TESTING A SUBTYPE-SPECIFIC GP41 AMPLIFICATION METHOD FOR GENOTYPING INDIVIDUALS INFECTED BY HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS TYPE-1 IN THE BRAZILIAN POPULATION OF ITAJAÍ, SOUTH BRAZIL

The method used by YAGYU et al. for the subtype-specific polymerase chain reaction (PCR) amplification of the gp41 transmembrane region of the human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) env gene, was tested. HIV-1 proviral DNA from 100 infected individuals in Itajaí, South Brazil was used to analyze this method. Seventy individuals were determined according to this method as having PCR products at the expected size for subtypes B, C, D and F. Of these individuals, 26 (37.1%) were observed as having the expected amplification for subtype C, and 42 (60%) were observed as having the expected products for subtypes B and D. Of the subtype B and D amplicons, 16 (22.9%) were classified as subtype D, and 26 (37.1%) were classified as subtype B. Two individuals (2.9%) had amplicons that were observed after subtype F-specific amplification was performed. Sequencing and comparing the patient sequences to reference sequences confirmed the classification of sequences of subtypes C and B. However, sequences that were falsely determined as being D and F in the PCR assay were determined as being subtypes C and B, respectively, by sequence analysis. For those individuals from whom no amplified products were obtained, a low viral load that was indicated in their patient history may explain the difficulty in subtyping by PCR methods. This issue was demonstrated by the results of ANOVA when testing the effect of viral load on the success of PCR amplification. The alignment of the obtained sequences with HIV-1 reference sequences demonstrated that there is high intra-subtype diversity. This indicates that the subtype-specific primer binding sites were not conserved or representative of the subtypes that are observed in the Brazilian populations, and that they did not allow the correct classification of HIV-1 subtypes. Therefore, the proposed method by YAGYU et al. is not applicable for the classification of Brazilian HIV-1 subtypes.

VIROLOGICAL AND SEROLOGICAL DIAGNOSIS OF RABIES IN BATS FROM AN URBAN AREA IN THE BRAZILIAN AMAZON

The outbreaks of rabies in humans transmitted by Desmodus rotundus in 2004 and 2005, in the northeast of the Brazilian State of Para, eastern Amazon basin, made this a priority area for studies on this zoonosis. Given this, the present study provides data on this phenomenon in an urban context, in order to assess the possible circulation of the classic rabies virus (RABV) among bat species in Capanema, a town in the Amazon basin. Bats were collected, in 2011, with mist nets during the wet and dry seasons. Samples of brain tissue and blood were collected for virological and serological survey, respectively. None of the 153 brain tissue samples analyzed tested positive for RABV infection, but 50.34% (95% CI: 45.67-55.01%) of the serum samples analyzed were seropositive. Artibeus planirostris was the most common species, with a high percentage of seropositive individuals (52.46%, 95% CI: 52.31 52.60%). Statistically, equal proportions of seropositive results were obtained in the rainy and dry seasons (c2 = 0.057, d.f. = 1, p = 0.88). Significantly higher proportions of males (55.96%, 95% CI: 48.96-62.96%) and adults (52.37%, 95% CI: 47.35-57.39%) were seropositive. While none of the brain tissue samples tested positive for infection, the high proportion of seropositive specimens indicates that RABV may be widespread in this urban area.

HIGH PREVALENCE OF Blastocystis spp. INFECTION IN CHILDREN AND STAFF MEMBERS ATTENDING PUBLIC URBAN SCHOOLS IN SÃO PAULO STATE, BRAZIL

