Passive haemagglutination test for human neurocysticercosis immunodiagnosis: I. Standardization and evaluation of the passive haemagglutination test for the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies

A passive haemagglutination test (PHA) for human neurocysticercosis was standardized and evaluated for the detection of specific antibodies to Cysticercus cellulosae in cerebrospinal fluid (CSF). For the assay, formaldehyde-treated group O Rh-human red cells coated with the cysticerci crude total saline extract (TS) antigen were employed. A total of 115 CSF samples from patients with neurocysticercosis was analysed, of these 94 presented reactivity, corresponding to 81.7% sensitivity, in which confidence limit of 95% probability (CL95%) ranged from 74.5% to 88.9%. Eighty-nine CSF samples derived from individuals of control group presented as nonreactive in 94.4% (CL95% from 89.6% to 99.2%). The positive and negative predictive values were 1.4% and 99.9%, respectively, considering the mean rate of that this assay provide a rapid, highly reproducible, and moderately sensitive mean of detecting specific antibodies in CSF samples.

Passive haemagglutination test for human neurocysticercosis immunodiagnosis: II - Comparison of two standardized procedures for the passive haemagglutination reagent in the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in cerebrospinal fluids

A comparison of two different standardized reagent procedures for the passive haemagglutination test (PHA) in the detection of specific antibody to Cysticercus cellulosae in cerebrospinal fluid (CSF) was carried out. The formaldehyde-treated group O Rh-human red blood cells (HuRBC) and glutaraldehyde-treated sheep red blood cells (SRBC) were the supplies for the reagents preparation and, in the tests, they were designated as PHA-1 and PHA-2, respectively. For both reagents the cells were coated with the cysticerci total saline extract (TS) antigen. PHA-1 and PHA-2 were assessed in a total of 204 CSF from patients with neurocysticercosis, from non-related infections and from healthy individuals. The positivity and specificity indices obtained were respectively 81.7% and 94.4% for PHA-1 and for PHA-2, 88.7% and 96.6%. Since no significant differences were observed between the results provided by two reagents, at level of significance of 0.05, either processes of cell sensitization can alternatively be used according to the own laboratory convenience.

Growth curves of Leishmania braziliensis braziliensis Promastigotes and surface antigen expression before and after adaptation to Schneider's drosophila medium as assessed by anti-Leishmania human sera

Leishmania braziliensis braziliensis(MHOM/BR/75/M2903) was grown in Schneider's Drosophila medium. In one set of experiments promastigotes were already adapted to the medium by means of serial passages whereas in the second cells were grown in a biphasic medium and transfered to the liquid. Growth was more abundant for culture medium adapted cells; degenerate cells in small numbers as well as dead ones were present from day 5 for promastigotes adapted to liquid medium and from day 3 for newly adapted cells. Synthesis of surface antigens differed according to length of cell culture as assessed by the titer of five mucocutaneous leishmaniasis sera on subsequent days. Five days of culture for cells already adapted to the culture medium and 3 days for newly adapted ones were judged to be the best for the preparation of immunofluorescence antigens.

Efeito adverso do uso intermitente de rifampicina para tratamento de hanseníase

Os autores apresentam um caso de insuficiência renal aguda, hemólise aguda e trombocitopenia relacionada ao uso intermitente de Rifampicina para tratamento da Hanseníase. Estas reações adversas são observadas com extrema raridade na literatura mundial. A evolução da paciente foi benigna havendo recuperação total da função renal e regressão completa das alterações hematológicas. Este foi o primeiro registro no Brasil dos efeitos adversos da Rifampicina no tratamento de Hanseníase. São discutidos os principais aspectos patogênicos das alterações apresentadas e fez-se revisão da literatura existente sobre o assunto.

Reduced schedule of human anti rabies immunization with Fuenzalida & Palacios vaccine

The present study evaluates the humoral and cellular immune responses in 35 volunteers submited to short antirabies vaccination schedules with the Fuenzalida & Palacios vaccine based on the administration of doses on non consecutive days. The volunteers were divided into two groups. The first group received a total number of five doses given on days 0, 4, 7, 20 and 35. The other group received four doses, the first one being a double dose given on day 0 and than three other single doses on days 7, 20 and 35. The evaluation of humoral immune response was carried out by serum neutralization (SN) and indirect immunofluorescense (IIF) tests, while the cellular immune response was evaluated by lymphoblastic transformation assay (LTA) and skin test (ST). According to our results these reduced schedules elicited early and effective humoral and cellulafimmune responses to rabies antigen suggesting that new reduced schedules should be extensively studied in order to give the proper bases to the proposition of changes in the current long-term schedule.

