Logística de coleta e transporte de material biológico e organização do laboratório central no ELSA-Brasil

O Estudo Longitudinal de Saúde do Adulto (ELSA-Brasil) é um estudo de coorte multicêntrico com o objetivo de identificar os fatores de risco associados ao diabetes tipo 2 e à doença cardiovascular na população brasileira. O artigo descreve as estratégias de coleta, processamento, transporte e de controle de qualidade dos exames de sangue e urina no ELSA. O estudo optou pela centralização dos exames em um único laboratório. O processamento das amostras foi realizado nos laboratórios locais, reduzindo o peso do material a ser transportado e diminuindo os custos do transporte para o laboratório central no Hospital da Universidade de São Paulo. O estudo incluiu exames para avaliação de diabetes, resistência à insulina, dislipidemias, alterações eletrolíticas, hormônios tireoidianos, ácido úrico, alterações de enzimas hepáticas, inflamação e hemograma completo. Além desses exames, foram estocados DNA de leucócitos, amostras de urina, plasma e soro. O laboratório central realizou aproximadamente 375.000 exames.

Peroxidase antibody test for mucocutaneous leishmaniasis serology performance indexes and comparison with a fluorescent antibody test: Comparação com o desempenho da reação de imunofluorescência

Performance indexes of the peroxidase antibody test were compared to that of the fluorescent antibody test. The peroxidase antibody test had a statistically higher sensitivity and negative predictive value and a higher efficiency than the fluorescent antibody test but its specificity and positive predictive value were within the 95% confidence limits for the values found for the fluorescent antibody test. Such differences did not change when Chagas' disease and visceral leishmaniasis sera were included in index calculations. Statistical analysis showed that the two tests have a substantial degree of agreement but the immunofluorescent test had a specificity index and a positive predictive value equal to 100.0% when Chagas' disease and visceral leishmaniasis sera were not included in the calculations of the performance index; in this instance, a positive test result equals a disclosure of the disease attribute due to the inexistence of false positive results. The enzyme/ protein ratio of the peroxidase conjugate, resulting in heavy or light-labeled conjugates may pose technical problems to its use in serology tests.

Simplified fluorescent inhibition microtest for the titration of rabies neutralizing antibodies

A simplified fluorescence inhibition microtest (SFIMT) was standardized for the evaluation of antirabies serum neutralizing antibodies based on the rapid fluorescent focus inhibition test (RFFIT) and the fluorescence inhibition microtest (FIMT). The simplified test showed reproductibility similar to that of the FIMT with advantages as easier executation and quicker reading. A simple pre-treatment of Brazilian microplates produced for immune enzymatic assays (PROSIL) gave equivalent results and substantial coast reduction, in relation to imported plates (DIFCO). The simplified test can be easily implemented in less sophisticated laboratories, as alternative to the mouse serum neutralization test, still the most largely employed in Brazil, or even to others as RFFIT and FIMT.

Advantages of the rapid HIV-1 test in occupational accidents with potentially contaminated material among health workers

In occupational accidents involving health professionals handling potentially contaminated material, the decision to start or to continue prophylactic medication against infection by Human Immunodeficiency Virus (HIV) has been based on the ELISA test applied to a blood sample from the source patient. In order to rationalize the prophylactic use of antiretroviral agents, a rapid serologic diagnostic test of HIV infection was tested by the enzymatic immunoabsorption method (SUDS HIV 1+2, MUREX®) and compared to conventional ELISA (Abbott HIV-1/ HIV-2 3rd Generation plus EIA®). A total of 592 cases of occupational accidents were recorded at the University Hospital of Ribeirão Preto from July 1998 to April 1999. Of these, 109 were simultaneously evaluated by the rapid test and by ELISA HIV. The rapid test was positive in three cases and was confirmed by ELISA and in one the result was inconclusive and later found to be negative by ELISA. In the 106 accidents in which the rapid test was negative no prophylactic medication was instituted, with an estimated reduction in costs of US$ 2,889.35. In addition to this advantage, the good correlation of the rapid test with ELISA, the shorter duration of stress and the absence of exposure of the health worker to the adverse effects of antiretroviral agents suggest the adoption of this test in Programs of Attention to Accidents with Potentially Contaminated Material.

