Importância da interação entre a integrina Mac-1 dos leucócitos e a glicoproteína Iba das plaquetas para o recrutamento de leucócitos pelas plaquetas e para a resposta inflamatória à lesão vascular

OBJETIVO: Avaliar a importância da interação entre a integrina Mac-1 dos leucócitos (a Mb 2) e a glicoproteína (GP) Iba das plaquetas para o recrutamento de leucócitos após a lesão vascular e o efeito da neutralização da interação Mac-1-GPIba sobre a proliferação celular e a hiperplasia neointimal desencadeadas por lesão vascular. MÉTODOS: Um peptídeo denominado M2 ou anticorpo anti-M2 foi desenvolvido para bloquear a interação Mac-1-GPIba . Esse peptídeo foi injetado e comparado com anticorpo-controle em camundongos C57B1/6J submetidos a lesão vascular da artéria femoral com corda-guia. Um, cinco ou 28 dias após a lesão vascular, as artérias femorais foram retiradas para a realização de morfometria e imuno-histoquímica. RESULTADOS: O bloqueio da interação Mac-1-GPIba promoveu uma redução estatisticamente significativa do número de leucócitos na camada média no primeiro dia após a lesão vascular (controle: 7,9±5,0% do total de células versus anti-M2: 2,0±1,6%, p=0,021), bem como determinou uma diminuição estatisticamente significativa do acúmulo de leucócitos na neoíntima em cinco e 28 dias (controle: 42,3±12,9% versus anti-M2: 24,6±10,8%, p=0,047 e controle: 7,9±3,0% versus anti-M2: 3,3±1,3%, p=0,012; respectivamente). A proliferação celular na camada média do vaso em cinco dias pós-lesão foi reduzida com o bloqueio da interação Mac-1-GPIba (controle: 5,0±2,9% do total de células versus anti-M2: 1,8±0,5%; p=0,043), assim como houve diminuição significativa da proliferação celular na camada íntima do vaso em 28 dias (controle: 3,8±1,7% versus anti-M2: 2,0±1,2%; p=0,047). O bloqueio da interação Mac-1-GPIba também determinou uma redução estatisticamente significativa do espessamento intimal em 28 dias pós-lesão (controle: 10.395±3.549 µm² versus anti-M2: 4.561±4.915 µm²; p=0,012). CONCLUSÃO: O recrutamento de leucócitos após a lesão vascular é dependente da interação Mac-1-GPIba e a neutralização dessa interação inibe a proliferação celular e a formação neointimal.

Medidas morfofuncionais do coração obtidas por ressonância magnética em brasileiros

FUNDAMENTO: Medidas ainda hoje utilizadas como referência na ressonância magnética cardíaca foram obtidas principalmente de estudos realizados em populações norte-americanas e europeias. OBJETIVO: Obter medidas do diâmetro diastólico, diâmetro sistólico, volume diastólico final, volume sistólico final, fração de ejeção e massa miocárdica dos ventrículos esquerdo e direito em brasileiros. MÉTODOS: Foram submetidos à ressonância magnética cardíaca, utilizando técnica de precessão livre em estado de equilíbrio, 54 homens e 53 mulheres, com idade média de 43,4 ± 13,1 anos, assintomáticos, sem cardiopatias. RESULTADOS: As médias e os desvios padrão dos parâmetros do ventrículo esquerdo foram: diâmetro diastólico = 4,8 ± 0,5 cm; diâmetro sistólico = 3,0 ± 0,6 cm; volume diastólico final = 128,4 ± 29,6 mL; volume sistólico final = 45,2 ± 16,6 mL; fração de ejeção = 65,5 ± 6,3%; massa = 95,2 ± 30,8 g. Para o ventrículo direito, foram: diâmetro diastólico = 3,9 ± 1,3 cm; diâmetro sistólico = 2,5 ± 0,5 cm; volume diastólico final = 126,5 ± 30,7 mL; volume sistólico final = 53,6 ± 18,4 mL; fração de ejeção = 58,3 ± 8,0% e massa = 26,1 ± 6,1 g. As massas e os volumes foram significativamente maiores nos homens, exceto para o volume sistólico final do ventrículo esquerdo. A fração de ejeção do ventrículo direito foi significativamente maior nas mulheres. Houve correlação significativa e inversa do volume sistólico do volume direito com o aumento da idade. CONCLUSÃO: Este estudo descreveu, pela primeira vez, medidas cardíacas obtidas pela ressonância magnética cardíaca em brasileiros assintomáticos, sem cardiopatias, mostrando diferenças de acordo com o gênero e a idade.

