Arsenic trioxide reduces the invasive and metastatic properties of nasopharyngeal carcinoma cells in vitro

Nasopharyngeal carcinoma (NPC) is notorious for the metastases, which are in close association with Epstein-Barr virus-encoded latent membrane protein 1 (LMP1). Arsenic trioxide (As2O3) has been shown to induce apoptosis and differentiation in NPC xenografts. Then, can it repress the cancer cells' metastasis potential? To elucidate this issue, the present study was performed. LMP1-negative cell line HNE1 and LMP1-positive cell line HNE1-LMP1 were used as in vitro model. Cells (1 x 10(5)/mL) were cultured with or without 3 µM As2O3 for 48 h. Then the survival cells were collected to investigate their potential of colony formation, attachment, invasion, and migration. Both confocal immunofluorescence staining and Western blot were used to detect the changes of LMP1 expression. The changes of MMP-9 were examined by RT-PCR assay and Western blot. The results were as follow: i) the colony formation inhibition rate (75.41 ± 3.9% in HNE1-LMP1 cells vs 37.89 ± 4.9% in HNE1 cells), the rate of attachment (HNE1-LMP1 vs HNE1: 56.40 ± 3.5 vs 65.87 ± 5.9%), the invasion inhibitory rate (HNE1-LMP1 vs HNE1: 56.50 ± 3.7 and 27.91 ± 2.1%), and the migration inhibitory rate (HNE1-LMP1 vs HNE1: 48.70 ± 3.9 vs 29.19 ± 6.27%) were all significantly different between the two cell lines (P < 0.01). ii) LMP1 was down-regulated in As2O3-treated HNE1-LMP1 cells. iii) The reduction of MMP-9 was found in As2O3-treated groups, more evident in HNE1-LMP1 cells. Thus, we conclude that As2O3 can reduce metastasis potential of NPC cells, involving inhibition of MMP-9 expression. LMP1 were also reduced in this process and seemed to enhance anti-metastasis activity of As2O3.

Genetic variations of EBV-LMP1 from nasopharyngeal carcinoma biopsies: potential loss of T cell epitopes

To find Epstein-Barr virus (EBV) strains with genetic variations of EBV latent membrane protein 1 (EBV-LMP1) from nasopharyngeal carcinoma (NPC), the full-length DNA of LMP1 genes from 21 NPC biopsies obtained in Hunan province in southern China was amplified and sequenced. Our sequences were compared to those previously reported by the Clustal V method. Results showed that all 21 sequences displayed two amino acid changes most frequently in LMP1 of CD4+ T cell epitopes at codons 144 (F®I, 21/21) and 212 (G®S, 19/21) or (G®N, 2/21). We also show that type A EBV strain is prevalent in the cases of NPC from Hunan province with a 30-bp 18/21 deletion, and we highlight that this deletion resulted in loss of one of the CD4+ T cell-restricted epitopes. The other 3 sequences without this deletion all had a change at codon 344 (G®D). Furthermore, in the major epitope sequence of CD8+ T cells restricted by HLA-A2, all 21 sequences showed changes at codons 126 (L®F) and 129 (M®I). Our study discovered that one of the 21 sequence variations harbored a new change at codon 131 (W®C), and 5/21 specimens showed another novel change at codon 115 (G®A) in the major epitope sequence of CD8+ T cells restricted by HLA-A2. Our study suggests that these sequence variations of NPC-derived LMP1 may lead to a potential escape from host cell immune recognition, protecting latent EBV infection and causing an increase in tumorigenicity.

