Avaliação hematológica e histopatológica de camundongos BALB/c e C57BL/6 expostos aos antígenos recombinantes Cytoplasmic Repetitive Antigen e Flagellar Repetitive Antigen de Trypanosoma cruzi

Os antígenos recombinantes Cytoplasmic Repetitive Antigen e Flagellar Repetitive Antigen de Trypanosoma cruzi foram inoculados em camundongos BALB/c e C57BL/6 e o seu efeito avaliado a nível hematológico e histopatológico. Os resultados mostraram que o padrão histológico normal dos órgãos e o perfil hematológico dos camundongos não foram modificados sugerindo que esses antígenos não parecem causar dano ao animal.

Adubação foliar do algodoeiro (Gossypium hirsutum, L., var. I.A.C.12), com nitrogênio, fósforo e potássio avaliada pela produção e diagnose foliar

Aplicações de adubos por via foliar no algodoeiro tem sido feitas em outros países; porém, no Brasil, tal prática encontra-se no inicio. Com o presente trabalho, foi estudado o efeito da adubação foliar nos aumentos de produção e foi estabelecido correlações entre a produção e as concentrações de nitrogênio, fósforo e potássio, nos pecíolos das folhas de ramos produtivos e não produtivos.

Analysis of polymorphism at site -174 G/C of interleukin-6 promoter region in multiple myeloma

It is well established that interleukin-6 (IL-6) is an essential growth factor for multiple myeloma (MM) and patients with increased IL-6 levels have a poor prognosis. In healthy subjects, the presence of the C allele at a polymorphic site (-174 G/C) of the IL-6 gene is related to low IL-6 levels. In view of the potential association of this particular polymorphism with IL-6 concentration, and the relevance of IL-6 in MM pathogenesis, the objective of the present study was to investigate the prevalence of IL-6 (-174 G/C) promoter polymorphism and its association with development of MM in Brazilian individuals. We investigated the prevalence of these alleles in 52 patients and 60 healthy subjects (matched by age, sex, and race) of a Brazilian population. Thirty patients were male (42.4%), 24 (46.2%) were white and the median age at diagnosis was 58.5 years (range: 28 to 84 years). To determine the IL-6 (-174 G/C) polymorphism, molecular analysis was performed by polymerase chain reaction followed by endonuclease restriction digestion. The genotype distributions observed in the group of patients were 4% CC, 42% GC and 54% GG. The C allele frequency was 0.25. These results were similar to the control group, suggesting no impact of this polymorphism on the susceptibility to MM.

Low prevalence of hepatitis B virus, hepatitis D virus and hepatitis C virus among patients with human immunodeficiency virus or acquired immunodeficiency syndrome in the Brazilian Amazon basin

Comorbidities in human immunodeficiency virus infection are of great interest due to their association with unfavorable outcomes and failure of antiretroviral therapy. This study evaluated the prevalence of coinfection by human immunodeficiency virus and viral hepatitis in an endemic area for hepatitis B in the Western Amazon basin. Serological markers for hepatitis B virus, hepatitis C virus and hepatitis D virus were tested in a consecutive sample of all patients referred for treatment of human immunodeficiency virus or acquired immunodeficiency syndrome. The variables sex, age, origin and exposure category were obtained from medical records and from the sexually transmitted diseases and acquired immunodeficiency syndrome surveillance database. Among 704 subjects, the prevalence of chronic hepatitis B carriage was 6.4% and past infection 40.2%. The presence of hepatitis B was associated with birth in hyperendemic areas of the Amazon basin, male sex and illegal drug use. The overall prevalence of hepatitis C was 5% and was associated with illegal drug use. The prevalence of hepatitis B and C among human immunodeficiency virus or acquired immunodeficiency syndrome patients in the Western Amazon basin was lower than seen elsewhere and is probably associated with the local epidemiology of these viruses and the degree of overlap of their shared risk factors. An opportunity presents itself to evaluate the prevention of hepatitis C through harm reduction policies and hepatitis B through vaccination programs among human immunodeficiency virus or acquired immunodeficiency syndrome patients.

