Characterization of a clone from an adult worm cDNA library selected with anti-Schistosoma mansoni human antibodies dissociated from immune complexes: a preliminary report

Considering the scarcity of defined antigens, actually useful and reliable for use in the field studies, we propose an alternative method for selection of cDNA clones with potential use in the diagnosis of schistosomiasis. Human antibodies specific to a protein fraction of 31/32 kDa (Sm31/32), dissociated from immune complexes, are used for screening of clones from an adult worm cDNA library. Partial sequencing of five clones, selected through this strategy, showed to be related to Schistosoma mansoni: two were identified as homologous to heat shock protein 70, one to glutathione S-transferase, one to homeodomain protein, and one to a previously described EST (expressed sequence tag) of S. mansoni. This last clone was the most consistently reactive during the screening process with the anti-Sm31/32 antibodies dissociated from the immune complexes. The complete sequence of this clone was obtained and the translation data yielded only one ORF (open reading frame) that code for a protein with 57 amino acids. Based on this amino acid sequence two peptides were chemically synthesized and evaluated separately against a pool of serum samples from schistosomiasis patients and non-schistosomiasis individuals. Both peptides showed strong reactivity only against the positive pool, suggesting that these peptides may be useful as antigens for the diagnosis of schistosomiasis mansoni.

The effect of antioxidant properties of aqueous garlic extract and Nigella sativa as anti-schistosomiasis agents in mice

The aim of this study was to assess the antioxidant and anti-schistosomal activities of the garlic extract (AGE) and Nigella sativa oil (NSO) on normal and Schistosoma mansoni-infected mice. AGE (125 mg kg-1, i.p.) and NSO (0.2 mg kg-1, i.p.) were administrated separately or in combination for successive 28 days, starting from the 1st day post infection (pi). All mice were sacrificed at weeks 7 pi. Hematological and biochemical parameters including liver and kidney functions were measured to assess the progress of anemia, and the possibility of the tissue damage. Serum total protein level, albumin, globulin and cholesterol were also determined. Malondialdehyde (MDA) and glutathione (GSH) levels were determined in the liver tissues as biomarkers for oxidative and reducing status, respectively. The possible effect of the treatment regimens on Schistosoma worms was evaluated by recording percentage of the recovered worms, tissue egg and oogram pattern. Result showed that, protection with AGE and NSO prevented most of the hematological and biochemical changes and markedly improved the antioxidant capacity of schistosomiasis mice compared to the infected-untreated ones. In addition, remarkable reduction in worms, tissue eggs and alteration in oogram pattern were recorded in all the treated groups. The antioxidant and antischistosomal action of AGE and NSO was greatly diverse according to treatment regimens. These data point to these compounds as promising agents to complement schistosomiasis specific treatment.

Immunoperoxidase technique using an anti-Leishmania (L.) chagasi hyperimmune serum in the diagnosis of culture-confirmed American tegumentary leishmaniasis

The present study reports the production of the rabbit anti-Leishmania (L.) chagasi hyperimmune serum, the standardization of the immunohistochemistry (IHC) technique and the evaluation of its employment in cutaneous leishmaniasis (CL) lesions diagnosed by Leishmania sp. culture isolation. Thirty fragments of active CL lesions were examined as well as 10 fragments of cutaneous mycosis lesions as control group. IHC proved more sensitive in detecting amastigotes than conventional hematoxylin-eosin (HE) stained slides: the former was positive in 24 (80%) biopsies whereas the latter, in 16 (53%) (p = 0.028). The reaction stained different fungus species causing cutaneous mycosis. Besides, positive reaction was noticed in mononuclear and endothelial cells. Nevertheless, this finding was present in the control group biopsies. It is concluded that IHC showed good sensitivity in detecting amastigotes.