Hipometilação do LINE-1 está Associada ao Risco de Doença Cardíaca Coronariana na População Chinesa

Fundamentos: O nível de metilação global do ADN de leucócitos no sangue tem sido associado ao risco de doença arterial coronariana (DAC), com resultados inconsistentes em diferentes populações. Faltam dados semelhantes da população chinesa, onde diferentes fatores genéticos, de estilo de vida e ambientais podem afetar a metilação do ADN e sua relação com o risco de DCC. Objetivos: Analisar se a metilação global está associada ao risco de doença coronariana na população chinesa. Métodos: Foram incluídos um total de 334 casos de DCC e 788 controles saudáveis. A metilação global do ADN de leucócitos de sangue foi estimada por meio da análise das repetições do LINE-1 usando pirosequenciamento de bissulfito. Resultados: Em uma análise inicial restrita aos controles o nível do LINE-1 diminui significativamente com a idade avançada, colesterol total elevado, e diagnóstico de diabetes. Na análise de caso-controle, a redução da metilação do LINE-1 foi associada ao aumento do risco de DCC, tendo a análise por quartil revelado uma odds ratio (IC 95%) de 0,9 (0,6-1,4), 1,9 (1,3-2,9) e 2,3 (1,6 3.5) para o terceiro, segundo e primeiro (o mais baixo) quartil (P da tendência < 0,001), respectivamente, em comparação com o quarto (o mais alto) quartil. A metilação inferior (< mediana) do LINE-1 esteve associada a 2,2 vezes (IC 95% = 1,7-3,0) o aumento de risco de doença coronariana. As estimativas de risco de DCC menores relacionadas com o LINE-1 tenderam a ser mais fortes entre os indivíduos com maior tercil de homocisteína (P interação = 0,042) e naqueles com diagnóstico de hipertensão arterial (P interação = 0,012). Conclusão: A hipometilação do LINE-1 está associada ao risco de doença coronariana na população chinesa. Fatores de risco de DCC potenciais tais como a idade avançada, colesterol total elevado, e diagnóstico de diabetes podem ter impacto na metilação global do ADN, exercendo, portanto, o seu efeito sobre o risco de doença coronariana.

Combination Therapy for the Cardiovascular Effects of Perinatal Lead Exposure in Young and Adult Rats

Background: Combination therapy can play a significant role in the amelioration of several toxic effects of lead (Pb) and recovery from associated cardiovascular changes. Objective: To investigate the effects of combination therapy on the cardiovascular effects of perinatal lead exposure in young and adult rats Methods: Female Wistar rats received drinking water with or without 500 ppm of Pb during pregnancy and lactation. Twenty-two- and 70-day-old rat offspring who were or were not exposed to Pb in the perinatal period received meso-dimercaptosuccinic acid (DMSA), L-arginine, or enalapril and a combination of these compounds for 30 additional days. Noradrenaline response curves were plotted for intact and denuded aortas from 23-, 52-, 70-, and 100-day-old rats stratified by perinatal Pb exposure (exposed/unexposed) and treatment received (treated/untreated). Results: Systolic blood pressure was evaluated and shown to be higher in the 23-, 52-, 70-, and 100-day age groups with Pb exposure than in the corresponding control age groups: 117.8 ± 3.9*, 135.2 ± 1.3*, 139.6 ± 1.6*, and 131.7 ± 2.8*, respectively and 107.1 ± 1.8, 118.8 ± 2.1, 126.1 ± 1.1, and 120.5 ± 2.2, respectively (p < 0.05). Increased reactivity to noradrenaline was observed in intact, but not denuded, aortas from 52-, 70-, and 100-day-old exposed rats, and the maximum responses (g of tension) in the respective Pb-exposed and control age groups were as follows: 3.43 ± 0.16*, 4.32 ± 0.18*, and 4.21 ± 0.23*, respectively and 2.38 ± 0.33, 3.37 ± 0.13, and 3.22 ± 0.21, respectively (p < 0.05). Conclusions: All treatments reversed the changes in vascular reactivity to noradrenaline in rats perinatally exposed to Pb. The combination therapy resulted in an earlier restoration of blood pressure in Pb-exposed rats compared with the monotherapies, except for enalapril therapy in young rats. These findings represent a new approach to the development of therapeutic protocols for the treatment of Pb-induced hypertension.

