Production and diagnostic application of recombinant domain III of West Nile envelope protein in Brazil

INTRODUCTION: West Nile virus (WNV) is a flavivirus with a natural cycle involving mosquitoes and birds. Over the last 11 years, WNV has spread throughout the Americas with the imminent risk of its introduction in Brazil. METHODS: Envelope protein domain III of WNV (rDIII) was bacterially expressed and purified. An enzyme-linked immunosorbent assay with WNV rDIII antigen was standardized against mouse immune fluids (MIAFs) of different flavivirus. RESULTS: WNV rDIII reacted strongly with St. Louis encephalitis virus (SLEV) MIAF but not with other flaviviruses. CONCLUSIONS: This antigen may be a potentially useful tool for serologic diagnosis and may contribute in future epidemiological surveillance of WNV infections in Brazil.

Fast and furious: a look at the death of animals on the highway MS-080, Southwestern Brazil

Several factors, such as hunting and the pet trade, are responsible for the worldwide decline of wildlife populations. In addition, fatal collisions with vehicles on highways have also taken one of the largest tolls. This study aimed to quantify the richness and abundance of vertebrate roadkill along highway MS-080 in Mato Grosso do Sul, Central-West Brazil. We compare the amount of roadkill to the distance between cities, moon phases and the flow of vehicles on the highway. Samples were collected weekly between March and September 2011, totaling 257 individuals, belonging to 32 families and 52 species, resulting in an index of 0.13 individuals hit/km. Birds were the most frequently hit taxa, followed by mammals. The most affected species was Cariama cristata (Cariamidae), followed by Cerdocyon thous (Canidae). The sections of highway closest to cities had the highest number of individual animals killed. Our observations indicate that the density of the vegetation next to the highway positively influences the amount of roadkill.

Antileishmanial and trypanocidal activity of Brazilian Cerrado plants

The side effects and the emerging resistance to the available drugs against leishmaniasis and trypanosomiasis led to the urgent need for new therapeutic agents against these diseases. Thirty one extracts of thirteen medicinal plants from the Brazilian Cerrado were therefore evaluated in vitro for their antiprotozoal activity against promastigotes of Leishmania donovani, and amastigotes of Trypanosoma cruzi. Among the selected plants, Casearia sylvestris var. lingua was the most active against both L. donovani and T. cruzi. Fifteen extracts were active against promastigotes of L. donovani with concentrations inhibiting 50% of parasite growth (IC50) between 0.1-10 µg/ml, particularly those of Annona crassiflora (Annonaceae), Himatanthus obovatus (Apocynaceae), Guarea kunthiana (Meliaceae), Cupania vernalis (Sapindaceae), and Serjania lethalis (Sapindaceae). With regard to amastigotes of T. cruzi, extracts of A. crassiflora, Duguetia furfuracea (Annonaceae), and C. sylvestris var. lingua were active with IC50 values between 0.3-10 µg/ml. Bioassay fractionations of the more active extracts are under progress to identify the active antiparasite compounds.

Towards an understanding of the epigenetics of schistosomes: a comparative epigenomic study

As in perhaps all eukaryotes, schistosomes use a supplementary information transmitting system, the epigenetic inheritance system, to shape genetic information and to produce different phenotypes. In contrast to other important parasites, the study of epigenetic phenomena in schistosomes is still in its infancy. Nevertheless, we are beginning to grasp what goes on behind the epigenetic scene in this parasite. We have developed techniques of native chromatin immunoprecipitation (N-ChIP) and associated the necessary bioinformatics tools that allow us to run genome-wide comparative chromatin studies on Schistosoma mansoni at different stages of its life cycle, on different strains and on different sexes. We present here an application of such an approach to study the genetic and epigenetic basis for a phenotypic trait, the compatibility of S. mansoni with its invertebrate host Biomphalaria glabrata. We have applied the ChIP procedure to two strains that are either compatible or incompatible with their intermediate host. The precipitated DNA was sequenced and aligned to a reference genome and this information was used to determine regions in which both strands differ in their genomic sequence and/or chromatin structure. This procedure allowed us to identify candidate genes that display either genetic or epigenetic difference between the two strains.