Comparison of serum hepatitis B virus replication markers in patients with chronic hepatitis B: studies on HBeAg/Anti-HBe system, viral dna polymerase and HBV-DNA

The detection of HBV-DNA in serum by molecular hybridization is the most sensitive and specific marker of replication and infectivity of hepatitis B virus and currently is proposed as a routine diagnostic technique in the follow-up of HBV - related diseases. Comparing different techniques already described, we found that direct spotting of serum samples on nitrocellulose membranes under vacuum filtration, followed by denaturing and neutralizing washes is more practical, simple, sensible and reproducible. DNA polymerase assay using phosphonoformic acid as specific viral inhibitor has shown 86.8% of concordance with HBV-DNA detection, and so, it is an useful alternative in the follow-up of hepatitis B chronic patients. We found 19.2% HBeAg positive samples with no other markers of viral replication and no anti-HBe positive sample had detectable HBV-DNA. Discordance between the 2 systems have been extensively described, and we confirm this for the first time in our country. Molecular biological techniques are essential to determine the replication status of chronic hepatitis B patients.

Enzyme linked immunosorbent assay: determination of anti-adenovirus antibodies in an infant population

In order to define an accurate assay for anti-adenovirus antibody detection, a recently developed ELISA was compared with IFA and CF. On 58 sera, the ELISA was more sensitive than both CF and IFA, which showed relative sensitivities of 63% and 94%, respectively. It was not possible to determine the exact specificity of the tests because of the lack of a gold standard. Furthermore, the ELISA was used to define the prevalence of adenovirus antibodies in 116 infants between 1 and 24 months old (mean 7.28). The data showed that maternal antibodies waned by the age of 5 to 6 months and that more than 80% of the children had been infected by adenoviruses by the age of 10 months.

Infecção por clonorchis sinensis em imigrantes asiáticos no Brasil: tratamento com praziquantel

Estudaram-se quinze pacientes com infecção assintomática por Clonorchis sinensis, revelada através de exame parasitológico de fezes. Todos eram de origem asiática e procuraram o Laboratório Central do Instituto Adolfo Lutz para se submeterem a exames laboratoriais necessários à regularização de sua situação, face à nova legislação sobre imigrantes. Eram todos indivíduos adultos, seis pertencendo ao sexo feminino e nove ao masculino. Os quinze pacientes com clonorquíase foram internados no Hospital das Clínicas da FMUSP e tratados com Praziquantel, na dosagem de 60 mg/kg de peso corporal, dividida em duas tomadas. Foram realizados exames coprológicos quantitativos (método de Kato-Katz), antes do tratamento específico e no 15º, 30º e 60º dias após a terapêutica. Na última avaliação (60? dia após terapêutica), em nove pacientes (60,0%) não se encontraram ovos do trematódeo nas fezes e nos seis (40,0%), que continuavam eliminando ovos, notou-se redução na quantidade eliminada (superior a 90% em cinco e a 30% no paciente restante). Os pacientes foram também submetidos a exames subsidiários, para avaliação do estado geral e função hepática, antes da administração de Praziquantel e, posteriormente, no seguimento ambulatorial. A medicação foi relativamente bem tolerada pelos pacientes, verificando-se a ocorrência de efeitos colaterais representados por náuseas e vômitos (dois casos), vertigens e tonturas (dois casos), epigastralgia (dois casos) e diarréia no 3? dia após tratamento (um caso).

Itraconazol no tratamento da pitiríase versicolor: comparação entre 5 e 7 dias de tratamento

Os autores analisam os resultados obtidos no tratamento da pitiríase versicolor com o Itraconazol em estudo aberto, comparativo, na dose de 200 mg/dia por 5 e 7 dias. A diagnose foi estabelecida pelo exame clínico, fluorescência pela luz de Wood exame micológico direto, sendo os pacientes reavaliados no 21º e 35º dia após o início da terapêutica. Ambos os esquemas de tratamento utilizados mostraram-se eficazes. Os índices de cura clínica e micológica, obtidos no último controle, foram de 90% para o grupo tratado por 5 dias e 95% para o grupo tratado por 7 dias. A tolerância à droga foi boa, tendo sido registrados efeitos colaterais em dois pacientes do grupo tratado por 7 dias e em um paciente do grupo tratado por 5 dias. Como não houve diferença estatisticamente significante entre ps grupos tratados, os autores recomendam o esquema de tratamento mais curto, ou seja, 200 mg/dia por 5 dias.