Severidade da antracnose e perda de matéria fresca de frutos de dez procedências de maracujázeiro-doce (Passiflora alata Dryander) em dois ambientes de armazenamento

Frutos de maracujá-doce de dez procedências foram avaliados quanto à severidade da antracnose (Colletotrichum gloeosporioides Penz.) e quanto à perda de matéria fresca em dois ambientes de armazenamento: câmara fria (5ºC e UR de 90%) e em ambiente de sala (23±1ºC e UR de 65±5%). Plantas provenientes de frutos colhidos em estado nativo ou adquiridos nos mercados da Central de Abastecimento de São Paulo- CEAGESP, procedências A, B e C; Viçosa-MG, procedência D; Tomé-Açu-PA, procedência E; Itacoatiara-AM, procedência F; Ouro Preto d'Oeste-RO, procedência G; Domingos Martins-ES, procedência H; Pontes e Lacerda-MT, procedência I; e Rondonópolis-MT, procedência J, foram estabelecidas no Distrito Federal. Após as primeiras colheitas, a melhor planta de cada procedência, selecionada pela maior taxa de vingamento, coloração da casca, tamanho do fruto e menor espessura de casca, foi multiplicada por estaquia. Frutos de três plantas clonadas de cada procedência, obtidos por polinização natural, foram colhidos de vez e mantidos em caixas de papelão padrão. As avaliações do percentual de perda de matéria fresca foram efetuadas no dia da colheita (tempo zero), aos 3; 6; 9 e 12 dias após, enquanto a severidade da antracnose (% da superfície do fruto ocupada por lesões) e incidência (% de frutos atacados) de outras doenças foram quantificadas aos 12 dias de armazenamento. As procedências com menores índices de antracnose foram a I e G. Os frutos armazenados em câmara fria foram menos afetados pela doença. As procedências G e A foram as que, ao final dos doze dias de armazenamento, perderam menos matéria fresca sendo, respectivamente, de 16,68% e 17,86% em ambiente de sala e de 7,71 e 6,61% em câmara fria. Considerando-se a média de todas as procedências, aos 12 dias de armazenamento, a menor perda de matéria fresca (9,78%) ocorreu em câmara fria, contra 22,06% em ambiente de sala. As procedências A, E, F, G e J perderam menos matéria fresca em ambiente natural que as demais.

Aspectos germinativos de capim-camalote (Rottboellia cochinchinensis)

O capim-camalote (Rottboellia cochinchinensis), originário da Índia, é encontrado em várias regiões do mundo, sendo uma espécie temida pelos agricultores devido ao seu difícil controle e avanço crescente. Objetivou-se com este trabalho estudar os fatores que afetam a germinação das sementes dessa espécie. Foram avaliados os métodos de superação de dormência: 1 - escarificação mecânica, 2 - escarificação química, 3 - tratamento pré-semeadura, 4 - tratamento químico, 5 - tratamento hormonal e 6 - sementes não tratadas. Foram estudados os efeitos da temperatura (5, 10, 15, 20, 25, 30, 35 e 40 ºC), do fotoperíodo (6, 8, 10, 12, 14 e 16 horas de luz), da qualidade da luz incidente (branca, vermelha, vermelha distante, amarela, verde, azul e ausência de luz), da disponibilidade de água (0,0, -0,2, -0,3, -0,4, -0,5, -0,6, -1,2 e -2,4 MPa) e da viabilidade de suas sementes quando armazenadas sob condições de câmara fria e seca e sob condições naturais. Todos os ensaios foram conduzidos por 30 dias em câmara de germinação, com os tratamentos arranjados em delineamento experimental inteiramente casualizado, em quatro repetições. Verificou-se que as sementes apresentaram elevado índice de germinação, praticamente não apresentaram dormência e não se mostraram fotoblásticas. A disponibilidade de água foi indispensável para a germinação, com temperatura ideal de 25 °C. As sementes recém-coletadas são inviáveis para o estudo da germinação, apresentando redução na germinação quando armazenadas sob condição de câmara fria e seca.

A micromethod for quantitation of debrisoquine and 4-hydroxydebrisoquine in urine by liquid chromatography

