Suco de açaí (Euterpe oleracea Mart.): avaliação microbiológica, tratamento térmico e vida de prateleira

Um dos principais problemas enfrentados quando da elaboração do suco de açaí é a contaminação por microrganismos, oriundas de problemas técnicos e higiênico-sanitários durante o processamento. Objetivando a erradicação desta microbiota no suco de açaí foram testados os processos de pasteurização e fervura em diferentes temperaturas e tempos e avaliou-se a vida de prateleira. Os sucos foram armazenados sob congelamento a -18 ºC por 120 dias e avaliados mensalmente quanto às características microbiológicas e físico-químicas. Os resultados microbiológicos do açaí in natura demonstraram elevada contaminação por coliformes totais (> 100 NMP/ml) e fecais (> 110 NMP/ml), bolores e leveduras (> 300 UFC/ml). A pasteurização a 90ºC por cinco minutos e fervura por um minuto demonstraram eficiência na erradicação dos microrganismos, manutenção das características sensoriais e conservação do suco de açaí por 120 dias a -18 ºC.

Variação estacional da composição química-bromatológica, do teor de macronutrientes minerais e da digestibilidade "in vitro" do capim elefante (Pennisetum purpureum, Schum.) variedade napier

Com a finalidade de estudar alguns aspectos do valor nutritivo do capim elefante (Pennisetum purpureum, Schum.) variedade Napier, procurou-se, no presente trabalho, determinar os constituintes químico-bromatológicos e 6 macronutrientes minerais (nitrogênio, fósforo, cálcio, enxofre, potássio e magnésio), assim como estimar a digestibilidade "in vitro" da matéria seca e da celulose. A matéria seca, a proteína bruta, a fibra bruta e a cinza bruta foram determinadas pelos métodos descritos pela A.O.A.C. (1965), e a celulose pelo processo descrito por CRAMPTON e MAYNARD (1938). Dos macronutrientes minerais estudados, o cálcio, o potássio e o magnésio foram determinados por espectrofotometria de absorção atômica, o fósforo pelo processo do vanádio-molibdato de amônio, por digestão nítrico-perclórica, e o enxofre pelo método gravimétrico do bário. A digestibilidade "in vitro" da matéria seca e da celulose foi determinada por um período de 48 horas, utilizando-se fluido ruminal de carneiro, conforme o método descrito por CARVALHO (1967) e as modificações introduzidas por SILVEIRA (1970). Evidenciou-se a influência da maturidade sobre os constituintes químico-bromatológicos, os macronutrientes minerais e a digestibilidade "in vitro" do capim Napier. Os teores de materia seca, de fibra bruta e de celulose se elevaram e os teores de proteína bruta e cinza bruta decresceram com a maturidade da planta. Os teores de nitrogênio, fósforo, enxofre e potássio declinaram, os teores de magnésio mostraram tendência a se elevar e os teores de cálcio apresentaram constante variação com o avançar da idade da forrageira. A digestibilidade "in vitro" da matéria seca e da celulose foi influenciada negativamente pela maturidade da planta. Foram estabelecidas correlações entre os constituintes químico-bromatológicos e a digestibilidade "in vitro" e entre esta e os macronutrientes minerais.

Evidences of gentamicin resistance amplification in Klebsiella pneumoniae isolated from faeces of hospitalized newborns

The intestinal microbiota, a barrier to the establishment of pathogenic bacteria, is also an important reservoir of opportunistic pathogens. It plays a key role in the process of resistance-genes dissemination, commonly carried by specialized genetic elements, like plasmids, phages, and conjugative transposons. We obtained from strains of enterobacteria, isolated from faeces of newborns in a university hospital nursery, indication of phenothypical gentamicin resistance amplification (frequencies of 10-3 to 10-5, compatible with transposition frequencies). Southern blotting assays showed strong hybridization signals for both plasmidial and chromossomal regions in DNA extracted from variants selected at high gentamicin concentrations, using as a probe a labeled cloned insert containing aminoglycoside modifying enzyme (AME) gene sequence originated from a plasmid of a Klebsiella pneumoniae strain previously isolated in the same hospital. Further, we found indications of inactivation to other resistance genes in variants selected under similar conditions, as well as, indications of co-amplification of other AME markers (amikacin). Since the intestinal environment is a scenario of selective processes due to the therapeutic and prophylactic use of antimicrobial agents, the processes of amplification of low level antimicrobial resistance (not usually detected or sought by common methods used for antibiotic resistance surveillance) might compromise the effectiveness of antibiotic chemotherapy.

