Isolation, expansion and differentiation of cellular progenitors obtained from dental pulp of agouti (Dasyprocta prymnolopha Wagler, 1831)

Abstract: The study aimed to isolate, expand, differentiate and characterize progenitor cells existent in the dental pulp of agouti. The material was washed with PBS solution and dissociated mechanically with the aid of a scalpel blade on plates containing culture medium D-MEM/F-12, and incubated at 5% CO2-37⁰C. The growth curve, CFU assay, osteogenic/adipogenic differentiation and characterization were obtained from the isolation. The cells began to be released from the explant tissue around the 7th day of culture. By day 22 of culture, cells reached 80% confluence. At the UFC test, 81 colonies were counted with 12 days of cultivation. The growth curves before and after freezing showed a regular growth with intense proliferation and clonogenic potential. The cell differentiation showed formation of osteoblasts and fat in culture, starting at 15 days of culture in a specific medium. Flow cytometry (FACs) was as follows: CD34 (positive), CD14 (negative), CD45 (negative), CD73 (positive), CD79 (negative), CD90 (positive), CD105 (positive), demonstrating high specificity and commitment of isolated cells with mesenchymal stem cells strains. These results suggest the existence of a cell population of stem cells with mesenchymal features from the isolated tissue in the explants of agouti dental pulp, a potential model for study of stem cell strains obtained from the pulp tissue.

Lipopolysaccharide-induced dental pulp cell apoptosis and the expression of Bax and Bcl-2 in vitro

Lipopolysaccharide exerts many effects on many cell lines, including cytokine secretion, and cell apoptosis and necrosis. We investigated the in vitro effects of lipopolysaccharide on apoptosis of cultured human dental pulp cells and the expression of Bcl-2 and Bax. Dental pulp cells showed morphologies typical of apoptosis after exposure to lipopolysaccharide. Flow cytometry showed that the rate of apoptosis of human dental pulp cells increased with increasing lipopolysaccharide concentration. Compared with controls, lipopolysaccharide promoted pulp cell apoptosis (P < 0.05) from 0.1 to 100 μg/mL but not at 0.01 μg/mL. Cell apoptosis was statistically higher after exposure to lipopolysaccharide for 3 days compared with 1 day, but no difference was observed between 3 and 5 days. Immunohistochemistry showed that expression of Bax and Bcl-2 was enhanced by lipopolysaccharide at high concentrations, but no evident expression was observed at low concentrations (0.01 and 0.1 μg/mL) or in the control groups. In conclusion, lipopolysaccharide induced dental pulp cell apoptosis in a dose-dependent manner, but apoptosis did not increase with treatment duration. The expression of the apoptosis regulatory proteins Bax and Bcl-2 was also up-regulated in pulp cells after exposure to a high concentration of lipopolysaccharide.

VP22 herpes simplex virus protein can transduce proteins into stem cells

The type I herpes simplex virus VP22 tegument protein is abundant and well known for its ability to translocate proteins from one cell to the other. In spite of some reports questioning its ability to translocate proteins by attributing the results observed to fixation artifacts or simple attachment to the cell membrane, VP22 has been used to deliver several proteins into different cell types, triggering the expected cell response. However, the question of the ability of VP22 to enter stem cells has not been addressed. We investigated whether VP22 could be used as a tool to be applied in stem cell research and differentiation due to its capacity to internalize other proteins without altering the cell genome. We generated a VP22.eGFP construct to evaluate whether VP22 could be internalized and carry another protein with it into two different types of stem cells, namely adult human dental pulp stem cells and mouse embryonic stem cells. We generated a VP22.eGFP fusion protein and demonstrated that, in fact, it enters stem cells. Therefore, this system may be used as a tool to deliver various proteins into stem cells, allowing stem cell research, differentiation and the generation of induced pluripotent stem cells in the absence of genome alterations.

In vitro SCREENING ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF Bidens pilosa LINNÉ AND Annona crassiflora MART. AGAINST OXACILLIN RESISTANT Staphylococcus aureus (ORSA) FROM THE AERIAL ENVIRONMENT AT THE DENTAL CLINIC

Currently multiresistant Staphylococcus aureus is one common cause of infections with high rates of morbidity and mortality worldwide, which directs scientific endeavors in search for novel antimicrobials. In this study, nine extracts from Bidens pilosa (root, stem, flower and leaves) and Annona crassiflora (rind fruit, stem, leaves, seed and pulp) were obtained with ethanol: water (7:3, v/v) and their in vitro antibacterial activity evaluated through both the agar diffusion and broth microdilution methods against 60 Oxacillin Resistant S. aureus (ORSA) strains and against S. aureus ATCC6538. The extracts from B. pilosa and A. crassiflora inhibited the growth of the ORSA isolates in both methods. Leaves of B. pilosa presented mean of the inhibition zone diameters significantly higher than chlorexidine 0.12% against ORSA, and the extracts were more active against S. aureus ATCC (p < 0.05). Parallel, toxicity testing by using MTT method and phytochemical screening were assessed, and three extracts (B. pilosa, root and leaf, and A. crassiflora, seed) did not evidence toxicity. On the other hand, the cytotoxic concentrations (CC50 and CC90) for other extracts ranged from 2.06 to 10.77 mg/mL. The presence of variable alkaloids, flavonoids, tannins and saponins was observed, even though there was a total absence of anthraquinones. Thus, the extracts from the leaves of B. pilosa revealed good anti-ORSA activity and did not exhibit toxicity.

