Sperm tail flexibility test: a simple test for selecting viable spermatozoa for intracytoplasmic sperm injection from semen samples without motile spermatozoa

PURPOSE: The objective was to describe the results of the injection of immotile spermatozoa with flexible tails when only immotile spermatozoa are present in the semen sample. METHODS: A retrospective study was conducted to analyze the procedure results for 10 couples who participated in our intracytoplasmic sperm injection program. The sperm tail was considered flexible when it moved up and down independently of the head movement, and it was considered inflexible when the movement occurred together (tail plus head). The fertilization and pregnancy rate were analyzed. RESULTS: The normal fertilization rate (presence of 2 pronuclei) was 30.3% (40/132), and the abnormal fertilization rate (presence of less than or more than 2 pronuclei) was 6.81% (9/132). A total of 52 embryos were obtained with 9 transfer procedures performed (pregnancy rate: 11.12%). CONCLUSIONS: The sperm tail flexibility test (STFT) is an easy and cost-effective way for selecting viable immotile spermatozoa and can be used as an alternative method for determining the viability of spermatozoa. This test seems to be a simple and risk-free method when compared to the swelling test.

Puberty in male collared peccary (Pecari tajacu) determined by quantitative analysis of spermatogenic cells

Biological studies are necessary for the management of wildlife in captivity, and knowledge of reproduction is one of the important features for increasing production. The objective of the research was to determine the age at which male collared peccaries reach puberty. Testicular samples of 15 animals, aged 7 to 16 months, distributed into five groups (G1, G2, G3, G4 and G5) were used. The testes showed considerably increased weight, length and width (p < 0.05) from G1 to G3, whereas, from this group onward, the development of this organ was slower. There was positive correlation (p < 0.001) between the following testicular parameters: weight and length (r = 0.97), weight and width (r = 0.88), length and width (r = 0.92). Regarding the diameter of seminiferous tubules, an increase was observed (p < 0.05) from G1 to G4. The total number of spermatogenic cells increased significantly (p < 0.05) until G3 and then it stabilized. There was also positive correlation between testis weight and tubular diameter (r = 0.99, p < 0.001), and testis weight and spermatogenic cells (r = 0.98, p < 0.001). The number of Sertoli cells decreased significantly (p < 0.05) from G1, when they were undifferentiated as support cells, to G5, when they occurred together with the complete line of spermatic cells. The results demonstrate that the reproductive development of peccaries can be classified into the following stages: impuberty (G1, 7-8 months); pre-pubertal (G2, 9-10 months); pubertal (G3, 11-12 months); post-pubertal 1 (G4, 13-14 months); and post-pubertal 2 (G5, 15-16 months). Based on the histological analyses, puberty in the male collared peccary was determined to occur between 11 and 12 months of age.

O uso do ultra-som intracoronariano na tomada de decisão para o tratamento das lesões coronarianas moderadas

OBJETIVO: Investigar o critério ultra-sonográfico de área mínima da luz (AML), com valor de corte igual a 4,0 mm² na tentativa de diferençar as lesões que devem ou não ser tratadas. MÉTODOS: Incluímos 173 pacientes consecutivos com lesões angiograficamente moderadas (porcentual de estenose entre 40 e 70) submetidos à realização de ultra-som, divididos em 2 grupos: grupo 1 clínico (AML > 4,0 mm²) e grupo 2 revascularização (AML < 4,0 mm²), que foram acompanhados para determinar as taxas de eventos cardíacos maiores (ECM) em dois anos, a necessidade de revascularização da lesão-alvo e identificar os preditores clínicos, angiográficos e ultra-sonográficos dos eventos. RESULTADOS: Apresentaram AML > 4,0 mm² 75 (43%) pacientes, mantidos clinicamente e 98 (57%) pacientes AML < 4,0 mm², tratados com stents coronarianos. Pela angiografia coronariana quantitativa não houve diferença significante entre o porcentual de estenose do vaso [grupo 1: 48% vs grupo 2: 53%; p=0,06]. Ao contrário das mensurações ultra-sonográficas, pois a AML mostrou-se significativamente maior no grupo 1 quando comparada ao grupo 2 [4,54 mm² vs 2,45 mm²; p<0,001)]. O impacto clínico da tomada de decisão foi favorável, não verificando-se diferença na ocorrência de eventos cardíacos maiores: [grupo 1: 5 (7%) vs grupo 2: 14 (15%); p= 0,09]. A necessidade de revascularização da lesão-alvo também não diferiu (grupo 1: 3 (4%) vs grupo 2: 11 (12%); p=0,07). As variáveis preditoras para os ECM foram: diabetes, angina CFIII pré-hospitalização e a AML avaliada pelo ultra-som. CONCLUSÃO: A estratégia de decisão de tratamento assegura baixas taxas de ECM em ambos os grupos no seguimento de 24 meses, garantindo reduzidas taxas de revascularização, sendo as variáveis preditoras de eventos cardíacos maiores: diabetes melito, angina classe funcional III e a AML ao ultra-som intracoronariano.

