráulicas foi realizada a partir de amostras indeformadas coletadas a cada camada de 0,10 m até 1,00 m de profundidade com 5 repetições para determinação da condutividade hidráulica do solo saturado (Ko) pelo método do permeâmetro de carga decrescente e determinação das curvas de retenção (fim(teta)), utilizando as tensões de 1, 2 e 4 kPa (funis de placa porosa) e 10, 30, 50, 100, 500 e 1500 kPa (câmaras de pressão com placa porosa). As demais análises foram realizadas até 1,50 m de profundidade. Os valores de Ko nas camadas apresentaram grande homogeneidade estando compreendido entre 2,22 a 3,20 cm dia-1, sendo relacionados com variação da densidade do solo e porosidade. A retenção hídrica demonstra que o solo tem a capacidade de reter elevada quantidade de água, mesmo quando submetido a elevados potenciais, indicando uma baixa disponibilidade para as plantas. As curvas de retenção não apresentaram um bom ajuste pela equação de van Genuchten , sugerindo uma distribuição de poros bimodal.

Avaliação da condutividade hidraulica do solo saturada utilizando dois métodos de laboratório numa topossequência com diferentes coberturas vegetais no Baixo Amazonas

O objetivo desse trabalho foi avaliar dois métodos de laboratório para a determinação da condutividade hidráulica do solo saturada (Ko) conhecidos como Permeâmetro de carga constante (PCC) e Permeâmetro de carga decrescente (PCD), com o intuito de verificar sua aplicabilidade e variabilidade em solos amazônicos. Coletaram-se 125 amostras de solo com estrutura indeformada, através de amostrador tipo Uhland, com anéis volumétricos, de 0,072 m de altura e 0,069 m de diâmetro, devido à variabilidade apresentada pelas determinações de tal parâmetro. Nos mesmos pontos de amostragens da Ko, procedeu-se coleta de anéis volumétricos para a determinação da porosidade do solo. Ainda nesses pontos foram coletadas amostras com estrutura deformada para análises físicas e químicas. Os resultados obtidos demonstram que o método do PCC foi o mais apropriado para a classe dos Latossolos estudados, apresentando os menores coeficientes de variação e desvio padrão ao longo da topossequência. Os valores de Ko estiveram distribuídos entre P1(2,65 à 3,34 cm dia-1), P2(2,85 à 3,38 cm dia-1), P3(2,86 à 3,63 cm dia-1), P4(2,75 à 3,49 cm dia-1), P5(2,38 à 3,83 cm dia-1) e P6 (2,47 à 3,52 cm dia-1); havendo uma tendência para maiores valores de Ko na superficie. A utilização de Ko como parâmetro de análise hídrica em solos porosos na superfície e muito argilosos em profundidade, como os amazônicos, necessita ser realizada com precaução, evitando a interrupção da continuidade dos poros e compactação da amostra. Mudanças na condutividade hidráulica saturada estiveram mais relacionadas a alterações nas propriedades físicas do solo e posição no relevo do que nas alterações das coberturas vegetais ao longo da topossequência.

Atributos químicos, físico-hídricos e mineralogia da fração argila em solos do Baixo Amazonas: Serra de Parintins

Estudos sobre os atributos dos solos amazônicos geram informações para compor um levantamento atual sobre suas condições frente às várias formas de alterações que estão sujeitos. O objetivo deste trabalho foi descrever e avaliar a evolução química, físico-hídrica, bem como a mineralogia de Latossolos no Baixo Amazonas como forma de entender as variações desses atributos em diferentes coberturas vegetais. Coletaram-se amostras deformadas e indeformadas para análises físicas, químicas, mineralógicas e hídricas, em dois pontos de uma topossequência na Serra de Parintins: platô e vertente, sendo três perfis de solo em cada posição. Os resultados obtidos demonstraram que a floresta predominante sobre os perfis do topo e vertente promove condições físicas e hídricas adequadas para uma boa agregação, maior intensidade de poros grandes, maior condutividade hidráulica saturada (Ko) e melhor retenção hídrica dos solos. Fato semelhante ocorrendo com as áreas de capoeira, apresentando boa permeabilidade, porosidade e retenção de água no solo. O acúmulo de carbono é maior dos perfis da vertente, decrescendo em profundidade, relacionando-se diretamente com Ko e com o sistema radicular. A análise mineralógica da fração argila indicou a caulinita como argilomineral predominante, seguido pelos minerais gibbsita, goethita, quartzo e anatásio, não havendo variações ao longo da paisagem. A Serra de Parintins possui um solo pobre em nutrientes, ácido, com textura média a muito argilosa com acúmulo de plintita nos horizontes subsuperficiais, evitando o fenômeno de terras caídas. Um gradiente elevado de umidade volumétrica é observado nos horizontes subsuperficiais, havendo mais água retida, quando comparado com horizontes superficiais.