Characterization of a Hepatitis B virus strain in southwestern Paraná, Brazil, presenting mutations previously associated with anti-HBs Resistance

The present study investigated if hepatitis B virus (HBV) mutants circulate in the southwestern region of the State of Paraná, Brazil, by analyzing samples from children who received immunoprophylaxis but were born to HBV carrier mothers. Samples from 25 children were screened for HBV serum markers and for HBV DNA by PCR. Only one sample was positive for HBsAg, anti-HBs and HBV DNA, although the child had been vaccinated. Analysis of the S gene sequence of this sample showed the presence of a proline at position 105, a serine at position 114, three threonines at positions 115, 116 and 140, and a glutamine at position 129. The presence of these amino acids, except for serine at position 114, has been related to monoclonal or polyclonal therapy with anti-HBs after liver transplantation, whereas the presence of threonine at position 116 has been described in immunized children from Singapore. This finding demonstrates the possible circulation of HBV strains resistant to hepatitis B immunoprophylaxis in southwestern Paraná, Brazil. The genotype of the sample was identified as genotype D, which is frequently found in the region studied. Since 36% of the children had received incomplete or no immunoprophylaxis, more extensive follow-up of children born to HBsAg-positive mothers is needed.

Observações clínicas com um nôvo anti-helmíntico - triclorofenolpiperazina (CI-416) - no tratamento da ancilostomíase

O autor tratou 40 pacientes portadores de diversas helmintíases intestinais com um, nôvo sal de piperazina - Bis (2, 4, 5 - Triclorofenol) piperazina na dose única de 50 mg/kg de pêso corporal em jejum ou duas horas após a refeição matinal. Obteve com uma série de tratamento cura parasitológica em 25 pacientes (62,5%) infectados por Ancilostomídeos e mais 6 (15%) com um segundo curso da medicação, totalizando 31 pacientes curados parasitològicamente (77,5% dos casos). À tolerância ao produto foi boa, com exceção de dois casos (5%) que referiram vômitos logo após a ingestão da substância. Três enfermos relataram expulsão de exemplares adultos mortos de Ascaris lumbricoides pelas fezes. Com o esquema terapêutico empregado, o autor observou pequena atividade ãa droga com respeito à infecção por Ascaris lumbricoides e nula sôbre o Trichuris trichiura. Conclui que o nôvo antihelmíntico é bastante ativo contra a infestação determinada pelos Ancilostomídeos.

Avaliação sorológica de vacinação anti-rubéola em dois educandários no Estado da Guanabara

196 soros de crianças provenientes de dois educandários da Guanabara foram ensaiados quanto à presença de anticorpos para rubéola. através do teste de inibição de hemaglutinação. Apenas 24 crianças sem anticorpos foram encontradas e destas crianças susceptíveis um grupo foi vacinado com amostra Cendehill liofilizada do Lab. R.I.T. (Genval, Bélgica), sendo o outro grupo deixado como controle. Observou-se 100% de formação de anticorpos para rubéola no grupo vacinado. O alto nivel de anticorpos pré-vacinais encontrado sugere alta circulação do vírus cla rubéola em nosso meio.

Estudo da resposta imunitária à vacinação anti-meningocócica com polissacarídeos de diversas procedências

Um estudo duplamente cego sobre a capacidade de indução de anticorpos séricos anti-meningocócicos por polissacarfdeos capsulares A e C, detectados pela técnica de hemaglutinação passiva, foi realizado no período de outubro a dezembro de 1974. Analisaram-se as respostas imunogênicas de polissacarídeos isolados e combinados de três procedências, entre as quais a de um laboratório que se propunha a produzi-los em larga escala e que já os havia testado em um grupo de voluntários sem reações colaterais importantes. Duzentos e trinta e oito voluntários, funcionários e internos de uma penitenciária, foram divididos em 6 grupos aos quais foram administrados toxóide tetânico e cinco diferentes tipos de vacina. Colheitas de sangue imediatamente antes e quatro semanas após a inoculação foram realizadas e a conversão soro lógica analisada. As vacinas polissacarídeas C mostraram boa resposta imunogênica, enquanto a vacina A mostrou resposta mais pobre. As vacinas em experimentação que continham polissacarídeo A não demonstraram poder antigênico, apresentando, inclusive, resposta paradoxal, com a formação de anticorpos anti-meningocócicos C. Reações colaterais nos grupos submetidos a estas vacinas, embora de pequena intensidade, mostraram-se mais freqüentes do. que nos outros grupos, sugerindo, como depois se evidenciariam, problemas de purificação. A inoculação de vacinas mono vai entes determinou uma queda de níveis de anticorpos não específicos (queda de anti-polissacarfdeo A quando a vacina era polissacarfdea C e vice-versa), sugerindo, juntamente com achados de outros estudos, um possível mecanismo de depressão imunitária que merece ser melhor investigado.

