Estirpes de Bacillus thuringiensis efetivas contra insetos das ordens Lepidoptera, Coleoptera e Diptera

O objetivo deste trabalho foi selecionar entre 300 estirpes de Bacillus thuringiensis as efetivas simultaneamente contra larvas de Spodoptera frugiperda J.E. Smith e Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Noctuidae), Anthonomus grandis Boheman (Coleoptera: Curculionidae), Aedes aegypti Linnaeus e Culex quinquefasciatus Say (Diptera: Culicidae). Foram selecionadas duas estirpes de B. thuringiensis, denominadas S234 e S997, que apresentaram atividade contra as três ordens de insetos. As estirpes foram caracterizadas por métodos morfológicos, bioquímicos e moleculares. As mesmas apresentaram duas proteínas principais de 130 e 65 kDa, produtos de reação em cadeia da polimerase de tamanho esperado para a detecção dos genes cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B e cry2 e cristais bipiramidais, cubóides e esféricos.

Screening of Bacillus thuringiensis strains effective against mosquitoes

The objective of this work was to evaluate 210 Bacillus thuringiensis strains against Aedes aegypti and Culex quinquefasciatus larvae to select the most effective. These strains were isolated from different regions of Brazil and are stored in a Bacillus spp. collection at Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, Brasília, Brazil. The selected strains were characterized by morphological (microscopy), biochemical (SDS-PAGE 10%) and molecular (PCR) methods. Six B. thuringiensis strains were identified as mosquito-toxic after the selective bioassays. None of the strains produced the expected PCR products for detection of cry4, cry11 and cyt1A genes. These results indicate that the activity of mosquitocidal Brazilian strains are not related with Cry4, Cry11 or Cyt proteins, so they could be used as an alternative bioinsecticide against mosquitoes.

Winter biology of Culex pipiens quinquefasciatus say, (Diptera: Culicidae) from Córdoba, Argentina

Adult cohorts and immature stages were kept under field conditions during the autumn and winter of three consecutive years. Survival, oviposition and development time from egg to adult were considered. The adult cohorts were studied under three experimental conditions: unfed cohorts, cohorts fed with sugar solution ansd cohorts fed with both sugar solution and blood (chicken). Female longevity showed significant differences among the three treatments. Females of unfed cohorts lived up to three weeks; females fed with sugar solution survived until six weeks, while those fed both with sugar and blood lived at most fourteen weeks; after the blood intake eggs were laid. In the immature stages, the highest relative mortality rates occurred during the egg and larval stages. Total pre-adult mortality varied between 59.09 and 89.71%. The developmental duration from egg to adult was between 43-62 days; there were no differences among results obtained for the three years.

Peroral susceptibility of Aedes albifasciatus and Culex pipiens complex mosquitoes (Diptera: Culicidae) from Argentina to western equine encephalitis virus

The transmission cycle of western equine encephalitis (WEE) virus in South America is unknown. A WEE virus strain was isolated from Aedes albifasciatus in Argentina during the WEE epizootic of 1982-83. Also, Culex pipiens from Argentina was reported to be able to transmit WEE virus experimentally, but other results indicate that Cx. pipiens from the USA is refractory to this virus. We determined the susceptibility of Argentina strains of Ae. albifasciatus and Culex pipiens complex mosquites to infection by WEE virus by the oral route. Adult females were fed on chicks infected with a WEE virus strain isolated in Cordoba Province, Argentina, or were fed on a blood/virus suspension. Each mosquito ingested between 10(1.6) to 10(6.4) vero cell plaque-forming units of virus. Each of 28 Ae. albifasciatus was positive for virus from the fourth day postfeeding, and there was evidence for virus replication. In contrast, 0/44 Cx. p. quinquefasciatus and only 1/15 Cx. p. pipiens was positive. Aedes albifasciatus is susceptible to infection by WEE virus and should be considered a potential vector of this virus in Argentina. Both subspecies of Cx. pipiens are refractory to peroral infection by WEE virus and probably do not play a role in the WEE virus cycle in Argentina.

