Production of glucose and fructose syrups from cassava (Manihot esculenta Crantz) starch using enzymes produced by microorganisms isolated from Brazilian Cerrado soil

The high demands for sugars and the development of enzymatic technology have increased the production of sweeteners, especially for glucose and fructose syrups. This work describe a technology for glucose and fructose syrups from Brazilian cassava starch using enzymes produced by soil microrganisms isolated from the Brazilian Cerrado soil. Firstly, Aspergillus niger and Streptomyces sp. were isolated from the soil and used as glucoamylase (GA) and glucose isomerase (GI) producer sources. After characterization, GA and GI exhibited optimum pH 4.5 and 8.0, respectively. GA showed maximum activity at 60 ºC and GI at 85 ºC. GA and GI retained 65 and 80%, respectively, of initial activity after 180 minutes of incubation at 60 ºC. The kinetic parameters Km and Vmáx were 0.476 (mg.mL-1) and 8.58 (µmol/minute) for GA and 0.082 (M) and 48.20 (µmol/minute) for GI. The maximum glucose syrups production occurred after 24 hours of reaction with a 98% yield. The production of fructose syrups with 42% (w/v) was reached after 96 hours of reaction.

Application of enzymatic preparations to produce araçá pulp and juice

In the present study, the effect of pectinases on the production of pulp and juice of araçá and the presence of bioactive compounds were evaluated. An enzyme extract (EE) produced by Aspergillus niger LB-02-SF in solid state fermentation and the commercial enzyme Ultrazym®AFP-L were used in this study. After enzyme treatment with the EE preparation, the extraction yield increased by 23.1% and viscosity decreased by 42.8%, during pulp maceration. During juice processing, there was an increase of 70.6% in clarification and a decrease of 72.87% in turbidity. Higher values of these parameters, 47.7, 69.0, 80.7, and 79.7%, respectively, were obtained using the Ultrazym®AFP-L, which also led to a significant increase in the polyphenol content, both in the pulp (24%) and in the juice (28%), with a less pronounced effect when the EE was applied (10 and 21%, respectively). The anthocyanins content in the araçá pulp increased after treatment with the commercial preparation (23%), and there was no significant increase with the use of EE. The use of Ultrazym®AFP-L increased the β-carotene content by 29.4% in the fruit pulp, while the treatment with EE did not result in significant changes compared with those of the juice and pulp controls.

Production optimization and characterization of immunomodulatory peptides obtained from fermented goat placenta

The goat placental immunomodulatory peptides were produced by fermentation with Aspergillus Niger. The objective of the present study was to investigate the effects of fermentation parameters (carbon source content, pH, and time) on spleen lymphocyte proliferation for the highest immune activity of the fermentation broth using response surface methodology (RSM). According to the data analysis by the Design-Expert® software, the stimulation index value (23.51%), which is the maximum immune activity, was obtained under the following conditions: content of carbon source 1.97 g·L-1, initial pH 5.0, and 74.43 h of fermentation time. Under the optimized fermentation conditions, at a certain concentration range, the fermentation broth produced a significant effect on the proliferation of mouse spleen lymphocytes. Ultrafiltration technique was performed to separate the fermentation broth with different MW (molecular weight). It was found that peptides in the range of <10 KDa were the main bioactivity fractions for the immunomodulatory and antioxidant activities.

Fungitoxicidade in vitro de iprodione sobre o crescimento micelial de fungos que se associam a sementes de arroz

Este estudo teve o objetivo de avaliar a fungitoxicidade de iprodione, em diferentes concentrações, sobre o crescimento micelial in vitro dos fungos mais comuns disseminados pelas sementes de arroz no Estado de Minas Gerais, Brasil. Isolados de Alternaria alternata, Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Aspergillus ochraceus, Curvularia oryzae, Drechslera oryzae, Gerlachia oryzae, Phoma sorghina e Pyricularia grisea foram obtidos de sementes de arroz e o seu cresci-mento micelial foi avaliado em meio BDA contendo o fungicida nas concentrações de 10mg.l-1, 50mg.l-1, 100mg.l-1 e 500mg.l-1, após sete dias de incubação. O efeito de iprodione foi avaliado por meio da ED50 (dose necessária para inibir em 50% o crescimento micelial). O fungicida iprodione inibe com alto efeito (ED50<10mg.l-1) o crescimento micelial dos fungos A. alternata, A. niger, A. ochraceus, C. oryzae, D. oryzae e G. oryzae, médio efeito (ED50 entre 10 e 50mg.l-1) Phoma sorghina e baixo efeito (ED50>50mg.l-1) Pyricularia grisea. Os fungos A. niger e A. ochraceus foram os mais sensíveis a iprodione, tendo apresentado ED50 de 2,5 e 3,1mg.l-1, respectivamente.