APPLICATION OF 6-NITROCOUMARIN AS A SUBSTRATE FOR THE FLUORESCENT DETECTION OF NITROREDUCTASE ACTIVITY IN Sporothrix schenckii

Introduction Sporothrix schenckii is a thermal dimorphic pathogenic fungus causing a subcutaneous mycosis, sporotrichosis. Nitrocoumarin represents a fluorogenic substrate class where the microbial nitroreductase activity produces several derivatives, already used in several other enzyme assays. The objective of this study was the analysis of 6-nitrocoumarin (6-NC) as a substrate to study the nitroreductase activity in Sporothrix schenckii. Methods Thirty-five samples of S. schenckii were cultivated for seven, 14 and 21 days at 35 °C in a microculture containing 6-nitrocoumarin or 6-aminocoumarin (6-AC) dissolved in dimethyl sulfoxide or dimethyl sulfoxide as a negative control, for posterior examination under an epifluorescence microscope. The organic layer of the seven, 14 and 21-day cultures was analyzed by means of direct illumination with 365 nm UV light and by means of elution on G silica gel plate with hexane:ethyl acetate 1:4 unveiled with UV light. Results All of the strains showed the presence of 6-AC (yellow fluorescence) and 6-hydroxylaminocoumarin (blue fluorescence) in thin layer chromatography, which explains the green fluorescence observed in the fungus structure. Conclusion The nitroreductase activity is widely distributed in the S. schenckii complex and 6-NC is a fluorogenic substrate of easy access and applicability for the nitroreductase activity detection.

HCV INFECTION THROUGH PERFORATING AND CUTTING MATERIAL AMONG CANDIDATES FOR BLOOD DONATION IN BELÉM, BRAZILIAN AMAZON

This study evaluated epidemiological factors for HCV infection associated with sharing perforating and cutting instruments among candidates for blood donation (CBD) in the city of Belém, Pará, Brazilian Amazon. Two definitions of HCV infection cases were used: anti-HCV positivity shown by EIA, and HCV-RNA detection by PCR. Infected and uninfected CBD completed a questionnaire about possible risk factors associated with sharing perforating and cutting instruments. The information was evaluated using simple and multiple logistic regressions. Between May and November 2010, 146 (1.1%) persons with anti-HCV antibodies and 106 (0.8%) with HCV-RNA were detected among 13,772 CBD in Belém. Risk factors associated with HCV infection based on the EIA (model 1) and PCR (model 2) results were: use of needles and syringes sterilized at home; shared use of razors at home, sharing of disposable razors in barbershops, beauty salons etc.; and sharing manicure and pedicure material. The models of HCV infection associated with sharing perforating and cutting instruments should be taken into account by local and regional health authorities and by those of other countries with similar cultural practices, in order to provide useful information to guide political and public strategies to control HCV transmission.

Sorovares de Listeria monocytogenes e espécies relacionadas, isoladas de material clínico humano

A análise fenotípica de 255 amostras do gênero Listeria isoladas de material clínico humano, tanto de indivíduos doentes (220-86,3%), como de aparentemente normais (35-13,7%) de várias regiões do país e colecionadas no período de 1969 a 2000, permitiu caracterizar a distribuição de sorovares de Listeria monocytogenes. Nas faixas etárias de 0 a 10 e de 41 a 60 anos, predominaram os isolamentos de líquido cefalorraquidiano sobre os de sangue, incluindo dos transplantados renais. Somente dos hemocultivos foi possível detectar os sete sorovares de Listeria monocytogenes. No cômputo geral, o sorovar 4b foi o mais incidente (154-60,3%) secundado por ¹/2 a (74-29%) nos três decênios considerados, além de ocorrerem em quase todas as regiões do país. Os dados deste estudo evidenciaram a circulação de L. monocytogenes na espécie humana, provocando quadros graves de meningite e septicemia, bem como, revelando a figura do portador assintomático, razão pela qual são recomendadas novas investigações bacteriológicas, subsidiadas por análises clínico-patológicas e epidemiológicas.

Comparison of the fluorescent polarization (TDx) and the enzymatic competitive (EMIT 2000) immune assays for the measurement of cyclosporin A blood concentration

Evaluation of Cyclosporin A (CyA) blood concentration is imperative in solid organ transplantation in order to achieve maximal immunosuppression with the least side effects. We compared the results of whole blood concentrations of CyA in 50 blood samples simultaneously evaluated by the fluorescent polarization immune assay (TDx) and the enzymatic competitive immune assay (EMIT 2000). There was a strong correlation between both kits for any range of CyA blood concentration (R=0.99, p<0.001). The within-run and between-days coefficient of variation were less than 4% for both assays. The cost for each CyA measurement was 50% lower for the EMIT assay when compared to the TDx assay. We concluded that the EMIT is as accurate as the TDx in measuring CyA blood concentration and has the advantage of a lower cost, as well as the possibility of widespread access to the EMIT methodology in contrast to the TDx equipment, allowing the laboratory to perform several routines within a working day.