Abrigos de mosquitos Culex (Culex) em zona rural (Diptera: Culicidae)

As atividades antrópicas levadas a cabo em zona rural têm afetado o comportamento de mosquitos Culex (Culex), motivo pelo qual foi realizada investigação para observar seus abrigos naturais em área de pastagem, margem e interior de matas primitivas ou residuais. Foram escolhidas três localidades com características mesológicas diferenciadas pelo tipo de atividade humana, todas situadas na região do Vale do Ribeira, Estado de São Paulo, Brasil. As espécies mais abundantes foram Cx. mollis (28,0%), Cx. declarator (25,0%), Cx. lygrus (13,0%) e Cx. coronator (9,6%). O conjunto Cx. Bidens + Cx. dolosus + Cx. chidesteri, de hábito mais urbanizado, foi capturado em número muito reduzido. Com relação aos ambientes pesquisados, a mata contribuiu com 2.281 indivíduos (71,4%), sugerindo ser local de abrigo preferido pelo grupo, exceto para Cx. quinquefasciatus. Avaliou-se o potencial de domiciliação de cada espécie e suas conseqüências para a população humana.

COI barcode versus morphological identification of Culex ( Culex ) (Diptera: Culicidae) species: a case study using samples from Argentina and Brazil

Sequences of the cytochrome c oxidase subunit I (COI) mitochondrial gene from adults of 22 Culex ( Culex ) species from Argentina and Brazil were employed to assess species identification and to test the usefulness of COI for barcoding using the best close match (BCM) algorithm. A pairwise Kimura two-parameter distance matrix including the mean intra and interspecific distances for 71 COI barcode sequences was constructed. Of the 12 COI lineages recovered in the Neighbour-joining topology, five confirmed recognised morphological species ( Cx. acharistus , Cx. chidesteri , Cx. dolosus , Cx. lygrus and Cx. saltanensis ) with intraspecific divergences lower than 1.75%. Cx. bilineatus is formally resurrected from the synonymy of Cx. dolosus . Cx. maxi , Cx. surinamensis and the Coronator group species included were clustered into an unresolved lineage. The intraspecific distance of Cx. pipiens (3%) was almost twice the interspecific between it and Cx. quinquefasciatus (1.6%). Regarding the BCM criteria, the COI barcode successfully identified 69% of all species. The rest of the sequences, approximately 10%, 18% and 3%, remained as ambiguously, mis and unidentified, respectively. The COI barcode does not contain enough information to distinguish Culex ( Cux. ) species.

Detection of Oropouche virus segment S in patients and inCulex quinquefasciatus in the state of Mato Grosso, Brazil

This study aimed to investigate the circulation of Orthobunyavirus species in the state of Mato Grosso (MT) Brazil. During a dengue outbreak in 2011/2012, 529 serum samples were collected from patients with acute febrile illness with symptoms for up to five days and 387 pools of female Culex quinquefasciatuscaptured in 2013 were subjected to nested-reverse transcription-polymerase chain reaction for segment S of the Simbu serogroup followed by nucleotide sequencing and virus isolation in Vero cells. Patients (5/529; 0.9%) from Cuiabá (n = 3), Várzea Grande (n = 1) and Nova Mutum (n = 1) municipalities were positive for the S segment of Oropouche virus (OROV). Additionally, eight/387 Cx. quinquefasciatuspools were positive for the segment, with a minimum infection rate of 2.3. Phylogenetic analysis indicated that all the samples belong to the subgenotype Ia, presenting high homology with OROV strains obtained from humans and animals in the Brazilian Amazon. The present paper reports the first detection of an Orthobunyavirus, possibly OROV, in patients and in Cx. quinquefasciatus mosquitoes in MT. This finding reinforces the notion that arboviruses frequently reported in the Amazon Region circulate sporadically in MT during dengue outbreaks.

Observações sobre os mosquitos Culex da cidade de São Paulo, Brasil

São apresentados os resultados obtidos na coleta de mosquitos do gênero Culex na área urbana da cidade de São Paulo, Brasil. Foram empregadas armadilhas luminosas automáticas tipo "New Jersey 50". Os resultados revelaram a presença de outras populações representadas principalmente por Culex chidesteri, C. dolosus e C. bidens as quais, em conjunto, chegaram algumas vezes a sobrepujar a de Culex pipiens fatigans. O maior rendimento foi obtido em áreas com abastecimento de água mas sem rede de esgotos. As coletas intradomiciliares revelaram franca predominância de C. pipiens fatigans.