Good bug, bad bug: in the case of enteric inflammatory disease does the epithelium decide?

Many studies demonstrate that intestinal inflammation is either initiated or exaggerated by a component of the normal microbiota, most likely commensal bacteria or products derived from these organisms. We review the nature of human inflammatory bowel disease, the evidence for the involvement of the normal bacterial flora in these disorders and the relevance of maintaining the integrity of the epithelial barrier. Moreover, we, and others, have shown abnormal mitochondria structure in tissue resections from patients with inflammatory bowel disease and tissues from rodents that demonstrated psychological stress-induced increases in epithelial permeability. Thus, we also consider the possibility that a defect in epithelial mitochondrial function would predispose an individual to respond to their commensal bacteria flora - no longer considering them as a beneficial passive inhabitant, but rather perceiving them as a threatening and pro-inflammatory stimulus. In support of this postulate, we discuss our recent findings from an in vitro model showing that the human colon-derived T84 cell line exposed to the metabolic stressor, dinitrophenol, and the non-pathogenic, non-invasive, Escherichia coli (strain HB101) display a loss of barrier function, increased signal transduction and increased production of the chemokine, interleukin 8.

First isolation of microorganisms from the gut diverticulum of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae): new perspectives for an insect-bacteria association

We show for the first time that the ventral diverticulum of the mosquito gut (impermeable sugar storage organ) harbors microorganisms. The gut diverticulum from newly emerged and non-fed Aedes aegypti was dissected under aseptic conditions, homogenized and plated on BHI medium. Microbial isolates were identified by sequencing of 16S rDNA for bacteria and 28S rDNA for yeast. A direct DNA extraction from Ae. aegypti gut diverticulum was also performed. The bacterial isolates were: Bacillus sp., Bacillus subtilis and Serratia sp. The latter was the predominant bacteria found in our isolations. The yeast species identified was Pichia caribbica.

Biological activity of the mite Sancassania sp. (Acari: Acaridae) from bat guano associated with the pathogenic fungus Histoplasma capsulatum

Mites and the mammal pathogenic fungus Histoplasma capsulatum are the major components of bat guano microbiota. Interactions between mites and H. capsulatum were evaluated under laboratory conditions. Acarid mites, mainly Sancassania sp., were the most abundant microarthropod in the sampled guano of the Mexican bat Tadarida brasiliensis mexicana and, based on its morphology, Sancassania sp. was similar to the cosmopolitan species Sancassania sphaerogaster. The mycophagous and vectoring activities of this mite were tested for H. capsulatum and two other fungal species, Sporothrix schenckii (pathogenic) and Aspergillus sclerotiorum (non-pathogenic). S. ca. sphaerogaster was able to reproduce in H. capsulatum and S. schenckii colonies, multiplying in great numbers under controlled fungal mycelial-phase culture conditions. H. capsulatum colonies were completely destroyed after 14 days of in vitro interaction with mites. In contrast, S. ca. sphaerogaster did not reproduce in A. sclerotiorum cultures. S. ca. sphaerogaster was found vectoring H. capsulatum, but not the two other fungal species studied.