Nutrição mineral do cajueiro (Anacardium occidentale L.): III - absorção de nutrientes - nota prévia

Na presente nota prévia os autores apresentam os primeiros dados acerca da extração e exportação de nutrientes através do cajueiro a partir de 1 a 14 anos de idade. As plantas foram colhidas de uma plantação localizada no Município de Terezinha, BA, situadas em um latossolo de baixa fertilidade, exceto em K. As plantas foram pesadas e analisadas para N, P, K, Ca, Mg, S, B, Cu, Fe, Mn e Zn. Constataram os autores que o cajueiro cresce continuamente até aos 14 anos. Uma árvore aos 10 anos de idade contém: N- 1,5 kg; P- 0,2 kg; K- 1,1 kg; Ca-0,2 kg;Mg-0,3 kg; S- 0,1 kg; B- 4,0 g;Cu-1,4 g;Fe- 2,0 g;Mn- 7,8 g;Zn- 2,6 g. Aquilataram os autores que a exportação de nutrientes através de 1 kg de frutos é a seguinte: N- 13,9 g; P- 1,3 g; K- 6,2 g; Ca- 0,3 g; Mg- 1,3 g; S- 0,5 g; B-18,5 mg; Cu-16,2 mg; Fe- 36,9 mg; Mn-13,2 mg. Finalmente observaram que a concentração de N, Mg, S, Cu, Fe e Zn não varia nas folhas em função da idade da planta; sendo que a concentração em P, K, Ca, B e Mn varia com a idade da planta.

Nutrição mineral de hortaliças: XXXII. marcha de absorção dos nutrientes pelo tomateiro (Lycopersicon esculentum Mill,) destinado ao processamento industrial

Reveste-se de grande importância o conhecimento da marcha de absorção de nutrientes pelas culturas, principalmente visando uma aplicação racional dos fertilizantes. Utilizou-se no presente experimento a cultivar Roma VF, de porte determinado, que tem tido grande aceitação tanto pelos tomaticultores como pelas industrias processadoras. As amostras para analise foram coletadas no período junho a outubro de 1977, em uma área experimental instalada num solo representativo da região oeste do Estado de São Paulo (Latossol Vermelho Amarelo), no município de Narandiba (DIRA de Presidente Prudente)· A cultura recebeu uma adubação de 85--300-100 kg/ha de NPK, sendo 1/3 do N aplicado juntamente com todo o P e K no plantio e os 2/3 restantes aplicados em cobertura aos 30 e 35 dias após a germinação. A área foi de 1,25 x 0,30 m (26,666 covas/ha), com culturais foram os normalmente recomendados para a cultura na região. As amostras (4 repetições) foram coletadas aos 15, 30, 45, 60, 75, 90 e 105 dias após a germinação. As plantas foram separadas em folhas cotiledonares, folhas, caule e frutos. Determinou-se o peso de matéria seca e analisou-se para N, P, K, Ca, Mg, S, B, Cu, Fe, Mo e Zn. Os resultados analíticos obtidos revelaram um crescimento lento ate aos 30 dias, após o que houve um crescimento acelerado, com o peso da materia seca praticamente dobrando a cada quinzena no período dos 45 aos 75 dias, atingindo o máximo aos 105 dias (5.706,61 kg/ha). Quanto ao crescimento dos frutos, expresso em peso de materia seca, houve um aumento de cerca de 20 vezes no intervalo dos 45 aos 75 dias, praticamente duplicando o peso no período dos 75 aos 90 dias e estabilizando-se aos 105 dias (2.708,6 kg/ha). Na época de floração, as folhas apresentavam, em função da materia seca, 3,7% N; 0,50% P; 4,44% K; 3,24% Ca; 0,99% Mg; 0,46% S; 72 ppm B; 15 ppm Cu; 434 ppm Fe; 375 ppm Mn; 0,18 ppm Mo; 148 ppm Zn. A produção efetiva de 65 ton/ha obtida na área experimental, contem as seguintes quantidades de nutrientes nos frutos: 67,8 g N; 8,9 g P; 112,2g K; 7,7 g Ca; 6,0 g Mg; 3,1 g S; 93 g B; 45 g Cu; 547 g Fe; 163 g Mn; 485 mg Mo.

