A comparison of three DNA extractive procedures with Leptospira for polymerase chain reaction analysis

Three DNA extraction methods were evaluated in this study: proteinase K followed by phenol-chloroform; a plant proteinase (E6870) followed by phenol-chloroform; and boiling of leptospires in 0.1 mM Tris, pH 7.0 for 10 min at 100°C, with no phenol treatment. Every strain treated with proteinase K or E6870 afforded positive polymerase chain reaction (PCR) reaction. On the other hand, from five strains extracted by the boiling method, three did not feature the 849 bp band characteristic in Leptospira. We also evaluated by RAPD-PCR, DNAs from serovars isolated with proteinase K and proteinase 6870 with primers B11/B12. Each of the DNA samples provided PCR profiles in agreement with previous data. Moreover, the results with E6870 showed less background non-specific amplification, suggesting that removal of nucleases was more efficient with E6870. The limit for detection by PCR using Lep13/Lep14 was determined to be 10(2) leptospira, using the silver stain procedure.

Attractiveness of black Shannon trap for phlebotomines

A white Shannon-type trap was used for captures of female sand flies in the search for natural infection with flagellates, however, due to its low productivity and as a large number of phlebotomines settled on the researchers' black clothes, we decided to compare the relative attractiveness of black and white Shannon-type traps for sand flies. Several pairs of black and white traps were placed side by side in front of caves in four areas in the Serra da Bodoquena, Bonito county, State of Mato Grosso do Sul, Brazil, for a total of 12 observations and 44 h of capture. The experiment resulted in 889 phlebotomines captured, 801 on the black and 88 on the white trap, representing 13 species. The hourly Williams' means were 8.67 and 1.24, respectively, and the black/white ratio was 7.0:1.0. Lutzomyia almerioi, an anthropophilic species closely associated with caves, was predominant (89%). Only two other species, Nyssomyia whitmani and Psathyromyia punctigeniculata, also anthropophilic, were significantly attracted to the black rather than to the white trap (chi2 test; p <= 0.01). The difference between the diversity index of the two traps was not significant at level 0.05. The black trap in these circumstances was much more productive than the white, especially for anthropophilic species.

Longitudinal Study on the Natural Infection of Biomphalaria straminea and B. glabrata by Schistosoma mansoni in an Endemic Area of Schistosomiasis in Pernambuco, Brazil

The abundance of snail hosts and the rates of infection with Schistosoma mansoni were monitored monthly for four years in two representative localities subjected to repeated chemotherapy of infected persons. Snail abundance varied from 1.0 to 4.4 collected per person/minute/station for Biomphalaria straminea and from 0.1 to 7.0 for B. glabrata. Infection rates of snails in nature varied from 0% to 15% for the former and from 0% to 70% for the latter species. Human infection increased from 35.5% to 61.9% in the locality occupied by B. straminea, and decreased from 40.3% to 20.8% in that occupied by B. glabrata. No relationship could be detected between human infection and the snail variables. Despite seasonal variations, natural infection persisted throughout the monitoring period in both snail species. It reached remarkably high levels in B. straminea when compared to those obtained by other authors probably because of differences in methodology. It is recommended that longitudinal studies should be carried out focally and periodically to avoid underestimating the prevalence of schistosome infection in snails.

Preliminary characterization of a Rhodnius prolixus hemolymph trypanolytic protein, this being a determinant of Trypanosoma rangeli KP1(+) and KP1(-) subpopulations' vectorial ability

Rhodnius prolixus is the main Trypanosoma rangeli vector in several Latin-American countries and is susceptible to infection with KP1(+) strains; however, it presents an invasion-resistant response to KP1(-) strains. The present work has identified a trypanolytic protein against T. rangeli KP1(-) in the R. prolixus hemolymph which was fractioned with ammonium sulfate (following dialysis). The results revealed a protein component which did not depend on divalent cations for its biological function whilst keeping its trypanolytic activity at temperatures ranging from -20ºC to 37ºC, at 7.0 to 10.5 pH. The protein was partially purified by gel filtration chromatography and ionic exchange chromatography. The major component presented a molecular weight of around 79 kDa and an isoelectric point between 4.9 and 6.3 and may be directly related to hemolymph trypanolytic activity against T. rangeli KP1(-) populations.