Transferências lipídicas para HDL em diabéticos tipo 2: associações com microalbuminúria, estatina e insulina

FUNDAMENTO: O diabete melito tipo 2 (DM2) é um fator de risco isolado para coronariopatia, principalmente quando associado à microalbuminúria (MA). Alterações estruturais e funcionais das lipoproteínas não são totalmente esclarecidas nesse contexto. OBJETIVO: Avaliar a transferência de lípides para HDL (T) em pacientes DM2 e a associação com a presença da MA e com o tratamento com estatina ou insulina. MÉTODOS: Estudamos 33 pacientes com DM2 e 34 controles pareados para idade. Uma nanoemulsão lipídica artificial radiomarcada com ³H-Triglicéride (TG) e 14C-colesterol livre (CL) ou ³H-colesterol éster (CE) e 14C-fosfolípide (FL) foi incubada com plasma. A nanoemulsão e as lipoproteínas foram precipitadas, exceto a HDL, que teve sua radioatividade contada. RESULTADOS: A TFL (%) foi maior no grupo com DM2 que no grupo-controle (25,2±3,2 e 19,7±3,2 respectivamente; p < 0,001), assim como a TCL (%): 9,1±2,7 e 6,3±1,5 respectivamente; p < 0,001. O diagnóstico de MA não se associou a mudanças da propriedade de transferência. O uso da insulina associou-se à menor TFL (%): 23,5±2,1 contra 26,1±3,3; p = 0,018. Já o uso da estatina associou-se à queda de todas - TCE (%): 3,5±0,9; TFL (%):23,8±2,0; TTG (%): 3,9±0,8; TCL (%):7,4±1,3 - quando comparado ao grupo que não usava estatina (TCE (%):5,9±2,4; TFL (%):26,9±3,6; TTG (%):6,4±2,2; TCL (%):11,1±2,6). CONCLUSÃO: O DM2 aumentou a transferência de lípides de superfície para HDL, enquanto o uso de estatina diminuiu todas as transferências de lípides. A presença de MA não se associou às alterações das transferências de lípides.

Sobre o comportamento mitótico e meiótico de cromossomas policêntricos ou com ponto de inserção difuso

