Histopathological and ultrastructural aspects of mice lungs experimentally infected with dengue virus serotype 2

Histological and ultrastructural alterations in lung tissue of BALB/c mice infected with dengue virus serotype 2 (non-neuroadapted), by intraperitoneal and intravenous routes were analyzed. Lung tissues were processed following the standard techniques for photonic and electron transmission microscopies. Histopathological and ultrastructural studies showed interstitial pneumonia, characterized by the presence of mononuclear cells. In the mouse model, the dengue virus serotype 2 seems to led to a transient inflammatory process without extensive damage to the interalveolar septa, but caused focal alterations of the blood-exchange barrier. Endothelial cells of blood capillaries exhibited phyllopodia suggesting activation by presence of dengue virus. Morphometrical analysis of mast cells showed an expressive increase of the number of these cells in peribronchiolar spaces and adjacent areas to the interalveolar septa. Alveolar macrophages showed particles dengue virus-like inside rough endoplasmic reticulum and Golgi complex, suggesting viral replication. The tissue alterations observed in our experimental model were similar to the observed in human cases of dengue fever and dengue hemorrhagic fever. Our results show that BALB/c mice are permissive host for dengue virus serotype 2 replication and therefore provides an useful model to study of morphological aspects of dengue virus infection.

Trypanosoma cruzi: blood parasitism kinetics and their correlation with heart parasitism intensity during long-term infection of Beagle dogs

The goals of the present study were to evaluate the kinetics of blood parasitism by examination of fresh blood, blood culture (BC) and PCR assays and their correlation with heart parasitism during two years of infection in Beagle dogs inoculated with the Be-78, Y and ABC Trypanosoma cruzi strains. Our results showed that the parasite or its kDNA is easily detected during the acute phase in all infected animals. On the other hand, a reduced number of positive tests were verified during the chronic phase of the infection. The frequency of positive tests was correlated with T. cruzi strain. The percentage of positive BC and blood PCR performed in samples from animals inoculated with Be-78 and ABC strains were similar and significantly larger in relation to animals infected with the Y strain.Comparison of the positivity of PCR tests performed using blood and heart tissue samples obtained two years after infection showed two different patterns associated with the inoculated T. cruzi strain: (1) high PCR positivity for both blood and tissue was observed in animals infected with Be-78 or ABC strains; (2) lower and higher PCR positivity for the blood and tissue, respectively, was detected in animals infected with Y strains. These data suggest that the sensitivity of BC and blood PCR was T. cruzi strain dependent and, in contrast, the heart tissue PCR revealed higher sensitivity regardless of the parasite stock.

Construction and characterisation of a complete reverse genetics system of dengue virus type 3

Dengue virulence and fitness are important factors that determine disease outcome. However, dengue virus (DENV) molecular biology and pathogenesis are not completely elucidated. New insights on those mechanisms have been facilitated by the development of reverse genetic systems in the past decades. Unfortunately, instability of flavivirus genomes cloned in Escherichia coli has been a major problem in these systems. Here, we describe the development of a complete reverse genetics system, based on the construction of an infectious clone and replicon for a low passage DENV-3 genotype III of a clinical isolate. Both constructs were assembled into a newly designed yeast- E. coli shuttle vector by homologous recombination technique and propagated in yeast to prevent any possible genome instability in E. coli . RNA transcripts derived from the infectious clone are infectious upon transfection into BHK-21 cells even after repeated passages of the plasmid in yeast. Transcript-derived DENV-3 exhibited growth kinetics, focus formation size comparable to original DENV-3 in mosquito C6/36 cell culture. In vitro characterisation of DENV-3 replicon confirmed its identity and ability to replicate transiently in BHK-21 cells. The reverse genetics system reported here is a valuable tool that will facilitate further molecular studies in DENV replication, virus attenuation and pathogenesis.

Evaluation of the role of ATP-binding cassette transporters as a defence mechanism against temephos in populations of Aedes aegypti

The role of ATP-binding cassette (ABC) transporters in the efflux of the insecticide, temephos, was assessed in the larvae of Aedes aegypti. Bioassays were conducted using mosquito populations that were either susceptible or resistant to temephos by exposure to insecticide alone or in combination with sublethal doses of the ABC transporter inhibitor, verapamil (30, 35 and 40 μM). The best result in the series was obtained with the addition of verapamil (40 μM), which led to a 2x increase in the toxicity of temephos, suggesting that ABC transporters may be partially involved in conferring resistance to the populations evaluated.