Fine structure of Henneguya hemiodopsis sp. n. (Myxozoa), a parasite of the gills of the Brazilian teleostean fish Hemiodopsis microlepes (Hemiodontidae)

A fish-infecting myxosporean, Henneguya hemiodopsis sp. n., found infecting the gills of Hemiodopsis microlepis and collected from the Poty River near the city of Teresina, Brazil, was described based on ultrastructural studies. The parasite occurred within large whitish polysporic plasmodia (up to 200 &#956;m in diameter) containing asynchronous developmental sporogonic stages, mainly mature spores. The spores measured 19.7 ± 0.9 &#956;m in total length (n = 30) and the ellipsoidal spore body was 10.8 ± 0.5 &#956;m long, 3.3 ± 0.4 &#956;m wide and 2.5 ± 0.5 &#956;m thick. The spores were composed of two equal shell valves adhering together along the straight suture line, with each valve having equal-sized caudal tapering tails measuring 8.7 ± 0.6 &#956;m in length. The spores were surrounded by a thin anastomosed network of microfibrils, more evident on the tails. There were two symmetric elongated bottle-like polar capsules 3.5 ± 0.3 &#956;m long and 1.0 ± 0.2 &#956;m wide, each with a polar filament with five to six coils. Given the morphological and ultrastructural differences from previously described parasites and the specificity of the host species, we propose a new species, named H. hemiodopsis sp. n.

Distribution of sibling species of Anopheles culicifacies s.l. and Anopheles fluviatilis s.l. and their vectorial capacity in eight different malaria endemic districts of Orissa, India

The study was undertaken in eight endemic districts of Orissa, India, to find the members of the species complexes of Anopheles culicifacies and Anopheles fluviatilis and their distribution patterns. The study area included six forested districts (Keonjhar, Angul, Dhenkanal, Ganjam, Nayagarh and Khurda) and two non-forested coastal districts (Puri and Jagatsingpur) studied over a period of two years (June 2007-May 2009). An. culicifacies A, B, C and D and An. fluviatilis S and T sibling species were reported. The prevalence of An. culicifacies A ranged from 4.2-8.41%, B from 54.96-76.92%, C from 23.08-33.62% and D from 1.85-5.94% (D was reported for the first time in Orissa, except for occurrences in the Khurda and Nayagarh districts). The anthropophilic indices (AI) were 3.2-4.8%, 0.5-1.7%, 0.7-1.37% and 0.91-1.35% for A, B, C and D, respectively, whereas the sporozoite rates (SR) were 0.49-0.54%, 0%, 0.28-0.37% and 0.41-0.46% for A, B, C and D, respectively. An. fluviatilis showed a similarly varied distribution pattern in which S was predominant (84.3% overall); its AI and SR values ranged from 60.7-90.4% and 1.2-2.32%, respectively. The study observed that the co-existence of potential vector sibling species of An. culicifacies (A, C and D) and An. fluviatilis S (> 50%) was responsible for the high endemicity of malaria in forested districts such as Dhenkanal, Keonjhar, Angul, Ganjam, Nayagarh and Khurda (> 5% slide positivity rate). Thus, the epidemiological scenario for malaria is dependent on the distribution of the vector sibling species and their vectorial capacity.

Myxidium volitans sp. nov., a parasite of the gallbladder of the fish, Dactylopterus volitans (Teleostei: Triglidae) from the Brazilian Atlantic coast: morphology and pathology

Myxidium volitans sp. nov. (Myxozoa: Myxidiidae) parasitizing the hypertrophied green-brownish gallbladder of the teleost Dactylopterus volitans, collected in the Atlantic coast near Niterói, Brazil was described based on ultrastructural studies. The spores were fusiform, sometimes slightly crescent-shaped on average 21.7 ± 0.3 µm (mean ± standard deviation) (n = 50) long and 5.6 ± 0.4 µm (n = 30) wide. The spore wall was thin and smooth, comprising two equally-sized valves joined by a hardly visible sutural ridge. Spores containing two pyriform polar capsules (PC) (5.0 ± 0.4 × 2.3 ± 0.3 µm) (n = 30) are situated in each extremity of the spore. The PC wall was composed of hyaline layer (0.20-0.29 µm thick) and by a thin external granular layer. Each PC contains a polar filament (PF) with irregular arrangements that was projected from its apical region to the bases of PC and coiled laterally from bases to the tip of PC. Some regular striations and S-like structures in the periphery of the PFs with four-five irregular sections were observed. Based on the spore morphology, ultrastructural differences and the specificity of the host we describe this parasite as a new myxosporidian, named M. volitans sp. nov.