Studies on anti-component 5 antibodies in animals infected with Trypanosoma cruzi

A competitive antibody enzyme immunoassay, using a monoclonal antibody against the species-specific Trypanosoma crnzi antigen 5, was used to investigate the presence of anti-component 5 antibodies in sera of opossums, dogs, rabbits and rats infected with this parasite. The sera from 51 Venezuelan patients with Chagas’disease were also tested. About 90% of the infected subjects showed significant levels of anti-component 5 antibodies. Nevertheless, these antibodies were not detected in the sera of dogs, rats and opossums infected with T. cruzl Some sera from infected rabbits presented significant results but close to the limit ofpositivity ofthe test. These findings suggest that the immune response in animals naturally or experimentally infected with T. cruzi is different from that observed in human Chagas’disease.

Freqüência de indivíduos com anticorpos sericos anti-Cysticercus cellulosae em cinco Municípios do Estado de São Paulo

Considerando a importância da cisticercose humana em Saúde Pública, foi estudada a freqüência de positividade da detecção de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae em 1.264 amostras de soro, assim distribuídas: Grupol-1.064 de indivíduos da população geral (821 adultos e 243 crianças) residentes em cinco municípios do Estado de São Paulo (São Paulo, Presidente Prudente, Santos, Campinas e Marília), Brasil; Grupo 11-200 de pacientes adultos internados em hospital psiquiátrico (Presidente Prudente). Para a pesquisa dos anticorpos séricos foi empregado o teste ELISA utilizando como suporte discos de tecido-resina. No Grupo I foram encontrados 18 (2,30%) soros reagentes entre as amostras de adultos, e 2 (0,82%) entre as das crianças; entre os doentes psiquiátricos, Grupo II, a freqüência de positividade foi de 5 %, significativamente maior (p < 0.05).

Leptospirose em doentes com anticorpos anti-HIV: relato de dois casos

Relata-se a concomitância de leptospirose e síndrome da imunodeficiência adquirida (SIDA) em humanos. Nestes casos não foram observados aspectos clínicos diferentes que possam ser atribuídos à simultaneidade dessas patologias.

Prevalence of IgG and IgM anti-Toxoplasma antibodies in patients with HIV and acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)

With the emergence of the human immunodeficiency virus (HIV), in patients with acquired immunodeficiency syndrome (AIDS), Toxoplasma gondii has arisen as an important opportunist pathogenic agent, especcially in the central nervous system, being the most common cause of intracerebral lesions. The incidence of Toxoplasma gondii in HIV-infected patients depends principally on the existence of latent Toxoplasma parasitosis in the population affected. Through the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), IgG and IgM anti-Toxoplasma antibodies were found in 92 patients of which 46 (50.0%) were IgG seropositive, and only one case (1.0%) had IgM antibodies.Of the 92 patients: 53 were HIV seropositives and 39 had AIDS. The detection and monitoring of anti-Toxoplasma antibodies in HIV patients is essential, since in this group there is a high percentage risk of developing cerebral toxoplasmosis, which is the second cause of death in this type of patients.

Anticorpos anti-hantavírus em escolares de Salvador, Bahia

As hantaviroses são doenças emergentes nas Américas e, em todo o mundo, os casos clínicos descritos foram infreqüentes entre crianças. O objetivo de investigar a freqüência de escolares portadores de anticorpos (IgG) anti-hantavírus justifica-se porque poucos estudos soroepidemiológicos pesquisaram a infecção por hantavírus no grupo pediátrico. Nos espécimes séricos de 379 escolares, de duas Escolas públicas da cidade do Salvador, Bahia, foram pesquisados os anticorpos anti-Hantaan (HTN) e anti-Sin Nombre (SN). A soropositividade de anticorpos anti-HTN foi de 13,2% (50/379) e todos os escolares foram soronegativos para o vírus SN. A soropositividade anti-HTN aumentou proporcionalmente com a idade. Não houve associação entre a soropositividade anti-HTN e as características relacionadas à exposição a roedores urbanos. A soroprevalência de anticorpos anti-HTN nos escolares estudados foi elevada e reforçou a hipótese de circulação de hantavírus em Salvador. A não observação de portadores de anticorpos anti-SN indica, provavelmente, a circulação de outros sorotipos nesta região, mais relacionados antigenicamente ao sorotipo Hantaan.