A novel ABCG-like transporter of Trypanosoma cruziis involved in natural resistance to benznidazole

Benznidazole (BZ) is one of the two drugs used for Chagas disease treatment. Nevertheless therapeutic failures of BZ have been reported, which were mostly attributed to variable drug susceptibility among Trypanosoma cruzistrains. ATP-binding cassette (ABC) transporters are involved in a variety of translocation processes and some members have been implicated in drug resistance. Here we report the characterisation of the first T. cruzi ABCG transporter gene, named TcABCG1, which is over-expressed in parasite strains naturally resistant to BZ. Comparison ofTcABCG1 gene sequence of two TcI BZ-resistant strains with CL Brener BZ-susceptible strain showed several single nucleotide polymorphisms, which determined 11 amino acid changes. CL Brener transfected with TcI transporter genes showed 40-47% increased resistance to BZ, whereas no statistical significant increment in drug resistance was observed when CL Brener was transfected with the homologous gene. Only in the parasites transfected with TcI genes there was 2-2.6-fold increased abundance of TcABCG1transporter protein. The analysis in wild type strains also suggests that the level of TcABCG1transporter is related to BZ natural resistance. The characteristics of untranslated regions of TcABCG1genes of BZ-susceptible and resistant strains were investigated by computational tools.

Mayaro virus and dengue virus 1 and 4 natural infection in culicids from Cuiabá, state of Mato Grosso, Brazil

This study aimed to verify the diversity of Culicidae species and their frequency of infection with flaviviruses and alphaviruses in Cuiabá, state of Mato Grosso, Brazil. Mosquitoes were captured with Nasci aspirators and hand net in 200 census tracts, identified alive at species level and pooled in one-20 (11,090 mosquitoes, 14 species). Female pools (n = 610) were subjected to multiplex seminested-reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) for 11 flavivirus and five alphavirus. Positive pools were tested by single RT-PCR followed by nucleotide sequencing, by RT-PCR for E1 gene [Mayaro virus (MAYV)] and by inoculation in Vero cells (MAYV) or C6/36 cells (flaviviruses). One/171 Aedes aegypti was positive for dengue virus (DENV)-1, 12/403 Culex quinquefasciatus, and four/171Ae. aegypti for MAYV, which was isolated from two pools containing two nonengorged females of Ae. aegypti and two ofCx. quinquefasciatus. DENV-4 was detected in 58/171 pools of Ae. aegytpi, 105/403 Cx. quinquefasciatus, two/five Psorophora sp., two/11 Psorophora varipes/Psorophora albigenu, one/one Sabethes chloropterus, two/five Culex bidens/Culex interfor, and one/one Aedes sp. DENV-4 was isolated from two pools containing three and 16 nonengorged Cx. quinquefasciatus females. Phylogenetic analysis revealed MAYV belongs to genotype L, clustering with human samples of the virus previously identified in the city. Cuiabá has biodiversity and ecosystem favourable for vector proliferation, representing a risk for arbovirus outbreaks.

Educação à distância em processos de esterilização de materiais

Este artigo descreve as etapas de desenvolvimento de um curso de educação à distância (EAD) sobre Processos de Esterilização de Materiais, com o uso da Internet; sua avaliação por especialistas em processos de esterilização e em EAD; o perfil dos alunos e avaliadores; a participação dos alunos e sua opinião sobre o curso. O ambiente de aprendizagem escolhido foi o TelEduc. Utilizou-se a metodologia de ensino Aprendizagem Baseada em Casos (ABC). A população-alvo foi constituída por enfermeiros da Região Metropolitana de Campinas e cidades do Estado de São Paulo. Dos 58 enfermeiros convidados, 14 se inscreveram e 11 finalizaram o curso. O curso foi avaliado pelos juízes antes e após a sua aplicação. Um questionário do tipo Likert foi utilizado para avaliar a opinião dos alunos . A metodologia ABC favoreceu a participação dos alunos e o curso foi avaliado positivamente.

Percepções de graduandos de enfermagem sobre a importância do ato de ouvir na prática assistencial

O objetivo deste estudo foi investigar a percepção de graduandos de Enfermagem quanto ao ato de ouvir e sua importância na assistência de enfermagem. Trata-se de um estudo exploratório, com metodologia qualitativa e referencial teórico no Pensamento Complexo de Morin. A investigação foi feita com 12 alunos de enfermagem do último ano, da Faculdade de Medicina do ABC, Santo André-SP. Os dados foram coletados por meio da Técnica de Entrevista Individual em Profundidade, e analisados por meio da Técnica de Análise de Conteúdo. As categorias resultantes foram: O ato de ouvir um desafio para o mundo; As influências do Modelo Biomédico em relação ao ato de ouvir; Pondo de lado ideias pré-concebidas: aprendendo a ouvir; Preparando o graduando de enfermagem para o ato de ouvir. Os resultados demonstram que os discentes consideram que ser um bom ouvinte é algo difícil, pois é preciso estar predisposto a escutar o outro e aprender a suspender ideias pré-concebidas, para não bloquear o que o paciente deseja verbalizar.