After a gastroenteritis outbreak of unknown etiology in the municipality ofSebastião da Grama, SãoPaulo, Brazil, we conducted a parasitological survey to establish the epidemiological profile of enteroparasitosis in children and staff members attending the public urban schools in operation in town. The cross-sectional study evaluated 172 children aged 11 months to 6 years old and 33 staff members aged 19 to 58 years old. Overall, 96 (55.81%) children and 20 (60.61%) staff members were mono-parasitized, while 58 (33.72%) children and 4 (12.12%) workers were poly-parasitized. Protozoa (88.37%; 72.73%) was more prevalent than helminthes (3.48%; 0%) in children and staff members respectively.Blastocystis spp. was the most prevalent parasite in children (86.63%) and staff members (66.67%). The age of 1 year old or less was found to be associated with increased prevalence of giardiasis [OR = 13.04; 95%CI 2.89-58.91; p = 0.00] and public garbage collection was identified as a protective factor against intestinal helminth infections [OR = 0.06; 95%CI 0.00-0.79; p = 0.03]. Although most of the children tested positive for Blastocystis spp. and also presented clinical signs/symptoms (62.2%), this association was not statistically significant [OR = 1.35; 95%CI 0.53-3.44; p = 0.51]. Intestinal parasites still represent a public health concern and this study underscores the importance of further investigations to better understand the pathogenic role ofBlastocystis spp.

Prevalência de esofagopatia chagásica no Município de Mambaí, Goiás - Brasil

Em Mambaí, área endêmica de doença de Chagas, foram realizadas abreugrafias do esôfago com filme de 70mm, em 1.145 indivíduos do sexo masculino e 1.184 dofeminino, de 4 a 87 anos, dos quais 1.006eram soropositivos. Os pacientes foram posicionados em oblíqua anterior direita e tomadas duas abreugrafias: uma imediatamente à ingestão de 75 ml de suspensão baritada e outra 60 segundos após. Setenta e seis (3,2%) indivíduos apresentaram esofagopatia, sendo que 71(7%) entre os 1.006 soropositivos e, 5(0,37%) entre os 1.323 soronegativos. Dos 76 esofagopatas 47(61,8%) eram do sexo masculino e 29(38,1%) do sexo feminino. Segundo a classificação de Rezende e cols 48(63,1%) pertenciam ao grupo I, 18(23,7%) ao grupo II, 5(6,6%) ao grupo III e 5(6,6%) ao grupo IV. Entre os infectados a esofagopatia aumentou progressivamente com a idade, principalmente a partir dos 30 anos, alcançando a prevalência de 21,5% após os 59 anos.

Parasitemia em pacientes chagásicos crônicos avaliada pelo indice de triatomíneos infectados no xenodiagnóstico

Como parte de um estudo pré-terapêutico da infecção chagásica crônica, a parasitemia de 206pacientes (85 homens e 121 mulheres, com idades de 7 a 80 anos, média de 37,4 ± 14,6) do município de Virgem da Lapa, Minas Gerais, foi avaliada pelo índice de ninfas de triatomíneos infectadas nos xenodiagnósticos aplicados. Cada paciente foi submetido a três exames no período de 12 meses. Em cada exame foram aplicadas 40 ninfas de 3.° ou 4.° estádios de Triatoma infestans. A parasitemia de cada paciente foi classificada arbitrariamente, de acordo com o percentual de ninfas positivas no total de examinadas nos três xenos, em: não detectada - todas as ninfas negativas; baixa - quando o valor era maior que zero ou até igual a 2,0%; média - quando maior que 2,0% ou até igual a 7,0%; e alta- quando era maior que 7,0%. Com esses critérios a parasitemia não foi detectada em 105 (51,0%) pacientes, foi baixa em 55 (26,7%), média em 27 (13,1%) e alta em 19 (9,2%). Não houve diferença nos níveis da parasitemia em relação ao sexo dos pacientes, mas em relação aos grupos etários foi maior a freqüência da parasitemia baixa no grupo de 60 ou mais anos. A parasitemia alta foi mais freqüente no grupo de pacientes com cardiopatia crônica chagásica. A "parasitemia persistente" (todos os xenopositivos) foi observada em todos os pacientes com parasitemia alta, em 22,2% dos que apresentaram parasitemia média e em nenhum com parasitemia baixa.