A new species of Culex (Melanoconion) from Southern Brazil (Diptera: Culicidae)

A new species from Southern Brazil, named Culex (Melanoconion) ribeirensis is described. The description includes adults, pupal and larval stages, illustrating the morphological aspects and a picture of a breeding place. Some data about known distribution and bionomics are presented.

Studies on some species of Culex (Melanoconion), with the description of a new one from Southern Brazil (Diptera: Culicidae)

Redescription of Culex (Melanoconion) oedipus Root and of Cx. (Mel.) plectoporpe Root, as well as the description of a new one, named Cx. (Mel.) rabelloi, are made. The material was collected in S.Paulo State, Southern Brazil. The descriptions include adults, pupal and larval stages, illustrating the morphological aspects and with pictures of breeding places. Some data about known distribution and bionomics are presented, remarking that all the three species seem to be closely associated with artificial manmade enviroments.

Preferências alimentares de mosquitos Culicidae no Vale do Ribeira, São Paulo, Brasil

São apresentados os resultados obtidos na identificação do sangue ingerido por culicídeos ingurgitados coletados em vários ambientes rurais de cinco localidades do Vale do Ribeira, Estado de São Paulo (Brasil). O maior rendimento, que representou a quase totalidade dos espécimens coletados, foi obtido mediante o emprego da aspiração e das redes manuais. Foi possível identificar a origem de 1.444 repastos sangüíneos. Os Aedes apresentaram predominância de positividade para mamíferos. Ae. scapularis mostrou preferência por hospedeiros de grande porte representados por bovinos e eqüinos. Ae. serratus alimentou-se também em aves. Com exceção da elevada antropofilia de Cx. quinquefasciatus, os demais representantes de Cx. (Culex) revelaram-se apreciavelmente ornitófilos. Em conjunto, Cx. (Melanoconion) mostrou o mais amplo espectro de hematofagia, que incluiu anfíbio, ave, mamíferos e réptil. Cx. ribeirensis e Cx. sacchettae apresentaram resultados que sugerem alguma preferência por mamíferos. A antropofilia distribuiu-se por várias espécies destacando-se Ae. scapularis, Cx. sacchettae e Cx. ribeirensis que a apresentaram nas coletas efetuadas no intradomicílio. A influência da densidade de hospedeiros no ambiente modificado fez-se sentir em relação à primeira dessas três espécies, para as quais as evidências obtidas sugerem que estejam evoluindo no sentido da domiciliação.

Composição e atividade de mosquitos Culicidae. Emprego de armadilha CDC no Vale do Ribeira, Estado de São Paulo, Brasil

Com o emprego da armadilha CDC determinou-se a composição específica da fauna de mosquitos Culicidae em locais com vegetação primária, situados em terras baixas e próximas a mangues, no litoral sul do Estado de São Paulo (Brasil). Como resultado geral foram obtidos cerca de 64 espécies ou grupos. Entre as que foram mais freqüentes destacaram-se Culex (Mel.) sacchettae (71,6%), Anopheles (Ker.) cruzii (10,5%), Phoniomiya spp. (8,2%) e Culex (Mel.) taeniopus (2,9%). Também com este método de coleta, nos horários crepuscular vespertino, noturno, ao lado do uso de isca ave e roedor, a dominância nítida foi de Cx. sacchettae, ao contrário do que ocorreu no mesmo local com isca humana, quando An. cruzii foi a espécie predominante. A diversidade calculada para o interior, margem da mata, campo aberto e domicílio, tendo sido de 1,7 a 6,2 revelou fauna relativamente rica para Culicidae. Não obstante a marcante presença de Culex (Cux.) quinquefasciatus no domicílio, foi inesperada a elevada freqüência de Cx. sacchettae. Além disso, a presença proporcional de An. cruzii no solo e copa sugere mobilidade desse anofelino no interior da floresta, enquanto que a sua atividade em ambiente extraflorestal revelou ser restrita. Nesse particular, Cx. sacchettae demonstrou ser espécie ubiqüista e ocorrente durante todos os meses do ano, porém com picos mais elevados nas estações verão e outono.

