Selection of Trypanosoma cruzi clonal genotypes (clonet 20 and 39) isolated from Bolivian triatomines following subculture in liquid medium

Previous studies showed that two groups of Trypanosoma cruzi clonal genotypes named clonet 20 and clonet 39 were predominant in Triatoma infestans, the unique vector of Chagas disease in Bolivia. These groups of clones correspond to distinct genetic clusters. These clonets were detected in T. infestans and Rhodnius pictipes fecal samples before isolation and after culture by kDNA PCR (polymerase chain rreaction) and hybridization of the amplified products with clonet specific kDNA probes named 20 and 39 as previously reported. Forty eight T. infestans and three R. pictipes infected insects captured at random in different Bolivian departments were proceeded. As previously reported the direct identification of the two major clonets in fecal samples allowed the detection of abundant mixed infections: 41% in the original sample, however after culture, only 6% of mixed infections were detected. Among the 21 parasite stocks isolated from digestive tracts where mixed infections were initially detected (clonet 20 + 39) clonet 20 alone was detected in 81% of them. This result clearly showed that the culture step selected clonet 20 parasites over those belonging to clonet 39. The taxonomic status of the isolated stocks was also confirmed by isoenzyme typing, and correlation was observed between clustering topology and hybridization patterns with the probes 20 and 39.

Phenotypic plasticity in adult worms of Schistosoma mansoni (Trematoda:Schistosomatidae) evidenced by brightfield and confocal laser scanning microscopies

A comparative morphometric study was performed to identify host-induced morphological alterations in Schistosoma mansoni adult worms. A wild parasite population was obtained from a naturally infected rodent (Nectomys squamipes)and then recovered from laboratory infected C3H/He mice. Furthermore, allopatric worm populations maintained for long-term under laboratory conditions in Swiss Webster mice were passed on to N. squamipes. Suckers and genital system (testicular lobes, uterine egg, and egg spine) were analyzed by a digital system for image analysis. Confocal laser scanning microscopy (CLSM) showed details of the genital system (testicular lobes, vitelline glands, and ovary) and the tegument just below the ventral sucker. Significant morphological changes (p < 0.05) were detected in male worms in all experimental conditions, with no significant variability as assessed by CLSM. Significant changes (p < 0.05) were evident in females from the wild population related to their ovaries and vitelline glands, whereas allopatric females presented differences only in this last character. We conclude that S. mansoni worms present the phenotypic plasticity induced by modifications in the parasite's microenvironment, mainly during the first passage under laboratory conditions.

Application of molecular techniques in the study of Staphylococcus aureus clonal evolution - A Review

Staphylococcus aureus is an important agent of healthcare-associated and community-acquired infections. A major characteristic of this microorganism is the ability to develop resistance to antimicrobial agents. Several molecular techniques have been applied for the characterization of S. aureus in epidemiological studies. In the present review, we discuss the application of molecular techniques for typing S. aureus strains and describe the nomenclature and evolution of epidemic clones of this important pathogen.

Identification of uropathogenic Escherichia coli clonal group A (CgA) in hospitalised patients

This study provides the first description of healthcare-associated infections with Escherichia coli clonal group A (CgA) isolates in Latin America. Isolates were typed by enterobacterial repetitive intergenic consensus-PCR, pulsed-field gel electrophoresis, E. coli phylogenetic grouping, multilocus sequence typing and fimH single nucleotide polymorphism analysis. Out of 42 E. coli hospital isolates studied, three belonged to E. coli phylogenetic group D and ST69 and had fimH sequences identical to that of the CgA reference strain ATCC BAA-457. E. coli CgA is another potential source of resistant infections in hospitals.

Clonal multidrug-resistant Corynebacterium striatum within a nosocomial environment, Rio de Janeiro, Brazil

Corynebacterium striatum is a potentially pathogenic microorganism with the ability to produce outbreaks of nosocomial infections. Here, we document a nosocomial outbreak caused by multidrug-resistant (MDR) C. striatum in Rio de Janeiro, Brazil. C. striatum identification was confirmed by 16S rRNA and rpoB gene sequencing. Fifteen C. striatum strains were isolated from adults (half of whom were 50 years of age and older). C. striatum was mostly isolated in pure culture from tracheal aspirates of patients undergoing endotracheal intubation procedures. The analysis by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) indicated the presence of four PFGE profiles, including two related clones of MDR strains (PFGE I and II). The data demonstrated the predominance of PFGE type I, comprising 11 MDR isolates that were mostly isolated from intensive care units and surgical wards. A potential causal link between death and MDR C. striatum (PFGE types I and II) infection was observed in five cases.

