Identificação por PCR e sensibilidade a antifúngicos de isolados clínicos vaginais de Candida sp

INTRODUÇÃO: A candidíase vaginal é uma condição que afeta um grande número de mulheres em idade fértil. Candida albicans é a espécie mais frequentemente isolada de secreção vaginal, entretanto, outras espécies mais resistentes às drogas antifúngicas podem ser isoladas de amostras clínicas vaginais. MÉTODOS: Foram identificadas as espécies de 30 isolados vaginais de Candida sp por PCR utilizando o primer universal ITS4 e primers espécie-específicos para C. albicans, C. glabrata, C. tropicalis e C. krusei. A sensibilidade destes isolados frente à anfotericina B, fluconazol e voriconazol foi determinada pelo método de macrodiluição M27-A2 do CLSI. RESULTADOS: Através dos ensaios de PCR, 28 isolados foram caracterizados como C. albicans e 2 isolados apresentaram amplificação para os primers específicos de C. albicans e C. glabrata. A concentração inibitória mínima para anfotericina B variou de 0,03µg/mL a 0,25µg/mL, para o fluconazol de 0,125µg/mL a 16µg/mL e para o voriconazol de 0,03µg/mL a 0,25µg/mL. CONCLUSÕES: A identificação de Candida ao nível de espécie através de ensaios de PCR deve ser relevante para o gerenciamento clínico destas infecções.

Parasitismo em humano por Amblyomma sp (Acari: Ixodidae), na cidade de Recife, estado de Pernambuco

INTRODUÇÃO: Os ixodídeos pertencentes ao gênero Amblyomma são encontrados no Brasil, sendo de grande importância em Saúde Pública por representarem risco na transmissão de patógenos. MÉTODOS: Este trabalho relata um caso de parasitismo em humano por Amblyomma sp, ocorrido na Cidade de Recife, Pernambuco. RESULTADOS: O parasitismo foi observado em uma senhora onde os ectoparasitos encontravam-se fixados em suas pernas e pés. CONCLUSÕES: Este tipo de achado é incomum e constitui o primeiro relato do parasitismo em humano por Amblyomma sp, no Estado de Pernambuco.

Ação ovicida do extrato bruto enzimático do fungo Pochonia chlamydosporia sobre ovos de Ancylostoma sp

INTRODUÇÃO: Ancylostoma sp é um geo-helminto potencialmente zoonótico. MÉTODOS: O objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro a ação do extrato bruto enzimático de Pochonia chlamydosporia (VC4) sobre ovos de Ancylostoma sp, em meio ágar-água 2% e em cultura de fezes. RESULTADOS: Observou-se um percentual de redução na eclosão dos ovos de Ancylostoma sp, de 76,8% na placas de Petri do grupo tratado em relação ao grupo controle. CONCLUSÕES: O extrato bruto enzimático de Pochonia chlamydosporia foi eficiente na redução da eclosão dos ovos de Ancylostoma sp, podendo ser utilizado como controlador biológico desse nematoide.

Ocorrência e perfil de sensibilidade a antimicrobianos em Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter sp. em um hospital terciário, no sul do Brasil

INTRODUÇÃO: O principal mecanismo de resistência entre isolados de Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter sp. é a produção de metalo-β-lactamases (MβLs). As MβLs são enzimas capazes de hidrolisar cefalosporinas, penicilinas e carbapenêmicos, mas não monobactâmicos (aztreonam) antibióticos que se encontram entre as principais opções terapêuticas para o tratamento de infecções causadas por bactérias não fermentadoras de glicose. MÉTODOS: Um estudo observacional, transversal, descritivo e retrospectivo foi desenvolvido para avaliar a frequência e o perfil de susceptibilidade cepas de P. aeruginosa e Acinetobacter sp. produtoras de MβLs isoladas no Hospital São Vicente de Paulo, Passo Fundo, Brasil. RESULTADOS: A produção de MβLs foi observada em 77,6% (n = 173/223) dos isolados de P. aeruginosa e em 22,4% (n = 50/223) dos isolados de Acinetobacter sp. Dentre as cepas produtoras de MβL, a maioria apresentou mais de 90% de resistência a seis antimicrobianos dos 12 testados, enfatizando a resistência a ceftazidima, gentamicina, aztreonam, piperaciclina/tazobactam, cefepime, ciprofloxacina, meropenem e tobramicina. CONCLUSÕES: Os índices de MβL encontrados confirmam a preocupação mundial com a disseminação desse mecanismo de resistência.