Caspase-8 and p38MAPK in DATS-induced apoptosis of human CNE2 cells

Nasopharyngeal carcinoma is a common malignancy in Southern China of uncertain etiologic origin. Diallyl trisulfide (DATS), one of the major components of garlic (Allium sativum), is highly bactericidal and fungicidal. In this study, we investigated the function of p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) and caspase-8 in DATS-induced apoptosis of human CNE2 cells using MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide], flow cytometry assay, and Western blotting. After CNE2 cells were treated with DATS (50, 100, or 150 μM) for 24 h, cell viability rates were 75.9, 63.4 and 39.6%, and apoptosis rates were 24.5, 36.9, and 62.4%, respectively. The data showed that DATS induced CNE2 cell death in a dose-dependent manner. After human CNE2 cells were treated with 100 μM DATS and inhibitors (10 μM SB203580 and Z-LETD-FMK for p38MAPK and caspase-8, respectively), changes in cell viability and apoptosis and in p38MAPK and caspase-8 activity were detected. Cell viability rates were 66.5 and 68.1% and decreased 9.9 and 11.5% compared with inhibitor treatment alone. Apoptosis rates were 31.53 and 29.98% and increased 9.1 and 10% compared with inhibitor treatment alone. The results indicated that DATS activates p38MAPK and caspase-8, but both inhibitors have an effect on P38MAPK and caspase-8 activity. In conclusion, our data indicate that p38MAPK and caspase-8 are involved in the process of DATS-induced apoptosis in human CNE2 cells and interact with each other.

Effects of 5-aza-2′deoxycytidine on RECK gene expression and tumor invasion in salivary adenoid cystic carcinoma

Reversion-inducing cysteine-rich protein with kazal motifs (RECK), a novel tumor suppressor gene that negatively regulates matrix metalloproteinases (MMPs), is expressed in various normal human tissues but downregulated in several types of human tumors. The molecular mechanism for this downregulation and its biological significance in salivary adenoid cystic carcinoma (SACC) are unclear. In the present study, we investigated the effects of a DNA methyltransferase (DNMT) inhibitor, 5-aza-2′deoxycytidine (5-aza-dC), on the methylation status of the RECK gene and tumor invasion in SACC cell lines. Methylation-specific PCR (MSP), Western blot analysis, and quantitative real-time PCR were used to investigate the methylation status of the RECK gene and expression of RECK mRNA and protein in SACC cell lines. The invasive ability of SACC cells was examined by the Transwell migration assay. Promoter methylation was only found in the ACC-M cell line. Treatment of ACC-M cells with 5-aza-dC partially reversed the hypermethylation status of the RECK gene and significantly enhanced the expression of mRNA and protein, and 5-aza-dC significantly suppressed ACC-M cell invasive ability. Our findings showed that 5-aza-dC inhibited cancer cell invasion through the reversal of RECKgene hypermethylation, which might be a promising chemotherapy approach in SACC treatment.

Hepatitis B virus subgenotype C2- and B2-associated mutation patterns may be responsible for liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma, respectively

The objective of this study was to examine hepatitis B virus (HBV) subgenotypes and mutations in enhancer II, basal core promoter, and precore regions of HBV in relation to risks of liver cirrhosis (LC) and hepatocellular carcinoma (HCC) in Southeast China. A case-control study was performed, including chronic hepatitis B (CHB; n=125), LC (n=120), and HCC (n=136). HBV was genotyped by multiplex polymerase chain reaction and subgenotyped by restriction fragment length polymorphism. HBV mutations were measured by DNA sequencing. HBV genotype C (68.2%) predominated and genotype B (30.2%) was the second most common. Of these, C2 (67.5%) was the most prevalent subgenotype, and B2 (30.2%) ranked second. Thirteen mutations with a frequency >5% were detected. Seven mutation patterns (C1653T, G1719T, G1730C, T1753C, A1762T, G1764A, and G1799C) were associated with C2, and four patterns (C1810T, A1846T, G1862T, and G1896A) were associated with B2. Six patterns (C1653T, G1730C, T1753C, A1762T, G1764A, and G1799C) were obviously associated with LC, and 10 patterns (C1653T, G1730C, T1753C, A1762T, G1764A, G1799C, C1810T, A1846T, G1862T, and G1896A) were significantly associated with HCC compared with CHB. Four patterns (C1810T, A1846T, G1862T, and G1896A) were significantly associated with HCC compared with LC. Multivariate regression analyses showed that HBV subgenotype C2 and C2-associated mutation patterns (C1653T, T1753C, A1762T, and G1764A) were independent risk factors for LC when CHB was the control, and that B2-associated mutation patterns (C1810T, A1846T, G1862T, and G1896A) were independent risk factors for HCC when LC was the control.

