Characterization of Cryptococcus neoformans isolated from urban environmental sources in Goiânia, Goiás State, Brazil

Cryptococcus neoformans is an opportunistic fungal pathogen that causes meningoencephalitis as the most frequent clinical presentation in immunocompromised patients, mainly in people infected by HIV. This fungus is an environmental encapsulated yeast, commonly found in soil enriched with avian droppings and plant material. A total of 290 samples of pigeon and the other avian droppings, soil, ornamental trees and vegetable material associated with Eucalyptus trees were collected to study environmental sources of Cryptococcus species in Goiânia, Goiás State. The determination of varieties, serotypes and the susceptibility in vitro to fluconazole, itraconazole and amphotericin B of C. neoformans isolates were performed. C. neoformans var. grubii (serotype A) was found in 20.3% (36/177) of pigeon dropping samples and in 14.3% (5/35) of samples of Eucalyptus. None of the environmental isolates of C. neoformans showed in vitro resistance to three antifungal agents. The knowledge of major route for human cryptococcal infection (inhalation of infectious particles from saprophytic sources) and a total of 60 C. neoformans isolates obtained from AIDS patients with cryptococcal meningitis between October 2001 and April 2002 justify the study of the habitats of these yeasts as probable sources of cryptococcosis in this city.

Antifungal susceptibilities of clinical and environmental isolates of Cryptococcus neoformans in goiânia city, Goiás, Brasil

We evaluated the antifungal activities of amphotericin B, fluconazole, itraconazole and voriconazole in 70 Cryptococcus neoformans strains obtained from cerebrospinal fluid from AIDS patients and 40 C. neoformans strains isolated from the environment. Four clinical isolates were identified as C. neoformans var. gattii. The susceptibility test was done using a broth microdilution method according to NCCLS M27-A2. Range minimal inhibitory concentrations (MICs) for C. neoformans clinical isolates were 0.06-1.0 µg/mL for amphotericin B, 0.125-8 µg/mL for fluconazole, 0.03-0.5 µg/mL for itraconazole and 0.03-0.25 µg/mL for voriconazole. C. neoformans environmental isolates showed range MICs 0.015-0.125 µg/mL, 0.25-2.0 µg/mL, 0.007-0.125 µg/mL and 0.03-0.25 µg/mL for amphotericin B, fluconazole, itraconazole and voriconazole respectively. The MICs results obtained from clinical and environmental isolates showed similar pattern of susceptibility and no resistance has been found in our isolates.

Cryptococcus neoformans strains isolated from church towers in Rio de Janeiro City, RJ, Brazil

Cryptococcosis has been a significant cause of morbidity and mortality in patients with Aids. Many reservoirs of the agent Cryptococcus neoformans have been reported, but the ecology of this yeast must be elucidated in order to establish surveillance programs and to prevent infections. The objective of this study was to evaluate the presence of C. neoformans in Rio de Janeiro City, RJ, Brazil. Ten churches were selected for sampling and detection of the yeast collecting pigeon dropping, air samples from church towers and neighboring areas during one year. The data demonstrated that C. neoformans has been present in every church selected and was present in 37.8% of 219 pigeon dropping samples. As well as, the yeast was isolated from soil, insects, eggs, pigeon nests and feathers. Fifteen air samples (4.9%) were positive. The growth on C.G.B. medium showed that all strains belonged to C. neoformans var. neoformans, with 98.8% of the strains belonging to serotype A.