Non root feeding with two sources of zinc on Coffea arábica L. 'mundo novo'(B.Rodr.) Choussy

A trial was carried out on an eight old coffee plantation with visible zinc problems. The plantation was situated nearly the city of Jaú (22º30'S, 48º30'W). State of São Paulo, Brazil. The soil is classified as medium texture Oxisol of low base saturation (Latossol Vermelho Amarelo - fase arenosa). The pulverization program started in november 1977, followed in march and July 1978 (heavy harvest) and ended in march and July 1979 (light harvest). Is should be mentioned that a well reconized characteristic of arábica coffe is its habit of biennial bearing, a very heavy harvest is most often followed by a light load the next year. The following treatments and amounts of chemicals per cova hole (4 trees) were tested in accordance with a random block design: 1. 1 g of zinc (zinc sulphate, 0.5%) 2. 3 g of nitrogen (urea, 1.3%) 3. 1 g of zinc + 3 g of nitrogen (zinc sulphate 0.5% + urea 1.3%) 4. 0.25 g, 0.50 g, 1.00 g, 2.00 g of zinc plus 0.75 g, 1.50 g, 3.00 g and 6.00 of nitrogen (correspondent to NZN* 15-0-0-5 as 0.75%, 1-5%, 3.0% and 6.0% by v/v). Foliar absorption data were obtained by collecting the 3rd and 4th pairs of the coffee leaves and analysed them for N, P, K, Ca, Mg, S, B, Cu, Fe, Mn, and Zn. The main results may be summarized as follows: 1. The maximum calculated yields of clean coffee were obtained by the applications of 5.84 1 of NZN (1.13%) per hectare. 2. The applications of zinc sulphate (0.5%) and urea (1.3%) together or separate did not affected the coffee bean production. 3. The applications of 15.0 1 of NZN per hectare reduced the coffee yields. 4. Leaf damages and burning symptoms were observed by the applications of urea (1.3%) plus zinc sulphate (0.5%) and larger doses than 7.5 1 of NZN per hectare. 5. Leaf tissue analysis show that the concentrations of the elements were affecred by the age of the leaves and by the yields of the coffee trees. 6. The applications of increasing doses of NZN causes an increase in the concentration of zinc, manganese and boron in the leaves and decreased the concentration in calcium and potassium the leaves. 7. The concentration of zinc in the leaves associated with the heavy harvest, in July, was 70.0 ppm.

Application of chemicals on Ficus carica L. transplanted

This research deals with the effects of chemicals on, transplantation of Ficus carica L. cv. Roxo de Valinhos. Fig plants were sprayed with Transplantone (naphthaleneacetamide plusnaphtaleneacetic acid) 10 g/1 , Oed green (oxyethylene docosanol) 40 ml/1, Good-rite peps (polyethylene polysulfite) 0,6 ml/1, and Mobileaf 200 ml/1. A check treatment and aereduction to half of leaf area were also established. Reduction of leaf area and application of oxyethylene docosanol promoted higher plant survival. The chemicals did not affect the growth of transplanted plants. Auxins constituents of Transplantone increased leaf number of fig plants.

