Primary culture of Rhodnius prolixus (Hemiptera: Reduviidae) salivary gland cells

In the present paper, we developed a primary culture of Rhodnius prolixus salivary gland and main salivary canal cells. Cells remained viable in culture for 30 days. Three types of cells were indentified in the salivary gland cultures, with binuclear cells being the most abundant. The supernatants of salivary cultures contained mainly 16-24 kDa proteins and presented anticoagulant and apyrase activities. Secretion vesicles were observed budding from the cellular monolayer of the main salivary canal cells. These results indicate that R. prolixus salivary proteins may be produced in vitro and suggest that the main salivary canal may have a possible secretory role.

Behavioural responses to human skin extracts and antennal phenotypes of sylvatic first filial generation and long rearing laboratory colony Rhodnius prolixus

Chagas disease is a major public health issue and is mainly spread by Triatominae insects (Hemiptera: Reduviidae). Rhodnius prolixus is the main vector species in Northern South America. Host-seeking behaviour in R. prolixus is mediated by different compounds that are produced by and emanate from the host or microbiota on the host's skin. We tested the behavioural responses of sylvatic first filial generation (F1) and colony insects to extracts of human skin with a dual choice olfactometer. In addition, we compared the antennal phenotypes in both populations. No statistical differences were found between the two populations at the behavioural level. Both showed a preference for face and feet extracts and this effect was abolished for face extracts after treatment with an antibacterial gel. The observation of the antennal phenotype showed that there were differences between both groups in the total length, total surface area and number and density of bristles. However, the number and density of chemoreceptive sensilla (basiconic and thin and thick-walled trichoids) and the total density of sensilla did not show statistically significant differences. These results demonstrate that colony insects, which have only been fed with living hens for the last 30 years, are attracted by human skin extracts in a similar way as F1 sylvatic insects.

Vector control intervention towards interruption of transmission of Chagas disease by Rhodnius prolixus, main vector in Guatemala

In Guatemala, the Ministry of Health (MoH) began a vector control project with Japanese cooperation in 2000 to reduce the risk of Chagas disease infection. Rhodnius prolixus is one of the principal vectors and is targeted for elimination. The control method consisted of extensive residual insecticide spraying campaigns, followed by community-based surveillance with selective respraying. Interventions in nine endemic departments identified 317 villages with R. prolixus of 4,417 villages surveyed. Two cycles of residual insecticide spraying covered over 98% of the houses in the identified villages. Fourteen villages reinfestated were all resprayed. Between 2000-2003 and 2008, the number of infested villages decreased from 317 to two and the house infestation rate reduced from 0.86% to 0.0036%. Seroprevalence rates in 2004-2005, when compared with an earlier study in 1998, showed a significant decline from 5.3% to 1.3% among schoolchildren in endemic areas. The total operational cost was US$ 921,815, where the cost ratio between preparatory, attack and surveillance phases was approximately 2:12:1. In 2008, Guatemala was certified for interruption of Chagas disease transmission by R. prolixus. What facilitated the process was existing knowledge in vector control and notable commitment by the MoH, as well as political, managerial and technical support by external stakeholders.

Elimination of Rhodnius prolixus in El Salvador, Central America

Epidemiological studies performed in El Salvador between 1955-1972 demonstrated a high frequency of two triatomine vectors (Triatoma dimidiata and Rhodnius prolixus). However, the frequency of R. prolixus decreased by 1976 and this species has not been found since 1995. The main factors influencing the elimination of R. prolixus in El Salvador are discussed in this paper.

Perimicrovillar membrane assembly: the fate of phospholipids synthesised by the midgut of Rhodnius prolixus

In this study, we describe the fate of fatty acids that are incorporated from the lumen by the posterior midgut epithelium of Rhodnius prolixus and the biosynthesis of lipids. We also demonstrate that neutral lipids (NL) are transferred to the haemolymphatic lipophorin (Lp) and that phospholipids remain in the tissue in which they are organised into perimicrovillar membranes (PMMs). 3H-palmitic acid added at the luminal side of isolated midguts of R. prolixus females was readily absorbed and was used to synthesise phospholipids (80%) and NL (20%). The highest incorporation of 3H-palmitic acid was on the first day after a blood meal. The amounts of diacylglycerol (DG) and triacylglycerol synthesised by the tissue decreased in the presence of Lp in the incubation medium. The metabolic fates of 3H-lipids synthesised by the posterior midgut were followed and it was observed that DG was the major lipid released to Lp particles. However, the majority of phospholipids were not transferred to Lp, but remained in the tissue. The phospholipids that were synthesised and accumulated in the posterior midgut were found to be associated with Rhodnius luminal contents as structural components of PMMs.

