A reação "click" na síntese de 1,2,3-triazóis: aspectos químicos e aplicações

The Copper-catalyzed azide-alkyne cycloaddition (CuAAC), often referred to as "click" reaction, has become a very popular reaction in the last years. It affords exclusively 1,4-disubstituted 1,2,3-triazoles and has been widely used to connect readily accessible building blocks containing various functional groups. The great success of this reaction is based on the fact that it is general, virtually quantitative and very robuste. The scope of this copper-catalyzed synthesis is extraordinary and the reaction has found numerous applications in many research fields, including biological chemistry and materials science. In this review, the main chemical aspects and applications of the "click" reaction in the synthesis of 1,2,3-triazoles are presented.

Syntheses, characterization and antifungal activity of tris(1,10-phenanthroline)iron(ii) bis(n-r-sulfonyldithiocarbimate)zincate(ii)

Four new compounds with the general formula 1;Fe(phen)3] 1;Zn(RSO2N=CS2)2], where phen = 1,10-phenanthroline, R = 4-FC6H4 (1), 4-ClC6H4 (2), 4-BrC6H4 (3) and 4-IC6H4 (4), respectively, were obtained by the reaction of the appropriate potassium N-R-sulfonyldithiocarbimate (RSO2N=CS2K2) and tris(1,10-phenanthroline)iron(II) sulfate, with zinc(II) acetate dihydrate in dimethylformamide. The elemental analyses and the IR data were consistent with the formation of the expected complexes salts. The ¹H and 13C NMR spectra showed the signals for the cationic iron(II) complex and dithiocarbimate moieties. The molar conductance data were consistent with the 1:1 cation:anion complexes in 1-4. The antifungal activities of the compounds were tested in vitro against Candida albicans, Candida tropicalis and Colletotrichum gloeosporioides.

Plantas invasoras da cultura do arroz (Oryza sativa L. ) no Estado de São Paulo. 1. Dicotiledôneas

Foi realizado um levantamento das plantas invasoras na cultura do arroz, concentrado nas regiões com maior área cultivada no Estado de São Paulo. Cada uma das espécies levantadas foi estudada em seu ciclo, porte, fenologia e modo ou modos de reprodução. O hábito de crescimento herbáceo, o ciclo anual, o florescimento e frutificação nos meses mais quentes do ano e a reprodução através de sementes foram evidentemente preponderantes. Cada gênero representado por mais de uma espécie mereceu a confecção de chave analítica auxiliar objetivando oferecer algum subsidio para a identificação da espécie em sua primeira fase de desenvolvimento. Foram levantadas as sinonímias científica e vulgar e, sempre que possível, localizada a etimologia do termo que se prestou à nomenclatura genérica ou especifica. De cada espécie é fornecida uma diagnose da plântula além da ilustração planificada, tornando, portanto, mais fá cil o re conhecimento da mesma. Das 15 famílias dicotiledôneas encontradas, num total de 31 espécies identificadas, quantitativamente merecem destaque as seguintes: Compositae, Malvaceae e Amaranthaceae.

A new brain metalloendopeptidase which degrades the Alzheimer ß-amyloid 1-40 peptide producing soluble fragments without neurotoxic effects

A new metalloendopeptidase was purified to apparent homogeneity from a homogenate of normal human brain using successive steps of chromatography on DEAE-Trisacryl, hydroxylapatite and Sephacryl S-200. The purified enzyme cleaved the Gly33-Leu34 bond of the 25-35 neurotoxic sequence of the Alzheimer ß-amyloid 1-40 peptide producing soluble fragments without neurotoxic effects. This enzyme activity was only inhibited by divalent cation chelators such as EDTA, EGTA and o-phenanthroline (1 mM) and was insensitive to phosphoramidon and captopril (1 µM concentration), specific inhibitors of neutral endopeptidase (EC 3.4.24.11) and angiotensin-converting enzyme (EC 3.4.15.1), respectively. The high affinity of this human brain endopeptidase for ß-amyloid 1-40 peptide (Km = 5 µM) suggests that it may play a physiological role in the degradation of this substance produced by normal cellular metabolism. It may also be hypothesized that the abnormal accumulation of the amyloid ß-protein in Alzheimer's disease may be initiated by a defect or an inactivation of this enzyme.