Avaliação da aplicação de fungicida às sementes de amendoim antes do envelhecimento acelerado

Os objetivos do trabalho foram os de avaliar o efeito da aplicação de fungicida às sementes de amendoim (Arachis hypogaea L.), que foram colhidas em distintos estádios de maturação e provenientes de plantas-mãe que foram ou não submetidas à calagem, nas condições de envelhecimento acelerado. Foram avaliados quatro lotes de sementes do cultivar Botucatu, provenientes das áreas que receberam (CC) ou não a aplicação de calcário (SC) e que foram colhidas aos 104 (E1) e 124 (E2) dias após a semeadura e denominados de lote 1 (E1/SC), 2 (E1/CC), 3 (E2/SC) e 4(E2/CC). De cada lote, foram retiradas duas amostras de sementes, uma original e outra tratada com fungicida thiram. Estas amostras foram submetidas às condições do teste de envelhecimento acelerado, e após o período de exposição, as sementes foram avaliadas na primeira e na segunda contagem do teste de germinação realizado com e sem secagem. Pelos resultados pode-se concluir que há maior incidência de patógenos nas sementes colhidas aos 104 DAS e provenientes de plantas-mãe submetidas à calagem; o tratamento fungicida favorece a germinação das sementes contaminadas por Aspergillus do grupo flavus e Aspergillus niger, até 24 horas após a exposição às condições de envelhecimento acelerado.

Avaliação de metodologia para detecção de fungos em sementes de amendoim

O objetivo foi avaliar o efeito dos procedimentos de incubação e de desinfestação usando hipoclorito de sódio no desenvolvimento de fungos em teste de sanidade de sementes de amendoim (Arachis hypogaea L.). Foram realizados dois experimentos com dois lotes da cultivar Botutatu. No primeiro experimento, as sementes foram divididas em duas amostras, sendo uma imersa previamente em hipoclorito de sódio. A incubação destas foi realizada em meio agarizado (BDA, CZ) e em folhas de papel (sobre e em rolo), com ou sem restrição hídrica. No segundo experimento, as sementes foram imersas em hipoclorito de sódio a 1, 2, 3 5 e 10%, por um, três, cinco e dez minutos e, posteriormente, foram incubadas em BDA. Os métodos de incubação em meio agarizado com restrição hídrica propiciaram maior recuperação de Aspergillus spp e de Cladosporium spp. nas sementes de amendoim sem desinfestação prévia. Houve menor ocorrência de Rhizopus spp. e Aspergillus niger nas sementes desinfestadas, independente do período de embebição e da concentração de hipoclorito de sódio.

Aborto por Aspergillus fumigatus e A. niger em bovinos no sul do Brasil

As infecções micóticas apresentam distribuição mundial e podem causar placentite e aborto em diversas espécies de animais. Entre setembro 2001 e novembro 2002, foram processados no Setor de Patologia Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, 147 fetos bovinos abortados com o objetivo de avaliar as principais causas de aborto infeccioso bovino no sul do Brasil. Destes, 34 estavam acompanhados da placenta. Aborto micótico foi diagnosticado em cinco casos (3,4%) mediante cultivo puro de quatro amostras de Aspergillus fumigatus e uma de A. niger associado a lesões histológicas características de fungo. Os exames virológico, bacteriológico e imunofluorescência direta para Leptospira sp foram negativos nestes casos. A idade dos fetos variava entre 5 e 8 meses de idade. Lesões macroscópicas foram observadas em quatro casos e eram caracterizadas por áreas circulares multifocais branco-acinzentadas na pele, principalmente na região da cabeça e dorso, em dois fetos, lesões nodulares no fígado em um caso e espessamento dos cotilédones em duas placentas enviadas juntamente com os fetos. Lesões histológicas foram observadas principalmente no fígado, pulmão e placenta, caracterizadas por hepatite necrótica multifocal, broncopneumonia supurativa e placentite necrótica. Através da coloração de Grocott hifas septadas foram observadas em duas placentas e nas bordas das lesões necróticas no fígado de um feto. Em dois casos hifas foram observadas somente na placenta e não no feto, salientando-se a importância deste tecido para o diagnóstico de aborto micótico bovino.

