Cysticercus bovis: I. Ensaios de evaginação

Fresh bovine and swine bile and dehidrated bovine bile in association with chloridric acid, glucose, peptone or distilled water were utilized to induce evagination of C. bovis. Better results were obtained by using bovine or swine fresh bile 15% or dehidrated bovine bile 4% in distilled water. The C. bovis evagination pattern was the same in broths containing bovine or swine bile. The bovine dehidrated bile at 4% is better for the evagination than the natural one; in the studied concentrations a increase in the percentage of evagination was observed with a concomitant increase in the concentration of bile.

Caracterização das lesões por Cysticercus bovis, na inspeção post mortem de bovinos, pelos exames macroscópico, histopatológico e pela reação em cadeia da polimerase (PCR)

Considerando a necessidade do conhecimento da cisticercose bovina e do aperfeiçoamento dos métodos de diagnóstico desta doença, objetivou-se verificar a ocorrência do Cysticercus bovis nos diversos locais anatômicos, tais como: cabeça, coração, esôfago, diafragma, língua, fígado e carcaça, examinados pelo Serviço de Inspeção Federal. O diagnóstico foi feito por macroscopia, microscopia e PCR com extração de DNA por fervura para a identificação do metacestóide. Dos 22043 bovinos abatidos, 713 (3,23%) estavam infectados. O coração foi o sítio anatômico mais afetado, com 1,90% (420/22043), seguido da cabeça, 1,11% (245/22043), do esôfago, 0,08% (18/22043), da carcaça, 0,07% (15/22043), do diafragma, 0,03% (7/22043), do fígado, 0,02% (5/22043) e da língua, 0,01% (3/22043). Dos cistos obtidos, 58,35% (416/713) estavam mortos e 41,65% (297/713), vivos. As diferenças entre os sítios anatômicos e a condição morfológica dos cistos foram significativas (p < 0,05). Dos 416 cistos mortos, 253 foram examinados por apresentarem características de: lesões nodulares firmes, brancacentas, com material amarelado, por vezes com aspecto calcário, no interior. O exame microscópico revelou granulomas comumente representados por centro necrótico e/ou mineralizado, envolto por histiócitos dispostos em paliçada, células gigantes multinucleadas, infiltrado misto, predominantemente de mononucleares, e fibrose. Por vezes, a periferia das lesões tinha características de tecido de granulação e mineralização em forma de lâminas lineares. Os restos parasitários foram identificados como um material hialino acelular, contendo elementos ovais e circulares, basofílicos, acidófilos e incolores, denominados corpúsculos calcários. Em algumas lesões foram observados raros corpúsculos, dispersos na reação inflamatória. Nódulos fibrosos, ricos em infiltrado linfóide ou crônico ativos, foram frequentemente visualizados. Dos cistos vivos examinados, 65% (13/20) foram positivos para C. bovis , confirmando o diagnóstico ambulatorial e a eficácia do método de PCR utilizado. Em virtude da positividade observada para C. bovis nos exames histopatológico e PCR, particularmente em fígado e esôfago, sugere-se que seja reformulado o artigo 176 do Regulamento de Inspeção Industrial e Sanitária de Produtos de Origem Animal, incluindo estes locais na rotina de inspeção nos matadouros.

Prevalência da cisticercose bovina no Estado de São Paulo (Brasil)

Estudou-se a prevalência da cisticercose bovina (Cysticercus bovis) no Estado de São Paulo, no ano de 1986, a partir de fichas de matadouros do Estado sob o controle do Serviço de Inspeção Federal (SIF). Para o estudo da distribuição geográfica, adotou-se a divisão político-administrativa do Estado, formada por 11 Regiões Administrativas (RAs) e a Região Metropolitana (RM), subdivididas em 42 Regiões de Governo (RGs), abrangendo 572 municípios. Aos valores de prevalência obtidos aplicou-se o teste "Z" para duas proporções. O total de abate foi igual a 896.654 cabeças, tendo sido diagnosticados 48.957 casos de cisticercose, correspondendo a uma prevalência de 5,5%. Obteve-se resultados de prevalência para 385 municípios, todas as RGs, RAs e a RM. Apresentaram resultados estatisticamente significantes 97 municípios, 14 RGs e 4 RAs.