Specific fluorogenic substrates for neprilysin (neutral endopeptidase, EC 3.4.24.11) which are highly resistant to serine- and metalloproteases

Two intramolecularly quenched fluorogenic peptides containing o-aminobenzoyl (Abz) and ethylenediamine 2,4-dinitrophenyl (EDDnp) groups at amino- and carboxyl-terminal amino acid residues, Abz-DArg-Arg-Leu-EDDnp (Abz-DRRL-EDDnp) and Abz-DArg-Arg-Phe-EDDnp (Abz-DRRF-EDDnp), were selectively hydrolyzed by neutral endopeptidase (NEP, enkephalinase, neprilysin, EC 3.4.24.11) at the Arg-Leu and Arg-Phe bonds, respectively. The kinetic parameters for the NEP-catalyzed hydrolysis of Abz-DRRL-EDDnp and Abz-DRRF-EDDnp were Km = 2.8 µM, kcat = 5.3 min-1, kcat/Km = 2 min-1 µM-1 and Km = 5.0 µM, kcat = 7.0 min-1, kcat/Km = 1.4 min-1 µM-1, respectively. The high specificity of these substrates was demonstrated by their resistance to hydrolysis by metalloproteases [thermolysin (EC 3.4.24.2), angiotensin-converting enzyme (ACE; EC 3.4.24.15)], serineproteases [trypsin (EC 3.4.21.4), a-chymotrypsin (EC 3.4.21.1)] and proteases present in tissue homogenates from kidney, lung, brain and testis. The blocked amino- and carboxyl-terminal amino acids protected these substrates against the action of aminopeptidases, carboxypeptidases and ACE. Furthermore, DR amino acids ensured total protection of Abz-DRRL-EDDnp and Abz-DRRF-EDDnp against the action of thermolysin and trypsin. Leu-EDDnp and Phe-EDDnp were resistant to hydrolysis by a-chymotrypsin. The high specifity of these substrates suggests their use for specific NEP assays in crude enzyme preparations

Thioglycollate-elicited murine macrophages are cytotoxic to Mycoplasma arginini-infected YAC-1 tumor cells

Macrophages are important components of natural immunity involved in inhibition of tumor growth and destruction of tumor cells. It is known that these cells can be activated for tumoricidal activity by lymphokines and bacterial products. We investigated whether YAC-1 tumor cells infected with Mycoplasma arginini stimulate nitric oxide (NO) release and macrophage cytotoxic activity. Thioglycollate-elicited macrophages from male BALB/c mice were co-cultured for 20 h with YAC-1 tumor cells infected or not with Mycoplasma arginini. The cytotoxic activity was evaluated by MTT assay and nitrite levels were determined with the Griess reagent. Thioglycollate-elicited macrophages co-cultured with noninfected YAC-1 cells showed low cytotoxic activity (34.7 ± 8.6%) and low production of NO (4.7 ± 3.1 µM NO2-). These macrophages co-cultured with mycoplasma-infected YAC-1 cells showed significantly higher cytotoxic activity (61.4 ± 9.1%; P<0.05) and higher NO production (48.5 ± 13 µM NO2-; P<0.05). Addition of L-NAME (10 mM), an inhibitor of NO synthesis, to these co-cultures reduced the cytotoxic activity to 37.4 ± 2% (P<0.05) and NO production to 3 ± 4 µM NO2- (P<0.05). The present data show that Mycoplasma arginini is able to induce macrophage cytotoxic activity and that this activity is partially mediated by NO.