Behavioural responses to human skin extracts and antennal phenotypes of sylvatic first filial generation and long rearing laboratory colony Rhodnius prolixus

Chagas disease is a major public health issue and is mainly spread by Triatominae insects (Hemiptera: Reduviidae). Rhodnius prolixus is the main vector species in Northern South America. Host-seeking behaviour in R. prolixus is mediated by different compounds that are produced by and emanate from the host or microbiota on the host's skin. We tested the behavioural responses of sylvatic first filial generation (F1) and colony insects to extracts of human skin with a dual choice olfactometer. In addition, we compared the antennal phenotypes in both populations. No statistical differences were found between the two populations at the behavioural level. Both showed a preference for face and feet extracts and this effect was abolished for face extracts after treatment with an antibacterial gel. The observation of the antennal phenotype showed that there were differences between both groups in the total length, total surface area and number and density of bristles. However, the number and density of chemoreceptive sensilla (basiconic and thin and thick-walled trichoids) and the total density of sensilla did not show statistically significant differences. These results demonstrate that colony insects, which have only been fed with living hens for the last 30 years, are attracted by human skin extracts in a similar way as F1 sylvatic insects.

The persistence of multifocal colonisation by a single ABC genotype of Candida albicans may predict the transition from commensalism to infection

Candida albicans is a common member of the human microbiota and may cause invasive disease in susceptible populations. Several risk factors have been proposed for candidaemia acquisition. Previous Candida multifocal colonisation among hospitalised patients may be crucial for the successful establishment of candidaemia. Nevertheless, it is still not clear whether the persistence or replacement of a single clone of C. albicans in multiple anatomical sites of the organism may represent an additional risk for candidaemia acquisition. Therefore, we prospectively evaluated the dynamics of the colonising strains of C. albicans for two groups of seven critically ill patients: group I included patients colonised by C. albicans in multiple sites who did not develop candidaemia and group II included patients who were colonised and who developed candidaemia. ABC and microsatellite genotyping of 51 strains of C. albicans revealed that patients who did not develop candidaemia were multiply colonised by at least two ABC genotypes of C. albicans, whereas candidaemic patients had highly related microsatellites and the same ABC genotype in colonising and bloodstream isolates that were probably present in different body sites before the onset of candidaemia.

Cell vacuolation induced by Haemophilus influenzae supernatants in HEp-2 cells

Haemophilus influenzae belongs to respiratory tract microbiota. We observed vacuoles formation in previous studies with H. influenzae culture supernatants, so in this work we characterised that cytotoxic effect. We observed an abundant production of acidic cytoplasmic vacuoles due to the presence of a “vacuolating factor” in H. influenzae supernatants which was characterised as thermolabile. Greatest vacuolating activity was observed when utilizing the fraction > 50 kDa. The presence of a large number of vacuoles in HEp-2 cells was verified by transmission electron microscopy and some vacuoles were identified with a double membrane and/or being surrounded by ribosomes. These results suggest similar behaviour to that of vacuolating effects described by autotransporter proteins an undescribed cytotoxic effect induced by H. influenzae .

An overview of malaria transmission from the perspective of Amazon Anopheles vectors

In the Americas, areas with a high risk of malaria transmission are mainly located in the Amazon Forest, which extends across nine countries. One keystone step to understanding the Plasmodium life cycle in Anopheles species from the Amazon Region is to obtain experimentally infected mosquito vectors. Several attempts to colonise Ano- pheles species have been conducted, but with only short-lived success or no success at all. In this review, we review the literature on malaria transmission from the perspective of its Amazon vectors. Currently, it is possible to develop experimental Plasmodium vivax infection of the colonised and field-captured vectors in laboratories located close to Amazonian endemic areas. We are also reviewing studies related to the immune response to P. vivax infection of Anopheles aquasalis, a coastal mosquito species. Finally, we discuss the importance of the modulation of Plasmodium infection by the vector microbiota and also consider the anopheline genomes. The establishment of experimental mosquito infections with Plasmodium falciparum, Plasmodium yoelii and Plasmodium berghei parasites that could provide interesting models for studying malaria in the Amazonian scenario is important. Understanding the molecular mechanisms involved in the development of the parasites in New World vectors is crucial in order to better determine the interaction process and vectorial competence.