Nest plasticity of Cornitermes silvestrii (Isoptera, Termitidae, Syntermitinae) in response to flood pulse in the Pantanal, Mato Grosso, Brazil

Nest plasticity of Cornitermes silvestrii (Isoptera, Termitidae, Syntermitinae) in response to flood pulse in the Pantanal, Mato Grosso, Brazil. The Pantanal is one of the largest wetlands in the world. Since many areas in Pantanal are flooded during part of the year, it is expected that plants and animals would have mechanisms for their survival during the flooded period. This study investigated the existence of differences in nest shape and inquilines of Cornitermes silvestrii in areas influenced by the flood pulse. We measured the volume, height, width, and height/width ratio of 32 nests in flooded areas and 27 in dry areas, and performed an one-way-Anova with the quasi-Poisson distribution to determine if there were differences in the nest measurements between the points. To analyze the relationship of nest inquilines to flood pulse and nest shape, we performed a regression with a Poisson distribution with the inquiline richness and flood pulse, and the above measurements. The nests of C. silvestrii in flooded areas were significantly higher than nests in dry areas, and had a larger height/width ratio. Colonies in periodically flooded areas would probably make a larger effort to extend their nests vertically, to maintain at least some portion of the structure out of the water and prevent the entire colony from being submerged. Neither the size of the nest nor the flood pulses influenced the assemblage of 11 species found in nests of C. silvestrii.

Evidence of phenotypic plasticity of larvae of Simulium subpallidum Lutz in different streams from the Brazilian Cerrado

In this paper, the overall morphological differences between populations of Simulium subpallidumLutz, 1909 are studied. Several studies found in the literature point to a relationship between the labral fans and body size and the habitat where blackfly larvae occur. However, other characteristics potentially related to the microhabitat, such as abdominal hook circlet morphology, which is used for larvae to fix themselves in the substratum, and thoracic prolegs morphology, which help larvae move in the substratum, were analyzed in three different populations of S. subpallidum, one of which occupied a faster flow. The results suggest phenotypic plasticity in S. subpallidum and a tendency toward larger structures in faster flows.

Leaf plasticity in successive selection cycles of 'Saracura' maize in response to periodic soil flooding

The objective of this work was to assess the effect of successive selection cycles on leaf plasticity of 'Saracura' maize BRS-4154 under periodical flooding in field conditions. Soil flooding started at the six-leaf stage with the application of a 20-cm depth water layer three times a week. At flowering, samples of leaves were collected and fixed. Paradermic and transverse sections were observed under photonic microscope. Several changes were observed throughout the selection cycles, such as modifications in the number and size of the stomata, higher amount of vascular bundles and the resulting decrease of the distance between them, smaller diameter of the metaxylem, decrease of cuticle and epidermis thickness, decrease of number and size of bulliform cells, increase of phloem thickness, smaller sclerenchyma area. Therefore, the successive selection cycles of 'Saracura' maize resulted in changes in the leaf anatomy, which might be favorable to the plant's tolerance to the intermittent flooding of the soil.

Enraizamento de microestacas de mirtileiro provenientes de microjardim clonal semi-hidropônico

O uso de microjardins clonais hidropônicos tem sido relatado com sucesso para espécies florestais e pode vir a se tornar uma excelente alternativa para espécies frutíferas de difícil propagação, como é o caso do mirtilo. O objetivo deste estudo foi avaliar o enraizamento de microestacas de mirtileiro provenientes de dois sistemas de cultivo (convencional e semi-hidropônico), submetidas a diferentes concentrações de AIB (ácido indolbutírico). As microestacas de mirtileiro das cultivares Bluebelle e Woodard foram submetidas a diferentes concentrações de AIB (0; 500; 1.000; 1.500 e 2.000 mg.L-1), acondicionadas em caixas plásticas contendo vermiculita e, aos 90 dias de cultivo, avaliou-se o seu rendimento. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, com vinte tratamentos, contendo quatro repetições, compostas por dez microestacas cada. Foram avaliados as porcentagem de sobrevivência e de enraizamento, o comprimento da maior raiz, o número de brotações, o comprimento médio das brotações, o número de folhas e as massas fresca e seca radiculares. O sistema semi-hidropônico proporcionou um rendimento de microestacas significativamente superior ao convencional; entretanto, este material apresentou menores porcentagens de sobrevivência e enraizamento. Todos os tratamentos, inclusive aquele sem a presença de AIB, apresentaram porcentagens de enraizamento superiores a 50%.

