Prevalence and genetic characterization of Cryptosporidium spp. and Cystoisospora belli in HIV-infected patients

Cryptosporidium spp. and Cystoisospora belli are monoxenic protozoa that have been recognized as the causative agents of chronic diarrhea in immunocompromised individuals, especially HIV-infected subjects. The objective of this study was to evaluate the frequency of these intestinal protozoa in HIV-positive patients in the Triângulo Mineiro region of Brazil and to correlate the presence of these infections with clinical, epidemiological and laboratory data of the patients. Oocysts were detected in stool samples of 10 (16.9%) of the 59 patients studied, while Cryptosporidium spp. were present in 10.1% (6/59) and C. belli in 6.7% (4/59). The frequency of these parasites was higher among patients with diarrheic syndrome and CD4+ T lymphocyte counts < 200 cells/mm 3 , demonstrating the opportunistic characteristic of these infections. A significant association was observed between the lack of adherence to antiretroviral therapy and the presence of Cryptosporidium spp. and/or C. belli. Parasitism with Cryptosporidium spp. was more frequent in February and April, the months following the period of high rainfall. The same was not observed for C. belli. Genetic characterization of two isolates led to the identification of Cryptosporidium parvum, one of the main species associated with the zoonotic transmission of cryptosporidiosis.

WATER FROM DIFFERENT SOURCES USED FOR THE IRRIGATION OF VEGETABLES TO BE MARKETED: RESEARCH ON Cryptosporidium spp., Giardia spp., AND COLIFORMS IN PARANA, BRAZIL

SUMMARY The aim of this work was to compare, from a parasitological ( Cryptosporidiumspp. and Giardia duodenalis), bacteriological (total and thermotolerants coliforms) and physicochemical perspective, water sources used for drinking and irrigation of vegetables intended to be sold for human consumption. From January 2010 to May 2011, samples of different water sources from vegetable producing properties were collected; 100 liters for parasitological analysis, 200 mL for bacteriological analysis, and five liters for physicochemical analysis. Water samples were filtered under vacuum with a kit containing a cellulose acetate membrane filter, 1.2 µm (Millipore(r), Barueri, SP, Brazil). The material retained on the membrane was mechanically extracted and analyzed by direct immunofluorescence (Merifluor(r)kit). From 20 rural properties investigated, 10 had artesian wells (40 samples), 10 had common wells (40 samples), and one had a mine (four samples), the latter contaminated by Cryptosporidiumspp. In samples from artesian wells, 90 to 130 meters depth, 42.5% were positive for total coliforms and 5.0% were identified to have abnormal coloration. From the samples of common wells, 14 to 37 meters depth, 87.5% were contaminated with total coliforms, 82.5% were positive for thermotolerant coliforms, and 12.5% had color abnormalities. We did not detect the presence of Giardiaspp. or Cryptosporidiumspp. in artesian and common wells. The use of artesian or common wells is an important step in the control of the spreading of zoonoses, particularly Cryptosporidiumspp. and Giardiaspp., as well as artesian wells for coliform control in local production of vegetables to be marketed.

INTESTINAL AND PULMONARY INFECTION BY Cryptosporidium parvum IN TWO PATIENTS WITH HIV/AIDS

We describe two patients with HIV/AIDS who presented pulmonary and intestinal infection caused by Cryptosporidium parvum, with a fatal outcome. The lack of available description of changes in clinical signs and radiographic characteristics of this disease when it is located in the extra-intestinal region causes low prevalence of early diagnosis and a subsequent lack of treatment.

Avaliação da influência do formol e do hipoclorito de sódio na pesquisa de oocistos de Cryptosporidium nas fezes, através do método de heine

Foram examinadas, para pesquisa de Cryptosporidium pelo método de Heine,fezes de nove bezerros com criptosporidíase, após utilização prévia de dois diferentes desinfetantes. Quanto ao formol a 10%, notou-se que não houve interferência na identificação dos oocistos, em período compreendido entre cinco minutos e 72 horas; ao ser usado o hipoclorito de sódio a 14,5%, verificou-se que depois de 30minutos os ooçistos apresentaram-se avermelhados e sem refração, dificultando o reconhecimento. Assim, recomenda-se a adição de formol a 10% à matéria fecal, conforme a etapa referida, para coibir o risco de infecção de laboratoristas pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV), quando usada para diagnóstico atécnica mencionada.