Material: Studies were made mainly with Ascaris megalocephála Cloq. univalens and bivalens, and also with Tityus bahiensis Perty. 1) Somatic pairing of heterochromatic regions. The heterochromatic ends of the somatic chromosomes in Ascaris show a very strong tendency for unspecifical somatic pairing which may occur between parts of different chromosomes (Figs. 1, 2, 3, 7, 10, 11, 12, 13, 14, 16, 18,), between the two ends of the same chromosome either directly (Figs. 4, 5, 7, 8, 11, 12, 13, 15, 16, 17, 18) or inversely (Fig. 8, in the arrow) and also within a same chromosomal arm (Fig. 6). 2) During the early first cleavage division the chomosomes are an isodiametric cylinder (Figs. 6, 9, 11, 13, 14). But in later metaphase the ends become club shaped (Figs. 1, 2, 3, 4, 5, 7, 10) which is interpreted as the beginning of migration of chromatic substance from the central euchromatic region towards the heterochromatic regions. This migration becomes more and accentuated in anaphase (Figs. 19, 22, 23) and in the vegetative cells where euchromatic region looses more and more staing power, especially in the intersititial zones between the individual small spherical chromosomes into which the euchromatic region desintegrates. The emigrated chromatin material is finally eliminated with the heterochromatic chromosome ends (Fig. 23 and 24). 3) It seems a general rule that during mitotic anaphase all chromosomes with diffuse or multiple spindle fiber attachement (Ascaris, Tityus, Luzula, Steatococcus, Homoptera and Heteroptera in general) move to the poles in the form of an U with precedence of the chromosomal ends. In Ascaris, the heterocromatic regions are pulled passively towards the poles and only the euchromatic central portion may be U-shaped (Fig. 19, 22, 25). While in the other species this U-shape is perfect since the beginning of anaphase, giving the impression that movement towards the poles begins at both ends of a chromosome simultaneously, this is not the case in Ascaris. There the euchromatic region is at first U-shaped, passing then to form a straight or zig-zag line and becoming again U-shaped during late anaphase. This is explained by the fact that the ends of the euchromatic regions have to pull the weight of the passive heterochromatic portions. 4) While it is generally accepted that, during first meio-tic division untill second anaphase, all attachement regions remain either undivided or at least united closely, this is not the case in chromosomes with diffused or multiple attachment. Here one clearly sees in all cases so far studied four parallel chromatids at first metaphase. In Luzula and Tityus (for Tityus all figs. 26 to 31) this division is allready quite clear in paraphase (pro-metaphase) and it cannot be said wether in other species the division in sister chromatids is allready present, but not visible at this stage. During first anaphase the sister chromatids of Titbits remain more or less in contact, while in Luzula and especially in Ascaris they are quite separated. Thus one can count in late anaphase or telophase of Ascaris megalocephala bivalens, nearly allways, four separate chromosomes near each pole, or a total of eight chromatids per division figure (Figs. 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41).

Sobre um gênero e três espécies de nematóides da família Dorylaimidae

This paper deals with one genus and three species of dorylaimid nematodes found inhabiting soil in Brazil, as follows: Eudorylaimus ibiti Lordello, 1965. Closely resembling E. ibiti are E. humilis (Thorne & Swanger, 1936) Andrássy, 1959, E. diadematus (Cobb, 1936) Andrássy, 1959, and E. santosi (Meyl, 1957) Andrássy, 1959. it differs from E. humilis in the following aspects: a) longer and thicker body (1,126.0-1,520.8: 1,000 microns; a=21.0-26.0 : a= 31); b) less prominent lips; and, c) tail terminus decidedly acute; differs from E. diadematus in having: a) less prominent lips; b) posterior region of body ventrally concave; and, c) a different organization in the walls of the pre-rectum; differs from E. santosi in having: a) longer body (1,126.0-1,520.8 : 900-1,000 microns); b) spear with undiscernible aperture; c) a different organization in the guiding-ring of spear; and, d) caudal papillae closer together and located in front of the middle of the tail. Mesodorylaymus pizai Lordello, 1965. M. pizai most closely resembling species is M. mesonyctius (Kreis, 1930) Andrássy, 1959, from which it differs in having: a) lip region amalgamated, continuous with neck contour (lateral view); b) males with 11-12 supplements; and, c) females with longitudinal vulva. Metaporcelaimus Lordello, 1965. This genus differs from Aporcelaimus Thorne & Swanger, 1936, in having oesophagus made up of three regions, a cardia like structure being seen between the posterior and middle parts. Type species: M.mombucae Lordello, 1965.

Ácidos orgânicos de folhas de três variedades de cana-de-açúcar (Saccharum spp) em quatro estádios de maturidade

Folhas de cana-de-açúcar (Saccharum spp) de três variedades (NA 56-79, IAC 58-480 e RB 73-5275)em quatro estádios de maturidade (11, 12, 13 e 14 meses) foram analisadas para a determinação de ácidos orgânicos e potássio. O ácido trans-aconítico constituiu cerca de 60% do total de ácidos orgânicos seguido pelos ácidos málico, glutárico, succinics, alfa cetoglutárico, malônico e fumárico. Foram observadas diferenças significativas entre as variedades e entre os estádios de maturidade para todos os ácidos orgânicos identificados. Não foram observados coeficientes de correlação significativos entre os teores de potássio e de ácidos orgânicos.