O xenodiagnóstico na doença de Chagas: influência do sexo dos triatomíneos

Foi avaliado, comparativamente, o desempenho de fêmeas e machos de Triatoma infestans, em 5º estádio de desenvolvimento, em xenodiagnósticospara a tripanossomiase americana. Estes exames foram realizados em 40 pacientes, em fase crônica da doença de Chagas. Em cada exame utilizou-se 20 ninfas fêmeas e 20 ninfas machos, que foram pesadas imediatamente antes e após o repasto. O exame individual do conteúdo intestinal dos triatomíneos foi efetuado aos 20, 30, 60 e 90 dias após a aplicação dos xenodiagnósticos. As ninfas fêmeas e machos, ingeriram, em média, 230 e210 mg de sangue, respectivamente. Os resultados revelaram 15 (37,5%) xenodiagnósticos positivos; todavia, em nenhum destes exames foi verificada positivação, para T. cruzi, de todas as ninfas utilizadas. As ninfas fêmeas ingeriram significativamente mais sangue que as ninfas machos, isto vem de encontro com as observações de maior positividade, para T. cruzi entre as fêmeas, sugerindo, serem estas ninfas capazes de possibilitar maior incremento à sensibilidade do xenodiagnóstico na fase crônica da doença de Chagas, sendo necessários novos estudos para confirmação desta hipótese.

Resultados preliminares de um projeto sobre a ecologia dos flebotomineos vetores de leishmaniose tegumenar no estado da Bahia

São apresentados resultados preliminares de um projeto sobre a ecologia dos flebotomíneos, vetores de leishmaniose tegumentar, numa área de plantação de cacau no sul do Estado da Bahia, Brasil. Nesta área existem 60 casas, afastadas entre si, onde vivem 229 habitantes e 31 cães. Entre os moradores, 45% tinham reação de Montenegro positiva; destes, 8,8% eram portadores de úlceras em atividade e 37% de cicatrizes de úlceras. Dos cães, 22% eram soropositivos. Dos 7 cães com úlceras, apenas 3 eram soropositivos. Em 14% das casas inspecionadas, foram encontrados flebótomos. Durante dois anos, 72 hamsters foram mantidos como sentinelas em casas de pacientes com úlceras leishmanióticas, porém nehum adquiriu a infecção. Foram coletados e identificados 5.614 exemplares de flebótomos pertencentes a 14 diferentes espécies. Entre estas, Lutzomyia whitmani (92%) e Lutzomyia intermedia (4,8 %) eram as espécies mais abundantes. Esses flebótomos, muito antropofílicos, podiam ser encontrados dentro das casas e nas suas periferias e são provavelmente, os principais vetores da doença no ambiente doméstico. As outras 12 espécies eram menos frequentes e mais encontrados em ambientes silvestres, onde também picavam o homem. A maioria das espécies começava a aparecer às 17 horas, no crepúsculo, e alcançava sua densidade máxima às 24 horas, quando declinava até desaparecer às 6 horas da manhã. L. whitmani em todas as fases lunares foi capturada com a mesma densidade, enquanto L.intermedia foi mais abundante durante a fase de lua nova. Centenas de flebótomos coletados mensalmente durante o segundo ano de observações, permanecem preservados em nitrogênio líquido, aguardando o ajustamento de técnicas de PCR para a verificação da taxa de infecção natural desses vetores por leishmânia. Os resultadosfinais de todo o projeto serão publicados tão logo seja examinado esse material.