Epidemiological survey of the taeniasis/cysticercosis complex in cattle farms in Viçosa County, Minas Gerais, Brazil

Despite the importance of human taeniasis/bovine cysticercosis for public and animal health and the economy, its actual epidemiological status in Brazil is not well-studied. We sought to assess the epidemiological profile of this zoonosis in the rural area of Viçosa County, Minas Gerais, Brazil. The prevalence of bovine cysticercosis was 0.42%, whereas no case of human taeniasis was diagnosed. Factors favoring the persistence of zoonosis were identified. These included the supply of untreated water to animals, animals raised for slaughter without sanitary supervision, poor mechanization of raising techniques, and the use of untreated water for human consumption. Bovine meat for human consumption acquired in the city or from the farm itself was characterized as a risk factor for bovine cysticercosis (Odds Ratio (OR) =16.77; p<0.05). Nevertheless, the families on the investigated farms did apply several appropriate measures to control this disease, such as the virtual lack of open sewers and the consumption of well-cooked meat. The presence of bovine cysticercosis cases, and the factors favoring its persistence, point to the need for constant epidemiological and sanitary surveillance in this county.

Lesões parasitárias encontradas em bovinos abatidos para consumo humano

Durante um período de 28 meses (janeiro 2011-abril 2013) foram feitas visitas periódicas a quarto abatedouros frigoríficos de bovinos para colher lesões regularmente encontradas em bovinos abatidos para consumo humano. Trezentas e três lesões foram colhidas, 25% das quais eram causadas por seis parasitas diferentes: o metacestoide de Echinocccus granulosus (cisto hidático), Fasciola hepatica, o metacestoide de Taenia saginata (Cysticercus bovis), Oesophagostomum radiatum, Eurythrema coelomaticum e Paramphistomum cervi. Os aspectos macro e microscópicos causados por esses vermes são profusamente ilustrados e uma descrição macro e microscópicadas lesões é fornecida na esperança de auxiliar o inspetor de carnes iniciante na tarefa de reconhecer e interpretar o significado dessas lesões tanto para a saúde animal quanto para a saúde humana. Com respeito a esses últimos objetivos, o ciclo evolutivo, e os efeitos nos hospedeiros animal e humano, e ainda a destinação da carcaça ou órgão afetado na linha de inspeção, são discutidos para cada parasita.

Prevalência, distribuição espacial e fatores de risco para cisticercose bovina no estado de São Paulo

O presente trabalho teve como objetivos determinar a prevalência, a distribuição geográfica bem como os fatores e áreas de risco associados à cisticercose bovina no Estado de São Paulo. Foram inspecionados 34.443 animais, machos e fêmeas e com faixas etárias variando entre 18 a 60 meses. Os bovinos eram procedentes de 97 municípios do Estado de São Paulo, devidamente identificados e abatidos no período de outubro de 2010 a agosto de 2011, em um frigorífico localizado na cidade de Ipuã-SP, sob supervisão do SIF 1387. O estado de São Paulo foi dividido em núcleos regionais, e os dados dos municípios pertencentes ao respectivo núcleo, foram agrupados, conforme a Secretaria de Abastecimento e Agropecuária de São Paulo, totalizando 13 núcleos estudados. Com base nos resultados encontrados, pode-se concluir que dos 97 municípios analisados, foi possível encontrar bovinos positivos para a enfermidade em questão em 86. A prevalência média de cisticercose bovina no estado de São Paulo foi de 4,80%, sendo que os núcleos de Franca e Barretos foram os que tiveram maior número de casos da enfermidade durante o período analisado. Além disso, o maior número de casos nestes núcleos coincidiu com o menor índice de desenvolvimento humano referente à educação, com a maior área de plantio de café (núcleo de Franca) e também como a maior área de cana-de-açúcar cultivada (núcleo de Barretos) nestes locais, o que por sua vez pode indicar que a presença da mão-de-obra temporária no meio rural, aliado a aspectos socioeconômico/cultural, pode estar contribuindo para a disseminação e estabelecimento da cisticercose bovina nestas áreas.

Freqüência de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae em indivíduos de cinco municípios da região Norte do Estado do Paraná - Brasil

Realizou-se inquérito sorológico e epidemiológico para cisticercose em indivíduos de cinco municípios da região Norte do Estado do Paraná, Brasil. De 2.180 indivíduos investigados através da reação de imunofluorescência indireta, 69 (3,2%) apresentaram títulos significativos de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae. Os percentuais de indivíduos com títulos significativos encontrados em Sarandi (6,6%) e Marialva (4,7%) não diferem estatisticamente (Z=1.319, P=0,0936), mas diferem dos percentuais encontrados em Mandaguaçu, Paiçandu e Maringá (P<0,01). Destes indivíduos, 47,9% estavam na faixa etária de 21 a 49 anos e 79,4% eram do sexo feminino. Foi comum o relato de queixas como "dores de cabeça" (70,6%), "tonturas" (57,4%) e "convulsões" (7,4%), além de história de teníase (22,1%) e hábitos de ingestão de carne crua bovina (41,2%) ou suína (27,9%) e carne com "canjiquinha" (25,0%).