Ácidos orgânicos de caldo de três variedades de cana-de-açúcar (Saccharum spp) em quatro estádios de maturidade

Os teores dos ácidos trans-aconítico, málico, malônico e succínico foram determinados no caldo de cana das variedades IAC 58-480, RB 73-5275 e NA 56-79, em quatro estádios de maturidade (11, 12, 13 e 14 meses). O ácido trans-aconítico constituiu cerca de 84% do total dos ácidos orgânicos seguido pelo ácido málico com 14%. Os ácidos oxálico, glutárico, alfa-cetoglutárico e cítrico foram encontrados em níveis inferiores a 1%. Os níveis dos ácidos succínico, málico e trans-aconítico diminuíram com a maturidade da planta enquanto os de malônico aumentaram. Não foram encontradas diferenças significativas entre as variedades estudadas em relação aos teores de ácido trans-aconítico.

Nota sôbre a dosagem iodométrica da vitamina C nos frutos cítricos

Ascorbic acid was determined in pure aquous solutions and in citrus fruit juices by iodometric, dichlorophenolindophenol and iodate methods. More constant values were obtained with iodate and Tillmans methods. Iodate is preferable owing to the stability of solution and the simplicity of the method. In the analysis of citrus juices the iodate method proposed by Ballentine is very accurate and suitable for routine work (Table I and II). Recovery experiments recorded in Table III show that the results are reproducible. The averages obtained for some fruits are shown in Table IV. Lemon: 45,4 to 67,3; orange: 28,0 to 60,8; lima: 25,2 to 38,2 and mandarine: 32,0 to 59,3. Values expressed in mg per 100 cc. of juice.

Angiostrongylus costaricensis and experimental infection of Sarasinula marginata II: elimination routes

Angiostrongylus costaricensis intermediate hosts are terrestrial mollusks mostly belonging to the Veronicellidae family. In the present investigation we focused on the mechanisms of larval expulsion from Sarasinula marginata infected with A. costaricensis. Twenty-five mollusks were individually infected with 5000 L1 and sacrificed at 30 min and 1, 2, 4, 6, and 8 h post-infection and at days 1, 2, 4, 5, 6, 8, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 20, 21, 22, 25, 26, 28, and 30 post-infection; the mollusks were then fixed and stained. Diverse organs involved throughout the course of the migratory routes of larvae from oral penetration on were specified and the mechanisms of larval access to the fibromuscular layer through the kidney, rectum, and vascular system were defined. The elimination of L3, derived from oral and/or cutaneous infections, appears to depend on granulomas located close to the excretory ducts of mucous cells.

Myxobolus insignis sp. n. (Myxozoa, Myxosporea, Myxobolidae), a parasite of the Amazonian teleost fish Semaprochilodus insignis (Osteichthyes, Prochilodontidae)

A new myxosporean species is described from the fish Semaprochilodus insignis captured from the Amazon River, near Manaus. Myxobolus insignis sp. n. was located in the gills of the host forming plasmodia inside the secondary gill lamellae. The spores had a thick wall (1.5-2 µm) all around their body, and the valves were symmetrical and smooth. The spores were a little longer than wide, with rounded extremities, in frontal view, and oval in lateral view. They were 14.5 (14-15) µm long by 11.3 (11-12) µm wide and 7.8 (7-8) µm thick. Some spores showed the presence of a triangular thickening of the internal face of the wall near the posterior end of the polar capsules. This thickening could occur in one of the sides of the spore or in both sides. The polar capsules were large and equal in size surpassing the midlength of the spore. They were oval with the posterior extremity rounded, and converging anteriorly with tapered ends. They were 7.6 (7-8) µm long by 4.2 (3-5) µm wide, and the polar filament formed 6 coils slightly obliquely to the axis of the polar capsule. An intercapsular appendix was present. There was no mucous envelope or distinct iodinophilous vacuole.