Preferências alimentares e domiciliação de mosquitos Culicidae no Vale do Ribeira, São Paulo, Brasil, com especial referência a Aedes scapularis e a Culex (Melanoconion)

Apresentam-se novos dados sobre a identificação do sangue ingerido por culicídeos ingurgitados e coletados em quatro localidades do Vale do Ribeira, Estado de São Paulo (Brasil), no período de fevereiro a novembro de 1986, e que já tinham sido sede de observações anteriores. São fornecidos dados sobre a distribuição de algumas espécies relacionadas ao tipo de ambiente. Focalizam-se Ae. scapularis e representantes de Culex (Melanoconion), principalmente Cx. ribeirensis e Cx. sacchettae. Foi possível a identificação de 651 repastos sangüíneos. Confirmou-se a preferência de Ae. scapularis por mamíferos de grande porte representados por bovinos, eqüinos e o próprio homem, tendo reagido a todos os anti-soros testados, com exceção do correspondente a animais de sangue frio representados por anfíbio. Cx. ribeirensis revelou resultados que sugerem possível preferência por mamíferos. As duas espécies supracitadas mostram tendência nítida para adaptação ao ambiente modificado pelo homem e capacidade de evolução de seus hábitos de possível domiciliação. Quanto aos outros culicídeos, as coletas de An. bellator, An. cruzii e Cq. chrysonotum limitaram-se à isca humana que a segunda dessas espécies rendeu 31,6% do total de fêmeas capturadas.

Observações sobre domiciliação de mosquitos Culex (Melanoconion), em ambiente com acentuadas modificações antrópicas

Estudam-se alguns aspectos do comportamento de espécies de Culex (Melanoconion) em ambiente antrópico intensamente modificado. Foram realizadas coletas mensais de adultos, concomitantes e levadas a efeito no peridomicílio, em área aberta e em área coberta por vegetação de segunda formação. Foram focalizadas as espécies dominantes e representadas por Cx. delpontei, Cx. ocossa, Cx. ribeirensis, Cx. sacchettae e Cx. taeniopus. No peridomicílio, destacam-se pela regularidade de sua presença, Cx. ribeirensis e Cx. sacchettae, incluindo apreciável comparecimento às coletas com isca humana ali realizadas. A época de maior rendimento das capturas correspondeu ao primeiro trimestre, em especial modo, ao mês de março. Aliado a esse aspecto, Cx. ribeirensis e Cx. sacchettae revelaram apreciável freqüência à isca humana. Em relação a esta, o menor comparecimento foi apresentado por Cx. delpontei e Cx. ocossa. Quanto a Cx. taeniopus, compareceu de maneira um tanto irregular e em número geralmente inferior ao dos demais. As observações evidenciaram curva de atividade aumentando rapidamente por ocasião do início da noite e mantendo-se durante todo o período noturno, apresentada por Cx. ribeirensis, Cx. sacchettae e Cx. taeniopus. O outro tipo de curva foi observado com Cx. delpontei e Cx. ocossa, com aumento gradual na primeira metade da noite, alcançando o máximo ao redor da meia-noite, e declinando sensivelmente na segunda metade do período. As coletas de formas imaturas permitiram evidenciar criadouros de Cx. delpontei em cursos de água de porte médio ou grande, e associados à vegetação aquática flutuante. São feitas considerações de ordem ecológica passíveis de interpretar esses comportamentos de interesse epidemiológico.

Studies on mosquitoes (Diptera: Culicidae) and anthropic environment: 8- Survey of adult behaviour of Spissipes Section species of Culex (Melanoconion) in South-Eastern Brazil

A study of Spissipes Section of Culex (Melanoconion) adults behaviour was carried out from August 1992 through December 1993 in human dominated (anthropic) environment in the Ribeira Valley, S.Paulo State, Brazil. By sampling at several sites it the dominance of Culex ribeirensis and Cx. sacchettae became evident even through a total number of ten species was recorded. Those two mosquitoes showed a clear tendency to frequent the domiciliary environment where they were caught, both indoor and outdoor, through the use of the human bait. In the outside environments, the residual patchy forests seems to display a concentration role, from which these adults spread to the open land and reach the dwellings. As their vector competence has been demonstrated through the virus isolations in natural conditions, it is advisable to pay attention to the presence of these mosquitoes in the man-made environment.