Pesquisa de oocistos de Cryptosporidium sp em fezes: comparação entre os métodos de Kinyoun modificado e de heine

Para diagnosticar a infecção intestinal pelo Cryptosporidium sp, hoje bastante em foco pela não incomum participação no contexto da síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS), várias técnicas têm sido indicadas. Com o intuito de esclarecer vantagens e desvantagens, envolvendo quantificação, morfologia, durabilidade do esfregaço e tempo de preparação, comparamos os resultados obtidos mediante emprego de dois desses processos, ou seja, de Kinyoun modificado e de Heine, aplicados em amostras fecais de pacientes com AIDS. A sensibilidade foi bastante semelhante e a escolha deve depender da valorização das virtudes de cada uma das técnicas, que são: quanto â de Kinyoun modificada, a durabilidade dos esfregaços e, a propósito da de Heine, a rapidez com que se dã o preparo, aliada â superioiidade quando o parâmetro é a quantidade de oocistos encontrados, mais freqüentemente verificada.

Infection by Cryptosporidium parvum in renal patients submitted to renal transplant or hemodialysis

The frequency of infection by Cryptosporidium parvum was determined in two groups of renal patients submitted to immunosuppression. One group consisted of 23 renal transplanted individuals, and the other consisted of 32 patients with chronic renal insufficiency, periodically submitted to hemodialysis. A third group of 27 patients with systemic arterial hypertension, not immunosuppressed, was used as control. During a period of 18 months all the patients were submitted to faecal examination to detect C. parvum oocysts, for a total of 1 to 6 tests per patient. The results showed frequencies of C. parvum infection of 34.8%, 25% and 17.4%, respectively, for the renal transplanted group, the patients submitted to hemodialysis and the control group. Statistical analysis showed no significant differences among the three groups even though the frequency of C. parvum infection was higher in the transplanted group. However, when the number of fecal samples containing C. parvum oocysts was taken in account, a significantly higher frequency was found in the renal transplanted group.

Prevalência do Cryptosporidium parvum em crianças abaixo de 5 anos, residentes na zona urbana de Campo Grande, MS, Brasil, 1996

O presente estudo visou estabelecer a prevalência de Cryptosporidium parvum em crianças abaixo de 5 anos, residentes na zona urbana de Campo Grande, MS, 1996/97, através de exames coprológicos e avaliar epidemiologicamente os casos diagnosticados. Tratou-se de um estudo transversal com inquérito domiciliar, onde foram examinadas 1051 amostras fecais, processadas segundo a técnica de Blagg, utilizando-se a coloração de Ziehl-Neelsen modificada para a pesquisa de oocistos de C. parvum. Concluiu-se que: a prevalência de C. parvum (1,1%) observada não foi estatisticamente significativa; foi relatado diarréia em 58,3% das crianças com diagnóstico positivo, supondo-se associação entre diarréia e a presença do parasita; o C. parvum foi mais freqüente em crianças com idade de 25 a 36 meses (50%), porém sem diferença estatisticamente significativa; o sexo não teve papel diferencial em relação ao parasitismo por C. parvum; entre as 12 crianças com criptosporidiose, 83,3% tiveram contato com animais domésticos (cão e ou gato).

Comparação entre os métodos de Ziehl-Neelsen modificado e Acid-Fast-Trichrome para a pesquisa fecal de Cryptosporidium parvum e Isospora belli