Molecular detection of Treponema pallidum sp. pallidum in blood samples of VDRL-seroreactive women with lethal pregnancy outcomes: a retrospective observational study in northern Brazil

INTRODUCTION: Although control measures of maternal and congenital syphilis are available in Brazil, difficulties exist within the healthcare network in providing a laboratory diagnosis of the infection during the prenatal period. The objective of this study was to confirm the presence of Treponema pallidum by PCR in women with positive VDRL serology and lethal pregnancy outcomes, i.e., abortion, stillbirth and neonatal death. METHODS: A retrospective study was conducted on VDRLseroreactive women with lethal pregnancy outcomes admitted to the Fundação Santa Casa de Misericórdia do Pará (FSCM-PA) between January and July 2004. Serum samples and DNA from whole blood were obtained at the time of screening by the VDRL test. These samples were analyzed by IgG ELISA, IgM FTA-Abs and simple PCR (polA). RESULTS: During the study period, 0.7% (36/4,912) of women with lethal pregnancy outcomes presented a positive VDRL test. The polAgene was amplified in 72.7% (24/33) of these women, with 55.6% (20/36) and 94.4% (34/36) presenting IgM and IgG antibodies against T. pallidum, respectively. Comparison of these results showed a significant difference, with agreement between the PCR and IgM FTA-Abs results, suggesting that maternal syphilis was an active infection. No basic cause of death of the conceptus was reported in 97.2% (35/36) of cases. Among women who were submitted to the VDRL test during the prenatal period, only four of the nine seroreactive patients underwent treatment. CONCLUSIONS: The high frequency of syphilis in the group studied indicates the fragility of the service of infection diagnosis, treatment and monitoring, compromising epidemiological control.

Biologia comparativa e comportamento alimentar de Rhodnius neglectus e Rhodnius robustus (Triatominae) sob condições de laboratório

INTRODUÇÃO: A competência vetorial de triatomíneos é determinada a partir de estudos sobre biologia e comportamento alimentar em condições de campo e/ou laboratório. Fatores como número de picadas, quantidade de sangue ingerido e tempo de defecação têm implicações na transmissão de tripanosomatídeos. Parâmetros biológicos e comportamentais de Rhodnius neglectus e R. robustus foram comparados experimentalmente para estimar diferenças no potencial de transmissão de tripanosomatídeos. MÉTODOS: Os triatomíneos foram observados diariamente para determinar o período de desenvolvimento ninfal, mortalidade, detecção da fonte alimentar, número de picadas, tempo do repasto sanguíneo, quantidade de sangue ingerido, tempo entre o final do repasto e a primeira defecação e frequência de defecação. RESULTADOS: Apesar do período ninfal de R. neglectus (156,4 ± 25,05d) ter sido menor que o de R. robustus (204,7 ± 13,22d), a mortalidade foi similar entre as espécies (63,8 e 65%, respectivamente). R. robustus e R. neglectus detectaram rapidamente a fonte alimentar, especialmente no primeiro estádio (2,5 e 1,6min, respectivamente). Apesar do tempo de repasto sanguíneo ter sido similar entre as espécies, R. robustus ingeriu em média uma maior quantidade de sangue em todos os estádios, com maiores valores para as ninfas V. As ninfas de R. neglectus picaram mais vezes as fontes alimentares, defecaram mais rápido e mais frequentemente que as de R. robustus. CONCLUSÕES: Sob as condições de laboratório usadas, R. neglectus possui um maior potencial para transmissão de Trypanosoma cruzi e T. rangeli que R. robustus, atributo que deve ser avaliado em infecções experimentais.

Molecular characterization of clinical multiresistant isolates of Acinetobacter sp. from hospitals in Porto Alegre, State of Rio Grande do Sul, Brazil

INTRODUCTION: Hospitals around the world have presented multiresistant Acinetobacter sp. outbreaks. The spread of these isolates that harbor an increasing variety of resistance genes makes the treatment of these infections and their control within the hospital environment more difficult. This study aimed to evaluate the occurrence and dissemination of Acinetobacter sp. multiresistant isolates and to identify acquired resistance genes. METHODS: We analyzed 274 clinical isolates of Acinetobacter sp. from five hospitals in Porto Alegre, RS, Brazil. We evaluated the susceptibility to antimicrobial, acquired resistance genes from Ambler's classes B and D, and performed molecular typing of the isolates using enterobacterial repetitive intergenic consensus-polymerase chain reaction (ERIC-PCR) technique. RESULTS: A high (68%) percentage of multiresistant isolates of Acinetobacter sp. was observed, and 69% were resistant to carbapenems. We identified 84% of isolates belonging to species A. baumannii because they presented the gene blaOXA-51. The gene blaOXA-23 was detected in 62% of the isolates, and among these, 98% were resistant to carbapenems. Using the ERIC-PCR technique, we identified clones of Acinetobacter sp. spread among the four hospitals analyzed during the sampling period. CONCLUSIONS: The data indicate the dissemination of Acinetobacter sp. isolates among hospitals and their permanence in the hospital after one year.