Prevalência da incontinência anal na população urbana de Pouso Alegre - Minas Gerais

Os objetivos deste estudo foram conhecer a prevalência da incontinência anal (IA) em adultos da cidade de Pouso Alegre (Minas Gerais) e verificar os fatores demográficos e clínicos preditores de sua presença. Estudo epidemiológico desenvolvido por meio de amostragem estratificada por conglomerado, tendo amostra final composta de 519 indivíduos, com idade &gt;18 anos, em condições físicas e mentais adequadas, residentes em 341 domicílios da área urbana e sorteados aleatoriamente. As prevalências foram padronizadas por sexo e idade, resultando em 7,0% para IA, tanto geral como para homens e mulheres. No modelo final de regressão logística, número de filhos (OR=5,1; p<0,001), doença hemorroidária (OR=4,4; p<0,001) e cistocele (OR=3,0; p<0,001) estavam associados à presença de IA. O estudo permitiu conhecer a epidemiologia da IA e pode contribuir para o desenvolvimento de políticas públicas visando à prevenção primária e secundária, e ao tratamento, ainda que inicialmente em nível municipal.

Biologia e tabela de vida de fertilidade de Frankliniella occidentalis (Pergande) (Thysanoptera, Thripidae) em morangueiro

O objetivo deste trabalho foi estudar aspectos biológicos de Frankliniella occidentalis (Pergande) (Thysanoptera, Thripidae), considerando que no Brasil quase nada se sabe sobre a fauna de tripes associada à cultura do morangueiro. Larvas recém-eclodidas foram individualizadas em placas de Petri contendo uma flor ou um folíolo de morangueiro, mantidas em câmaras climatizadas (25 ± 1 ºC; 60 ± 10% U.R.; fotofase de 12 horas) e observadas diariamente até a morte. A duração média do período de larva-adulto e a viabilidade não diferiram entre os insetos mantidos em flores (8,49 ± 0,18 e 68,52%) e folíolos (8,85 ± 0,15 e 75,47%). A fecundidade média diária e a total foram mais elevadas quando flores foram fornecidas como alimento (7,4 ± 0,69 e 70,0 ± 9,18 ovos/fêmea respectivamente), em comparação com folíolos (2,4 ± 0,35 e 8,5 ± 1,13 ovos/fêmea, respectivamente). A duração média, em dias, do período embrionário foi distinta entre os indivíduos mantidos em flores (3,7 ± 0,03) e em folíolos (4,4 ± 0,09). A viabilidade dos ovos depositados sobre flores e folíolos foi de 65,5 ± 0,01 e 74,3 ± 0,03%, respectivamente. Com base na tabela de vida de fertilidade, o desempenho dos indivíduos de F. occidentalis que se desenvolveram em flores foi melhor, com uma geração (ovo-adulto) completada a cada 20,92 dias, a 25 °C.

Avaliação de critérios para calagem de arroz inundado em casa de vegetação

O presente trabalho foi desenvolvido, no período de maio a setembro de 1995, com o objetivo de avaliar critérios para a recomendação de calcário para o arroz em solos inundados de Minas Gerais. Foram avaliados os efeitos de doses crescentes de carbonatos de cálcio e de magnésio sobre a produção de matéria seca de plantas de arroz em casa de vegetação. O experimento constou de um fatorial completo com dez solos de várzeas e cinco níveis de calagem. Verificou-se que a acidez potencial (H + Al) a pH 7,0, a saturação por bases (V), o teor de carbono orgânico (C) e o teor de cálcio mais magnésio (Ca + Mg) foram as características dos solos que mais influenciaram as doses recomendáveis de calcário. Por outro lado, os teores de Fe e de Mn redutíveis do solo não tiveram influência significativa na recomendação de calagem. O método que visa elevar V a 40% foi mais eficiente na definição das doses recomendáveis para obtenção da matéria seca equivalente a 90% da máxima eficiência física.