Gerenciamento de custos: aplicação do método de Custeio Baseado em Atividades em Centro de Material Esterilizado

Esta pesquisa exploratória descritiva, na modalidade de estudo de caso, teve por objetivo a aplicação do Custeio Baseado em Atividades (ABC) em Centro de Material e Esterilização (CME) de um hospital de ensino de capacidade extra. A coleta de dados ocorreu durante o ano de 2006, utilizando-se as técnicas de análise documental e observação direta não participante. A análise de processos possibilitou o conhecimento dos custos do ciclo/carga de desinfecção química ($9.95) e física ($12.63), e esterilização por vapor saturado sob pressão ($31.37) e por vapor de Baixa Temperatura e Formaldeído Gasoso ($255.28). As informações geradas pelo ABC resultaram na compreensão do processo gerador de custos e forneceram base para a mensuração de desempenho e melhorias de processos do CME.

Formas químicas, disponibilidade de manganês e produtividade de soja em solos sob semeadura direta

O trabalho foi desenvolvido com os objetivos de testar, dentre vários extratores de micronutrientes do solo, qual é o mais adequado para avaliar a disponibilidade de Mn em solos sob sistema de semeadura direta (SSD); estudar, com auxílio da ressonância paramagnética eletrônica (RPE), a interação do Mn com os ácidos húmicos (AH) de solos de locais com e sem constatações de deficiência desse nutriente, e avaliar em quais das frações do solo (trocável, orgânica, óxido e residual) estava ligado o Mn, após sua aplicação no solo. Quatro locais foram selecionados para o estudo (Local I: Faz. Santa Rosa; II e III: Faz. Novo Horizonte e IV: Campo Experimental da Fundação ABC). Os Locais I, II e III situam-se em Tibagi, PR, e o Local IV, em Castro (PR). De modo geral, as doses de Mn aplicadas elevaram os teores de Mn nos solos, mas a concentração e a quantidade de Mn acumuladas pelas plantas de soja foram pouco influenciadas. Os teores de Mn nas frações trocável, orgânica e óxido das amostras do Local I aumentaram com as doses de Mn aplicadas no solo, tendo a maior elevação ocorrido na fração orgânica. Nessa fração, os teores aumentaram de 5,4 mg kg-1, na testemunha, para 35,1 mg kg-1, com a aplicação da maior dose. Os sinais de Mn não foram detectados por RPE nas amostras sólidas de AH (pH 3,0). A quantificação de Mn nessas amostras, após digestão nítrico-perclórica, juntamente com a observação de Mn por RPE, em amostras de AH em solução (pH 2,4), confirmou a hipótese de que o Mn presente nas amostras de AH estava na forma de ligações muito estáveis com os grupos funcionais (provavelmente carboxílicos) do AH. A ausência de efeito do Mn na produtividade da soja pode ser devida à complexação do nutriente pela MO. De forma geral, o DTPA-TEA foi o extrator mais adequado na avaliação da disponibilidade de Mn à soja.

Nitrogen dynamics in soil management systems. I - flux of inorganic nitrogen (NH4+ and NO3-)

In agricultural systems the N-NH4+ and N-NO3- contents is significantly affected by soil management. This study investigated the dynamics of inorganic nitrogen (N; NH4+ and NO3-) in an experimental evaluation of soil management systems (SMSs) adopted in 1988 at the experimental station of the ABC Foundation in Ponta Grossa, in the Central South region of the State of Paraná. The objective of this study was to evaluate the changes in N-NH4+ and N-NO3- flux in the surface layer of a Red Latosol arising from SMSs over a 12-month period. The experiment was arranged in a completely randomized block design in split plots, in three replications. The plots consisted of the following SMSs: 1) conventional tillage (CT); 2) minimum tillage (MT); 3) no-tillage with chisel plow every three years (NT CH); and 4) continuous no-tillage (CNT). To evaluate the dynamics of inorganic N, the subplots represented samplings (11 sampling times, T1 - T11). The ammonium N (N-NH4+) and nitric N (N-NO3-) contents were higher in systems with reduced tillage (MT and NT CH) and without tillage (CNT) than in the CT system. In the period from October 2003 to February 2004, the N-NH4+ was higher than the N-NO3- soil content. Conversely, in the period from May 2004 to July 2004, the N-NO3- was higher than the N-NH4+ content. The greatest fluctuation in the N-NH4+ and N-NO3- contents occurred in the 0-2.5 cm layer, and the highest peak in the N-NH4+ and N-NO3- concentrations occurred after the surface application of N. Both N-NH4+ and N-NO3- were strongly correlated with the soil organic C content, which indicated that these properties vary together in the system.