4-Aminopyridine inhibits the neuromuscular effects of nitric oxide and 8-Br-cGMP

The effects induced by nitric oxide (NO) in different tissues depend on direct and/or indirect interactions with K+ channels. The indirect interaction of NO is produced by activation of guanylyl cyclase which increases the intracellular cGMP. Since NO, cGMP and 4-aminopyridine alone induce tetanic fade and increase amplitude of muscular contractions in isolated rat neuromuscular preparations, the present study was undertaken to determine whether or not the neuromuscular effects of NO and 8-Br-cGMP can be modified by 4-aminopyridine. Using the phrenic nerve and diaphragm muscle isolated from male Wistar rats (200-250 g), we observed that L-arginine (4.7 mM) and 8-Br-cGMP (18 µM), in contrast to D-arginine, induced an increase in the amplitude of muscle contraction (10.5 ± 0.7%, N = 10 and 8.0 ± 0.7%, N = 10) and tetanic fade (15 ± 2.0%, N = 8 and 11.6 ± 1.7%, N = 8) at 0.2 and 50 Hz, respectively. N G-nitro-L-arginine (4 mM, N = 8 and 8 mM, N = 8) antagonized the effects of L-arginine. 4-Aminopyridine (1 and 10 µM) caused a dose-dependent increase in the amplitude of muscle contraction (15 ± 1.8%, N = 9 and 40 ± 3.1%, N = 10) and tetanic fade (17.7 ± 3.3%, N = 8 and 37.4 ± 1.3%, N = 8). 4-Aminopyridine (1 µM, N = 8) did not cause any change in muscle contraction amplitude or tetanic fade of preparations previously paralyzed with d-tubocurarine or stimulated directly. The effects induced by 4-aminopyridine alone were similar to those observed when the drug was administered in combination with L-arginine or 8-Br-cGMP. The data suggest that the blockage of K+ channels produced by 4-aminopyridine inhibits the neuromuscular effects induced by NO and 8-Br-cGMP. Therefore, the presynaptic effects induced by NO seem to depend on indirect interactions with K+ channels.

Anti-parasitic action and elimination of intracellular Toxoplasma gondii in the presence of novel thiosemicarbazone and its 4-thiazolidinone derivatives

Toxoplasma, which infects all eukaryotic cells, is considered to be a good system for the study of drug action and of the behavior of infected host cells. In the present study, we asked if thiosemicarbazone derivatives can be effective against tachyzoites and which morphological and ultrastructural features of host cells and parasites are associated with the destruction of Toxoplasma. The compounds were tested in infected Vero cell culture using concentration screens (0.1 to 20 mM). The final concentration of 1 mM was chosen for biological assay. The following results were obtained: 1) These new derivatives decreased T. gondii infection with an in vitro parasite IC50% of 0.2-0.7 mM, without a significant effect on host cells and the more efficient compounds were 2, 3 (thiosemicarbazone derivatives) and 4 (thiazolidinone derivative); 2) The main feature observed during parasite elimination was continuous morphological disorganization of the tachyzoite secretory system, progressive organelle vesiculation, and then complete disruption; 3) Ultrastructural assays also revealed that progressive vesiculation in the cytoplasm of treated parasites did not occur in the host cell; 4) Vesiculation inside the parasite resulted in death, but this feature occurred asynchronously in different intracellular tachyzoites; 5) The death and elimination of T. gondii was associated with features such as apoptosis-like stage, acidification and digestion of parasites into parasitophorous vacuoles. Our results suggest that these new chemical compounds are promising for the elimination of intracellular parasites by mainly affecting tachyzoite development at 1 mM concentration for 24 h of treatment.