Carcinoma de células escamosas oral - contribuição de vírus oncogênicos e alguns marcadores moleculares no desenvolvimento e prognóstico da lesão: uma revisão

O carcinoma de células escamosas oral é um evento de muitas etapas, cuja incidência cresce continuamente, particularmente em jovens, numa amplitude que não pode ser completamente explicada pelo aumento da exposição a fatores de risco, como o tabaco e o álcool. Recentes investigações moleculares sugerem que existem múltiplos eventos genéticos, e vírus oncogênicos que são capazes de alterar as funções normais de oncogenes e genes de supressão tumoral. O objetivo deste artigo foi revisar o conhecimento atual sobre o papel do papilomavírus humano (HPV), Epstein-Barr vírus (EBV), P53 e telomerase no desenvolvimento e prognóstico do carcinoma de células escamosas oral.

Paradigma da disseminação local do carcinoma epidermóide da base de língua

OBJETIVO: Analisar o padrão de disseminação local através da delimitação clínica da extensão da lesão primária assim como os subsítios invadidos. FORMA DE ESTUDO: Clínico retrospectivo. MATERIAL E MÉTODO: Foram analisados os prontuários de 290 pacientes com carcinoma epidermóide de base de língua no Departamento de Cirurgia de Cabeça e Pescoço e Otorrinolaringologia do Hospital Heliópolis, Hosphel, São Paulo - Brasil, de 1977 a 2000, sendo estadiados pelo TNM da UICC, e os resultados analisados pelo teste do Quiquadrado para tabelas Z x N (Cochran) para estudo da associação dos sítios e dimensão da neoplasia em relação à invasão da linha média. RESULTADOS: Com predomínio dos homens (8:1) e da 6ª década de vida (41,0%), 83,8% eram etilistas e tabagistas e em 4,7% os hábitos estavam ausentes. Quanto aos sintomas, odinofagia (37,6%), linfonodo (21,7%) e a média de tempo entre o 1º sintoma e o diagnóstico de 6 meses (62,0%). Quanto ao estadiamento, tivemos T1-T2 (18,3%), T3 (32,4%), T4(50,7%). Quanto à disseminação local, em direção à valécula (25,3%), epiglote (18,7%), glote (2,7%), anteriormente para o v lingual em (22,4%) e póstero lateralmente para a prega faringloepiglótica (6,6%) e seio piriforme (2,2%). Quanto a ultrapassagem da linha média, isso ocorreu em 66,2% dos casos, sendo 42,2% (T2), 54,2% (T3) e 82,9% (T4). CONCLUSÃO: o carcinoma epidermóide no estádio T4 ultrapassa a linha média da base da língua em 82,9%.

Carcinoma de pequenas células primário de seios paranasais: relato de caso

CCarcinoma de pequenas células dos seios paranasais são tumores extremamente raros e agressivos. Apesar de os pulmões serem o sítio mais prevalente destes tumores, este trabalho enfoca o acometimento de um sitio extrapulmonar, os seios paranasais. Nós relatamos o caso de uma paciente com carcinoma de pequenas células primário do seio maxilar. Incluímos neste estudo uma discussão acerca de todos os casos relatados em literatura, abrangendo suas metástases, tratamento e expectativa de vida.

Carcinoma de células escamosas da cavidade oral em pacientes jovens e sua crescente incidência: revisão de literatura

A proposta deste estudo é rever o carcinoma de células escamosas oral na população jovem. A literatura mostra um comportamento diferente neste tipo de doença, que parece ser mais agressivo. Existe uma forte relação entre alguns hábitos (tabaco e consumo de álcool) e o desenvolvimento do carcinoma de células escamosas (CCE) oral, mas nestes casos os pacientes normalmente não relatam hábitos considerados de risco. Existe um pequeno número de relatos de casos de CCE oral em pacientes com menos de 40 anos de idade, então é difícil de provar o aumento da incidência do CCE da cavidade oral como dito na literatura. Outros estudos são necessários para entendermos melhor esta entidade. A identificação das características desta população jovem se faz necessária, pois pode refletir problemas no controle do câncer e pode possibilitar o desenvolvimento de um programa de prevenção primária para o CCE oral em pacientes jovens.