Respiratory syncytial virus seasonality in Brazil: implications for the immunisation policy for at-risk populations

Respiratory syncytial virus (RSV) infection is the leading cause of hospitalisation for respiratory diseases among children under 5 years old. The aim of this study was to analyse RSV seasonality in the five distinct regions of Brazil using time series analysis (wavelet and Fourier series) of the following indicators: monthly positivity of the immunofluorescence reaction for RSV identified by virologic surveillance system, and rate of hospitalisations per bronchiolitis and pneumonia due to RSV in children under 5 years old (codes CID-10 J12.1, J20.5, J21.0 and J21.9). A total of 12,501 samples with 11.6% positivity for RSV (95% confidence interval 11 - 12.2), varying between 7.1 and 21.4% in the five Brazilian regions, was analysed. A strong trend for annual cycles with a stable stationary pattern in the five regions was identified through wavelet analysis of the indicators. The timing of RSV activity by Fourier analysis was similar between the two indicators analysed and showed regional differences. This study reinforces the importance of adjusting the immunisation period for high risk population with the monoclonal antibody palivizumab taking into account regional differences in seasonality of RSV.

A new species of Stilobezzia Kieffer from the neotropical region (Diptera, Ceratopogonidae)

A new species from the Neotropical Region, Stilobezzia (Stilobezzia) pseudopunctulata Cazorla & Ronderos, is described and illustrated based on male and female adults and pupal exuviae. Adults were collected in the Argentinian provinces of Chaco, Formosa, Corrientes and Buenos Aires, and in Santa Cruz, Bolivia. The pupa was collected from mats of floating aquatic macrophytes in a lagoon in Ilha da Marchantería, in the vicinities of Manaus, Brazil. This new species is compared with its similar congener Stilobezzia punctulata Lane, from which it can be mainly distinguished by the wing with only two dark spots, the parameres longer and hook-shaped, the pupal respiratory organ with 11-12 pores and the very short apicolateral processes of the anal segment.

Imobilização de nitrogênio da uréia e do sulfato de amônio aplicado em pré-semeadura ou cobertura na cultura de milho, no sistema plantio direto

Sulfato de amônio (SA) e uréia (U) marcados com 15N foram aplicados na cultura do milho, em sucessão à aveia preta (Avena strigosa Schieb.), no sistema plantio direto, 43 dias antes e 31 dias depois da semeadura, na dose de 80 kg ha-1 de N, incorporados a 5-7 cm de profundidade, em sulcos espaçados de 0,8 m, nas entrelinhas do milho. O objetivo foi quantificar o N dos fertilizantes imobilizado no solo (15N-orgânico), no sulco de adubação, e o N-recuperado na planta nos estádios de 5-6 folhas, 11-12 folhas, florescimento e maturação fisiológica. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com parcelas subdivididas e três repetições. As parcelas foram constituídas das fontes U e SA, e as subparcelas, das épocas de aplicação de N. O experimento foi realizado em Latossolo Vermelho ácrico típico fase cerrado subcadocifólio, na Fazenda Floresta do Lobo-Pinusplan, em Uberlândia (MG). Na aplicação em pré-semeadura, a máxima imobilização foi observada aos 19 dias da aplicação do SA (13,3 kg ha-1 ou 16,6 % do N-aplicado) e aos 40 dias da aplicação da U (13,7 kg ha-1 ou 17,1 % do N-aplicado). A maior quantidade de N fertilizante assimilado pela planta ocorreu entre os estádios de 5-6 e 11-12 folhas (44,1 e 23,4 % do N-SA e N-U, respectivamente). Na aplicação em cobertura, a imobilização do N-SA foi inferior a 3,5 % do N-aplicado, enquanto a imobilização do N-U foi de 9,9 kg ha-1 e 7,9 kg ha-1, respectivamente, nos estádios de 11-12 folhas e florescimento. Até o estádio de maturação fisiológica da cultura, 61,8 % do N-SA e 42,0 % do N-U foram recuperados pelo milho. Em média, nos estádios de 11-12 folhas e de florescimento, para cada kg de N-SA imobilizado, as plantas de milho recuperaram 8,0 e 16,7 kg ha-1 de N fertilizante em pré-semeadura e cobertura, respectivamente. Nos tratamentos com U, a média foi de 3,1 kg ha-1, independentemente da época de aplicação. As produtividades de grãos obtidas com SA e U, independentemente da época de aplicação, foram de 7.824 kg ha-1 e 6.977 kg ha-1, respectivamente. Na adubação em pré-semeadura do milho, o SA apresentou maior rapidez na ciclagem do N imobilizado-mineralizado ("turnover"), em relação a U, e, conseqüentemente, causou maior assimilação do N pela cultura. Em cobertura, no sulco de adubação, somente houve imobilização do N-U, retardando a sua assimilação pela planta.