Influência genotípica e clonal de genótipos de bananeiras micropropagados a partir de gemas florais masculinas

Inflorescências masculinas de bananeiras apresentam potencial para serem usadas como explantes para a micropropagação de bananeiras. Este trabalho teve por objetivo avaliar a influência genotípica e clonal de bananeiras micropropagadas a partir de gemas florais masculinas em sucessivos subcultivos. Foram utilizados explantes florais de 15 clones plantados em campo, da variedade Preciosa e do híbrido FHIA 02, em meio de cultura de MS contendo 4,0 mg.L-1 de BAP. Por sete subcultivos sucessivos de 30 dias, os materiais foram avaliados quanto à taxa de multiplicação e contaminação microbiana. Ao final do período de multiplicação, o acúmulo de mudas produzidas, em razão dos sucessivos subcultivos utilizando esse tipo de explante, foi também avaliado. Verificou-se que os maiores índices de contaminação foram observados no primeiro subcultivo, com média superior a 50% de contaminação dos explantes. As melhores taxas de multiplicação foram alcançadas no terceiro subcultivo, com média de até 6,1 brotos por explante. Os clones que apresentaram maior acúmulo de mudas produziram 105 e 163 mudas por explante, para a variedade Preciosa e o híbrido FHIA 2, respectivamente, após sete subcultivos.

Limpeza clonal de mudas de videira infectadas por Xanthomonas campestris pv. viticola

O cancro bacteriano da videira é causado por Xanthomonas campestris pv. viticola (Xcv). Visando à limpeza clonal de mudas de 'Red Globe', foram estudados: tamanho ideal de ápices e gemas axilares para cultivo em meio de Galzy modificado (MGM); efeito da termoterapia (38ºC/30 dias); e ação de antibióticos na eliminação de Xcv em videiras infectadas. Os percentuais de contaminação por Xcv e de regeneração foram analisados, e as plantas obtidas foram indexadas em meio ágar nutritivo-dextrose-extrato de levedura-ampicilina (NYDAM), seguindo-se teste de patogenicidade. O cultivo de explantes com 3 mm possibilitou a obtenção de plantas livres da bactéria, com regeneração 14,3 vezes maior que explantes com 1 mm. A termoterapia de mudas infectadas, associada ao cultivo in vitro, não eliminou o patógeno. O cultivo de explantes com 10 mm, durante 40 dias em MGM + cefotaxima (300 mg L-1), proporcionou limpeza clonal das mudas. A indexação de plantas de videira regeneradas in vitro, quanto à infecção por Xcv utilizando NYDAM, seguida de teste de patogenicidade, é uma alternativa econômica e eficiente para produção de mudas de alta qualidade fitossanitária.

MICROJARDIM CLONAL DE MIRTILEIRO EM SISTEMAS DE CULTIVO SEM SOLO

RESUMO O uso de microjardins clonais em sistemas de cultivo sem solo para fornecimento de material propagativo na cultura do mirtileiro (Vaccinium spp.) pode trazer grandes avanços na produção de mudas dessa cultura. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção de microestacas e a sobrevivência de plantas matrizes de mirtileiro micropropagadas das cultivares Woodard e Aliceblue, em dois sistemas de cultivo. Os sistemas de cultivo utilizados foram o semi-hidropônico (floreiras com substrato de areia e fornecimento diário de solução nutritiva) e o com substrato organomineral (sacos plásticos com substrato comercial e fornecimento de solução nutritiva a cada 15 dias). Após o período de 90 dias do plantio das plantas matrizes, foram iniciadas as coletas de microestacas, as quais foram realizadas a cada 60 dias, com exceção do período de inverno, em que as coletas foram realizadas a cada 90 dias, totalizando ao final do experimento onze coletas. O experimento foi constituído como um fatorial 2 x 2 x 11 (sistemas x cultivares x coletas), em delineamento inteiramente casualizado, com três repetições de 12 plantas cada. Foram avaliadas a produção total de microestacas ao final das onze coletas, o número de microestacas produzidas por planta matriz a cada coleta, a sobrevivência das plantas matrizes ao final das onze coletas e a sobrevivência das plantas matrizes a cada coleta. Os resultados indicaram que o sistema semi-hidropônico foi superior ao substrato organomineral para a produção de microestacas de ambas as cultivares. A maior produtividade total de microestacas ocorreu no sistema semi-hidropônico combinado com a cultivar Aliceblue, com produção total média de 237,67 microestacas. Porém, nesta condição, houve menor sobrevivência das plantas matrizes. A produção de microestacas apresentou alternância ao longo das coletas. A sobrevivência das plantas matrizes diminuiu após sucessivas coletas. Após as coletas de verão, ocorreu maior mortalidade de plantas matrizes.