Nitrogen dynamics in soil management systems: II - mineralization and nitrification rates

Nitrogen is the main limiting factor in crop productivity and thereby soil management systems may change the mineralization and nitrification rates. In an experiment on soil management systems implemented in 1988 at the experimental station Fundação ABC, Ponta Grossa, in the central South region of the State of Paraná, inorganic N dynamics were examined to find a soil management strategy with a view to a sustainable environment. The objective of this study was to calculate the net mineralization and nitrification rates of soil N and the correlation with soil pH under management systems. Randomized complete block design was used, in split plots, in three replications. The following soil management systems (SMSs) were adopted in the plots: 1) conventional tillage (CT); 2) minimum tillage (MT); 3) no-tillage with chisel plow every three years (NT CH); and 4) continuous no-tillage (CNT). To evaluate the dynamics of inorganic N, samples were collected from sub-plots at different times (11 sampling times - T1 to T11). In the CNT and NT CH, the net mineralization rates were higher in the MT and CT systems in the 0-2.5 cm soil layer, while the nitrification rate was higher in the 2.5-5 cm layer. Soon after implementing the white oat management, the mineralization and nitrification rates in all soil layers were higher in the MT and CT systems. In the period of soybean development, in the 0-2.5 and 2.5-5 cm soil layers, the mineralization and nitrification rates were higher in the CNT and NT CH than in the MT and CT systems.

Qualidade física de um Latossolo Vermelho cultivado com soja submetido a níveis de compactação e de irrigação

Manter uma boa qualidade física do solo é importante para preservar o meio ambiente, além de maximizar a produtividade das plantas. Um solo compactado poderá interferir na densidade, na porosidade e na resistência do solo à penetração, influenciando no crescimento radicular. A presente pesquisa objetivou avaliar a qualidade física de um Latossolo Vermelho eutroférrico, textura argilosa, com a cultivar de soja CAC-1, submetido a quatro níveis de compactação e três níveis de irrigação, utilizando os atributos físicos do solo, assim como a correlação do sistema radicular com a produtividade da cultura. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com parcelas subdivididas, com quatro repetições. Os níveis de compactação foram: C0 = 0, C2 = 2, C4 = 4 e C6 = 6 passadas, no mesmo local, de um trator de 11 t. Foram coletadas amostras indeformadas de solo nas entrelinhas da cultura da soja, para determinação dos atributos físicos, nas camadas de 0-0,10 e 0,10-0,20 m. A produtividade máxima da soja foi obtida com a resistência do solo à penetração de 0,71 MPa. O sistema radicular correlacionou-se inversamente com a produtividade da soja.

Caracterização química da amêndoa de coquinho-azedo (Butia capitata var capitata)

A palmeira Butia capitata var capitata produz o coquinho-azedo, fruto de odor agradável e penetrante, cuja polpa é aproveitada para a produção de um suco saboroso na região norte de Minas Gerais. As sementes apresentam uma amêndoa cuja exploração ainda é bastante limitada. O objetivo deste trabalho foi determinar a composição da amêndoa do coquinho-azedo, visando a avaliar suas possibilidades de uso. Na amêndoa, a composição química (umidade, proteínas, lipídios, cinzas e fibras) foi determinada por métodos gravimétricos. Os teores dos principais minerais foram avaliados por espectrofotometria de emissão atômica com fonte de plasma indutivo, e a composição dos ácidos graxos presentes na gordura da semente foi determinada por cromatografia a gás. A amêndoa do coquinho-azedo apresentou 9,9 % de umidade e 57,8 % de lipídios totais, 25,8 % de fibra detergente neutro, 17,6 % de fibra detergente ácido e 1,6 % de cinzas em base seca. A gordura extraída da amêndoa de coquinho-azedo apresentou elevados teores de ácido láurico (42,1 %), que foi seguido pelo ácido oléico (16,9 %). Predominaram os ácidos graxos saturados (78,9 %), principalmente os de cadeia média (C6-C12).

Cisticercose intramedular: relato de caso e revisão da literatura

Os autores relatam um caso raro de neurocisticercose intramedular em um paciente do sexo masculino, de 36 anos de idade. Foram realizadas tomografia computadorizada e ressonância magnética do crânio, que evidenciaram múltiplas lesões de tamanhos variados, com realce periférico após injeção de meio de contraste. Também foi realizada ressonância magnética da coluna cervical, que evidenciou formação cística com escólex em seu interior ao nível de C5-C6 na região intramedular.