Tratamento do carcinoma epidermóide do palato mole

OBJETIVO: Avaliar o resultado do tratamento dos pacientes com carcinoma epidermóide do palato mole. FORMA DE ESTUDO: Série de casos, retrospectivo. MATERIAL E MÉTODO: Foram avaliados os prontuários de 111 pacientes com carcinoma epidermóide do palato mole tratados entre 1977 e 2000. Foram excluídos 12 pacientes com múltiplos tumores primários simultâneos e selecionados 66 pacientes com seguimento após o tratamento, sendo avaliados o controle loco-regional e a sobrevida livre de doença de acordo com o estadiamento. RESULTADOS: O tratamento radioterápico apresentou resposta completa no sítio primário em 76% dos pacientes e no pescoço em 47% dos pacientes N+. Considerando as recidivas, o controle em ambos os sítios caiu para 52% e 31%, respectivamente. As recidivas cervicais ocorreram em 11% dos pacientes N0 irradiados e em 28% dos casos T1 sem tratamento do pescoço. A sobrevida livre de doença a 3 e 5 anos foi de 45% e 35% respectivamente, sendo significativamente menor entre os pacientes N+. CONCLUSÃO: A persistência ou recidiva cervical é a principal causa de falha no tratamento radioterápico exclusivo. Mesmo as lesões T1 apresentam alta incidência de metástases, justificando o esvaziamento cervical eletivo.

Carcinoma espinocelular do lábio: avaliação de fatores prognósticos

Dentre os cânceres do lábio de 90% a 95% dos casos afetam o lábio inferior, sendo o carcinoma espinocelular o mais freqüente. A classificação TNM sintetiza as características clínicas do tumor, permitindo realizar um prognóstico e possibilitando comparações dos resultados. Relaciona três parâmetros: tamanho do tumor (T), propagação aos gânglios linfáticos regionais (N) e metástases à distância (M), mas estabelece padrões a partir de 2cm. Para o carcinoma espinocelular do lábio lesões com 2cm são extremamente grandes. OBJETIVO: O objetivo deste estudo é verificar a relação entre as características epidemiológicas, clínicas, evolutivas e histopatológicas do carcinoma espinocelular do lábio tendo como parâmetro lesões de tamanhos a partir de 0,5cm. CASUÍSTICA E MÉTODO: Foi elaborado um estudo retrospectivo transversal em pacientes com carcinoma espinocelular do lábio, no período 1993-2000, em São Paulo, Brasil. Estudou-se prontuários, laudos originais dos exames histopatológicos e lâminas de tumores de pacientes com carcinoma espinocelular do lábio. Os tumores foram classificados de 0.5 em 0.5cm, sendo verificado o tipo, o grau de diferenciação histológica, a presença de desmoplasia, as invasões muscular, neural e vascular, e o tipo de infiltrado inflamatório. RESULTADOS: A análise estatística mostrou que metástases e recidivas não dependem da cor de pele ou do sexo dos pacientes e que há independência entre a localização do tumor, no lábio superior ou inferior, e a incidência de metástases e recidiva. Houve correlação entre o tamanho da lesão a partir de 0,5cm e a ocorrência de metástases e recidiva. Verificou-se que o tamanho da lesão determina a invasão em outros tecidos. O infiltrado inflamatório verificado em todas as lesões era linfoplasmocitário e, em algumas, associado com eosinófilos sem relação com o tamanho do tumor. CONCLUSÃO: Tumores menores que 2cm podem apresentar comportamentos evolutivos distintos, sob o ponto de vista clínico e histopatológico. O tipo mais prevalente de lesão é o ulcerativo e o que mais metastatiza e recidiva é o úlcero-vegetante. Os tipos úlcero-vegetante e vegetante estão ligados a lesões de maior tamanho. O tamanho do tumor se relaciona, de forma semelhante, com os graus II e III, nos quais ocorrem os maiores índices de metástases e recidivas. O tumor invade em ordem decrescente de freqüência músculos, nervos e vasos sanguíneos, e esta pode ser prevista pelo tamanho da lesão. É necessária a invasão dos músculos para a ocorrência de metástases, sendo que os vasos sanguíneos somente podem estar implicados quando há invasão concomitante dos nervos. A desmoplasia está diretamente relacionada ao tamanho da lesão e à ocorrência de metástases.