Glutathione levels in and total antioxidant capacity of Candida sp. cells exposed to oxidative stress caused by hydrogen peroxide

INTRODUCTION: The capacity to overcome the oxidative stress imposed by phagocytes seems to be critical for Candida species to cause invasive candidiasis. METHODS: To better characterize the oxidative stress response (OSR) of 8 clinically relevant Candida sp., glutathione, a vital component of the intracellular redox balance, was measured using the 5,5'-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid (DTNB)-glutathione disulfide (GSSG) reductase reconversion method; the total antioxidant capacity (TAC) was measured using a modified method based on the decolorization of the 2,2'-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic) acid radical cation (ABTS*+). Both methods were used with cellular Candida sp. extracts treated or not with hydrogen peroxide (0.5 mM). RESULTS: Oxidative stress induced by hydrogen peroxide clearly reduced intracellular glutathione levels. This depletion was stronger in Candida albicans and the levels of glutathione in untreated cells were also higher in this species. The TAC demonstrated intra-specific variation. CONCLUSIONS: Glutathione levels did not correlate with the measured TAC values, despite this being the most important non-enzymatic intracellular antioxidant molecule. The results indicate that the isolated measurement of TAC does not give a clear picture of the ability of a given Candida sp. to respond to oxidative stress.

Correlation between microdilution, Etest, and disk diffusion methods for antifungal susceptibility testing of fluconazole against Candida sp. blood isolates

INTRODUCTION: Antifungal susceptibility testing assists in finding the appropriate treatment for fungal infections, which are increasingly common. However, such testing is not very widespread. There are several existing methods, and the correlation between such methods was evaluated in this study. METHODS: The susceptibility to fluconazole of 35 strains of Candida sp. isolated from blood cultures was evaluated by the following methods: microdilution, Etest, and disk diffusion. RESULTS: The correlation between the methods was around 90%. CONCLUSIONS: The disk diffusion test exhibited a good correlation and can be used in laboratory routines to detect strains of Candida sp. that are resistant to fluconazole.

Schistosomiasis mansoni in urban Northeast Brazil: influence of rainfall regime on the population dynamics of Biomphalaria sp.

Introduction Our objective was to evaluate the influence of rainfall regime on the population dynamics of Biomphalaria in a potential urban focus of schistosomiasis in Aracaju, Brazil, during 2009-2010. Methods Snails were collected monthly and were counted, measured and identified; the level of infection and fecal contamination at the sampling sites was determined; rainfall data were obtained. Results High levels of fecal contamination were observed, and the abundance of Biomphalaria glabrata increased during the rainy and post-rainy seasons. The snails' size was variable, and infected snails were identified independently of rainfall. Conclusions These results provide evidence of anthropogenic and climate interference in an urban focus of schistosomiasis in the Aracaju metropolitan area.

Laboratory diagnosis of amebiasis in a sample of students from southeastern Brazil and a comparison of microscopy with enzyme-linked immunosorbent assay for screening of infections with Entamoeba sp.

Introduction: Epidemiological studies on amebiasis have been reassessed since Entamoeba histolytica and E. dispar were first recognized as distinct species. Because the morphological similarity of these species renders microscopic diagnosis unreliable, additional tools are required to discriminate between Entamoeba species. The objectives of our study were to compare microscopy with ELISA kit (IVD®) results, to diagnose E. histolytica infection, and to determine the prevalence of amebiasis in a sample of students from southeastern Brazil. Methods: In this study, diagnosis was based on microscopy due to its capacity for revealing potential cysts/trophozoites and on two commercial kits for antigen detection in stool samples. Results: For 1,403 samples collected from students aged 6 to 14 years who were living in Divinópolis, Minas Gerais, Brazil, microscopy underestimated the number of individuals infected with E. histolytica/E. dispar (5.7% prevalence) compared with the ELISA kit (IVD®)-based diagnoses (15.7% for E. histolytica/E. dispar). A comparison of the ELISA (IVD®) and light microscopy results returned a 20% sensitivity, 97% specificity, low positive predictive value, and high negative predictive value for microscopy. An ELISA kit (TechLab®) that was specific for E. histolytica detected a 3.1% (43/1403) prevalence for E. histolytica infection. Conclusions: The ELISA kit (IVD®) can be used as an alternative screening tool. The high prevalence of E. histolytica infection detected in this study warrants the implementation of actions directed toward health promotion and preventive measures.