Enfermeiras americanas do Serviço Especial de Saúde Pública e a formação de recursos humanos na Enfermagem Brasileira

RESUMO Objetivo Historicizar as mudanças na formação de recursos humanos em enfermagem no Brasil, no período de 1942 a 1961, a partir da presença de 35 enfermeiras americanas designadas para trabalhar em cooperação com o SESP. Método O estudo utilizou como fontes relatórios redigidos pelas enfermeiras, que descrevem suas impressões, sugestões e atividades desenvolvidas no país, e foram analisadas a partir da análise de discurso de Michel Foucault. Resultados O período mencionado foi marcado pela presença americana nos projetos de enfermagem desenvolvidos pelo Serviço Especial de Saúde Pública (SESP). Os discursos indicaram que o período foi marcado por muitas mudanças na enfermagem brasileira, em especial no que diz respeito à captação e formação de recursos humanos para a profissão. Conclusão Pode-se afirmar que elas, através de seus discursos e influência, foram centrais para a consolidação de um novo paradigma na formação de profissionais de enfermagem no Brasil.

Earthworm communities in organic and conventional coffee cultivation

The objective of this work was to evaluate the effect of organic and conventional coffee crops on biomass, population density and diversity of earthworms, in Lerroville, district of Londrina County, Paraná state, Brazil. Earthworm communities were sampled in three areas with organic coffee cultivation (CO1, CO2 and CO3), two with conventional coffee (CC1 and CC2), and a native forest fragment (MT). The soil of the areas CO1, CC1, and MT was classified as Nitossolo Vermelho (Rhodic Kandiudox), while CO2, CO3, and CC2 were on Latossolo Vermelho (Rhodic Hapludox). Eight samples were taken in each area on two occasions, winter and summer, using the Tropical Soil Biology and Fertility (TSBF) method in the 0-20 cm soil layer. The earthworms were handsorted and preserved in 4% formaldehyde, and were later weighed, counted and identified. The highest earthworm biomass, both in winter and summer, occurred in the CO3 area. For population density, the higher numbers of individuals were found in CO1 and CO3. The highest number of species was identified in the organic cultivation. The adoption of organic practices in coffee cultivation favored the diversity, density and biomass of earthworm communities.

Diversidade genética de isolados de Ralstonia solanacearum e caracterização molecular quanto a filotipos e sequevares

O objetivo deste trabalho foi identificar isolados brasileiros de Ralstonia solanacearum quanto a filotipos e sequevares, determinar sua diversidade genética, realizar a associação da estrutura genética do patógeno com sua classificação e origem geográfica e identificar um marcador molecular para a diagnose do moko-da-bananeira. Um grupo de 33 isolados de R. solanacearum, da coleção da Embrapa Tabuleiros Costeiros, coletado de diversos hospedeiros, foi caracterizado por meio de PCR em sequência palindrômica extragênica repetitiva (rep-PCR) e RAPD. Deste grupo, 19 perteciam à raça 2 do patógeno e 14 à raça 1, e 15 isolados eram associados à cultura da bananeira. Os filotipos e sequevares foram caracterizados e determinados por PCR Multiplex. Verificou-se que 82% dos isolados pertencem ao filotipo II, e 12% ao filotipo III. Todos os isolados da bananeira pertencem ao filotipo II. Atécnica de RAPD foi eficiente em agrupar os isolados de acordo com sua origem geográfica; entretanto, ela requer um número elevado de marcas moleculares. Foi possível relacionar os isolados pela análise rep-PCR. O iniciador com sequências repetitivas enterobacterianas intergênicas de consenso (ERIC) possibilitou a separação dos isolados de acordo com a raça, eoiniciador REP permitiua discriminação entre os filotipos. Estas duas análises foram as mais informativas.

Fístula gastrocólica na síndrome de Bartter em uso de indometacina: relato de dois casos

Os autores relatam dois casos de fístula gastrocólica causada por uso crônico de indometacina em pacientes com síndrome de Bartter, em acompanhamento no Instituto da Criança do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. O diagnóstico foi realizado por meio de trânsito intestinal, que evidenciou passagem de contraste da grande curvatura gástrica para o cólon transverso. O tratamento foi cirúrgico em ambos os casos.

Investigação do potencial antioxidante e anticolinesterásico de Hippeastrum (Amaryllidaceae)

Amaryllidaceae family is an important source of bioactive molecules and considering the taxonomic relationships, it is relevant to investigate the genus Hippeastrum. Thus, the aim of this work was to determine antioxidant and anticholinesterasic activities of Hippeastrum morelianum, Hippeastrum psittacinum and Hippeastrum santacatarina. Both antioxidant and acetylcholinesterasic activities of extracts were determinated by bioautography as 10 mg/mL and 0.1 mg/mL, respectively. The antioxidant activity of alkaloid lycorine, determinated spectrophotometrically with DPPH, indicated an IC50 value of 0.326 mM.