Growth and plant mass of radish fertirrigated with different doses nitrogen

ABSTRACT The objective of the present study was to evaluate the effect of nitrogen doses applied via fertigation and associated with different types of crop establishment fertilization on growth and biomass of radish. The experiment was conducted in a greenhouse of the Academic Unit of Agricultural Engineering, Federal University of Campina Grande, from April to May 2014. Treatments consisted of five doses of nitrogen fertilizer applied by fertigation (0, 0.7, 1.4, 2.1 and 2.8g per pot) and three types of crop establishment fertilization (humus 2:2; NPK and control), arranged in a 5 x 3 factor design with four repetitions. The 15 treatments were arranged in 60 plots. The nitrogen source used in the study was urea, divided in three applications: the first application was carried out eight days after transplanting, the second, on day 15, and the third, on day 22. The crop establishment fertilization significantly influenced the growth variables and plant mass of the radish on day 35 after transplanting. The highest values of the variables (number of leaves, plant height, bulb diameter, leaf area, fresh mass of the aerial part, dry mass of the aerial part and root/aerial part were observed in the treatment with humus on day 35 after transplanting. The dose of 2.8g nitrogen per pot corresponding to 6.22g of urea per plant provided the highest yield for the variable number of leafs, leaf area and root length on day 35 after transplanting.

Anticorpos neutralizantes contra rubéola num grupo de gestantes de São Paulo

Determinou-se os níveis de anticorpos neutralizantes contra rubéola em 778 soros de igual número de pacientes que freqüentam o ambulatório da Casa Maternal Leonor Mendes de Barros. Destas 778 mulheres, 600 (77,12%) apresentavam níveis de anticorpos iguais ou superiores a 4 (diluição 1:4). Em relação à idade, o grupo examinado, com uma idade média de 25,6 anos, permite verificar que no grupo etário de 15 a 19 anos a freqüência de pacientes com anticorpos na diluição 1:4 ou maior é de 79,43%; no grupo de 20 a 24 anos, 75,69%; no de 25 a 29, 77,38%; de 30 a 34, 82,50%; de 35 a 39, 75,68% e de 40 a 44, 50.00%. A comparação dos resultados obtidos em cada grupo etário da amostra examinada, mostra que os percentuais de positividade das idades compreendidas entre 15 e 39 anos são muito próximas, sendo que o grupo de 40 a 44 anos apresenta um percentual notadamente menor de pacientes com anticorpos. Esta discordância demonstrou-se estatisticamente significativa ao nível de 0,01. No que se refere à cor, das 350 gestantes de cor branca, 79,14% apresentaram anticorpos nos níveis mencionados anteriormente; das 90 pacientes de cor preta, 75,56%; das 317 mulheres grávidas de cor parda, 75,71% e das 21 gestantes de cor amarela, 71,43% possuiam níveis de anticorpos. Para inquéritos sôro-epidemiológicos de larga escala, a prova de neutralização apresenta inconvenientes de ordem prática pelo que se faz necessário estudar mais amplamente a correlação dos resultados desta técnica com aqueles fornecidos por outros, entre as quais se destaca, sem dúvida, a reação de inibição da hemaglutinação.

A importância das inundações na expansão da esquistossomose mansoni

Faz-se alusão à interferência das inundações na vida dos planorbídeos, quer contribuindo para a destruição de seus criadouros nas águas naturais e sistemas de irrigação, quer favorecendo sua proliferação e dispersão. Foram analisados os efeitos das enchentes e uma de suas conseqüências, que é a exacerbação da esquistossomose em focos antigos e o surgimento de novos. Foi relatada a ocorrência verificada em São José dos Campos, Estado de São Paulo, onde se deu o agravamento da parasitose em dois focos antigos, após as enchentes do Rio Paraíba e seus afluentes.