Interaction of lipophorin with Rhodnius prolixus oocytes: biochemical properties and the importance of blood feeding

Lipophorin (Lp) is the main haemolymphatic lipoprotein in insects and transports lipids between different organs. In adult females, lipophorin delivers lipids to growing oocytes. In this study, the interaction of this lipoprotein with the ovaries of Rhodnius prolixus was characterised using an oocyte membrane preparation and purified radiolabelled Lp (125I-Lp). Lp-specific binding to the oocyte membrane reached equilibrium after 40-60 min and when 125I-Lp was incubated with increasing amounts of membrane protein, corresponding increases in Lp binding were observed. The specific binding of Lp to the membrane preparation was a saturable process, with a Kdof 7.1 ± 0.9 x 10-8M and a maximal binding capacity of 430 ± 40 ng 125I-Lp/µg of membrane protein. The binding was calcium independent and pH sensitive, reaching its maximum at pH 5.2-5.7. Suramin inhibited the binding interaction between Lp and the oocyte membranes, which was completely abolished at 0.5 mM suramin. The oocyte membrane preparation from R. prolixus also showed binding to Lp from Manduca sexta. When Lp was fluorescently labelled and injected into vitellogenic females, the level of Lp-oocyte binding was much higher in females that were fed whole blood than in those fed blood plasma.

Rhodnius barretti, a new species of Triatominae (Hemiptera: Reduviidae) from western Amazonia

Rhodnius barretti , a new triatomine species, is described based on adult specimens collected in rainforest environments within the Napo ecoregion of western Amazonia (Colombia and Ecuador). R. barretti resembles Rhodnius robustus s.l. , but mitochondrial cytochrome b gene sequences reveal that it is a strongly divergent member of the “robustus lineage”, i.e., basal to the clade encompassing Rhodnius nasutus , Rhodnius neglectus , Rhodnius prolixus and five members of the R. robustus species complex. Morphometric analyses also reveal consistent divergence from R. robustus s.l. , including head and, as previously shown, wing shape and the length ratios of some anatomical structures. R. barretti occurs, often at high densities, in Attalea butyracea and Oenocarpus bataua palms. It is strikingly aggressive and adults may invade houses flying from peridomestic palms. R. barretti must therefore be regarded as a potential Trypanosoma cruzi vector in the Napo ecoregion, where Chagas disease is endemic.

Bioactivity of the latex from Parahancornia amapa (Apocynaceae) on the development of Rhodnius nasutus (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae) under laboratory conditions

Bioactivity of the latex from Parahancornia amapa (Apocynaceae) on the development of Rhodnius nasutus (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae) under laboratory conditions. The aim of this study was to verify the effects of the methanolic fraction of the latex from Parahancornia amapa (Apocynaceae) (PALAM) on individuals of the species Rhodnius nasutus Stål (Hemiptera, Triatominae). Many of the insects treated with the substance presented deformities and these may interfere in the feeding and possibly hinder the reproductive capacity. They also presented significant mortality during the molt when compared to the control group, noting a gradual increase in mortality. The treated insects also presented delayed nymphal development (5th instar) and higher adult longevity.

Aspectos ecológicos da tripanossomose americana: II - distribuição e dispersão local de triatomíneos em ecótopos naturais e artificiais

São apresentados os resultados de investigação destinada a estabelecer o quadro de distribuição de Triatoma sordida e Rhodnius neglectus em áreas com ecótopos naturais e artificiais. Essa distribuição revelou-se do tipo agrupado ou contagiante, dirigida uniformemente para casas e anexos por parte do primeiro, e para palmeiras por parte do segundo. Em áreas de vegetação mais densa, do tipo cerrado, a densidade é praticamente nula ou muito baixa, admitindo-se que isso deva correr por conta da competição. As modificações introduzidas pelo homem tendem a anular êsse fator, além de, as suas habitações, se transformarem em ecótopos que atraem a população de T. sordida. Êsse fato, aliado à eliminação local do T. infestans, parece explicar a tendência invasiva daquele triatomíneo. Evidenciou-se também a persistência da infecção pelo Trypanosoma cruzi em triatomíneos e vertebrados domiciliados, o que representa potencial para o incremento da transmissão.