Selective hydrogenation of furfural on Ir/TiO2 catalysts

Titania-supported Ir catalysts were used in the hydrogenation of furfural. Reactions were carried out in a stirred batch type reactor at 0.62MPa and 363K using a 0.10M solution of furfural in a 1:1 mixture n-heptane -ethanol as solvent. Catalysts containing 2 wt% of Ir were reduced in H2 flow at different temperatures in the range 473-773K. The catalysts were characterized by H2 chemisorption, TEM, TPR, TPD of NH3 and XPS. Conversion of furfural is higher at lower reduction temperatures, but leads to byproducts whereas reduction at higher temperatures shows selectivity to furfuryl alcohol close to 100%.

Tradução e validação para a língua portuguesa de um questionário para avaliação da gravidade da incontinência urinária

OBJETIVO: traduzir para a língua portuguesa, adaptar culturalmente e validar o questionário Incontinence Severity Index (ISI). MÉTODOS: dois tradutores brasileiros realizaram a tradução do ISI para a língua portuguesa e uma versão foi gerada por consenso entre eles. Esta versão foi retraduzida para o inglês por outros dois tradutores que tinham esta língua como língua-mãe. As diferenças entre as versões foram harmonizadas e pré-testadas em um estudo piloto. Após uma semana da realização do questionário ISI, este foi reaplicado para a realização do reteste. A versão final do ISI foi aplicada juntamente com o pad test de uma hora em mulheres com incontinência urinária de esforço (IUE). Para validação do ISI, foram testadas a confiabilidade (consistência interna e teste-reteste) e a validade de constructo. RESULTADOS: a confiabilidade do instrumento foi avaliada por meio do coeficiente α de Cronbach, tendo como resultado geral 0,93, demonstrando excelente confiabilidade e consistência do instrumento. O coeficiente de correlação intraclasse e o erro padrão da medida foram de 0,96 e 0,43, respectivamente. Por meio da correlação de Pearson foi verificada uma correlação forte e positiva (r=0,72, p<0,0001) entre os resultados do questionário ISI e o pad test de uma hora. CONCLUSÃO: a versão em português do ISI, traduzida e adaptada culturalmente para o português do Brasil, apresentou confiabilidade e validade de constructo satisfatórias e foi considerada válida para avaliação da gravidade da IUE.

Análise espacial da prevalência de toxoplasmose em gestantes de Aracaju, Sergipe, Brasil

OBJETIVO:Analisar a distribuição espacial da prevalência de anticorpos antitoxoplasma em gestantes residentes em uma cidade do Nordeste do Brasil, e correlacionar a prevalência de anticorpos antitoxoplasma com a faixa etária materna e o local de residência.MÉTODOS:Estudo ecológico, descritivo e analítico, desenvolvido no período de 01 janeiro a 31 de dezembro de 2012. As informações foram obtidas retrospectivamente de um banco de dados, e processadas com o pacote estatístico Epi info (Epi 7, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, EUA) e também em planilha do pacote Microsoft Office Excel, versão 2010. Para avaliar a associação entre a prevalência de anticorpos para a toxoplasmose e a faixa etária, foi aplicado o teste do X2. A análise espacial da prevalência dessa infecção foi realizada com o programa TerraView, versão 4.2.2, utilizando o estimador de intensidade Kernel, que permite estimar a quantidade de eventos em mapa para identificar áreas de maior concentração de casos no município.RESULTADOS:A soroprevalência encontrada para IgG foi de 68,5% (IC95% 67,2-69,8) e IgM de 0,36% (IC95% 0,23-0,6). Foi encontrado incremento da prevalência de IgG associado ao aumento da idade nos bairros mais antigos da capital. Entre as mulheres mais jovens, a maior prevalência foi nos bairros de periferia. Quanto ao anticorpo IgM, a concentração espacial foi mais elevada em bairros da periferia e não ocorreu associação significativa entre a soroprevalência e a idade.CONCLUSÃO:O geoprocessamento permitiu identificar as áreas de maior prevalência, assim como a faixa etária com maior suscetibilidade, servindo como instrumento de avaliação e implementação de medidas preventivas apropriadas para esse município e outras regiões do Brasil.