Nutrição mineral de hortaliças: LIV - acumulação de nutrientes na cultura do pepino (Cucumis sativus L.) var. Aodai cultivado em condições de campo

Com o objetivo de se determinar a acumulação de nutrientes pela planta de pepino (Cucumis sativus L.) var. Aodai, foi conduzido a um experimento de campo, no município de Píracicaba, SP (LS: 22°41'31" e LW: 47°38'01"), em um solo Terra Roxa Estruturada, Série Luiz de Queiroz, devidamente adubado. O delineamento estatístico foi o inteiramente casualizado com quatro repetições, com amostragens das plantas aos 12, 24, 36, 48, 60, 72 e 84 dias após a emergência da planta sendo subdivididas em caule, folhas do caule, ramos, folhas dos ramos, flores femininas, flores masculinas e frutos que foram analisados para os nutrientes. Verificou-se que após 84 dias da emergência, a acumulação de nutrientes pela parte aérea, por planta, foi de K-10,8 g; N-6,1 g; Ca-5,6 g; Mg-1,5 g; P-0,68 g; S-0,44 g; Fe37,5 mg; Mn-25,0 mg; Z-10,7 mg; B10,3 mg; Cu-4,5 mg.

Nutrição mineral do gergelim (Sesamum indicum L.): I - concentração e acúmulo de macronutrientes em condições de campo

Tendo-se como objetivo conhecer o comportamento nutricional da cultura de gergelim (Sesamum indicum L.), instalou-se um ensaio no campo experimental do Departamento de Agricultura e Horticultura, da Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz" da Universidade de São Paulo, visando analisar o crescimento, determinar as concentrações e acúmulo de macronutrientes pelo cultivar Venezuela em diferentes estágios de desenvolvimento, e avaliar a exportação pela colheita. O experimento foi conduzido no decorrer do ano agrícola 1981/1982, num solo Terra Rosa Extruturada, Série Luiz de Queiroz. O delineamento estatístico foi inteiramente casualizado, com um cultivar, oito épocas de amostragem e quatro repetições. As primeiras amostras foram coletadas 28 dias após a emergência das plântulas (desbaste) e as demais em intervalos regulares de 12 dias, de tal maneira que sempre houvessem outras quatro competitivas na fileira. No material coletado (folha, caule e fruto), determinou-se os teores e acúmulo de macronutrientes, assim como a quantidade de matéria seca. Concluiu-se que: a) até os 112 dias a produção de matéria seca foi de 344,40 gramas por planta; b) a matéria seca acumulada nas folhas tem representação quadrática, nos caules é sigmoidal e nos frutos linear; c) a concentração dos macronutrientes foi sempre maior nas folhas do que nos caules, com exceção apenas do potássio; d) a acumulação dos macronutrientes foi sempre maior nas folhas do que nos caules, com exceção do potássio: e) a concentração dos macronutrientes nos órgãos amostrados, ocorreu na seguinte ordem: Folha: N(3,97%) > K(3,60%) > Ca(2,91%) > P (0,54%) > Mg(0,45%) >.S(0,30%). Caule: K(6,14%) > N(1,48%) > Ca(1,36%) > Mg (0,42%) > P(0,40%) > S(0,-2%). Fruto: K(1,86%) > N(1,6%) > Ca(O,41%) > P (0,40%) > Mg(0,21%) > S(0,20%). f) a acumulação total dos macronutrientes pela planta inteira foi crescente com a idade até os 112 dias, com exceção do P, K nas folhas e Ca nos caules. g) a acumulação pela planta (mg/planta) foi em ordem decrescente: N(5391,70) > K(4075,26) > Ca(2759,85) > P(986,72) > Mg(667,97) > S(647,01). h) a exportação através da colheita (mg/planta) foi em ordem decrescente: N( 1931,10) > K(170)I; 7,70) > Ca(528,68) > P(492,69) > S(260,67) > Mg(295,54).