Aspectos ecológicos da tripanossomose americana: III - dispersão local de triatomíneos, com especial referência ao Triatoma sordida

São apresentados os resultados obtidos nas investigações levadas a efeito no Bairro João Pedro, município de Guíra e na Fazenda Vila Maria, município de Sertãozinho, Estado de São Paulo, Brasil. Os resultados das provas de precipitina indicam várias fontes alimentares para Triatoma sordida e, mais restritas, para Rhodnius neglectus, se bem que revelem mais a influência das oportunidades do que de preferências propriamente ditas. O exame minucioso dos ecótopos artificiais, representados por casas e anexos, mostram nítida invasão por parte do T. sordida. O transporte passivo dêste triatomíneo foi sugerido pelo encontro de ninfas e adultos em montes de lenha, obtidos a custa de árvores sêcas. Evidenciou-se também o transporte de ninfas de primeiros estádios do mesmo hemíptero, entre as penas de pardais (Passer domesticus) em cujos ninhos, situados no fôrro das casas, ocorre a colonização do inseto. A atração do ambiente domiciliar sôbre o hemíptero deve-se principalmente aos anexos que se destinam aos animais domésticos, onde o triatomíneo se coloniza facilmente. Tais ambientes agem, pois, como locais de concentração, a partir de focos naturais a certa distância. À semelhança do que se verificou para outras espécies, admite-se, pelas evidências, a movimentação ativa desses insetos, à procura de ecótopos mais estáveis. Em conseqüência, é de se esperar incremento da invasão domiciliar pelo T. sordida.

Evidenciação de antígeno da hepatite B (HBsAg) em "manchas" obtidas de exemplares de Triatominae: nota prévia

De 890 "manchas" provenientes de insetos dos gêneros Panstrongylus, Rhodnius e Triatoma, positivas para sangue humano, 7 deram resultados presumptivamente positivos por hemaglutinação passiva para HBsAg. Deste total só um caso foi confirmado como positivo, por RIE (radioimunoensaio), correspondendo a uma "mancha" obtida de Triatoma sordida (ninfa de 5.º estádio).

Aspectos ecológicos da Tripanossomíase americana: XII - Variação regional da tendência de Panstrongylus megistus à domiciliação

Mediante a instalação de galinheiros experimentais em regiões distintas, observou-se variação da capacidade de colonização espontânea de Panstrongylus megistus nesses ecótopos artificiais. Os resultados positivos foram obtidos em áreas de clima com inverno seco ou chuvoso mas onde a destruição da cobertura vegetal primitiva foi mais intensa. Na região de maior persistência florestal e de clima mais úmido, os resultados foram negativos. A existência de populações silvestres em ambas as zonas sugere que a segunda represente o centro de dispersão da espécie, enquanto na primeira o triatomíneo desenvolveu valência ecológica que lhe possibilita a invasão de ecótopos artificiais. Na dependência do grau de alteração e das condições de utilização do ambiente, a vigilância epidemiológica deverá ser mantida para evitar que a domiciliação do triatomíneo se transforme em problema de saúde pública.

Aspectos ecológicos da tripanossomíase americana: XIV - Persistência e potencial de domiciliação de populações triatomínicas silvestres em região de intensa atividade agropecuária

São apresentados os resultados de observações sobre populações triatomínicas extradomiciliares em região de intensa atividade agropecuária. Os restos de vegetação primitiva, embora reduzidos a menos de 8,0%, mostraram-se suficientes para manter essas populações. Pelo menos para Triatoma sordida, a destruição progressiva parece favorecer sua sobrevivência, graças à multiplicação de ecótopos preferidos por esse triatomíneo. Tanto essa espécie como Panstrongylus megistus e Rhodnius neglectus mostraram-se aptos à colonização em ecótopos artificiais representados por galinheiros experimentais.