Imobilização de nitrogênio da uréia e do sulfato de amônio aplicado em pré-semeadura ou cobertura na cultura de milho, no sistema plantio direto

No segundo ano de estudo, sulfato de amônio (SA) e uréia (U) marcados com 15N foram aplicados na cultura do milho, em sucessão à aveia-preta (Avena strigosa Schieb.), no sistema plantio direto, 33 dias antes e 10 dias depois da semeadura, na dose de 80 kg ha-1 de N, incorporados a 5-7 cm de profundidade, em sulcos espaçados de 0,8 m, nas entrelinhas do milho. O objetivo foi quantificar o N dos fertilizantes imobilizado no solo (15N orgânico), no sulco de adubação, e o N recuperado na planta nos estádios de 4-5 folhas, 11-12 folhas, florescimento e colheita. O delineamento experimental foi de blocos casualizados, efetuando-se a análise de variância em esquema fatorial 2 x 6 em pré-semeadura (duas fontes, U e SA, em seis épocas de amostragem) e 2 x 3 (duas fontes em três épocas de amostragem) em cobertura, com três repetições. O experimento foi realizado em Latossolo Vermelho ácrico típico fase Cerrado subcaducifólio, na Fazenda Floresta do Lobo - Pinusplan, em Uberlândia (MG). Na aplicação em pré-semeadura, a máxima imobilização foi observada aos 22 dias da aplicação do SA (9,1 kg ha-1 ou 11,4 % do N aplicado) e aos 11 dias da aplicação da U (46,5 kg ha-1 ou 58,1 % do N aplicado). Até a colheita, a planta (parte aérea, grãos e raiz) acumulou 66,0 e 47,9 kg ha-1 de N-SA e N-U, respectivamente, correspondendo à eficiência de absorção de 82,5 e 59,9 % do N aplicado. Na aplicação em cobertura, a imobilização do N fertilizante das duas fontes foi inferior a 12,5 % do N aplicado, em todas as fases de crescimento da planta, evidenciando que a biomassa do solo não concorreu com a planta pelo N fertilizante, sendo similar à quantificação realizada na safra 1999/2000. Na média das duas safras (1999/2001) e dos estádios de 11-12 folhas e florescimento, para cada kg de N fertilizante imobilizado, as plantas de milho absorveram 8,9 e 15,4 kg ha-1 de N-SA, em pré-semeadura e cobertura, respectivamente. Para N-U, esses valores foram, respectivamente, de 4,5 e 5,2 kg ha-1, mostrando menor proporção de N-imobilizado de SA, com a aplicação dos fertilizantes em cobertura. As produtividades de grãos obtidas com SA e U, independentemente da época de aplicação, foram de 8.543 e 7.767 kg ha-1, respectivamente. Na adubação em pré-semeadura do milho, o SA apresentou maior rapidez na ciclagem do N imobilizado-mineralizado (turnover), em relação a U, e, conseqüentemente, causou maior absorção do N pela cultura, como verificado na safra anterior. Em cobertura, no sulco de adubação, de forma similar à observada na safra anterior, somente houve imobilização significativa do N-U, retardando sua absorção pela planta.