Sobre a sensibilidade da cultura de leucócitos circulantes na detecção de Leishmania no sangue periférico de pacientes com leishmaniose tegumentar

Foi investigada a presença de Leishmania, através da cultura de leucócitos circulantes, no sangue periférico de 60 pacientes portadores de leishmaniose tegumentar americana, nas suas diferentes formas clínicas, assim como nas principais fases evolutivas da doença. Biópsias de lesões cutâneas e/ou de mucosa desses pacientes foram obtidas com a finalidade de isolar e caracterizar os parasitas, através da técnica de anticorpos monoclonais. Dos 60 pacientes examinados, foram isoladas 40 amostras de Leishmania das lesões biopsiadas, sendo 5 de Leishmania (V.) brasiliensis, 3 de L. (V.) guyanensis, 1 de L. (V.) lainsoni, 13 de L. (L.) amazonensis e 18 não puderam ser caracterizados a nível específico, porém, reagiram com anticorpos monoclonais do grupo braziliensis. Quanto àpesquisa através das culturas de leucócitos circulantes, esta revelou resultados completamente negativos. Com base nesses achados, os autores concluíram ser pouco consistente atribuir valor à cultura de leucócitos para o diagnóstico da leishmaniose tegumentar.

Leishmaniose cutânea experimental: II - aspectos evolutivos da infecção no primata Cebus apella (Cebidae) pela Leishmania (V.) Braziliensis e L. (L.) Amazonensis

Objetivando avaliar o potencial do primata C. apella como modelo experimental da leishmaniose cutânea, produzida pela L. (V.) braziliensis e L. (L.) Amazonensis , inocularam-se, via intradérmica, 3 X 10(6) de promastigotas dessas leishmanias, em 8 sítios da cauda de 10 espécimens desse primata, 5 deles com a L. (V.) braziliensis e outros 5 com a L. (L.) Amazonensis . Posteriormente, às inoculações, o exame semanal dos animais e biópsias mensais, revelaram os seguintes resultados relativos a cada parasita: a) L. (V.) braziliensis : o período de incubação foi de 15-20 dias; aos 30 dias evidenciaram-se lesões pápulo-eritematosas, que evoluíram para nódulos ao fim de 60 dias; no 3.° mês, notou-se ulceração espontânea destas lesões e, no 4° mês, deu-se o início da reparação das lesões ulceradas, culminando com a cura em um dos animais após 5 meses, em dois após 6 meses, noutro após 7 meses e, no último, após 10 meses. Quanto ao parasitismo nas lesões, foi demonstrado nos 5 animais, até 90 dias; depois disto, somente em 2 até 120 dias e, por fim, até 180 dias apenas naquele que curou depois de 10 meses, b) L. (L.) Amazonensis : o período de incubação foi de 20 dias; aos 30 dias notou- se lesões pápulo-eritematosas, que também evoluíram para nódulos ao fim de 60 dias, porém, a partir do 3.° mês, estas lesões regrediram rapidamente ao fim de 90 dias, quando não mais detectou-se o parasita na pele dos animais. Em relação aos testes de Montenegro, somente 2 dos 5 animais infectados com a L. (V.) braziliensis reagiram ao teste, 60 e 90 dias após as inoculações. Os resultados observados permitiram confirmar a infectividade do C. apella a estas leishmanias e, também, reforçar a indicação desse primata como modelo experimental da leishmaniose cutânea causada por estes parasitas.

Teste de aglutinação direta no sorodiagnóstico da leishmaniose visceral no estado do Pará