Contribuição para a determinação do nível normal de componentes do sangue bovino canchim

Conduziu-se um experimento na Fazenda Canchim, em São Carlos, SP, para se verificar se determinados componentes do sangue de bovinos jovens refletiriam diferentes estados nutricionais. 0 delineamento estatístico foi o de blocos casualizados. Empregaram - se 36 bovinos canchim desmamados, inteiros, em regime de pasto exclusivo (T1), ou confinados, recebendo feno de soja e rolão de milho (T2), torta de algodão e cana-de-açúcar (T3), ou ração completa (T4), de março a setembro de 1973, e em seguida somente pasto, até março de 1974. No período de confinamento, as pesagens e coletas de sangue foram a cada 2 semanas, passando para 4no período seguinte. Embora os tratamentos houvessem proporcionado diferentes níveis de consumo, de ganho de peso e de conversão, não houve variação correspondente nos diversos componentes de sangue analisados, talvez porque os intervalos de coleta e de pesagens deveriam ter sido mais curtos, para que se relacionassem melhor, pois os primeiros dados corresponderam às médias diárias do intervalo entre pesagens, enquanto que as dosagens correspondiam a uma única determinação do dia da coleta. A utilização de "kits" para análise do sangue comprovou-se plenamente satisfatória, mais simples e rápida em relação ao sistema convencional. Foram assumidos como normais os níveis médios para os seguintes parâmetros do sangue: uréia, 11,1 a 16,1 mg;proteínas totais, 5,92 a 6,32 g; fósforo, 6,24 a 7,11 mg; Ca, 11,01 a 12,66 mg; e hemoglobina, 10,14 a 10,55 g por decilitro.

The importance of dietary calcium consumption in two species of semi-terrestrial grapsoid crabs

Calcium (Ca) is essential for crustaceans, due to calcium carbonate (CaCO3) deposition in the new exoskeleton to harden it. The purpose of this work was to study short term Ca balance in terms of dietary Ca ingestion in two phylogenetically related crabs (Superfamily Grapsoidea) showing different degrees of terrestrial adaptations: Sesarma rectum Randall, 1840 and Neohelice granulata (Dana, 1851). Dietary Ca ingestion was studied using purified diets with different Ca concentrations (0, 2.2 and 6.66 % Ca), together with measurements of Ca excretion and Ca hemolymph levels. The results showed that both crabs had the same response to foods containing different levels of Ca, with both species eating more of the high Ca diet. However, S. rectum consumed more per mg body mass at all Ca concentrations (6 mg.g-1 for S. rectum against 3 mg.g-1 for N. granulata). Both species excreted/egested Ca differently: S. rectum excreted Ca proportionally to ingestion, whereas N. granulata maintained constant faecal Ca output at all dietary Ca levels. Moreover, Ca hemolymph levels for crabs fed the different diets were independent of dietary Ca. In conclusion, both S. rectum and N. granulata seem to regulate the consumption of diets containing more Ca, which suggests a fine balance for Ca intake.