Serotype and mating type characterization of Cryptococcus neoformans by Multiplex PCR

Cryptococcus neoformans is an encapsulated yeast, etiological agent of cryptococcosis. The species is commonly associated with pigeon droppings and plant materials. The aim of the present work was to verify the presence of the yeast in pigeon droppings, and to identify the isolates obtained in serotypes and mating types (MAT). Ten samples of pigeon droppings were collected in the rural area of the city of Alfenas, Brazil. Samples were inoculated in agar Niger medium for fungal isolation and 22 isolates with characteristics of C. neoformans were obtained. The serotypes and MAT were determined by multiplex PCR using specific primers. Serotypes were also determined by using the Kit Crypto Check. Among the 22 samples evaluated, eight were identified as C. neoformans by classic identification tests. These samples were characterized as serotype A by the Kit Crypto check and as serotype A MAT alpha by the multiplex PCR. The present study reinforces the evidence that pigeon droppings are a reservoir for C. neoformans and confirms the prevalence of C. neoformans var. grubii (Aalpha) among environmental isolates. It also demonstrates that multiplex PCR is an acceptable alternative for serotype analysis because it reduces the costs for each reaction and analyses serotype and MAT simultaneously.

Molecular characterization of environmental Cryptococcus neoformans isolated in Vitoria, ES, Brazil

Cryptococcus neoformans is the major cause of fungal meningitis, a potentially lethal mycosis. Bird excreta can be considered a significant environmental reservoir of this species in urban areas, thirty-three samples of pigeon excreta were collected within the city of Vitoria, Brazil. Cryptococcus neoformans was isolated and identified using standard biochemical assays in ten samples. PCR amplification with primer M13 and orotidine monophosphate pyrophosphorylase (URA5) gene-restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis discerned serotypes and genotypes within this species. All isolates were serotype A (C. neoformans var. grubii) and genotype VNI. The two alternative alleles a and α at the mating type locus were determined by PCR amplification and mating assays performed on V8 medium. All isolates were MAT α mating type but only 50% were able to mate in vitro with the opposite mating type MAT a tester strains (JEC20, KN99a and Bt63). This study adds information on the ecology and molecular characterization of C. neoformans in the Southeast region of Brazil.

PROTECTIVE EFFECT OF THE PROBIOTIC Saccharomyces boulardii IN Toxocara canis INFECTION IS NOT DUE TO DIRECT ACTION ON THE LARVAE

SUMMARY In a previous study our group found that the probiotic Saccharomyces boulardii was capable of reducing the intensity of infection in mice with toxocariasis. In order to assess whether the mechanism involved would be a direct action of the probiotic on Toxocara canis larvae, this study was designed. Both probiotics were singly cultivated in plates containing RPMI 1640 medium and T. canis larvae. S. boulardii and B. cereus var. toyoi cultures presented 97.6% and 95.7% of larvae with positive motility, respectively, and absence of color by the dye trypan blue, not representing significant difference to the control group (p > 0.05). We conclude that none of the probiotics showed in vitro effects on T. canis larvae and that the interaction with the intestinal mucosa is necessary for the development of the protective effect of S. boulardii.

DISTRIBUTION OF DERMATOPHYTES FROM SOILS OF URBAN AND RURAL AREAS OF CITIES OF PARAIBA STATE, BRAZIL

SUMMARYThe dermatophytes, keratinophilic fungi, represent important microorganisms of the soil microbiota, where there are cosmopolitan species and others with restricted geographic distribution. The aim of this study was to broaden the knowledge about the presence of dermatophytes in soils of urban (empty lots, schools, slums, squares, beaches and homes) and rural areas and about the evolution of their prevalence in soils of varying pH in cities of the four mesoregions of Paraiba State, Brazil. Soil samples were collected from 31 cities of Paraiba State. Of 212 samples, 62% showed fungal growth, particularly those from the Mata Paraibana mesoregion (43.5%), which has a tropical climate, hot and humid. Soil pH varied from 4.65 to 9.06, with 71% of the growth of dermatophytes occurring at alkaline pH (7.02 - 9.06) (ρ = 0.000). Of 131 strains isolated, 57.3% were geophilic species, particularly Trichophyton terrestre(31.3%) and Mycrosporum gypseum(21.4%). M. nanum and T. ajelloi were isolated for the first time in Paraiba State. The zoophilic species identified were T. mentagrophytes var.mentagrophytes (31.3 %) and T. verrucosum (7.6 %), and T. tonsurans was isolated as an anthropophilic species. The soils of urban areas including empty lots, schools, slums and squares of cities in the mesoregions of Paraiba State were found to be the most suitable reservoirs for almost all dermatophytes; their growth may have been influenced by environmental factors, soils with residues of human and/or animal keratin and alkaline pH.