O contrôle da doença de Chagas no município de Bariri, Estado de São Paulo

Com o aparecimento de adultos com reação de Machado-Guerreiro positiva, no município de Bariri, foram relatados fatos sôbre o contrôle da doença de Chagas, naquele município, a cargo da Divisão de Combate a Vetores (antigo Serviço de Erradicação da Malária e Profilaxia da Doença de Chagas). Foram relatadas informações sôbre captura e identificação das espécies encontradas, índices de infecção e métodos utilizados, desde 1950 até a presente data. Observou-se que em várias áreas do Estado de São Paulo, as diversas espécies de triatomíneos reagem de forma diferente ao BHC 30%, havendo acentuada redução do T. infestans nos domicílios e anexos, o mesmo não acontecendo com o T. sordida e o P. megistus. Com a finalidade de medir a prevalência, foi assinalada a realização de amplo inquérito sorológico por amostragem, que vem sendo realizado nas escolas primárias de todo o Estado de São Paulo. Além disso, como complemento, em Bariri, foi realizado o levantamento pela imunofluorescência indireta entre pré-escolares. Fêz-se também trabalhos de divulgação sanitária junto à população. Conclui-se que os índices atuais de infestação por triatomíneos, das casas e dos anexos, são atualmente baixos; o cadastramento do tipo de casas existentes mostra a prevalência de construções de tijolos rebocados, com poucas possibilidades de refúgio para êsses insetos, e, a transmissão natural da doença de Chagas, em Bariri, atualmente encontra-se sob contrôle, estando o referido município em condições de entrar em Fase de Vigilância.

Observações sôbre o ciclo evolutivo do Triatoma arthurneivai, em condições de laboratório (Hemiptera, Reduviidae)

A partir de ovos de fêmeas de Triatoma arthurneivai capturadas no ecótopo natural observou-se o tempo de evolução, em condições de laboratório mantidas à temperatura de 25°C e 60-70% de umidade relativa do ar. Foram oferecidos repastos sanguíneos em camundongo albino, semanalmente. A taxa de eclosão de ovos foi de 92,8%. Observaram-se diferenças entre o tempo de evolução desde a eclosão do ôvo até a muda para adulto, quando os triatomíneos foram criados isoladamente ou em grupos de 2-9 espécimes. O tempo médio dêstes foi de 228,3 dias e o daqueles, de 314,4 dias. O mesmo tempo, também apresentou diferenças quando se levou em consideração o sexo; os machos tiveram um tempo médio de 205,4 dias enquanto para as fêmeas o tempo foi de 274,3 dias. Algumas hipóteses são apresentadas, porém nenhuma ofereceu possibilidades de confirmação. Conclue-se pela necessidade de novos trabalhos para elucidar as dúvidas e, sugere-se possibilidade de novos conhecimentos a serem utilizados no estudo da tripanossomose americana em seus focos naturais.

Aspectos ecológicos da tripanossomose americana: I - observações sôbre o Panstrongylus megistus e suas relações com focos naturais da infecção, em área urbana da cidade de São Paulo, Brasil

São relatadas as investigações que levaram a efeito o encontro de foco natural da Tripanossomose Americana, na área ocupada pelo bairro denominado Chácara Flora, na cidade de São Paulo. Esse foco conta com o concurso do triatomíneo Panstrongylus megistus, de gambás Didelphis marsupialis e de ratos domésticos da espécie Rattus norvegicus. A presença destes últimos permite admitir maior aproximação da infecção no sentido do ambiente humano. O encontro de um espécimen adulto fêmea de P. megistus sugando ativamente o homem dentro da habitação, aliado à revisão da literatura, permite supor que não se trata de subespécie ecológica. A presença de diferenças essenciais de comportamento no norte e sul do Brasil, no estado atual dos conhecimentos, seria resultante, preponderantemente, da ação de fatôres ambientais, entre os quais, as condições climáticas.

Ampicilina K em dose única, por via oral, no tratamento da gonorréia

Foram tratados 70 pacientes do sexo masculino portadores de uretrite gonocócica aguda com 3,0 g de Ampicilina K por via oral, em dose única. Em 87,1% dos casos houve desaparecimento da secreção uretral; na grande maioria dos casos entre 24 e 72 horas. Considerados mais 3 casos em que houve persistência da secreção pós tratamento, mas com ausência de gonococos aos exames bacteriológicos (cura bacteriológica) o sucesso terapêutico pode ser elevado para 91,4%.