Supressão da atividade saprofítica de Rhizoctonia spp. em solos de jardim clonal de Eucalyptus

Avaliou-se a eficiência de Trichoderma longibranchiatum (UFV-1), de T. inhamatum (UFV-2 e UFV-3), compostos de casca e folhas de eucalipto contra Rhizoctonia spp., aplicados em solo de jardim clonal de eucalipto (Eucalyptus sp.). Em solos artificialmente infestados com Rhizoctonia spp., sob condições controladas, os antagonistas UFV-2 e UFV-3 apresentaram níveis elevados de supressividade, quando se aumentou a fonte alimentar na formulação, de 5 a 50 g de farelo de trigo por litro. No campo, o antagonista UFV-3 não teve efeito significativo na redução do inóculo de Rhizoctonia spp. Compostos de casca de eucalipto apresentaram diferentes graus de supressão a Rhizoctonia spp., dependendo da origem e do lote do composto. A incorporação de folhas de eucalipto ao solo favoreceu o aumento do inóculo de Rhizoctonia spp.

Encapsulamento de Trichoderma inhamatum para o controle biológico de Rhizoctonia solani na propagação clonal de Eucalyptus

Testou-se um novo sistema para o encapsulamento de Trichoderma inhamatum em grânulos de alginato de sódio, visando o controle biológico de Rhizoctonia solani, agente etiológico da mela de estacas/miniestacas de Eucalyptus spp. para enraizamento. No novo sistema idealizado, foi utilizado um aparato simples capaz de substituir eficientemente o equipamento (Bomba Peristáltica) anteriormente utilizado, sendo possível aumentar a produção de 594 grânulos/min para aproximadamente 6.734 grânulos/min. Com este novo sistema, um isolado de T. inhamatum (UFV – 03) foi encapsulado em grânulos contendo as fontes alimentares: farelo de trigo, palha de arroz, farelo de aveia, folhas de eucalipto ou farelo de milho na concentração de 50 g/l. Na segunda etapa, a melhor fonte alimentar foi testada nas concentrações de 0 a 60 g/l. Os grânulos foram veiculados em substrato de enraizamento de eucalipto na concentração de 2% (p/p) inoculado com micélio triturado de R. solani (2 mg/g de substrato) e a atividade saprofítica do patógeno foi quantificada por meio do método de iscas. Posteriormente, os grânulos produzidos com a fonte alimentar e concentração que promoveram maior inibição do desenvolvimento de R. solani foram utilizados para determinar o tempo mínimo de pré-incubação e competição para supressão do patógeno, com a mesma metodologia. Observou-se aumento da supressão da atividade saprofítica de R. solani ao acréscimo de uma fonte alimentar. Daquelas testadas, farelo de trigo foi a melhor. Além disso, houve interação significativa e positiva ao aumento de sua concentração na formulação.

Flutuação populacional de Rhizoctonia spp. em jardim clonal de Eucalyptus spp

A queima de folhas em brotações em jardim clonal e a mela de estacas na fase de enraizamento, causadas por espécies de Rhizoctonia, podem limitar a produção de mudas de eucalipto por estaquia. Apesar de sua importância, pouco se conhece sobre essas doenças. Assim, visando otimizar as estratégias de controle dessas doenças, nesse trabalho objetivou-se elucidar aspectos da dinâmica populacional de Rhizoctonia spp. no solo e em brotações, a fim de estabelecer, correlações com a incidência da doença, bem como determinar a distribuição do patógeno em jardim clonal de eucalipto. Conclui-se que há flutuação populacional de Rhizoctonia spp. em jardim clonal de eucalipto, sendo observado um padrão de distribuição espacial agregado do inóculo no solo. A dinâmica populacional de Rhizoctonia spp. foi correlacionada à temperatura, mas não à precipitação pluviométrica.