Salmonelose septicêmica prolongada em face às doutrinas de Kiel e de Montevidéu

Com a finalidade de caracterizar efetivamente a septicemia na salmonelose prolongada, em 6 pacientes, dos quais 2 com resistência antibiótica e quimioterápica, procedeu-se a hemoculturas seriadas, consecutivas ou não, durante um período que oscilou entre 25 e 113 dias. Em cada paciente, numa média de 7 hemoculturas, foram isoladas, respectivamente, as seguintes salmonelas: S. typhi, S. paratyphi C, S. panamá, S. cholerae-suis var. Kunzendorf e S. paratyphi A. No caso em que se isolou a S. paratyphi A, em uma das hemoculturas isolou-se, também, a S. montevideo. A duração média da septicemia nos 6 pacientes foi de 73 dias. A se considerarem procedentes os informes dos pacientes quanto ao início da doença, a septicemia, com tôda a probabilidade, deve ter tido a duração média de 4 meses. Por outro lado, tomando por base a identidade do quadro clínico e a coincidência fisiopatológica dos casos estudados, é possível admitir-se a ocorrência de septicemias de longa duração nos demais 31 casos pelas seguintes salmonelas: S. newport, S. dublin, S. cholerae-suis, S. typhimurium, S. anatum, S. derby, e Salmonellas sp (não sorològicamente identificadas). Com base nestes achados, o A. acredita não ser possível admitir-se, na salmonelose em estudo, a diferença fundamental entre salmonelas adaptadas ou não à espécie humana, conforme preceitua a Doutrina de Kiel; considera, também, limitadas as restrições preconizadas pela Doutrina de Montevidéu aos conceitos fisiopatogenéticos da escola alemã. De fato, salmonelas do grupo tifiparatifi e outras consideradas adaptadas aos animais têm produzido, indistintamente em crianças e em adultos, quadros clínicos indistinguíveis, nos quais transcende a septicemia de longa duração e tornam-se manifestas a disproteinemia marcante e a hiperplasia do S.R.E. Finalmente, discute-se no trabalho o papel representado por uma série de fatores que podem atuar, acarretando alterações no organismo parasitado e criando condições à multiplicação das salmonelas e à manutenção da infecção. Dentre êles foram ressaltados: a associação parasitária, especialmente a esquistossomose mansoni; a desnutrição crônica; a disproteinemia marcante, seja devida à deficiência de prótides, seja em decorrência ao estado reacional do S.R.E., seletivamente agredido pelas salmonelas; modificações do estado imunitário, quer por inibição da anticorpogênese e da fagocitose, quer devida à inadequada propriedade imunológica das globulinas, extraordinariamente aumentadas na doença.

Adiaspiromicose pulmonar humana novo caso da forma disseminada

E apresentado um caso de adiaspiromícose pulmonar disseminada, em paciente oriundo de Corrente, Estado do Piauí. Trata-se do segundo caso dessa forma clínica diagnosticado no Distrito Federal. As manifestações principais consistiram em febre, calafrios, tosse e dispnéia. Com dez meses da doença, veio o paciente à consulta, motivado por exacerbação dos sintomas ocorrida cerca de dois meses antes. Após toracotomia direita, numerosas lesões nodulares, brancas, miiiares, aparecem disseminadas por toda a superfície exposta do órgão. O exame microscópico de um fragmento do pulmão permitiu reconhecer-se a presença de microabscessos e granulomas, alguns contendo no seu interior estruturas redondas, queforam identificadas como adiaconidios de Chrysosporium parvum var. crescens. O aspecto variado das lesões foi considerado por representar estádios evolutivos diferentes do processo inflamatório, estando a variação ligada a inóculos diversos do fungo, separados no tempo. Admite-se que a exacerbação, referida pelo paciente, resultou de uma nova exposição ao fungo, sugerida pela existência de lesões recentes, de natureza supurativa, entre outras, de aspecto granulomatoso, tidas como mais antigas.