Adubação da mandioca (Manihot utilissima Pohl.) I: ensaio em areia lavada (Nota prévia)

This paper deals with the preliminary results of a sand culture experiment carried out to obtain physiological bases to study the fertilization of cassava in the State of São Paulo. On the other hand, the authors are interested in the possible influence of mineral nutrients in the quantity and quality of starch. Cassava (Manihot utilissima Pohl.), "Branca de Sta. Catarina" variety, was grown under the following treatments: NO PO KO, NO P1 K1, N1 P0 Kl, NI P1K0, N2 p1 Kl N1 P2 K1 and N1 P1 K2. A striking response to phosphorus was observed among the treatments. However, once secured the necessary phosphoric level to the plant, the production becomes limited by nitrogen; in other words, increase in yield can be accomplished only by raising the nitrogenous level. The present results suggest that the remarkable effects of phosphates applied to cassava cultures in the State of São Paulo are due not only to the poor quality of our soils, as far phosphorus is concerned: we are facing a positive physiological response showed by the plant.

Characterization of protective and non-protective surface membrane carbohydrate epitopes of Schistosoma mansoni

We have produced a number of monoclonal antibodies, protective and non-protective, which recognize a complex of schistosomula antigens, including the 38 kDa antigen. Eight different protective and non-protective monoclonal antibodies, varying in isotypes, were used in the binding assays. Lectin inhibition studies suggested that the monoclonal antibodies probably recognized carbohydrate epitopes on the antigen(s). Immunoprecipitation studies showed that at least two of the monoclonal antibodies recognized different epitopes on the same molecule. Additionally, we tested for monoclonal antibody binding after the antigens were treated with; 1) proteases, 2) periodate, 3) various exo- and endoglycosidases, 4) mild acid hydrolysis. We also tested for binding of the antibodies to keyhole limpet hemocyanin (KLH). Using the 8 monoclonal antibodies as probes, we were able to define at least 4 different carbohydrate epitopes related to the protective monoclonal antibodies, and at least one epitope which is seen by the non-protective antibodies. The epitope seen by the non-protective antibodies was shown to be cross-reactive with epitopes on KLH. These results demonstrate the importance of epitope mapping studies for any defined vaccine.

Role of cytokines in the formation and downregulation of hepatic circumoval granulomas and hepatic fibrosis in Schistosoma mansoni-infected mice

Schistosoma mansoni infections are associated with a strong Th2 cytokine response. Treatment of mice with IL-12 or anti-IL-2 or anti-IL-4 before i.v. injection of eggs increased IFN-gamma production and downregulated Th2 responses and pulmonary granuloma size. Conversely, anti-IFN-gamma antibody treatment increased Th2 responses and granuloma size. Similar manipulation produced less dramatic results in infected mice. However, sensitization of mice with eggs + IL-12 before infection augmented the Th1 response and decreased Th2 cytokines, granuloma size and fibrosis. Antisera to IFN-gamma, TNF-alpha or IL-12 during IL-12-egg immunization partly restored granuloma size and fibrosis following infection. Variations in the size of granulomas in acute (8 week) infections may be influenced primarily by the number and state of activation of T cells. In chronic (12-16 week) infections immunologic downmodulation proceeded normally in mice without functional CD8+ cells and in IFN-gamma KO mice but not in B cell KO (muMT) mice or in mice deficient in FcR expression in spite of the fact that these mice downregulated their T cell and cytokine responses. It is evident that the participation of cytokines in granuloma formation and regulation is complicated and that the mechanisms controlling both these phenomena are likely to involve both T cells and antibody/FcR interactions.

Interferon-gamma is required for the late but not early control of Leishmania amazonensis infection in C57Bl/6 mice

The critical role of interferon-gamma (IFN-g) in the resistance of C57Bl/6 mice to Leishmania major is widely established but its role in the relative resistance of these animals to L. amazonensis infection is still not clear. In this work we use C57Bl/6 mice congenitally deficient in the IFN-g gene (IFN-g KO) to address this issue. We found that IFN-g KO mice were as resistant as their wild-type (WT) counterparts at least during the first two months of infection. Afterwards, whereas WT mice maintained lesion growth under control, IFN-g KO mice developed devastating lesions. At day 97 of infection, their lesions were 9-fold larger than WT controls, concomitant with an increased parasite burden. At this stage, lesion-draining cells from IFN-g KO mice had impaired capacity to produce interleukin-12 (IL-12) and tumour necrosis factor-a in response to parasite antigens whereas IL-4 was slightly increased in comparison to infected WT mice. Together, these results show that IFN-g is not critical for the initial control of L. amazonensis infection in C57Bl/6 mice, but is essencial for the developmente of a protective Th1 type immune response in the later stages.