Modificações em atributos químicos de solo arenoso sob sistema plantio direto

O manejo do solo sem as operações de lavração e gradagem não incorpora os resíduos culturais, fertilizantes e corretivos, alterando a distribuição e disponibilidade dos nutrientes. Este trabalho teve por objetivo avaliar as modificações químicas decorrentes da adoção do sistema plantio direto (SPD) comparativamente ao cultivo convencional (SCC) e ao campo nativo (CN). Em 1995, coletaram-se amostras de um Podzólico Vermelho-Amarelo textura arenosa/argilosa, em quatro profundidades (0-5, 5-10, 10-20 e 20-40 cm), num experimento instalado, em 1989, na Universidade Federal de Santa Maria (RS). Foi utilizado o delineamento em blocos ao acaso com parcelas subdivididas e quatro repetições. Determinaram-se o ponto de efeito salino nulo (PESN), as cargas permanentes, as substâncias húmicas, o pH em água, Al e Ca + Mg trocáveis, H + Al, N total e mineral, K da solução do solo, trocável e não-trocável, e P disponível, total e orgânico. Calcularam-se a CTC efetiva e a pH 7,0, a saturação por Al e por bases e a percentagem de P orgânico. Não houve variação no PESN em decorrência dos diferentes sistemas de manejo do solo. A adoção do SPD aumentou o teor de carbono orgânico, de ácidos fúlvicos e húmicos, CTC, disponibilidade de P e K e acidez potencial, especialmente na camada de 0-5 cm, comparativamente ao SCC.

Estimativa de H + AL pelo pH SMP em solos do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina

A capacidade de troca de cátions (CTC) e a proporção dos principais cátions retidos nas cargas negativas do solo são de grande importância para a caracterização química e para o diagnóstico da fertilidade do solo. Essas características, juntamente com o Al, o Ca e o Mg trocáveis, foram incluídas na análise de solo realizada pelos laboratórios oficiais do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina, a partir de 1994. Este trabalho avaliou a relação entre o valor de H + Al e o pH SMP, visando estabelecer uma equação para a estimativa do valor de H + Al (acidez potencial), o qual pode ser utilizado no cálculo da CTC (método da soma de cátions trocáveis). O trabalho foi realizado nos laboratórios de solos da Universidade de Passo Fundo (UPF) e da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), em 1995, constando da determinação do teor de H + Al, extraído com acetato de cálcio 1,0 mol L-1, pH 7,0, e do pH SMP em um grupo de 113 amostras de solo. Os resultados obtidos foram reunidos com os de outros pesquisadores, procedendo-se à análise de regressão para um conjunto de 250 amostras representativas de solos dos dois estados. Observou-se relação significativa entre o valor de H + Al e o pH SMP. Concluiu-se que as equações log (H + Al) = 3,9014 - 0,391 SMP (R² = 0,90) ou ln (H + Al) = 8,9832 - 0,9004 SMP (R² = 0,90), com os valores de H + Al expressos em mmol c dm-3, podem ser utilizadas para a estimativa do teor de H + Al pelo uso do pH SMP.

Método computacional para correção da alcalinidade de águas para fertirrigação

A alcalinidade excessiva das águas destinadas à fertirrigação pode criar uma série de inconvenientes, que vão desde o entupimento dos emissores, pela precipitação de carbonatos, até a redução da disponibilidade dos micronutrientes para as culturas. Com o propósito de auxiliar a tomada de decisão quanto ao manejo da alcalinidade dessas águas, desenvolveu-se o ALKA 1.0, um software em CLIPPER 5.2, que pode ser rodado em microcomputadores IBM-PC/XT/AT/PENTIUM ou outros 100% compatíveis. A partir do fornecimento do pH original da água de irrigação, da sua alcalinidade total ou subdividida em CO3(2-) e HCO3- (em mmol L-1), e da lâmina de irrigação utilizada durante o ciclo da cultura, o ALKA 1.0 fornece as quantidades de HCl, HNO3, H2SO4 e H3PO4 que devem ser adicionadas à água de irrigação para que o seu pH atinja o valor estipulado pelo usuário. Além do volume de cada ácido a ser adicionado, o programa fornece a quantidade de nutrientes introduzidas pelos ácidos, na dosagem recomendada, bem como o custo total de cada uma das possíveis escolhas. Para tal, cadastram-se, inicialmente, a densidade e a pureza (%p/p) de cada ácido, bem como seu custo por litro. O ALKA 1.0 oferece, ainda, a opção de adições mistas dos diversos ácidos, visando não só à remoção da alcalinidade excessiva da água, mas também a um balanço adequado à cultura em questão dos nutrientes (N, P, S) adicionados via ácido. Por fim, o ALKA 1.0 oferece a possibilidade de trabalhar-se com bancos de dados, pré-cadastrados, que contêm informações sobre as origens (localidades) e fontes (rios, poços, lagos, açudes e outros) de diversas águas, além do seu pH e alcalinidade total. Desta forma, podem-se conhecer as características de manejo da alcalinidade dessas águas em função de características definidas pelo usuário, tais como um município em particular, determinada fonte, pH, e outros. O ALKA 1.0 foi validado com uma mistura sintética de CO3(2-) e HCO3-, com pH 9,19, em que se verificou a eficiência dos cálculos efetuados para o abaixamento do pH para 7,0, 6,5 e 5,5; e com amostras de águas naturais, para o abaixamento do pH para 6,5 e 6,0; obtendo-se resultados bastante satisfatórios. A redução do pH das amostras naturais para 5,0 não foi eficiente.