Ocorrência de cisticercose (Cysticercus cellulosae) encefálica e cardíaca em necropsias

OBJETIVO: Realizar estudo retrospectivo relativo ao achado de lesões de cisticercose e às localizações mais comumente atingidas em exames usuais de necropsias. MÉTODOS: Foram revistos, retrospectivamente, 1.596 protocolos de necropsias em Uberaba, MG, Brasil, no período de 1974 a 1997, registrando-se: a idade, o sexo, a cor, o índice de massa corporal (IMC) e a localização do cisticerco. RESULTADOS: Encontraram-se relatos de cisticercose em 53 (3,3%) protocolos. A média das idades foi de 50 ± 15,4 anos (variando de 15 a 86 anos), 62,3% eram homens, 64,1% brancos. As localizações encontradas foram: encefálica (79,2%), cardíaca (22,6%), muscular esquelética (11,3%) e outras (5,7%). Não houve diferença estatística das variáveis entre os grupos positivos ou negativos para o diagnóstico de cisticercose. Observaram-se dois casos de neurocisticercose localizados no núcleo ventromedial do hipotálamo. CONCLUSÃO: A ocorrência de cisticercose, bem como a localização cardíaca foram mais freqüentemente encontradas em relação a outros estudos da região. Em dois casos de cisticercose hipotalâmica havia associação com obesidade.

Avaliação de antígenos de Cysticercus cellulosae no imunodiagnóstico da cisticercose humana pela hemaglutinação indireta

Os Autores avaliaram os antígenos de Cysticercus cellulosae para o imunodiagnóstico da cistieercose humana pela reação de hemaglutinação indireta. Observaram que os antígenos de escólex (ES) e ES pico II são mais específicos que os antígenos de C. cellulosae total (CC), líquido vesicular e de membrana (ME). Usando soros de pacientes com cistieercose comprovada parasitologicamente, obtiveram uma sensibilidade de 0,80 para o ES, 0,84 para o ES II e especificidade 1,0, quando os soros foram usados na diluição 1:8 para o antígeno ES e 1:16 para o antígeno ES II.

Efeito do Mycobacterium bovis BCG, lipopolissacarideo bacteriano e hidrocortisona no desenvolvimento de imunidade ao Plasmodium berghei em camundongos

Mycobacterium bovis (BCG) aumenta significantemente o desenvolvimento da imunidade nos camundongos CFW, C57BL/6, C57BL/l0ScN e BALB/c (Nu/+) para os estágios eritrocitos do Plasmodium berghei. Camundongos tratados com BCG requerem menos ciclos de infecção com P. berghei e cura pelo Fansidar (pirimetamina + sulfadoxina) para desenvolverem imunidade sólida a este parasita do que os controles. Contudo, os animais que receberam BCG 30 dias antes do início da imunização evidenciaram uma perda precoce da imunidade adquirida para o P. berghei, quando comparado com os animais que receberam BCG 14 dias antes ou que não receberam BCG. Assim, sendo, o BCG aumentada a indução na resposta imune do hospedeiro ao P. berghei no curso de infecções subseqüentes. O tratamento de camundongos CFW, BALB/c e C57BL/6 com lipopolissacarídeo bacteriano ou hidrocortisona faz com que os animais requeiram um número maior de ciclos de infecção e cura para tornarem-se imunes ao P. berghei que os controles. O tratamento dos camundongos C57BL/10ScN com hidrocortisona aboliu completamente a sua habilidade de sobrevida subseqüentes a ciclos de infecção com P. berghei e cura pelo Fansidar.

Passive haemagglutination test for human neurocysticercosis immunodiagnosis: I. Standardization and evaluation of the passive haemagglutination test for the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies

A passive haemagglutination test (PHA) for human neurocysticercosis was standardized and evaluated for the detection of specific antibodies to Cysticercus cellulosae in cerebrospinal fluid (CSF). For the assay, formaldehyde-treated group O Rh-human red cells coated with the cysticerci crude total saline extract (TS) antigen were employed. A total of 115 CSF samples from patients with neurocysticercosis was analysed, of these 94 presented reactivity, corresponding to 81.7% sensitivity, in which confidence limit of 95% probability (CL95%) ranged from 74.5% to 88.9%. Eighty-nine CSF samples derived from individuals of control group presented as nonreactive in 94.4% (CL95% from 89.6% to 99.2%). The positive and negative predictive values were 1.4% and 99.9%, respectively, considering the mean rate of that this assay provide a rapid, highly reproducible, and moderately sensitive mean of detecting specific antibodies in CSF samples.