Sôbre u'a modificação do meio de Monteverde

It is well known that the culture media used in the presumptive diagnosis of suspiciuous colonies from plates inoculated with stools for isolation of enteric organisms do not always correctly indicate the major groups of enterobacteria. In an effort to obtain a medium affording more exact indications, several media (1-9) have been tested. Modifications of some of these media have also been tested with the result that a satisfactory modification of Monteverde's medium was finaly selected. This proved to be most satisfactory, affording, as a result of only one inoculation, a complete series of basic indications. The modification involves changes in the formula, in the method of preparation and in the manner of storage. The formulae are: A. Thymol blue indicator: NaOH 0.1/N .............. 34.4 ml; Thymol blue .............. 1.6 g; Water .................... 65.6 ml. B. Andrade's indicator. C. Urea and sugar solution: Urea ..................... 20 g; Lactose ................... 30 g; Sucrose ................... 30 g; Water .................... 100 ml. The mixture (C.) should be warmed slightly in order to dissolve the ingredients rapidly. Sterilise by filtration (Seitz). Keep stock in refrigeratior. The modification of Monteverde's medium is prepared in two parts. Semi-solid part - Peptone (Difco) 2.0 g; NaCl 0.5 g; Agar 0.5 g; Water 100.0 ml. Boil to dissolve the ingredients. Adjust pH with NaOH to 7.3-7.4. Boil again for precipitation. Filter through cotton. Ad indicators "A" 0.3 ml and "B" 1.0 ml. Sterilise in autoclave 115ºC, 15 minutes in amounts not higher than 200 ml. Just before using, add solution "C" asseptically in amounts of 10 ml to 200 ml of the melted semi-solid medium, maintained at 48-50ºC. Solid part - Peptone (Difco) 1.5 g; Trypticase (BBL) 0.5 g; Agar 2.0 g; Water 100,00 ml. Boil to dissolve the ingredients. Adjust pH with NaOH to 7.3-7.4. Boils again. Filter through cotton. Add indicators "A" 0.3 ml and "B" 1.0 ml; ferrous ammonium sulfate 0.02 g; sodiun thiosulfate 0.02 g. Sterilise in autoclave 115ºC, 15 minutes in amounts not higher than 200 ml. Just before using, add solution "C" asseptically in amounts of 10 ml to 200 ml of the melted solid medium, maintained at 48-50ºC. Final medium - The semi-solid part is dispensed first (tubes about 12 x 120 mm) in 2.5 ml amounts and left to harden at room temperature, in vertical position. The solid part is dispensed over the hardened semi-solid one in amounts from 2.0 ml to 2.5 ml and left to harden in slant position, affording a butt of 12 to 15 mm. The tubes of medium should be subjected to a sterility test in the incubator, overnight. Tubes showing spontaneous gas bubbles (air) should then be discarded. The medium should be stored in the incubator (37ºC), for not more than 2 to 4 days. Storage of the tubes in the ice-box produces the absorption of air which is released as bubbles when the tubes are incubated at 37ºC after inoculation. This fact confirmed the observation of ARCHAMBAULT & McCRADY (10) who worked with liquid media and the aplication of their observation was found to be essential to the proper working conditions of this double-layer medium. Inoculation - The inoculation is made by means of a long straight needle, as is usually done on the triple sugar, but the needel should penetrate only to about half of the height of the semi-solid column. Indol detection - After inoculation, a strip of sterelized filter papaer previously moistened with Ehrlich's reagent, is suspended above the surface of the medium, being held between the cotton plug and the tube. Indications given - In addition to providing a mass of organisms on the slant for serological invetigations, the medium gives the following indications: 1. Acid from lactose and/or sucrose (red, of yellowsh with strains which reduce the indicators). 2. Gas from lactose and/or sucrose (bubbles). 3. H[2]S production, observed on the solid part (black). 4. Motility observed on the semi-solid part (tubidity). 5. Urease production, observed on solid and semi-solid parts (blue). 6. Indol production, observed on the strip of filter paper (red or purplish). Indol production is not observed with indol positive strains which rapidly acidify the surface o the slant, and the use of oxalic acid has proved to give less sensitive reaction (11). Reading of results - In most cases overnight incubation is enough; sometimes the reactions appear within only a few hours of incubation, affording a definitive orientation of the diagnosis. With some cultures it is necessary to observe the medium during 48 hours of incubation. A description showing typical differential reaction follows: Salmonella: Color of the medium unchanged, with blackening of the solid part when H[2]S is positive. The slant tends to alkalinity (greenish of bluish). Gas always absent. Indol negative. Motility positive or negative. Shigella: Color of the medium unchanged at the beginning of incubation period, but acquiring a red color when the strain is late lactose/sucrose positive. Slant tending to alkalinity (greenish or purplish). Indol positive or negative. Motility, gas and H[2]S always negative. Proteus: Color of the medium generally changes entirely to blue or sometimes to green (urease positive delayed), with blackening of solid part when H[2]S is positive. Motility positive of negative. Indol positive. Gas positive or negative. The strains which attack rapidly sucrose may give a yellow-greenish color to the medium. Sometimes the intense blue color of the medium renders difficult the reading of the H[2]S production. Escherichiae and Klebsiellae: Color of the medium red or yellow (acid) with great and rapid production of gas. Motility positive or negative. Indol generally impossible to observe. Paracoli: Those lactose of sucrose positive give the same reaction as Esherichia. Those lactose or sucrose negatives give the same reactions as Salmonellae. Sometimes indol positive and H[2]S negative. Pseudomonas: Color of the medium unchanged. The slant tends to alkalinity. It is impossible to observe motility because there is no growth in the bottom. Alkaligenes: Color of the medium unchanged. The slant tends to alkalinity. The medium does not alter the antigenic properties of the strains and with the mass of organisms on the slant we can make the serologic diagnosis. It is admitted that this medium is somewhat more laborious to prepare than others used for similar purposes. Nevertheless it can give informations generally obtained by two or three other media. Its use represents much saving in time, labor and material, and we suggest it for routine laboratory work in which a quick presumptive preliminary grouping of enteric organisms is needed.