Material Zoológico depositado nas coleções sistemáticas de entomologia do INPA, resultante do "Projeto INPA/MAX-PLANK" (Convênio CNPq/MGP)

As coleções de Entomolologia Sistemática do Instituto nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA) em Manaus, Brasil, no momento, contém aproximadamente 16.350 exemplares de invertebrados e vertebrados identificados, representando 330a espécies e incluindo 692 tipos que foram depositados entre 1940 e 1982 por pesquisadores e associados do Instituto Max-Planck de Limnologia em Plön, Alemanha Ocidental.

Enraizamento de estacas de material juvenil de Pau-rosa (Aniba rosaeodora Ducke - Lauraceae)

RESUMOO presente, trabalho teve como objetivo o enraizamento de estacas de material juvenil ramos laterais e terminais) de pau-rosa, através do uso das concentrações de 2000 ppm, 4000 ppm e 6000 ppm de ácido indol-3-butírico (AIB) na forma líquida. Αs condições do enraizamento αs estacas foram oferecidas mediante o uso de ncbulização intermitente, regulada em 20 segundos para espécies com intervalos de 20 minutos. O substrato utilizado foi terriço + areia, na proporção de 4:1. Semanalmente foram feitas aplicações de fertilizante foliar. Aos 210 dias do plantio, as estacas foram retiradas, do substrato e avaliados os seguintes parâmetros: porcentagem de enraizamento, porcentagem de sobrevivência, tamanho das raízes e Peso da matéria fresca das raízes. Os resultados obtidos mostram que a emissão de raízes das estacas de material juvenil, possivelmente independe do uso do ácido indol-3-butírico (AIB).

Avaliação da concentração de mercúrio em sedimentos e material particulado no rio Acre, estado do Acre, Brasil

A avaliação dos teores de mercúrio em sistemas aquáticos sem influência direta de fontes antropogênicas conhecidas não tem sido conduzida com freqüência na região Amazônica. Visando contribuir para esclarecer a ocorrência de valores elevados de Hg em peixes consumidos pela população de Rio Branco - AC, o Instituto Evandro Chagas - IEC, realizou um estudo para quantificar os teores de Hg em sedimentos de fundo e material particulado no rio Acre e alguns afluentes, além da caracterização físico-química das águas entre as cidades de Brasiléia e Assis Brasil. As amostras de sedimentos foram peneiradas na fração < 250 mesh e o material particulado obtido por floculação com Al2SO4 . Uma massa de 250 mg dos materiais foram submetidos a digestão ácida e as determinações de Hg realizadas por Espectrofotometria de Absorção Atômica, com geração de vapor frio. Os parâmetros físico-químicos pH, condutividade elétrica, temperatura e sólidos totais dissolvidos, foram feitos no campo, por métodos potenciométricos. Os teores de Hg nos sedimentos de fundo variaram entre 0,018 e 0,184 mig g-1, com média de 0,054 ± 0,034 mig g-1, enquanto que no material particulado a variação foi de 0,067 a 0,220 mig g-1e média de 0,098 ± 0,037 mig g-1. As águas possuem características levemente ácidas indicadas pelos valores de pH que variaram entre 5,80 - 6,95. A condutividade elétrica variou de 151,60 - 1.151,00 miS cm-1. Os teores de Hg nos materiais analisados encontram-se dentro da faixa dos valores observados para os rios amazônicos "não poluídos". Entretanto, estudos complementares deverão ser implementados para elucidar a origem e os processos de biodisponibilidade do mercúrio.

Avaliação de risco ambiental por contaminação metálica e material orgânico em sedimentos da bacia do Rio Aurá, Região Metropolitana de Belém - PA

A bacia do Rio Aurá está situada na região metropolitana de Belém, entre os municípios de Belém e Ananindeua, onde a taxa populacional tem aumentado sem qualquer medida de controle social ou ambiental. A região é intensamente explorada, sendo que os principais problemas ambientais são o desmatamento, erosão, inundação, poluição e contaminação das águas, especialmente por metais pesados e compostos orgânicos. O comportamento geoquímico dos elementos Al, Fe, Mn, Cr, Ni e Cu e os teores de compostos orgânicos foram avaliados em 30 pontos de amostragem no período entre 2008 e 2010 nos sedimentos fluviais. O aterro sanitário não controlado localizado nas proximidades da bacia do Rio Aurá é responsável, em parte, pela contaminação dos sedimentos. O estresse ambiental é resultado das atividades antrópicas locais, que contribuem no transporte de material clástico contendo metais para o rio. As variáveis estudadas foram classificadas segundo mecanismos de transporte e fonte (autóctone ou alóctone). Os resultados demonstraram que a principal contribuição de íons Al e Fe foi o aterro sanitário; Mn e Ni vieram principalmente dos solos adjacentes; Cr foi modificado (III/VI) por processo alobioquímico e Cu por processo bioinduzido.