Degradação de ametrina em areia quartzosa com adição de solo rizosférico de cana-de-açúcar

Utilizando amostras de Areia Quartzosa esterilizada, não esterilizada e com adição de 10% de solo da rizosfera de cana-de-açúcar cultivada em campo, na presença e na ausência do herbicida ametrina, a biodegradação de 14C-ametrina foi avaliada juntamente com a quantidade de resíduos extraíveis, não-extraíveis e número de microrganismos presentes. A taxa de desprendimento de 14CO2 aumentou em 3,5 vezes, com adição de solo rizosférico de culturas previamente tratadas com o herbicida, em 1,7 vez, com a adição de solo de rizosfera de culturas não tratadas. A presença de metabólitos detectada por cromatografia de camada delgada revela a maior degradação nas amostras que tiveram a adição de solo rizosférico. A microbiota presente na rizosfera ocasionou maior mineralização do herbicida ametrina.

Redução química e biológica do cromo hexavalente aplicado ao solo

Realizou-se um experimento em laboratório, com o objetivo de avaliar não só a redução do cromo hexavalente aplicado ao solo com ênfase ao efeito da aplicação de carbono orgânico, manganês divalente, mas também a participação da microbiota do solo. Utilizaram-se, como unidades experimentais, amostras de 50 g de um Argissolo, acondicionadas em sacos de polipropileno e incubadas durante 42 dias com calcário para elevar o pH a 6,0 (2,0 t ha-1 de CaCO3 + MgCO3 na proporção de 2:1), Cr6+, esterco bovino e Mn2+ nas doses de 20, 50 e 40 mg kg-1, respectivamente. Metade das amostras foi sujeita à esterilização por autoclavagem com o objetivo de eliminar a atividade biológica. A aplicação de esterco bovino e sulfato de manganês promoveu a total redução do cromo hexavalente para cromo trivalente (Cr6+ → Cr3+) no solo, em 42 dias. Os modelos, quadrático e exponencial, foram os que melhor descreveram a cinética de redução com o tempo. A redução do Cr6+ foi estimulada pela atividade microbiana, sendo 16% maior em amostras de solo não esterilizadas, que continham esterco bovino, em comparação com as mesmas amostras esterilizadas por autoclavagem. Os resultados demonstraram que a descontaminação do solo que contém teores tóxicos de Cr6+ pode ser viabilizada tanto pela incorporação de adubo orgânico como pela manutenção de sua atividade biológica.

Atributos biológicos indicadores da qualidade do solo em sistemas de manejo na região do cerrado no sul do estado de Goiás

O estudo da quantidade e da atividade da biomassa microbiana pode fornecer subsídios importantes para o planejamento do uso correto da terra, considerando a natureza dinâmica dos microrganismos do solo. Este trabalho objetivou verificar alterações em atributos biológicos indicadores da qualidade do solo na adoção de sistemas de manejo em áreas originalmente sob cerrado nativo, e selecionar os atributos com melhor desempenho em indicar tais alterações. Amostras de solo foram coletadas em três profundidades (0-10, 10-20 e 20-40 cm) em Latossolo Vermelho distrófico típico textura argilosa no município de Morrinhos (GO). Foram selecionadas cinco propriedades agrícolas, baseadas na sua representatividade para a região com relação ao histórico de uso e às características dos sistemas de manejo adotados. Estes consistiram de: cerrado nativo, pastagem, plantio direto, plantio direto com histórico de gradagem superficial, plantio convencional de longa duração e plantio convencional recente após pastagem. O cerrado nativo foi tomado como referência, uma vez que todos os sistemas foram instalados em área originalmente de cerrado. Foram avaliados: carbono da biomassa microbiana (Cmic), respiração basal, quociente metabólico (qCO2) e relação Cmic/CO. Em adição, foram avaliados o carbono orgânico total (CO) e alguns atributos de fertilidade do solo. A adoção dos sistemas agrícolas e da pastagem reduziu os teores de Cmic na camada superficial, em relação ao cerrado nativo. Excetuando o sítio sob cerrado, o maior valor de Cmic foi observado na pastagem e o menor no plantio convencional de longa duração. Não foram observadas diferenças significativas entre os sistemas de manejo para respiração basal e qCO2. O Cmic indicou alterações significativas na instalação de sistemas de manejo em relação ao cerrado nativo e, embora tenha apontado diferenças apenas entre dois dos cinco sistemas cultivados, foi indicativo de maior equilíbrio da microbiota do solo no cerrado.