Devido a crescente importância dos coccídios intestinais (Cryptosporidium, Isospora e Cyclospora) como parasitos oportunistas, é fundamental para os laboratórios diferenciar morfologicamente estes protozoários; a técnica de Ziehl-Neelsen modificada (ZNm) é amplamente utilizada para este fim; recentemente, foi proposto um novo procedimento, a coloração combinada do ácido tricrômico (Acid-Fast-Trichrome - AFT). O objetivo do presente estudo foi comparar os processos AFT e ZNm para a detecção destes coccídios em amostras fecais de pacientes portadores do vírus VIH. Foram selecionados dois grupos de indivíduos, para inclusão no estudo, segundo a presença (n=60) ou ausência de diarréia (n=60). As amostras de fezes foram coletadas em solução de formalina 10% e os esfregaços fecais preparados i) diretamente das fezes e ii) após concentração prévia a 500xg (10 minutos), foram submetidos aos diferentes processos de coloração. Considerando-se a positividade por técnica (AFT e ZNm), verificou-se a superioridade do procedimento de ZNm (n=19; 100% dos casos positivos) sobre o de AFT (n=8; 42,1%). Ambos possibilitaram a identificação dos 101 casos verdadeiramente negativos. Coccidiose intestinal foi mais frequente entre os pacientes que apresentaram diarréia (26,6%) em comparação à positividade observada entre os indíviduos assintomáticos (5%) sendo que C. cayetanensis não foi detectada em ambos os grupos. Foi de nosso interesse avaliar a aplicabilidade da técnica AFT para a coloração deste protozoário. Devido à sensibilidade e especificidade obtida neste estudo (100%), conclui-se que o método de ZNm continua sendo o mais indicado para o diagnóstico da criptosporidiose e isosporose, principalmente quando associado ao procedimento de centrífugo-concentração (500xg, 10 minutos). Embora a coloração AFT tenha baixo custo, faz-se necessário o seu aperfeiçoamento pois este procedimento permite o diagnóstico simultâneo dos coccídios intestinais (C. parvum, I. belli e C. cayetanensis) e dos microsporídios.

Conservação de oocistos de Cryptosporidium em fezes para exame parasitológico

Por meio de dispositivo facilmente acessível que contém formol a 10% tamponado, dispensa refrigeração, permite execução de maneira higiênica, evita o mau odor e garante biossegurança é possível evidenciar satisfatoriamente oocistos de Cryptosporidium em fezes, sendo utilizado o método de Kinyoun. O sistema possibilita conservação adequada até durante período prolongado, facilitando a execução de tarefas assistências e epidemiológicas.

Ocorrência de Cryptosporidium sp em amostras fecais de crianças, menores de 10 anos de idade, com indicação clínica de Rotavírus

A partir da indicação clínica de Rotavírus em fezes de 485 crianças, investigou-se a presença de oocistos de Cryptosporidium sp. Não houve diferenças significativas entre a positividade de Cryptosporidium sp e rotavírus com a consistência das fezes. Cryptosporidium sp deve ser incluído na investigação diagnóstica dos quadros diarréicos em crianças.

Detection of Cryptosporidium spp and other intestinal parasites in children with acute diarrhea and severe dehydration in Rio de Janeiro

The objective of the present study was to estimate the frequency of infection by Cryptosporidium spp and other intestinal parasites in dehydrated children with gastroenteritis who were admitted to a pediatric hospital. Stool examinations from 218 children were performed. Cryptosporidium spp was identified in eighteen out of 193 stool samples (9.3%) subjected to safranin-methylene blue staining. Giardia lamblia was detected in ten out of 213 (4.7%) samples examined via the direct or Ritchie methods. Other parasites identified were Ascaris lumbricoides (4.2%), Blastocystis hominis (1.4%), Entamoeba coli (0.9%), Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar (0.5%), Endolimax nana (0.5%), Trichuris trichiura (0.5%) and Enterobius vermicularis (0.5%).

Presença de Cryptosporidium spp em crianças com diarréia aguda em uma creche pública de Recife, Estado de Pernambuco

O objetivo do presente estudo foi analisar a freqüência de oocistos de Cryptosporidium spp em amostras fecais de crianças, de 1 a 14 anos, de uma creche pública localizada em uma comunidade carente da cidade do Recife, Pernambuco. A pesquisa foi realizada no período de 28 de junho de 2006 a 3 de abril de 2007, e envolveu 182 crianças. Das amostras analisadas 59 (32,4%) foram positivas quanto à presença de oocistos de Cryptosporidium spp, e a faixa etária mais acometida foi a de 3 a 5 anos de idade (54,2%). A alta freqüência de amostras positivas para Cryptosporidium spp obtidas neste estudo comprovam que creches são ambientes propícios a essa ocorrência devido ao contato direto entre criança-criança, crianças e funcionários. A maior via de infecção por Cryptosporidium spp é a transmissão interpessoal, que é bem ilustrada em creches. A imaturidade, deficiências do sistema imune e hábitos higiênicos inadequados são fatores que também contribuem para esse tipo de infecção.