The effect of timing temporary cements to treat induced pulp necrosis in the teeth of dogs

During endodontic therapy (pulpectomy, root canal debridement and root canal filling) microbiological management is a major concern. Bacteria present in dentine tubules, apical foramina and apical delta are causally related to failure of the procedure. Studies have shown that during single session endodontic treatment bacteria remain within dental structures. The aim of the present study was to evaluate endodontic treatment performed as two sessions, using temporary endodontic dressing materials for different periods in four groups of experimental dogs. A total of 80 roots of second and third upper premolar teeth and second, third and fourth lower premolar teeth were divided into four groups. The pulp chamber was opened with burrs and the pulp exposed for 60 days to induce pulpal inflammation and necrosis. Groups II, III and IV were treated with calcium hydroxide plus camphorated paramono-chlorophenol (PMCC) for 7, 15 and 30 days, respectively. In all groups, the root canals were filled with zinc oxide-eugenol and gutta-percha cones. Clinical and radiographical measurements were performed every 2 weeks. After 60 days a small block section containing the teeth, surrounding periapical tissues and the periodontium was removed for histological and microbiological study. Histological analysis revealed intense inflammatory response in all groups. Microbiological analysis showed microbial reduction inversely proportional to the period of time that the intracanal temporary medicament was left in place.

Distribution of biglycan and decorin in rat dental tissue

Biglycan and decorin are small leucine-rich proteoglycans that play several biological and structural roles in different tissues and organs. Several reports have indicated that biglycan participates in odontoblast and ameloblast differentiation and in the calcification process. In the present study we show that the expression of biglycan changes from within the ameloblasts and odontoblasts to the extracellular space according to the stage of animal development. In predentin and in the pulp space, however, biglycan was continually expressed throughout the period of investigation. In contrast, decorin was absent in odontoblasts and in ameloblasts and was exclusively expressed in predentin throughout the period of observation. In young rats, however, decorin was expressed in the extracellular spaces of the pulp, where it was concentrated mainly in the peripheral pulp.

Osteossarcoma de mandíbula inicialmente mimetizando lesão do periápice dental: relato de caso

O osteossarcoma é um tumor mesenquimal maligno, no qual as células cancerosas produzem matriz óssea. É o tumor maligno primário mais comum do osso, responsável por aproximadamente 20% dos sarcomas, sendo que 5% destes ocorrem nos maxilares. Possuem variados aspectos não só clínicos e histopatológicos como também no curso e prognóstico. Este artigo apresenta um relato de caso de paciente do sexo feminino, com 20 anos de idade, que nos foi encaminhada apresentando aumento de volume na região de pré-molar inferior esquerdo. Após diagnóstico clínico de lesão do periápice dental, a paciente foi submetida previamente a tratamento endodôntico do dente envolvido, a partir do qual, em um período de 11 dias, pode-se observar um considerável aumento da lesão provocando visível assimetria facial. A radiografia oclusal mostrava imagem compatível com área de destruição óssea e formação de osso anormal na região, com cortical externa exibindo evidente radiopacidade semelhante a raios de sol, sugerindo o diagnóstico de osteossarcoma. A lesão foi biopsiada e obteve-se o diagnóstico histopatológico de osteossarcoma. A paciente foi então submetida à mandibulectomia parcial e uma reconstrução da área, usando osso de costela e enxerto de pele da nádega, para o revestimento da mucosa oral envolvida. Aos 8 meses após a cirurgia houve recorrência local da lesão e a paciente foi a óbito aproximadamente 1 ano depois da recidiva.

Climate strategies of firms in the automotive and pulp & paper industries in Brazil: insights from an international perspective

This article focuses on the results of the final stage of research into the climate strategies of firms in the automotive and pulp-and-paper industries in Brazil, a country that is becoming increasingly important also in terms of climate change issues. In the first stage, the Climate Strategy Model (CSM) was developed to assess whether firms were adopting the necessary practices to assure the successful implementation of climate strategies. In the second, the CSM was applied to firms in the above mentioned industries that were chosen because of their important role in the domestic economy. In the final stage, interviews with executives of these firms were conducted to identify root causes of climate strategy implementation deficiencies and obtain new insights from an international perspective.