Avaliou-se o teste de aglutinação direta (TAD) no sorodiagnóstico da leishmaniose visceral (LV) humana e de canídeos (cão e raposa Cerdocyon thous), sendo os resultados comparados com aqueles obtidos em imunofluorescência indireta (IFI) e ensaio imunoenzimático (ELISA). Utilizaram-se soros: humanos (303): indivíduos com LV confirmada (16), suspeitos de LV (65), em outras condições (102), controles negativos (15), indivíduos em área endêmica (105): de cães (82): de área endêmica (68), Salvaterra/Marajó/PA. (21 parasitologicamente positivos), e controles negativos (14), de Belém; de raposas (9): espécimes capturados na Ilha do Marajó. Antígenos para o TAD foram preparados a partir de promastigotas de Leishmania (Leishmania) donovani e L. (L.) chagasi. Aqueles utilizados em ELISA e IFI, respectivamente, de promastigotas (antígeno solúvel) e amastigotas deL. (L.) chagasi. Em humanos, a especificidade e sensibilidade do TAD, utilizando-se antígeno deL. (L.) donovani, foram altas (98,4% e 100%, respectivamente) e comparáveis às de IFI (97,5% e 100%). ELISA foi menos específico (84,8%), embora igualmente sensível. Em cães, o TAD foi mais específico com antígeno de L. (L.) donovani do que com aquele preparado a partir de L. (L.) chagasi. Entretanto, ELISA e TAD foram menos sensíveis (ambos 71,4%) que IFI (100%). Essa diferença foi reflelida nos resultados de cães de área endêmica, 87% dos quais foram positivos para IFI, mas somente 54% para ELISA e 49% para o TAD. Resultados similares foram observados com raposas, quando todos os 9 soros foram positivos para IFI, 7 de 9 (78% ) positivos para ELISA, enquanto que o TAD não revelou nenhum resultado positivo. Concluiu-se que o TAD, usando antígeno de L. (L.) donovani é um teste útil para LV humana; sua utilização em ampla escala é indicada, desde que monitorada por um laboratório de referência que garanta qualidade dos antígenos. Contudo, não é a melhor opção em inquéritos sorológicos caninos, já que foi menos específico que ELISA e, especialmente, IFI, na detecção de anticorpos em casos infecção canina.

Observações sobre o diagnóstico laboratorial e a epidemiologia da leishmaniose tegumentar no Estado do Paraná, sul do Brasil

De 1986 a 1997 foram encaminhados ao Laboratório de Ensino e Pesquisa em Análises Clínicas, da Universidade Estadual de Maringá, 1418 pacientes suspeitos de leishmaniose tegumentar para diagnóstico laboratorial. Os testes utilizados foram a intradermorreação de Montenegro, reação de imunofluorescência indireta, pesquisa direta, isolamento e identificação de Leishmania. Destes pacientes, 955 (67,3%) apresentaram pelo menos um dos testes positivo, entre os quais 804 (84,2%) contraíram a infecção no Estado do Paraná, 665 (69,6%) tinham de 15 a 49 anos de idade, 658 (68,9%) eram do sexo masculino, 523 (54,8%) foram diagnosticados nos 3 primeiros meses de evolução da lesão e 74 (7,7%) apresentavam comprometimento nasobucofaríngeo. Dos 83 municípios do Estado do Paraná envolvidos, destacaram-se São Jorge do Ivaí (10,2%), Doutor Camargo (9,8%), Terra Boa (7,3%), Maringá (7,3%), Jussara (6,0%) e Cianorte (4,5%). Foram isoladas 77 cepas de Leishmania (Viannia) braziliensis, predominando (63,6%) o serodema 1.

A pictorial field guide for the rapid identification of sandflies (DIPTERA: PSYCHODIDAE), commonly encountered in Pará state, Brazil.

A pictorial field guide to the 30 species of sandfly most commonly encountered in Pará State is presented, based on the easily recognised external characters of the length of the 5th palpal segment, thoracic infuscation, abdominal colour and head and body size. In most cases this allows identification to the species. In others, especially with females, it gives an indication of the species, which may then be confirmed with data from more detailed taxanomix studies. This type of field guide helps in teaching, rapid sorting of flies prior to dissection and in acquainting visitors with the variety of species present in a given area.A rapid technique for the taxonomic sorting of unmounted, freshly killed female sandflies is required, prior to the dissection of large numbers of a particular species. Such a method is useful in areas where numerous species occur in studies on natural flagellate infections, age determination and for ecological studies. With the above points in mind a pictorial field guide has been designed that enables the identification of unmounted, unmacerated specimens of the 30 more commonly encountered species of phleboto-mine sandflies (***) in Pará State, North Brazil. It is based on the easily recognised external characters of the length of the 5th palpal segment, thoracic infuscation, ad-dominal colour and proboscis and body size.Taxonomy of male phlebotomine sandflies is based on the structure of the genitalia and, as most of this is external, a wholly external character key is readily made. Female taxonomy, however, is based on the internal character of the cibarium, pharynx and sperma thecae. In order to produce an external character key we therefore return to an unso phisticated "phlebotometry" (see Martins et al., 1978 p. 3 for review), using relative lengths of the proboscis, palpal segments and body, along with the degree of infuscation. Ihis idea is not new; indeed many sandfly specialists presently use external characters to separate certain species (H. Fraiha, R. P. Lane, P. D. Ready, D. G. Young and R. D. Ward personal communications 1983 & 1984).A key used to separate five anthropophillic sandflies by Biagi (1966), in Mexico, was based mainly on palpal segment length and infuscation. Floch and Abonnenc (1952) stressed the use of relative lengths of palpal segments in their keys to the sandflies of French Guiana, and four members of the shannoni group have been similarly separated according to the degree of infuscation by Morales et al. (1982). The use of thoracic infuscation as a reliable character seems to be gaining favour, having been used by young & Fairchild (1974) and Ready & Fraiha (1981). Indeed Chariotis 1974) showed the usefulness of thoracic infuscation to sepenate 7 anthropophillic species, during studies onvesicular stomatitis in Panama. Identification using external characters is essential for work on viral isolations from sandflies, where bulk samples of whole sandflies are used.Perhaps the major advantage of a simple visual guide is for teaching purposes. Technical staff in this lnstitute are able to identify most of the species they encounter without having to use the standard, more unwieldly (and in many cases unavailable) internal character keys, and the guides presented below have allowed rapid species sorting prior to the dissection of sandflies in our leismaniasis study areas (Ryan et at. ,1985).