The water extract of Coleus barbatus Benth decreases gastric secretion in rats

Coleus barbatus (Labiatae) Benth is popularly used in Brazil "for the healing of liver and stomach diseases". The water extract (WE 1 to 10 g/Kg, p.o.) of stem and leaves given to rats and mice did not induce signs of intoxication. Preveious treatment of mice with WE (1 g/kg, p.o.) shortened the sleeping time induced by pentobarbital (50 mg/Kg, i.p.) by 37 por cento, althoyugh the extract alone did not increase the spontaneous activity nor did it induce hyperexcitability. In mice WE (2 g/Kg, p.o.) increased the intestinal transit of charcoal by 30 por cento, while reduced gastric secretions ion rats treated with WE (2g/Kg intraduodenal) 3,9 ± 1.0 to 0.5 ± 0.2 ml/4h, respectively). The treatment also reduced the total acid secretion from 34.4 ± 11.0 to 2.7 ± 0.5 mEq/l and raisedgastric pH from 2.2 ± 0.3 to 6.5 ± 0.8. Treatment with WE (2g/Kg, p.o.) protected against gastric ulcers induced by stress (5.3 ± 1.6 and 1.5 ± 0.5 ulcers/cm²), but did nor protect against indonethacin induced ulcers. The results show that the water extract of C barbatus Benth produces mild stimulation of thecentral nervous system and increases intestinal movements. The extract also reduces gastric secretion indicating an antidyspeptic activity, and protects against gastric ulcers induced by stress.

An outbreak of diarrhoea associated with rotavirus serotype 1 in a day care nursery in Rio de Janeiro, Brazil

Faeces from 17 children less than 1.6 years old 15 adultsmore than 22 years old were collected during an outbreak of gastroenteritis in aday care nursery and screened for the presence of adenovirus and rotavirus by enzyme immunoassay (EIARA) and other viruses by electron microscopy (EM) and polycrylamide gel electrophoresis (PAGE). Ten samples (58.8 per cent) from childrenand one (6.7 per cent) from adults were positive for rotavirus and all samples were negative for bacteria and parasites. No other viruses were observed in EM. An enzyme immunoassay test using monoclonal antibodies (MAb-EIA) to determine the subgroup(s) and the serotype(s) of rotavirus was performed and the results showedthat all positive samples belong to serotype 1, subgroup II of group A rotaviruses. In PAGE test all samples had the same profile and the 10 and 11 dsRNA segments corresponed to the "long" profile of group A of rotaviruses. These results corroborated the MAbEIA results and indicate a sole source of infection. The majorsymptoms observed were: vomiting (60 per cent), fever (70 per cent) and diarrhoea (100 per cent). In previous years (1989 to 1991) we observed only rotavirus serotype 2 in this same day care nursery, but no outbreak was reported.