Prevalência da cárie dental em brancos e não brancos

Foram examinadas 378 crianças de um grupo escolar da Capital do Estado de São Paulo, com a finalidade de verificar se a prevalência de cárie dental em crianças de côr branca é maior do que em crianças de côr não branca. Após a análise estatística dos dados, utilizando o teste U, de Mann-Whitney, não paramétrico, concluiu-se que os brancos apresentam uma prevalência de cárie estatìsticamente maior, nas idades de 8, 10 e 12 anos, a um nível de significância de 5%.

Fluosilicato de zinco na prevenção de cárie dental em ratos

O propósito desta pesquisa foi verificar uma possível ação sinérgica entre flúor e zinco na incidência da cárie dental. O estudo compreendeu três grupos de ratos que receberam soluções de: a) fluoreto de sódio (1 ppm) ; b) fluosilicato de zinco; c) e água, respectivamente. Todos os grupos, com ratos machos e fêmeas, eram divididos em subgrupos de acôrdo com a dieta - cariogênica e não cariogênica. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância, concluíndo-se o seguinte: I) O grupo que recebeu fluosilicato de zinco apresentou menor número de cáries do que o do fluoreto de sódio, mas a diferença não foi estatìsticamente significante, sendo, porém, significante entre êstes dois grupos e o da água. II) Os ratos que receberam o fluosilicato de zinco ou o fluoreto de sódio, mostraram nível mais elevado de flúor nas cinzas dos ossos, mas a diferença entre os dois grupos não foi estatìsticamente significante, III) Notou-se também que apresentavam similar desmineralização óssea.

Efeito inibidor de cárie dental de uma única aplicação tópica de solução de fluofosfato acidulada em adultos jovens: experiência de um ano

O propósito desta pesquisa foi o de verificar se as soluções de fluofosfato aciduladas, que têm efeito comprovado em crianças, teriam também em adultos jovens. O estudo compreendeu uma aplicação tópica de solução de fluofosfato acidulada, pH aproximadamente 3, e contendo 1,23% de flúor, em 75 estudante de curso superior com idade média de 20 anos, servindo eles mesmo como contrôle. Verificou-se que a diferença percentual entre o lado contrôle e o experimental, ou seja, a redução na incidência de cárie foi de 27,66%, resultado estatisticamente significante.

Gestação e cárie dental

O objetivo desta pesquisa foi o de verificar se a incidência de cárie aumenta durante a gestação. Foram incluídas neste estudo 82 gestantes e 40 não gestantes nas quais se observou a incidência de superfícies atacadas pela cárie durante um período de 6 meses. À análise dos dados constatamos que não ocorreu diferença estatìsticamente significante entre os dois grupos quanto à incidência de cárie.

Aspectos epidemiológicos da cárie dental em escolares brancos e não brancos de ambos os sexos internos em sete orfanatos da cidade de São Paulo, Brasil, em 1972

Foi realizado um levantamento epidemiológico de cárie dental em 860 escolares de ambos os sexos, de 7 a 12 anos, de cor branca e não branca, internos em sete orfanatos da cidade de São Paulo, com o objetivo de verificar se em crianças brancas e não-brancas, vivendo nas mesmas condições ambientais, era possível detectar diferenças na experiência da cárie. Neste estudo, foram controladas variáveis de grande importância em relação à cárie dental, tais como dieta e freqüência da ingestão de substâncias açucaradas durante, ou entre as refeições. Foram estudadas relações entre idade, sexo e cor das crianças com os valores do índice CPO, com o número de dentes permanentes irrompidos e com os valores médios de dentes permanentes atacados por cárie por 100 dentes irrompidos. Os resultados obtidos mostram que os brancos não apresentam prevalência de cárie dental estatisticamente maior do que os não brancos, na dentição permanente.

Análise dos dados de prevalência de cárie dental na cidade de Campinas, SP, Brasil, depois de dez anos de fluoração da água de abastecimento público

Foram analisados os resultados dos dados de quatro levantamentos de prevalência de cárie dental de crianças de 4 a 14 anos de idade da cidade de Campinas, SP, Brasil, com o objetivo de se verificar as reduções de cárie dental encontradas nos dentes permanentes e primários durante o período de dez anos de fluoração da água de abastecimento público. As reduções de prevalência de cárie observadas são similares às constatadas nos estudos pilotos dos Estados Unidos e do Brasil, sendo de 66% para os dentes permanentes e de 53% nos dentes primários. Nos grupos etários de 6 a 10 anos, 25% das crianças não têm nenhum dente primário atacado pela cárie, e 36% estão em igual condição em relação aos dentes permanentes.

Prevenção da cárie dental: a questão da fluoretação do sal

Discute-se a viabilidade da utilização do sal de cozinha como veículo para o flúor no processo de prevenção da cárie no Brasil. Com base na análise do estudo da Colômbia, e na experiência brasileira com o método similar de iodação do sal, conclui-se que o emprego do sal fluoretado é válido somente em áreas restritas e sob controle técnico. A fluoretação da água constitui o método de escolha para o país, que deverá concentrar seus esforços na tentativa de sua máxima expansão.