O emprego das soluções de HCl 0,1 N de EDTA (NH4)2 CO3 e da ditizona - acetato de amônio na extração de zinco em solos de Piracicaba

Foram feitas determinações de zinco total, solúvel em HCl 0,1 N, solúvel em EDTA-(NH4) 2CO3 e solúvel em ditizona em 8 perfis de solos de 8 séries de solos do município de Piracicaba, Estado de São Paulo-Brasil. Para determinação do zinco total, solúvel em HCl 0,1 N, solúvel em EDTA(NH4/2CO3 e solúvel em ditizona, usouse o método de TRIERWEILER e LINDSAY (1968) e para a ditizona (NH4/2SO4 o método de SHAW e DEAN (1952). Foram estudadas as correlações entre as soluções extratoras de zinco e o zinco total, e o confronto entre os extratores químicos. A solução extratora de HCl 0,1 N extraiu maior quantidade de zinco do que as soluções do EDTA-carbonato de amônio e de ditizona acetato de amônio. Esta, por sua vez, na maior parte dos casos, não diferiu da solução do EDTA-carbonato de amônio. Estudo de correlações entre as soluções extratoras e o zinco total mostrou que apenas o HCl 0,1 N apresentou tal correlação. As principais conclusões foram as seguintes: 1- Os teores de zinco total para os perfis de solos situam-se entre 23 e 128 ppm de Zn. 2- As séries Bairrinho, Luiz de Queiroz e Guamium foram as mais altas em Zn total (46 a 128 ppm). 3- As séries Paredão Vermelho, Quebra Dente, Monte Olimpo e Lageadinho foram as mais baixas em zinco total (23 a 55 ppm de Zn). 4- O HCl 0,1 N extraiu mais zinco do que as soluções de EDTA- (NH4) 2CO3 e da ditizona e acetato de amônio. Entre estas duas soluções não houve diferença nos teores. 5- Os solos Luiz de Queiroz, Lageadinho e Bairrinho, foram os altos em zinco solúvel, pelas soluções extratoras.

Schooling and swimming behaviors of Hyla semilineata tadpoles (Anura, Hylidae)

The schooling behavior of Hyla semilineata Spix, 1824 tadpoles is described. Experiments were carried out both in the natural environment and under controlled conditions to quantify the constant movement of these tadpoles. Bullfrog tadpoles (Rana catesbeiana Shaw, 1802), similar in size to the H. semilineata larvae, were used as controls in the experiments. Hyla semilineata tadpoles remained stationary for one sixth of the time that the bullfrog tadpoles did and the number of individuals of H. semilineata moving at any given moment was about seven times greater. The schooling behavior and constant swimming behavior of these tadpoles may enhance the effect of their warning coloration.

The diet of the South American sea lion (Otaria flavescens) at Río Negro, Patagonia, Argentina, during the winter-spring period

The South American sea lion, Otaria flavescens (Shaw, 1800) population is steadily expanding along the Patagonian coast of Argentina in the last decades. However, little is known about the feeding ecology of the species in the area. The aim of this study was to analyze the food habits of O. flavescens from 91 scats collected at Río Negro province, during the winter and spring of 2005. Fish occurred in 96% of scats containing prey remains, followed by cephalopods (26%). Raneya brasiliensis (Kaup, 1856) was the most frequent and abundant species occurring in 58.6% of samples and constituting almost 50% of fish predated. Second in importance were Porichthys porosissimus (Cuvier, 1829) and Cynoscion guatucupa (Cuvier, 1830) in terms of occurrence (%FO 20.7) and numbers (29.6%) respectively. The squid Loligo gahi (d'Orbigny, 1835) was the most frequent cephalopod prey (42.1%), whereas Octopus tehuelchus (d'Orbigny, 1834) was the most abundant (77%). The higher amount and diversity of prey found in the spring in comparison with the winter season might be related to a higher feeding activity of seals or to a seasonal increase in food availability in the area.