Solubilização quantitativa de fosfatos insolúveis, por algumas espécies dos gêneros Aspergillus e Penicillium

No presente trabalho, os autores estudaram, em condições de laboratório, as relações entre algumas especies dos gêneros Aspergillus e Penicillium e tres fosfatos insolúveis, determinando quantitativamente o fósforo solubilizado e imobilizado. Dos resultados, os autores extraíram as seguintes conclusões: 1. Todas as linhagens estudadas demonstraram alta capacidade solubilizadora nos testes em placas de petri. No entante, quando analisadas quantitativamente, apenas o A. niger foi capaz de solubilizar quantidades apreciáveis de fosfatos insolúveis. 2. A análise dos dados, obtidos com as linhagens de Penicillium spp, indicou que ambas aumentaram significativamente os níveis de fósforo solúvel para os tratamentos com fosfato de alumínio, em relação a seus homólogos estéreis; diminuiram significativamente os níveis de fósforo solúvel das testemunhas e, não alteraram significativamente os níveis dos tratamentos com fosfato de ferro. Por outro lado, nos tratamentos com apatita de Araxá o nível de fosforo solúvel não foi alterado significativamente com a linhagem 4 Raíz III e, diminuiu significativamente, com a linhagem 8 RIZ III. 3. À linhagem de Aspergillus sp. apresentou comportamento diferente dos demais fungos, diminuindo significativamente os níveis de fósforo solúvel de todos os tratamentos. 4. A aderência de numerosas partículas de fosfatos insolúveis à trama miceliana, é fator de erro que pode explicar as discrepancias nos valores obtidos pela determinação indireta do fósforo assimilável do solo, empregando-se técnicas biológicas com A. niger ou outros fungos.

Identificação e características culturais de espécies do gênero Aspergillus isoladas de sementes de feijão no Estado da Paraíba

A partir de sementes de feijão (Phaseulus vulgaris) armazenadas no estado da Paraíba, foram isolados os fungos Aspergillus flavus, A. fumigatus, A. lucknowensis, A.niger, A.ochraceus e A. parasiticus. Os fungos foram identificados com base nas características culturais exibidas em meio de Czapek-Agar e morfológicas através de microscópio ótico composto. No oitavo dia de crescimento em meio de BDA, cada espécie apresentou diferenças quanto à curva de crescimento, taxa de crescimento durante o período de incubação e diâmetro das colônias no oitavo dia de acordo com a procedência das amostras de sementes.

Qualidade sanitária de grãos e frutos de amendoim comercializados no estado de Alagoas e identificação através de características culturais de espécies do gênero Aspergillus

A identificação de espécies fúngicas presentes em grãos e frutos de amendoim (Arachis hypogaea), bem como a caracterização cultural das espécies de Aspergillus detectadas, é um importante passo para a prevenção da presença de micotoxinas no substrato, garantindo a qualidade do produto, tanto para a comercialização in natura quanto já processado. A partir de grãos e frutos de amendoim comercializados, in natura ou processados, no estado de Alagoas foram isolados os fungos Aspergillus flavus, A. niger, A. ochraceus, A. parasiticus, Fusarium verticillioides (= F. moniliforme), F. equiseti, Rhizopus stolonifer, Botrytis cinerea, Penicillium italicum e Colletotrichum sp. De um modo geral, os grãos processados apresentaram menor incidência de fungos, diferindo estatisticamente dos grãos in natura, com destaque para as espécies A. flavus, A. parasiticus, F. verticillioides e F. equiseti. As espécies de Aspergillus foram identificadas com base nas características culturais, exibidas em meio de Czapek-ágar, e morfológicas, através de microscópio ótico. No oitavo dia de crescimento em meio de BDA, cada espécie apresentou diferenças quanto à taxa de crescimento durante o período de incubação, de acordo com a procedência das amostras dos grãos ou frutos.