We describe a new simple, selective and sensitive micromethod based on HPLC and fluorescence detection to measure debrisoquine (D) and 4-hydroxydebrisoquine (4-OHD) in urine for the investigation of xenobiotic metabolism by debrisoquine hydroxylase (CYP2D6). Four hundred µl of urine was required for the analysis of D and 4-OHD. Peaks were eluted at 8.3 min (4-OHD), 14.0 min (D) and 16.6 min for the internal standard, metoprolol (20 µg/ml). The 5-µm CN-reverse-phase column (Shimpack, 250 x 4.6 mm) was eluted with a mobile phase consisting of 0.25 M acetate buffer, pH 5.0, and acetonitrile (9:1, v/v) at 0.7 ml/min with detection at lexcitation = 210 nm and lemission = 290 nm. The method, validated on the basis of measurements of spiked urine, presented 3 ng/ml (D) and 6 ng/ml (4-OHD) sensitivity, 390-6240 ng/ml (D) and 750-12000 ng/ml (4-OHD) linearity, and 5.7/8.2% (D) and 5.3/8.2% (4-OHD) intra/interassay precision. The method was validated using urine of a healthy Caucasian volunteer who received one 10-mg tablet of Declinax®, po, in the morning after an overnight fast. Urine samples (diuresis of 4 or 6 h) were collected from zero to 24 h. The urinary excretion of D and 4-OHD, Fel (0-24 h), i.e., fraction of dose administered and excreted into urine, was 6.4% and 31.9%, respectively. The hydroxylation capacity index reported as metabolic ratio was 0.18 (D/4-OHD) for the person investigated and can be compared to reference limits of >12.5 for poor metabolizers (PM) and <12.5 for extensive metabolizers (EM). In parallel, the recovery ratio (RR), another hydroxylation capacity index, was 0.85 (4-OHD: SD + 4-OHD) versus reference limits of RR <0.12 for PM and RR >0.12 for EM. The healthy volunteer was considered to be an extensive metabolizer on the basis of the debrisoquine test.

Somatic cytogenetic and azoospermia factor gene microdeletion studies in infertile men

The objective of the present study was to determine the frequency of somatic chromosomal anomalies and Y chromosomal microdeletions (azoospermia factor genes, AZF) in infertile males who seek assisted reproduction. These studies are very important because the assisted reproduction techniques (mainly intracytoplasmic sperm injection) bypass the natural selection process and some classical chromosomal abnormalities, microdeletions of AZF genes or some deleterious genic mutations could pass through generations. These genetic abnormalities can cause in the offspring of these patients male infertility, ambiguous external genitalia, mental retardation, and other birth defects. We studied 165 infertile men whose infertility was attributable to testicular problems (60 were azoospermic, 100 were oligospermic and 5 were asthenospermic). We studied 100 metaphases per patient with GTG banding obtained from temporary lymphocyte culture for chromosomal abnormality detection and performed a genomic DNA analysis using 28 Y chromosome-specific sequence-tagged sites for Y AZF microdeletion detection. Karyotyping revealed somatic anomalies in 16 subjects (16/165 = 9.6%). Of these 16, 12 were in the azoospermic group (12/60 = 20%) and 4 were in the oligospermic group (4/100 = 4%). The most common chromosomal anomaly was Klinefelter syndrome (10/165 = 6%). Microdeletions of AZF genes were detected in 12 subjects (12/160 = 7.5%). The frequencies detected are similar to those described previously. These results show the importance of genetic evaluation of infertile males prior to assisted reproduction. Such evaluation can lead to genetic counseling and, consequently, to primary and secondary prevention of mental retardation and birth defects.

Association of urinary 90 kDa angiotensin- converting enzyme with family history of hypertension and endothelial function in normotensive individuals

We described angiotensin-I-converting enzyme (ACE) isoforms with molecular masses of 190, 90, and 65 kDa in the urine of normotensive offspring of hypertensive subjects. Since they did not appear in equal amounts, we suggested that 90 kDa ACE might be a marker for hypertension. We evaluated the endothelial response in normotensive offspring with or without family history of hypertension and its association with the 90 kDa ACE in urine. Thirty-five normotensive subjects with a known family history of hypertension and 20 subjects without a family history of hypertension, matched for age, sex, body weight, and blood pressure, were included in the study. Endothelial function was assessed by ultrasound and a sample of urine was collected for determination of ACE isoforms. In the presence of a family history of hypertension and detection of 90 kDa ACE, we noted a maximal flow mediated dilation of 12.1 ± 5.0 vs 16.1 ± 6.0% in those without a previous history of hypertension and lacking urinary 90 kDa ACE (P < 0.05). In subjects with a family history of hypertension and presenting 90 kDa ACE, there were lower levels of HDL-cholesterol (P < 0.05) and higher levels of triglycerides (P < 0.05). Subjects with 90 kDa ACE irrespective of hypertensive history presented a trend for higher levels of triglycerides and HDL-cholesterol (P = 0.06) compared to subjects without 90 kDa ACE. Our data suggest that the 90 kDa ACE may be a marker for hypertension which may be related to the development of early atherosclerotic changes.