Esvaziamento cervical no tratamento do carcinoma epidermóide de lábio

O carcinoma epidermóide de lábio geralmente é diagnosticado em fase inicial e as metástases linfonodais são pouco freqüentes. OBJETIVO: Avaliar a incidência e a localização das metástases linfonodais no carcinoma epidermóide de lábio. FORMA DE ESTUDO: Estudo retrospectivo, série de casos. CASUÍSTICA E MÉTODO: Revisão de prontuários de 78 pacientes com carcinoma epidermóide de lábio, sem tratamento prévio, atendidos no período de 1990 a 2001. Foi avaliada a relação do tamanho do tumor primário, grau de diferenciação e comprometimento da comissura labial com a presença de metástases linfonodais, bem como a localização das metástases. RESULTADOS: As metástases linfonodais foram observadas em 7% dos tumores até 3 cm e em 41% nos tumores maiores do que 3 cm (p=0,002). Dez pacientes apresentavam metástases, sendo que todos estes tinham metástases no nível I e apenas 2 tinham metástases em outros níveis. Os pacientes submetidos ao esvaziamento eletivo apresentavam metástases apenas no nível I. CONCLUSÃO: As metástases são infreqüentes nos tumores menores do que 3 cm. Quando presentes, as metástases habitualmente acometem o nível I, portanto o esvaziamento suprahioideo pode ser indicado no tratamento eletivo do pescoço.

Carcinoma triquilemal: relato de um caso

Carcinoma triquilemal é uma lesão maligna de baixo grau, pouco freqüente, que se origina de célula do folículo piloso, sendo necessário o diagnóstico diferencial com outros carcinomas de pele. O objetivo do trabalho é relatar um caso de carcinoma triquilemal atendido no ambulatório de Otorrinolaringologia e Cirurgia de Cabeça e Pescoço da Universidade Regional de Blumenau, em um paciente feminino de 86 anos que apresentou lesão em região supraclavicular esquerda, com um ano de evolução e crescimento progressivo, medindo 75x45mm, vegetante, endurecida, avermelhada, friável, com ulceração central, secreção sanguinolenta e dor local. Foi realizada excisão do tumor com margens cirúrgicas livres. Devido ao curso da lesão geralmente não desenvolver metástases, nem recorrência local, optou-se por não realizar terapia adjuvante, apenas acompanhamento periódico da lesão.

Leucemia mielóide crônica em paciente com carcinoma epidermóide de região tonsilar submetido à radioterapia pós-operatória

O tratamento de escolha para o carcinoma epidermóide avançado de tonsila consiste em cirurgia e radioterapia pós-operatória. A indicação de radioterapia pós-operatória baseia-se no exame do espécime operatório, considerando as margens cirúrgicas, a presença de embolização neoplásica, infiltração perineural ou de linfonodos cervicais metastáticos. Segundo a literatura, o tratamento ionizante tem o potencial de induzir uma neoplasia, embora a evidência clínica seja escassa. O presente relato descreve um paciente portador de carcinoma epidermóide de tonsila, submetido à irradiação ionizante que evoluiu com quadro clínico de leucemia mielóide crônica, três anos após o tratamento inicial. Um paciente do sexo masculino de 54 anos, branco, operado há 11 anos de um carcinoma epidermóide de tonsila e submetido à radioterapia (50Gy), após três anos apresentou desmaio súbito e fraqueza. O exame laboratorial mostrou tratar-se de leucose e o mielograma revelou uma leucemia mielóide crônica. O paciente foi submetido à quimioterapia com Hidroxiuréia e interferon, sem sinais de recidiva após um seguimento de 8 anos (até novembro de 2003).

Esvaziamento cervical no carcinoma epidermóide da tonsila

Avaliar o significado prognóstico dos níveis linfáticos acometidos por metástases nos carcinomas epidermóides da região tonsilar. OBJETIVO: Definir o tipo de esvaziamento cervical eletivo mais apropriado. FORMA DE ESTUDO: Série de casos. MATERIAL E MÉTODO: 51 pacientes com tumor de região tonsilar tratados entre 1992 e 2001. A incidência de metástases foi avaliada nos diferentes níveis linfonodais, bem como sua relação com a extensão do tumor primário para os subsítios anatômicos adjacentes. RESULTADOS: Nos pacientes cN0 foram encontradas metástases apenas nos níveis I e II. Entre os pacientes pN+ com metástases no nível I, 6/7 apresentavam extensão da lesão para a cavidade oral. CONCLUSÃO: O esvaziamento supraomohioideo (níveis I, II e III) mostrou ser o mais adequado para o tratamento eletivo do pescoço nos tumores da região tonsilar que se estendem para a cavidade oral. Nos casos N0 restritos à orofaringe, o esvaziamento apenas dos níveis II e III mostrou-se a melhor indicação terapêutica.