Conseqüências de diferentes sistemas de preparo do solo sobre a contaminação do solo, sedimentos e água por metais pesados

Este trabalho teve por objetivos determinar a influência de diferentes métodos de preparo do solo sobre as perdas por erosão de metais pesados e avaliar a contaminação dos sedimentos e da água do córrego principal da microbacia de Caetés, município de Paty do Alferes (RJ). A avaliação foi realizada durante os meses de dezembro de 1996 a março de 1997, no ciclo de cultivo do pepino (Cucumis sativus L ). Foram utilizadas parcelas do tipo Wischmeier, de tamanho de 22,0 x 4,0 m. Os tratamentos utilizados foram os seguintes: (a) aração com trator morro abaixo e queimado (MAQ); (b) aração com trator morro abaixo não queimado com restos de vegetação natural entre as linhas (MANQ); (c) aração com tração animal em nível, faixas de capim-colonião a cada 7,0 m (AA), e (d) cultivo mínimo, com preparo de covas em nível (CM). Avaliaram-se também os teores desses metais nos sedimentos de fundo e na água do córrego principal que drena a microbacia de Caetés. As perdas mais elevadas de metais pesados por erosão foram verificadas no tratamento MAQ, típico da região. Os sedimentos e a água do córrego da microbacia de Caetés mostraram incrementos nos teores totais de Cd, Ni, Pb, Zn e Mn de acordo com a posição de coleta na área. A água coletada no córrego e no açude apresentou concentrações de Cd, Mn e Pb acima dos padrões máximos estabelecidos para água potável. Os resultados obtidos neste trabalho permitem concluir que o uso intensivo de agroquímicos e as elevadas perdas de solo por erosão podem acarretar sérios riscos de contaminação da água do córrego da microbacia que é utilizada pelos animais e para irrigação.

Efeito do pH na adsorção-dessorção de chumbo em Latossolos brasileiros

Reações de adsorção-dessorção de chumbo em solos são influenciadas por atributos de superfície dos colóides dos solos e pela composição da solução do meio. Este estudo avaliou o efeito do pH sobre a adsorção-dessorção de chumbo em Latossolos brasileiros. Amostras do horizonte A de cada solo, suspensas em Ca(NO3)2 5 mmol L-1, foram tituladas com HNO3 7 mmol L-1 ou solução saturada de Ca(OH)2, para que fosse atingido o valor de pH estipulado em cada experimento (4,5, 5,5 e 6,5). Atingido o pH de equilíbrio, as amostras foram equilibradas com Pb(NO3)2, com vistas em obter uma concentração final de 0,15 mmol L-1 (relação solo:solução 1:100; força iônica 15 mmol L-1), por um período de 72 h. A dessorção foi realizada em Ca(NO3)2 5 mmol L-1, pH 5,5. O aumento do pH de 4,5 para 6,5 causou aumento da adsorção de até 16,7 vezes, um aumento médio de 2,9 vezes de pH 4,5 para 5,5; 1,4 vez de pH 5,5 para 6,5 e 4,2 vezes de pH 4,5 para 6,5. A relação Pb adsorvido/Pb adicionado foi, em média, de 0,33 para pH 4,5; 0,75 para pH 5,5 e 0,94 para pH 6,5. A fração média de Pb dessorvido (Pb dessorvido/Pb adsorvido) decresceu de 0,36 a pH 4,5, para < 0,06 a pH 6,5. O efeito dos atributos do solo sobre a adsorção-dessorção de chumbo decresceu quando o pH aumentou, evidenciado por uma maior diferenciação na quantidade adsorvida pelos solos em valores mais baixos de pH. A adsorção de Pb foi positivamente correlacionada (e geralmente a fração dessorvida foi negativamente correlacionada) com área superficial específica, CTC a pH 7,0, teores de caulinita, hematita, Fe2O3 extraídos pelo ditionito-citrato-bicarbonato de sódio e oxalato ácido de amônio e SiO2 e Fe2O3 extraídos pelo ataque sulfúrico. O fato de considerável fração de chumbo permanecer adsorvida em pH 4,5 mostra a reduzida disponibilidade deste metal em Latossolos, mesmo em baixos valores de pH.