Hábitos alimentares, infecção natural e distribuição de triotomíneos domiciliados na região nordeste do Brasil

São apresentadas as informações obtidas no inquérito triatomíneo levado a efeito na região nordeste do Brasil. As características biogeográficas incluem a presença de áreas semi-áridas da caatinga e amplas faixas transicionais com outras feições paisagísticas. Entre estas foram incluídas as da floresta tropical atlântica e as inclusões florestadas mais extensas. No período de 1975 a 1980 foram examinados 15.342 triotomíneos coletados no ambiente domiciliar, visando detectar as presenças de sangue ingerido e de infecção natural por Trypanosoma tipo cruzi. O conteúdo intestinal foi submetido a reações com antisoros para homem, cão, gato, roedor (Kattus), marsupial (Didelphis) e ave (Gallus). Por ordem de freqüência, as espécies encontradas foram Triatoma pseudomaculada (40,6%), Panstrongylus megistus (19,7%), Triatoma brasiliensis e T. sordida (ambos com 14,3%), Rhodnius nasutus (6,1%) e Triatoma infestans (1,1%); além de em algumas outras raras. A presença de sangue foi detectada em 42,4% e a infecção em 3,4% desse total de espécimens examinados. Observou-se elevada mobilidade alimentar, com coeficientes gerais de 54,8% para ave e 30,0% para homem. Em nível específico pôde determinar apreciável grau de antropofilia em P. megistus e, em menor intensidade, em T. brasiliensis. Por sua vez, T. infestans mostrou-se altamente antropófilo. Observou-se apreciável ornitofilia em T. pseudomaculata e T. sordida, com elevada intensidade em R. nasutus. Por outro lado, a presença de sangue humano em espécimens capturados no peridomicílio indicou a ocorrência de freqüente mobilidade espacial, com exceção de T. infestans que não mostrou evidências de abandonar o domicílio. A tendência à domiciliação, além desta, revelou-se apreciável em P. megistus, moderada em T. brasiliensi, T. pseudomaculata, T. sordida e praticamente nula em R. nasutus. A distribuição geográfica confirmou o caráter autóctone de T. brasiliensis, T. pseudomaculata e R. nasutus em relação à caatinga, e do P. megistus em relação às regiões florestais atlânticas e de inclusão. Este último revelou caráter invasivo no que concerne à caatinga, enquanto T. infestans e T. sordida mostraram o mesmo aspecto quanto à região nordeste como um todo. Os resultados permitem concluir que, na transmissão regional epidemiologicamente significante da tripanossomíase americana, desempenha papel relevante o P. megistus, em primeiro lugar, e o T. brasiliensis, em segundo. Dependendo de fatores vários, provavelmente da densidade, poderão atuar secundariamente nesse sentido o T. pseudomaculata e o T. sordida. Quanto à T. infestans, a sua presença, em número reduzido, representa, no momento, risco apenas potencial. O controle rotineiro, mediante a desinsetização domiciliar, deverá fornecer bons resultados no que concerne à interrupção da transmissão. Todavia a reinfestação, pelo menos do peridomicílio, deverá provavelmente continuar. E isso em virtude de focos extradomiciliares que fornecem espécimens com tendência à colonização no ambiente humano. É de se prever que ela se fará a custa do P. megistus nas áreas florestais atlânticas e de inclusão e de T. brasiliensis, T. pseudomaculata e R. nasutus nas áreas da caatinga. A vigilância epidemiológica deverá pois levar em conta esses aspectos e tender a aumentar sua eficiência pela continuidade das pesquisas.

Roedores, marsupiais e triatomíneos silvestres capturados no município de Mambaí-Goiás: infecção natural pelo Trypanosoma cruzi

Neste trabalho está descrito aspectos do ciclo silvestre do Trypanosoma cruzi em região do cerrado do Brasil Central, endêmica para doença de Chagas. Entre 151 roedores (11 espécies) e 73 Didelphis albiventris, capturados em ambiente silvestre, respectivamente 4 (2,6%) e 15 (20,6%), estavam naturalmente infectados pelo T. cruzi. Triatomíneos, pertencentes a cinco espécies (Rhodnius neglectus, Psammolestes tertius, Triatoma costalimai, Triatoma pseudomaculata e Triatoma sordida) foram também capturados em ambiente silvestre e em diferentes tipos de biótopos. Entre 165 exemplares, destes insetos, coletados, dois estavam parasitados pelo T. cruzi (T. costalimai e T. pseudomaculata). Foram ainda realizadas observações ecológicas, quanto a interações entre roedores, D. albivetris e triatomíneos.