Teste de condutividade elétrica para avaliação do potencial fisiológico de sementes de aveia preta

As empresas têm buscado aprimorar, cada vez mais, o controle interno de qualidade das sementes produzidas. Métodos que avaliem com maior rapidez o vigor da semente, como o teste de condutividade elétrica, são ferramentas úteis na tomada de decisão sobre o destino dos lotes. Objetivou-se, nesta pesquisa, avaliar o teste de condutividade elétrica para estimar o vigor de sementes de aveia preta, visando a estabelecer uma metodologia eficiente para a sua execução. Para isso, foram utilizados quatro lotes de aveia preta, cultivar IAPAR 61 (Ibiporã), sendo estudados: a) quantidade de sementes: 50 e 100 sementes com casca; b) volumes de embebição: 50, 75 e 100 mL de água deionizada; c) períodos de embebição: 4, 8, 16 e 20 horas, mantida fixa a temperatura do germinador em 20 °C. Paralelamente, foi realizada a determinação do teor de água das sementes e a condução dos testes de germinação e de emergência de plântulas em campo. Os dados obtidos foram analisados de acordo com delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições. O teste de condutividade elétrica para sementes de aveia preta pode ser realizado mediante o uso de 100 sementes com casca, embebidas em 100 mL de água deionizada, a 20 °C, por 16 ou 20 horas.

Prevalência e extensão da cárie dentária radicular em adultos e idosos brasileiros

OBJETIVO: Estimar a prevalência e a extensão da cárie radicular na população adulta e idosa do Brasil. MÉTODOS: A partir dos dados da Pesquisa Nacional de Saúde Bucal (SBBrasil 2010) foram examinados 9.564 adultos e 7.509 idosos em domicílios das 26 capitais e no Distrito Federal e de 150 municípios do interior de cada macrorregião. Adotaram-se os critérios de diagnóstico preconizados pela Organização Mundial da Saúde. Para estudo da prevalência e de extensão utilizou-se o índice de cárie radicular e o índice de raízes cariadas e obturadas. RESULTADOS: A prevalência de cárie radicular foi de 16,7% nos adultos e 13,6% nos idosos; o índice de raízes cariadas e obturadas foi de 0,42 e 0,32, respectivamente, a maior parte composta por cárie não tratada. Observaram-se diferenças na experiência de cárie radicular entre capitais e macrorregiões, com valores maiores em capitais do Norte e Nordeste. O índice de cárie radicular nos adultos variou de 1,4% em Aracaju (SE) a 15,1% em Salvador (BA) e nos idosos de 3,5% em Porto Velho (RO) a 29,9% em Palmas (TO). Verificou-se incremento da cárie radicular com a idade e maior expressividade da doença em homens de ambos os grupos etários. CONCLUSÕES: Identificou-se uma grande variação da prevalência e extensão da cárie radicular entre e dentro das regiões do Brasil, tanto em adultos quanto em idosos, e a maior parte da cárie radicular encontra-se não tratada. Recomenda-se a incorporação deste agravo ao sistema de vigilância em saúde bucal, devido à sua tendência crescente.

Doença de Chagas aguda: vias de transmissão, aspectos clínicos e resposta à terapêutica específica em casos diagnosticados em um centro urbano

Relata-se o quadro clínico de 27 pacientes com doença de Chagas aguda, acompanhados no ambulatório da Clínica de Doenças Infecciosas e Parasitárias do Hospital das Clínicas da FM-USP no período de 1974 a 1987. As vias de transmissão envolvidas foram: vetorial em 7 casos, transfusional em 9, transplante de rim e/ou transfusional em 4, acidental em 1, via oral em 3, provável aleitamento materno em 1, congênita ou aleitamento materno em 1, congênita ou transfusional em 1. Pacientes com infecção por via vetorial eram procedentes da Bahia e Minas Gerais, tendo 6 apresentado a doença de 1974 a 1980 e um em 1987. Já os pacientes infectados por via transfusional adquiriram a doença na Grande São Paulo, 7 deles após 1983. O quadro clínico foi oligossintomático ou assintomático em 4 pacientes, sendo 3 deles imunodeprimidos por doença de base ou por medicamentos. Em outros 2 pacientes imunodeprimidos ocorreu miocardite grave com insuficiência cardíaca congestiva. O quadro clínico foi também mais grave em 5 de 6 crianças menores de dois anos de idade, qualquer que fosse a via de transmissão. A avaliação de 16 pacientes tratados na fase aguda com benzonidazol (4-10mg/kg/dia) por 30 a 60 dias mostrou falha terapêutica em 4/16 (25,0%), possível sucesso terapêutico em 9/16 (56,2%), sendo inconclusivos os resultados em 3/16 (18,8%). A reação de LMC foi concordante com o xenodiagóstico em 18 e 22 casos (agudos e na fase crônica inicial), e se negativou mais precocemente que as RSC. No seguimento pós-terapêutico, observou-se aparecimento de doença linfoproliferativa em um paciente com anemia aplástica e que recebia corticosteróide 6 anos após o emprego de benzonidazol.