Teste imunoenzimático para pesquisa de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae em líquidos cefalorraquianos de pacientes com meningites de etiologia indeterminada

Foi empregado o teste imunoenzimático com componentes antigênicos de Cysticercus cellulosae quimicamente ligados a suporte inerte constituído por discos de tecido-resina, ELISA-d, com a finalidade de investigar a entidade neurocisticercose (NC) em líquidos cefalorraquianos (LCR) de pacientes com meningites de etiologia indeterminada. Foram ensaiados 277 LCR de 128 crianças e 149 adultos. A densidade óptica média (DO) obtida para os 22 LCR de pacientes nos quais foi afastada a possibilidade diagnóstica de meningite foi de 0,03. Os 44 LCR de pacientes com meningites determinadas por diversos agentes etiológicos, não cisticercose, apresentaram DO de 0,05. O limiar de reatividade do teste ELISA-d calculado a partir desses dois grupos (controle) foi de 0,13 (DO + 3SD). No grupo de 13 LCR de pacientes com NC comprovada em episódio meningítico por essa causa, foi observada DO de 0,41 (0,10 a 0,91) no teste ELISA-d. Dos 198 LCR de meningites por agente etiológico não identificado pelos métodos usualmente empregados, 23 (11,6%) apresentaram DO acima de 0,13, sugerindo que a possível causa da meningite tenha sido por cisticercose, uma vez que o teste ELISA-d tem apresentado elevadas sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade. Em cinco dos 23 LCR a alteração no exame quimiocitológico era às custas do aumento do número de células predominantemente linfomononucleares, em 13 o predomínio era de polimorfonucleares e nos cinco restantes ambos os tipos de células estavam em número aumentado.

DOT-ELISA for detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in human cerebrospinal fluid using a new solid-phase (resin-treated polyester fabrics): preliminary report

A dot enzyme-linked immunosorbent assay (DOT-ELISA) was developed to detect specific antibodies in cerebrospinal fluid (CSF) for human neurocysticercosis immunodiagnosis, with Cysticercus cellulosae antigen dotted on a new solid-phase. This was represented by sheets of a synthetic polyester fabric impregnated with a polymerized resin (N-methylol-acrylamide). A very stable preparation was thus obtained, the antigen being covalently bound by cross-linking with free N-methylol groups on the resin. Since robust, no special care was necessary for handling the solid-phase. The test could be performed at room-temperature. From 30 CSF samples assayed, 14 were positive, from a group of 15 cases of neurocysticercosis, with titers from 1 to 128; 15 other samples, from normals or other neurological diseases, were all negative. Test characteristics seem to indicate it as adequate for epidemiological surveys. A more detailed study on sensitivity, specificity, reproducibility and the use in serum samples is being conducted.

Da necessidade de se adotar e divulgar esquemas terapêuticos para tratamento de leishmaniose tegumentar no Paraná

A leishmaniose tegumentar tem mostrado caráter endêmico no Norte-Noroeste do Paraná, em áreas que vêm sendo ocupadas desde os anos 40, onde persistem matas residuais com modificações bastante acentuadas. A infecção tem atingido sobretudo adultos do sexo masculino, mas também vem sendo constatada em mulheres e crianças, e por vezes em diversos componentes de uma mesma família. Investigou-se 513 casos de leishmaniose tegumentar notificados pela SUC AM, com informações de terem tido apenas diagnóstico clínico, de janeiro de 1987 a agosto de 1989, os quais iniciaram o tratamento com Glucantime®, em Centros de Saúde do Estado ou na própria SUCAM. De 513 pacientes tratados 260 (50,67%) tiveram alta por cura clínica e os 253 (49,33%) restantes não retornaram para verificação da cura clínica ou abandonaram o tratamento. A quantidade de ampolas de Glucantime® fornecidas para os pacientes oscilou de 10 a mais de 200, com ou sem intervalo durante o tratamento, sendo que 217 (85,46%) dos 260 casos receberam de 10 a 75 ampolas. A ocorrência de leishmaniose em 163 (31,75%) mulheres e em 34 (6,62%) crianças, de ambos os sexos, até dez anos de idade, sugere a transmissão domiciliar. Não se sabe se os 253 (49,33%) indivíduos que não retornaram ou abandonaram o tratamento seguiram a prescrição terapêutica e se restabeleceram. O elevado número de indivíduos que não retornou ou abandonou o tratamento mostra a necessidade de maior conscientização das conseqüências que podem advir do tratamento incompleto. APOIO: Núcleo de Estudos em Saúde Coletiva.