Passive haemagglutination test for human neurocysticercosis immunodiagnosis: II - Comparison of two standardized procedures for the passive haemagglutination reagent in the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in cerebrospinal fluids

A comparison of two different standardized reagent procedures for the passive haemagglutination test (PHA) in the detection of specific antibody to Cysticercus cellulosae in cerebrospinal fluid (CSF) was carried out. The formaldehyde-treated group O Rh-human red blood cells (HuRBC) and glutaraldehyde-treated sheep red blood cells (SRBC) were the supplies for the reagents preparation and, in the tests, they were designated as PHA-1 and PHA-2, respectively. For both reagents the cells were coated with the cysticerci total saline extract (TS) antigen. PHA-1 and PHA-2 were assessed in a total of 204 CSF from patients with neurocysticercosis, from non-related infections and from healthy individuals. The positivity and specificity indices obtained were respectively 81.7% and 94.4% for PHA-1 and for PHA-2, 88.7% and 96.6%. Since no significant differences were observed between the results provided by two reagents, at level of significance of 0.05, either processes of cell sensitization can alternatively be used according to the own laboratory convenience.

Teste imunoenzimático para pesquisa de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae em líquidos cefalorraquianos de pacientes com meningites de etiologia indeterminada

Foi empregado o teste imunoenzimático com componentes antigênicos de Cysticercus cellulosae quimicamente ligados a suporte inerte constituído por discos de tecido-resina, ELISA-d, com a finalidade de investigar a entidade neurocisticercose (NC) em líquidos cefalorraquianos (LCR) de pacientes com meningites de etiologia indeterminada. Foram ensaiados 277 LCR de 128 crianças e 149 adultos. A densidade óptica média (DO) obtida para os 22 LCR de pacientes nos quais foi afastada a possibilidade diagnóstica de meningite foi de 0,03. Os 44 LCR de pacientes com meningites determinadas por diversos agentes etiológicos, não cisticercose, apresentaram DO de 0,05. O limiar de reatividade do teste ELISA-d calculado a partir desses dois grupos (controle) foi de 0,13 (DO + 3SD). No grupo de 13 LCR de pacientes com NC comprovada em episódio meningítico por essa causa, foi observada DO de 0,41 (0,10 a 0,91) no teste ELISA-d. Dos 198 LCR de meningites por agente etiológico não identificado pelos métodos usualmente empregados, 23 (11,6%) apresentaram DO acima de 0,13, sugerindo que a possível causa da meningite tenha sido por cisticercose, uma vez que o teste ELISA-d tem apresentado elevadas sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade. Em cinco dos 23 LCR a alteração no exame quimiocitológico era às custas do aumento do número de células predominantemente linfomononucleares, em 13 o predomínio era de polimorfonucleares e nos cinco restantes ambos os tipos de células estavam em número aumentado.

DOT-ELISA for detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in human cerebrospinal fluid using a new solid-phase (resin-treated polyester fabrics): preliminary report

A dot enzyme-linked immunosorbent assay (DOT-ELISA) was developed to detect specific antibodies in cerebrospinal fluid (CSF) for human neurocysticercosis immunodiagnosis, with Cysticercus cellulosae antigen dotted on a new solid-phase. This was represented by sheets of a synthetic polyester fabric impregnated with a polymerized resin (N-methylol-acrylamide). A very stable preparation was thus obtained, the antigen being covalently bound by cross-linking with free N-methylol groups on the resin. Since robust, no special care was necessary for handling the solid-phase. The test could be performed at room-temperature. From 30 CSF samples assayed, 14 were positive, from a group of 15 cases of neurocysticercosis, with titers from 1 to 128; 15 other samples, from normals or other neurological diseases, were all negative. Test characteristics seem to indicate it as adequate for epidemiological surveys. A more detailed study on sensitivity, specificity, reproducibility and the use in serum samples is being conducted.

Immunoperoxidase for the detection for the detection of antibodies in cerebrospinal fluid in neurocysticercosis: use of Cysticercus cellulosae and Cysticercus longicollis particles fixed on microscopy slides

The ORF strain of Cysticercus longicollis represents an important model for the study of heterologous antigens in the immunodiagnosis of neurocysticercosis (NC). The immunoperoxidase (IP) technique was standardized using a particulate antigen suspension of Cysticercus longicollis (Cl) and Cysticercus cellulosae (Cc). Cerebrospinal fluid (CSF) samples were incubated on the antigen fixed to microscopy slides; the conjugate employed was anti-IgG-peroxidase and the enzymatic reaction was started by covering the slides with chromogen solution (diaminobenzidine/H2O2). After washing with distilled water, the slide was stained with 2% malachite green in water. Of the CSF samples from 21 patients with NC, 19 (90.5%) were positive, whereas the 8 CSF samples from the control group (100%) were negative. The results of the IP-Cl test applied to 127 CSF samples from patients with suspected NC showed 28.3% reactivity as opposed to 29.1 % for the IP-Cc test. The agreement index for the IP test (Cl x Cc) was 94.2%, with no significant difference between the two antigens.