Isolamento e cultivo de neurônios e neuroesferas de córtex cerebral aviar

Métodos de cultivo celular são convenientes na realização de análises funcionais de alterações/interações protéicas das células neuronais, auxiliando a decifrar o interactoma de proteínas chaves na neurogênese de doenças do Sistema Nervoso Central. Por esse motivo, culturas de neurônios e neuroesferas isolados do córtex cerebral aviar representam um modelo acessível para o estudo de diversas doenças neurológicas, tal como a epilepsia. A espécie aviar apresenta peculiaridades em seu proteoma neuronal, visto a presença de uma expressão diferenciada de proteínas chaves no metabolismo energético cerebral, algumas destas (VDAC1 e VDAC2) desempenham papel importante na compreensão do mecanismo da epilepsia refratária. A metodologia estabelecida no presente estudo obteve cultivo de neuroeferas, onde as células cresceram tipicamente em aglomerados atingindo, dentro de 7 dias, o diâmetro ideal de 100-200 µm. A diferenciação celular das neuroesferas foi obtida após a aderência destas às placas tratadas com poli-D-lisina, evidenciada pela migração de fibras do interior da neuroesfera. Ao contrário das neuroesferas, os neurônios em cultivo extenderam seus neuritos após 11 dias de isolamento. Tal modelo in vitro pode ser utilizado com sucesso na identificação das variáveis neuroproteômicas, propiciando uma avaliação global das alterações dinâmicas e suas interações protéicas. Tal modelo pode ter aplicações em estudos dos efeitos de indutores da morte celular e bloqueadores de canais de membrana mitocondriais em proteínas chaves do metabolismo energético cerebral.

Intrapopulational chromosome number variation in Zephyranthes sylvatica Baker (Amaryllidaceae: Hippeastreae) from Northeast Brazil

Zephyranthes Herb. is a taxonomically complex and cytologically variable group, with about 65 species of Neotropical distribution. Chromosome number variability in 32 individuals of a Zephyranthes sylvatica population from Northeast Brazil was investigated. Three cytotypes were found: 2n = 12 (one metacentric, four submetacentric and one acrocentric pairs), in 24 individuals; 2n = 12 + 1B, in five and three individuals with 2n = 18, a triploid cytotype. All diploid individuals showed chromosomes with polymorphism in pair one and two, while in triploids this polymorphism was observed in all chromosome triplets, generally with two homomorphic chromosomes and a higher or lower heteromorphic chromosome. All individuals had reticulated interfasic nucleus and a slightly asymmetric chromosome complement, with one metacentric chromosome pair and the others more submetacentric to acrocentric. These data confirm the cytological variability previously registered for the genus. Mechanisms involved in karyotypic evolution in this population are discussed.

Há associação entre acyl-grelina e inflamação em pacientes em hemodiálise?

INTRODUÇÃO E OBJETIVOS: Pacientes com doença renal crônica (DRC) apresentam um quadro de anorexia que pode estar relacionado com o processo inflamatório crônico, característico desta população. Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar se há associação entre inflamação e o hormônio orexígeno, acyl-grelina, em pacientes com DRC em hemodiálise (HD). MÉTODOS: Foram estudados 36 pacientes (61,1% homens; 46,7 ± 14,9 anos; IMC 22,9 ± 3,9 kg/m²) em programa regular de HD (65,0 ± 46,8 meses em HD). Os níveis plasmáticos de acyl-grelina e dos marcadores inflamatórios (TNF-α, IL-6 e PCR) foram medidos com o uso do método imunoenzimático (ELISA, Enzyme Linked Immunosorbent Assay). Dados antropométricos foram coletados para avaliação do estado nutricional e a ingestão alimentar foi analisada por meio de recordatório alimentar de 24h de 2 dias. RESULTADOS: Os pacientes apresentaram elevados níveis de IL-6 (83 ± 10 pg/mL), TNF-α (21,06 pg/mL [20,6-40,0]) e PCR (2,7 pg/mL [1,7-3,4]) quando comparados a valores normais. Os níveis plasmáticos de acyl-grelina (18,0 pg/mL [1,3-77,7 pg/mL]) foram baixos comparados com valores de indivíduos saudáveis. Porém, pacientes com elevado IMC (> 25 kg/m²) apresentaram menores concentrações plasmáticas de acyl-grelina (13,6 [1,3-30,5] pg/mL) em relação aos pacientes com IMC < 25 kg/m² (21,7 [7,4-77,7] pg/mL (p < 0,05). Houve correlação negativa entre o IMC e acyl-grelina (r = -0,38; p = 0,02), porém, não houve correlação significativa entre acyl-grelina e os marcadores inflamatórios. CONCLUSÃO: Apesar dos pacientes em HD apresentarem baixas concentrações de acyl-grelina e uma provável resistência a este hormônio, não houve associação entre inflamação e acyl-grelina.