Distribution of hepatitis C virus genotypes among blood donors from mid-west region of Brazil

In order to investigate the hepatitis C virus (HCV) genotypes in mid-west region of Brazil, 250 anti-HCV positive blood donors were studied. Among them, the anti-HCV serological status was confirmed in 205 (82%). HCV RNA was detected in 165 samples, which were genotyped. HCV types 1, 2 and 3 were found in 67.9%, 3% and 29.1% of the donors, respectively. In Goiás state, subtype 1a (50%) was the most prevalent, followed by subtypes 3a (30.9%) and 1b (16.7%). In Mato Grosso state, subtype 1a was also predominant (41%), followed by subtypes 1b (29.5%) and 3a (25%). In Mato Grosso do Sul state, subtypes 1a and 1b were detected equally (36.8%), followed by 3a (21.1%). Subtype 2b was rare (2.4%, 4.5% and 5.3%, respectively). In Distrito Federal, subtype 3a (39%) was more frequent than 1a (31.7%) and the remaining (29.3%) belonged to subtype 1b.

TESTING A SUBTYPE-SPECIFIC GP41 AMPLIFICATION METHOD FOR GENOTYPING INDIVIDUALS INFECTED BY HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS TYPE-1 IN THE BRAZILIAN POPULATION OF ITAJAÍ, SOUTH BRAZIL

The method used by YAGYU et al. for the subtype-specific polymerase chain reaction (PCR) amplification of the gp41 transmembrane region of the human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) env gene, was tested. HIV-1 proviral DNA from 100 infected individuals in Itajaí, South Brazil was used to analyze this method. Seventy individuals were determined according to this method as having PCR products at the expected size for subtypes B, C, D and F. Of these individuals, 26 (37.1%) were observed as having the expected amplification for subtype C, and 42 (60%) were observed as having the expected products for subtypes B and D. Of the subtype B and D amplicons, 16 (22.9%) were classified as subtype D, and 26 (37.1%) were classified as subtype B. Two individuals (2.9%) had amplicons that were observed after subtype F-specific amplification was performed. Sequencing and comparing the patient sequences to reference sequences confirmed the classification of sequences of subtypes C and B. However, sequences that were falsely determined as being D and F in the PCR assay were determined as being subtypes C and B, respectively, by sequence analysis. For those individuals from whom no amplified products were obtained, a low viral load that was indicated in their patient history may explain the difficulty in subtyping by PCR methods. This issue was demonstrated by the results of ANOVA when testing the effect of viral load on the success of PCR amplification. The alignment of the obtained sequences with HIV-1 reference sequences demonstrated that there is high intra-subtype diversity. This indicates that the subtype-specific primer binding sites were not conserved or representative of the subtypes that are observed in the Brazilian populations, and that they did not allow the correct classification of HIV-1 subtypes. Therefore, the proposed method by YAGYU et al. is not applicable for the classification of Brazilian HIV-1 subtypes.

Trypanosoma (herpetosoma) Rangeli tejera, 1920: influence of host weight, size of inoculum, and route of infection upon experimental parasitemia

To study the influence of host age, inoculum size, and route of infection on Trypanosoma (Herpetosoma) rangeli, 12 lots of 6.0 g albino mice (NMRI strain) were infected up. with from 25x10¹ to 25x10(6) trypomastigotes/gram body weight harvested from LIT medium. The lower inocula produced low but persistent parasitemias, while the higher inocula produced high levels of parasitemia that fell quickly, suggesting the mobilization of resistance mechanisms. In other experiments, i.p. inoculation produced higher parasitemias than s.c. inoculation, and 6.0 g mice had higher parasitemias than 16.0 or 26.0 g mice. Thus, a standard methodology would seem to be necessary in the study of the various strains and/or species that may make up the T. rangeli complex.