Esterilização por óxido de etileno: I. Influência do meio de esporulação na resistência dos esporos de Bacillus subtilis var. niger

Tendo por meta a padronização das variáveis influenciando a resistência de esporos empregados no controle do processo esterilizante por óxido de etileno, foram obtidos esporos de Bacillus subtilis var. niger, em meio sólido e líquido sintético de esporulação. Tais esporos, após padronização quantitativa dos 12 lotes obtidos, foram submetidos a exposições subletais como bioindicadores, tendo o papel como suporte. Construiu-se, então, a curva de letalidade característica de cada lote. A análise estatística empregada não evidenciou diferenças entre resistência dos 10 lotes obtidos em meio sólido e os 2 em meio líquido sintético, ressaltando-se a vantagem quanto ao rendimento que caracterizou a primeira metodologia.

Obtenção e avaliação de antígenos de Aspergillus fumigatus

Antígenos de três amostras de A. fumigatus (354, 356, JIG) e antissoro contra a mistura destes antígenos foram produzidos e avaliados imunoquimicamente. Os antígenos de filtrado de cultura foram obtidos após concentração com acetona conforme adaptação da técnica descrita por Coleman & Kaufman. Em prova de ID obteve-se 100% de positividade com os soros de pacientes com aspergilose estudados. Com relação aos soros heterólogos encontramos reatividade com soro de um paciente com candidíase e com soro de um paciente com histoplasmose; foi encontrado padrão idêntico de resposta quando se utilizou o antígeno de referência. O antissoro foi titulado por ID, CIE e RFC MI contra o antígeno específico apresentando títulos respectivos de 1:32, 1:32 e 1:128, e utilizado para reagir contra o mesmo antígeno por IEF, demonstrando 8 linhas de precipitação, sendo 5 na região anódica e 3 na região catódica. O perfil de bandeamento do antígeno em eletroforese utilizando gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) a 12,5% apresentou-se complexo com 26 sub-unidades protéicas, cujos pesos moleculares variaram de 18 a > 100kDa. Quando estes componentes foram eletrotransferidos e reagidos com o antissoro específico ("immunoblotting"), verificou-se imunogenicidade em todas as frações bandeadas.

Cerebral aspergillosis due to Aspergillus fumigatus in AIDS patient: first culture - proven case reported in Brazil

Cerebral aspergillosis is a rare cause of brain expansive lesion in AIDS patients. We report the first culture-proven case of brain abscess due to Aspergillus fumigatus in a Brazilian AIDS patient. The patient, a 26 year-old male with human immunodeficiency virus (HIV) infection and history of pulmonary tuberculosis and cerebral toxoplasmosis, had fever, cough, dyspnea, and two episodes of seizures. The brain computerized tomography (CT) showed a bi-parietal and parasagittal hypodense lesion with peripheral enhancement, and significant mass effect. There was started anti-Toxoplasma treatment. Three weeks later, the patient presented mental confusion, and a new brain CT evidenced increase in the lesion. He underwent brain biopsy, draining 10 mL of purulent material. The direct mycological examination revealed septated and hyaline hyphae. There was started amphotericin B deoxycholate. The culture of the material demonstrated presence of the Aspergillus fumigatus. The following two months, the patient was submitted to three surgeries, with insertion of drainage catheter and administration of amphotericin B intralesional. Three months after hospital admission, his neurological condition suffered discrete changes. However, he died due to intrahospital pneumonia. Brain abscess caused by Aspergillus fumigatus must be considered in the differential diagnosis of the brain expansive lesions in AIDS patients in Brazil.

Invasive Aspergillus flavus sinusitis: case report in a patient with biphenotypic acute leukemia

Here we report a case of invasive pansinusitis with proptosis of the right eye caused by Aspergillus flavus in an immunocompromised patient with acute biphenotypic leukemia without aggressive therapy response.

Variability in Galactomannan detection by platelia Aspergillus EIA™ according to the Aspergillus species

Here we investigate the extent to which different Aspergillus species release galactomannan (GM) in vitro. Marked variability was observed in GM reactivity between and within Aspergillus species, with A. terreus strains showing the highest GM indexes. The in vivo significance of these findings remains to be determined.