Aleitamento e parasitismo intestinal materno-infantil

Entre março e maio de 1991, a prevalência das enteroparasitoses e o aleitamento materno foram determinados simultaneamente em 208 crianças menores de dois anos de idade e suas mães, atendidas em Instituição Pública de Saúde no Rio de Janeiro. Através da técnica de sedimentação, detectou-se positividade geral de 12,7% para as crianças, e 37,3% para as mães. Ascaris lumbricoides foi o parasito mais prevalente nas mulheres (12,7%) e nos lactentes (4,3%). A distribuição dos parasitos entre os grupos de aleitamento não variou para as mulheres, mas foi estatisticamente significativa em relação às crianças (p < 0,05). Nenhuma criança em aleitamento exclusivo apresentou parasitose. Verificou-se correlação positiva entre parasitismo e desmame. Cerca de 60% das crianças parasitadas eram filhas de mães também parasitadas, sendo detectado um risco 1,7 vezes maior destas crianças virem a apresentar algum parasito intestinal. Acreditamos que a mãe parasitada possa influenciar na freqüência do parasitismo infantil.

Identificação de ponto de corte no nível sérico da alanina aminotransferase para rastreamento da hepatite C em pacientes com insuficiência renal crônica em hemodiálise

Pacientes com insuficiência renal crônica em hemodiálise apresentam níveis séricos mais baixos de alanina aminotransferase. Para estabelecer melhor ponto de corte nos níveis de ALT, no diagnóstico da hepatite C, avaliaram-se mensalmente, durante 6 meses os níveis desta enzima em 235 pacientes em hemodiálise, sendo excluídos aqueles que apresentassem média acima do limite superior da normalidade. O ponto de corte foi identificado através da construção de curva ROC. Entre 202 pacientes, 15 (7,4%) apresentavam anti-VHC positivo e 187 (92,6%) negativo, com média de ALT de 0,7 e de 0,5 do limite superior (p < 0,0001), respectivamente. O ponto de corte para ALT situou-se em 0,6 do limite superior, com sensibilidade de 67% e especificidade de 75% na identificação do anti-VHC. Sugere-se que os limites superiores de normalidade da ALT sejam reduzidos para 60% dos limites convencionais, quando se avaliam pacientes com IRC em hemodiálise.

Efeitos da ciclosporina A e betametasona na toxocaríase murina experimental

Estudou-se o efeito de ciclosporina A ou betametasona em camundongos experimentalmente infectados por larvas de Toxocara canis administrados 15 dias antes ou 45 dias após infecção por esse ascarídeo. Nos animais infectados determinou-se a cinética da resposta humoral por IgG 60 e 90 dias após infecção por meio de pesquisa de anticorpos anti-Toxocara, utilizando teste imunoenzimático, em amostras de sangue obtidas por punção do plexo orbitário. No 90º dia após a infecção todos os animais sobreviventes foram sacrificados e submetidos a digestão ácida da carcaça, pulmões, fígado e cérebro para recuperação de larvas de Toxocara canis encistadas nesses órgãos. Observou-se retardo na produção de anticorpos IgG anti-Toxocara nos animais tratados com ciclosporina A ou betametasona 15 dias antes da infecção, além de aumento significativo na quantidade de larvas de Toxocara canis recuperadas no grupo de animais que foi tratado com ciclosporina A 15 dias antes da infecção pelo ascarídeo.

Doenças infecciosas como causas de morte em idosos autopsiados

O envelhecimento populacional no Brasil está associado às alterações na morbimortalidade da população. Nesse estudo, foi verificado as causas de morte e outros processos patológicos em idosos autopsiados. Os idosos com idade maior ou igual a 60 anos, no período de 1976 a 1998 representaram 394 casos (24,4%). A mediana da idade foi 69 (60 a 120) anos, sendo maior nas mulheres (70,5 versus 68 anos; p<0,05). O sexo masculino (67,5%), a cor branca (69,8%) e as causas de morte cardiovascular (43,7%) e infecciosa (31%) prevaleceram. A subnutrição (76,2%) estava associada à pneumonite e cistite, (p<0,05). A arteriosclerose (61,9%) e as cardiopatias chagásica (42,1%) e hipertensiva (39,1%) foram os processos mais freqüentes. Portanto, foi observado sobreposição das causas de morte crônico-degenerativas e infecciosas. Isso demonstra a necessidade de valorizar medidas como o acompanhamento do índice de massa corporal e dos fatores de risco para o desenvolvimento de doenças no envelhecimento, como a pneumonite.