Comportamento do diclosulam em amostras de um latossolo vermelho distroférrico sob plantio direto e convencional

O objetivo deste estudo foi verificar a dissipação, efeito na microbiota e sorção/dessorção do 14C-diclosulam num Latossolo Vermelho distroférrico cultivado há 10 anos sob plantio direto (PD) ou convencional (PC). Foram realizados três ensaios paralelos: dissipação, sorção/dessorção, atividade microbiana. Nos ensaios de dissipação e sorção/dessorção, os tratamentos consistiram na aplicação de diclosulam a amostras de solo oriundas de dois sistemas de preparo de solo; no experimento de atividade microbiana, testou-se a aplicação ou não do herbicida em amostras dos dois sistemas. O ensaio de dissipação foi realizado em frascos de Bartha, com avaliação semanal da mineralização do herbicida por radiorrespirometria. Nos mesmos períodos de avaliação, em outros frascos, foram extraídos o herbicida e seus metabólitos e, subseqüentemente, foi quantificada a fração remanescente no solo (fração resíduo ligado) após oxidação em oxidador biológico. A atividade microbiana do solo foi avaliada por meio da técnica da 14C-glicose. Nas isotermas de sorção/ dessorção, utilizaram-se cinco concentrações do herbicida e quatro dessorções para cada concentração. O sistema plantio direto acelerou a dissipação do diclosulam no solo, conforme a maior atividade microbiana, e a maior formação de resíduo ligado, relativamente ao sistema convencional. A extração do herbicida diminuiu com o tempo, graças à metabolização e ao aumento na formação da fração resíduo ligado. O diclosulam apresentou baixa taxa de sorção, independentemente do sistema de manejo. A aplicação do diclosulam não interferiu na atividade microbiana do solo. O sistema de manejo interferiu na dissipação do diclosulam no solo.

Atributos físicos, químicos e biológicos relacionados com a estabilidade de agregados de dois latossolos em plantio direto no Estado de São Paulo

Com o objetivo de verificar a influência de atributos físicos, químicos e biológicos na estabilidade de agregados em água de dois Latossolos sob plantio direto há mais de quatro anos, foi amostrada a camada de 0-10 cm de duas áreas, utilizando uma grade de amostragem de 100 m entre pontos, georreferenciados com DGPS. Uma das áreas está localizada no município de Campos Novos Paulista, SP (22 º 36 ' 11 " latitude e 50 º 00 ' 09 " longitude) em um Latossolo Vermelho distrófico típico álico textura média A moderado (LVd-CNP), e a outra se localiza no município de Angatuba, SP (23 º 29 ' 23 " latitude e 48 º 24 ' 46 " longitude), em Latossolo Vermelho distrófico típico álico textura argilosa A moderado (LVd-Anga). Os valores do diâmetro médio ponderado (DMP) e dos atributos físicos, químicos e biológicos foram analisados mediante regressões lineares múltiplas, em pré-tratamentos com água, álcool e benzeno. Os resultados mostraram que a matéria orgânica, a comunidade bacteriana e os teores de Fe, de K e de argila foram os principais agentes agregantes. Em áreas com baixos teores de argila e altos teores de areia fina, baixos índices de estabilidade foram encontrados. Mesmo estando sob plantio direto há mais de quatro anos, o LVd-CNP mostrou índices de estabilidade de agregados muito baixos, graças, principalmente, ao seu alto conteúdo de areia fina. Em relação ao LVd-CNP, o LVd-Anga apresentou índices de agregação mais elevados, principalmente por causa do alto teor de argila e maior quantidade de matéria orgânica.