A contribution to the study of the Haematozoon parasites of bats: a new mammalian haemoproteid, Polychromophilus deanei n. sp

Polychromophilus deanei n. sp. (Haemosporidiidea, Haemoproteidae) is described from a vespertilionid bat, Myotis nigricans nigricans (SCHINZ, 1821), captured on the Rio Maracapuçu, Município of Abaetetuba, Pará, Brasil. Mature oocysts were found in 2 specimens of the ectoparasite Basilia sp., taken form the infected animal. The parasite is probably the same as that previously described in another bat, Glossophaga soricina soricina, from the same general area, by DEANE & DEANE in 1961.

Phlebotominae brasileiros: II - Psychodopygus wellcomei, nova espécie antropófila de flebótomo do grupo squamiventris, do Sul do Estado do Pará, Brasil (Diptera, Psychodidae)

Os autores descrevem os adultos de uma nova espécie de flebótomo do gênero Psychodopygus, grupo squamiventris, que ocorre no sul do Estado do Pará, Brasil, baseando-se em 7 exemplares machos e 8 fêmeas, coletados com isca humana ou animal. Os machos têm genitália complexa, bem característica, distinguindo-se fàcilmente das epécies afins. As fêmeas são muito semelhantes às das demais espécies do grupo, separando-se, porém, pelo aspecto dos dutos individuais inteiramente esclerotinizados, pelo número de dentes verticais do cibário, de 12 a 20, e plo comprimento do terceiro segmento antenal: 265 a 332μ. Ratificam o parecer de Martins et al. sôbre a identidade de "L. squamiventris" do Amapá, segundo Forattini, com P. maripaensis, e mostram o que lhes parece ser o aspecto natural da genitália do macho dessa espécie. Acreditam na importância da nova espécie na transmissão de Leishmaniose tegumentar para o homem, salientando ainda os hábitos diuturnos das fêmeas.

Presence of Psychodopygus wellcomei (Diptera: Psychodidae), a proven vector of Leishmania braziliensis braziliensis, in Ceara State

Psychodopygus wellcomei, a proven vector of (muco-)cutaneous leishmaniasis, has been found for the first time outside of the Amazon Basin, in Ceará State. Parasitological and entomological evidence suggests that the Leishmania braziliensis braziliensis/Ps. wellcomei zoonosis is widespread on the Brazilian Shield.

The retained capacity of Lutzomya longipalpis (Lutz & Neiva) to transmit Leishmania chagasi (Cunha & Chagas) after eight years (64 generations in a closed laboratory colony

A closed Lutzomyia longipalpis colony, from Ceará has been used to transmit Leishmania chagasi isolated from a fox in Pará state. The last time this colony was successfully used in similar transmission experiments was eight years (64 generations) ago indicating that this colony of Lu. longipalpis has fully maintained its vectorial capacity in spite of such a long period of maintainance in the laboratory.

Observations on the sandfly (Diptera: Psychodidae) fauna of Além Paraíba state of Minas Gerais, Brazil, and the isolation of a parasite of the Leishmania braziliensis complex from Psychodopygus hirsuta hirsuta

Dissection of 765 sandflies captured in Além Paraíba (the type locality of Leishmania braziliensis) resulted in the isolation, from Psychodopygus hirsuta hirsuta, of a parasite of the Le. braziliensis complex.

New Phlebotomine Sandflies of the walkeri group (Diptera: Psychodidae) from Pará State, Brazil, with a pictorial key 1

The male and female of Lutzomyia carmelinoi n.sp., and the female only of L. baculus and L. williamsi, (Diptera:Psychodidae) are described and illustrated from specimens collected in Pará state, Brazil. A pictorial key is presented to these and the other members of the walkeri group.

Psychodopygus Leonidasdeanei a new species of sand fly (Diptera: Psychodidae) from Pará State, Brazil

The male and female of Psychodopygus leonidasdeanei n.sp., (Diptera : Psychodidae) are described and illustrated from specimens collected in Shannon traps near Santarém, Pará State, Brazil. This species is a member of the squamiventris series and information is given on the distribution of the members of this series in Pará. A pictorial guide to separate the males and some females from others in the series is given.