Molecular detection of Trypanosoma sp. and Blastocrithidia sp. (Trypanosomatidae) in phlebotomine sand flies (Psychodidae) in the Federal District of Brazil

Abstract: INTRODUCTION : This study describes the occurrence of trypanosomatids in phlebotomines in Brasília, Brazil. METHODS : Two hundred and ten females of 13 sand fly species were analyzed by polymerase chain reaction (PCR) using different molecular markers (D7 24Sα rRNA, kDNA, and ITS1) and sequencing. RESULTS : PCR revealed trypanosomatid-positive samples from Nyssomyia whitmani and Evandromyia evandroi, which were negative by kDNA and ITS1 Leishmania-specific PCRs. DNA sequence analysis of D7 24Sα rRNA amplicons indicated the occurrence of Blastocrithidia sp. and Trypanosoma sp. in Nyssomyia whitmani and Evandromyia evandroi, respectively. CONCLUSIONS : Two trypanosomatid species other than Leishmania sp. were found to circulate in sand flies in Central Brazil.

Frequency of histopathological changes in Howler monkeys ( Alouatta sp.) naturally infected with yellow fever virus in Brazil

Abstract: INTRODUCTION: Due to the importance that Howler monkeys have on the yellow fever (YF) epidemiological sylvatic cycle in Brazil, more accurate morphological diagnostic criteria needs to be established, especially considering the differences that may exist between the genera of Brazilian non-human primates (NHPs) involved in yellow fever virus (YFV) epizootics. METHODS: Records of YF epizootics in NHPs in Brazil between 2007 and 2009 were obtained from the Brazilian Ministry of Health database to select YF positive (n=98) Howler monkeys (Alouatta sp.) for this study. The changes described in the histopathological reports were categorized by organ and their frequencies calculated. RESULTS: The most frequent lesions observed in the animals with YF were hepatocyte apoptosis (Councilman body formation), midzonal hepatocyte necrosis, steatosis, liver hemorrhage, inflammatory mononuclear cell infiltration of the liver, renal acute tubular necrosis and interstitial nephritis. Midzonal hepatocyte necrosis, steatosis and hemorrhage presented positive correlations with apoptosis of hepatocytes, suggesting strong YFV pathogenic effect association; they were also the main histopathological changes in the Alouatta sp. A pronounced negative correlation between apoptosis of hepatocytes and hepatic mononuclear cell infiltration pointed to significant histopathological differences between YFV infection in Howler monkeys and humans. CONCLUSIONS: The results warn that NHPs may exhibit different response patterns following YFV infection and require a more careful diagnosis. Presumptive diagnosis based on primate histopathological lesions may contribute to public health service control.

Alguns aspectos da biologia reprodutiva do guaranazeiro (Paullinia cupana var. sorbilis (Mart.) Ducke - Sapindaceae

O objetivo deste trabalho é a identificação dos insetos visitantes do guaraná (Paullinia cupanavar. sorbilis)e a determinação dos prováveis polinizadores, em uma plantação próxima de Manaus, assim como determinar a taxa de visita em ambas as flores, masculinas e femininas. Também estuda a variação na freqüência da produção de flores masculinas e femininas, no período da floração. Foram coletadas trinta e duas famílias de insetos de cinco ordens. Hymenoptera foi a ordem mais freqüente com 71% de todos os indivíduos. Vinte e sete espécies de abelhas foram encontradas visitando as flores. A síndrome geral da polinização da espécies parece estar adaptada aos Hymenoptera. E sugerido que Melipona seminigra merilae, Xylocopa muscariae Apis melliferaestão entre os mais Importantes polinlzadores, sendo que outros Hymenoptera, Diptera, Lepidoptera e Coleoptera são, talvez, ocasionais . Parece não haver preferência dos diversos grupos de insetos por flores masculinas ou femininas. A floração ocorreu durante 37 a 38 dias com dois períodos bem definidos. Houve uma pausa de um a dois dias [sem floração) entre os dois períodos, coincidindo em todas as inflarescências estudadas. 0 primeiro período durou 20-22 dias, enquanto o segundo foi menor, durando somente 16-18 dias. Em nenhum caso, o pique da floração masculina coincidiu com a feminina.

Biologia alimentar de três espécies de Triportheus (PISCES: CHARACOIDEIL, CHARACIDAE) do Lago do Castanho, Amazonas

Neste trabalho, é discutida a composição do conteúdo estomacal de três espécies de sardinha: Triportheus angulatus, Triportheus elongatus e Triportheus culter, do lago do Castanho, um lago de várzea localizado na Amazônia Central, com o objetivo de determinar o comportamento alimentardessas espécies, comparativamente, em funções de variações hidrológicas e ecológicas regionais, e desenvolvimento dos indivíduos. Paralelamente, procura-se correlacionar determinadas estruturas morfoanatômicas de adaptação ligadas mais diretamente ao tipo de regime alimentar de cada espécie como dentes e rastros branquiais. Em conseqüência dos tipos de alimentos ingeridos e observações de campo é feita a caracterização do possível bíotopo ocupado pelas espécies.