Characteristics of pulmonary tuberculosis in HIV seropositive and seronegative patients in a Northeastern region of Brazil

The aim of this study was to analyse the clinical, epidemiological and bacteriological features present in 60 pulmonary tuberculosis patients who were also infected with human immunodeficiency virus (HIV) and to compare these with 120 TB patients who were not infected with HIV. The patients with pulmonary tuberculosis and HIV coinfection were mostly male (p = 0.001), showed a higher frequency of weight loss >10 kilos (p <0.001), had a higher rate of non-reaction result to the tuberculin skin test (p <0.001), a higher frequency of negative sputum smear examination for acid-fast bacilli (p = 0.001) and negative sputum culture for Mycobacterium tuberculosis (p = 0.001). Treatment failure was more common in those who were HIV positive (p <0.000). No higher frequency of resistance to antituberculosis drugs was found to be associated with TB/HIV coinfection (p = 0.407). Association between extrapulmonary and pulmonary tuberculosis was more frequent in those seropositive to HIV than those without HIV virus, 30% and 1.6% respectively. These findings showed a predominance of atypical clinical laboratory features in co-infected patients, and suggest that health care personnel should consider the possibility this diagnosis.

Adiaspiromicose humana: lesões cicatriciais em linfonodos do mediastino

Em paciente de 60 anos, sexo masculino, com diagnóstico radiográfico de massa tumoral no pulmão direito - depois reconhecida, por meio de biópsia transbrônquica, como de natureza maligna -, não se descobriu qualquer evidência tomográfica de metástases a distância. Resolveu-se então, para fins de estadiamento da neoplasia, obter material de linfonodos mediastinais. O exame microscópico desse material não demonstrou invasão neoplásica, mas revelou a presença de granulomas em avançado estádio de fibrose, contendo raras estruturas redondas, vazias, de parede espessa e, quase sempre, colapsada, que foram reconhecidas como adiaconídios de Emmonsia crescens. Havia ainda, nos cortes histológicos, grande quantidade de pigmento antracótico.

Experimental schistosomiasis in the Common Marmoset Callithrix jacchus

In order to evaluate Callithrix jacchus as an animal model for mansoni schistosomiasis, a group of 10 male animals were once percutaneously exposed to 250 cercariae of the Schistosoma mansoni SLM (São Lourenço da Mata) strain. Animals were periodically bled for measuring serum level of enzymes and proteins and for blood cell counting. When comparing pre-infection to post-infection values, a significant increase was found for alkaline phosphatase at 15 to 120 days p.i., differential counts of eosinophil at 45 and 60 days, and total protein and global eosinophil counts at 120 days. No Schistosoma mansoni eggs were found in stools. Adult worms of small size were recovered from five animals. At day 120, the number of Schistosoma mansoni eggs/g of tissue was 0-289.7 (liver), 0-30.1 (large intestine) and 0-171.4 (small intestine). These findings lead us to classify Callithrix jacchus as a non-permissive host to the SLM strain of Schistosoma mansoni.

Histoplasmose disseminada e SIDA: importância do meio de cultivo para o espécime clínico-broncoscópico

A fibrobroncoscopia é um procedimento útil no diagnóstico da histoplasmose, quando o material clínico é processado adequadamente. São apresentados dez casos de histoplasmose disseminada em pacientes com SIDA, com avaliação micológica em cultivo, nos meios Mycosel® e ágar-Sabouraud cloranfenicol de espécimes clínicos colhidos por fibrobroncoscopia. A positividade do cultivo em Mycosel® foi de 60%, enquanto no ágar-Sabouraud cloranfenicol foi de 20%, evidenciando a importância do meio seletivo no isolamento do Histoplasma capsulatum var capsulatum de espécimes clínicos potencialmente contaminados, bem como a importância das informações clínicas para o laboratório, sendo esta a chave para o diagnóstico correto.