Lesões cutâneas na histoplasmose disseminada progressiva associada com sida

O polimorfismo das manifestações clínicas na histoplasmose disseminada progressiva associada com SIDA, em especial das lesões cutâneas, pode confundir o clínico e o patologista no diagnóstico da micose. Relatamos um caso dèstaforma clínica da micose, diagnosticada pelo exame direto e histológico e cultivos de aspirado de nódulo subcutâneo e biópsia de pele. Técnicas especiais de coloração e de cultivo das amostras devem ser utilizadas, mesmo em zonas consideradas de baixa endemicidade da histoplasmose, devido à possibilidade da ocorrência de infecções combinadas numa mesma lesão. São comentadas as demais manifestações desta forma clínica da micose.

Criptococose não associada àAIDS no Rio Grande do Sul: relato deoito casos e revisão daliteratura sul-riograndense

Relatam-se oito casos de criptococose não associada à AIDS diagnosticados em Santa Maria, RS, no período 1961-1995. É revisada a literatura sul-riograndense sobre a micose e comentada a prevalência da infecção pela var. neoformans em pacientes sem doença predisponente nas regiões subtropicais.

Adiaspiromicose pulmonar disseminada. Relato de caso

Relata-se caso de adiaspiromicose causando infiltrado pulmonar retículo-nodular difuso e bilateral, em lavrador de 26 anos. O diagnóstico etiológico foi estabelecido através de biópsia por toracoscopia. Tratado com cetoconazol, o paciente evoluiu bem, retornando às atividades profissionais um mês após a alta.

Adiaspiromicose humana. Relato de um caso tratado com cetoconazol

É descrito um caso de adiaspiromicose humana, da forma pulmonar disseminada, no qual se empregou o cetoconazol. O paciente, oriundo de Goianésia, GO, referia tosse produtiva, dispnéia e emagrecimento. Doente há dois meses, já fizera uso do esquema tríplice tuberculostático, devido a um radiograma do tórax ter acusado lesões sugestivas de tuberculose miliar. Esse tratamento não surtiu o efeito esperado, pelo que foi ele submetido a uma biópsia pulmonar a céu aberto. A medida permitiu o reconhecimento da natureza fúngica da doença. Passou-se, então, ao emprego do cetoconazol, quando o processo já completara três meses de evolução. Dois meses depois, foi o paciente novamente visto, para controle do tratamento: todas as manifestações respiratórias haviam cessado e um novo radiograma mostrou regressão completa das alterações pulmonares. Apesar disso, é discutida a eficácia do cetoconazol contra C. parvum var crescens, tendo-se em conta o fato de o microrganismo não se reproduzir no hospedeiro.

Criptococose em crianças no Estado do Pará, Brasil

Relatam-se 19 casos de criptococose em crianças, diagnosticados em Belém, PA. Em nove pacientes a variedade do agente etiológico foi estudada e identificada como Cryptococcus neoformans var. gattii. A média de idade destes pacients foi 7,8 anos (variação, 5-13 anos). Havia 5 meninas e 4 meninos (razão, 1,25:1). Cinco foram a óbito em três meses apesar do tratamento com anfotericina B (associada com fluconazol 3 ou fluocitosina 1). São comentados a existência de áreas de alta endemia da infecção por var. gattii no Pará e a gravidade da doença causada por essa variedade fúngica.

Cryptococcus neoformans isolados de pacientes com AIDS

Criptococose é considerada a infecção fúngica sistêmica oportunista mais comum em pacientes com AIDS. Nestes pacientes tem predominado como agente etiológico Cryptococcus neoformans var. neoformans, e muito raramente relata-se C. neoformans var. gattiii, mesmo nas regiões onde se verifica a sua prevalência. Foram estudados 50 pacientes com lesões de criptococose meningoencefálica associada com AIDS. Os isolados foram identificados através de características microscópicas e macroscópicas exibidas em meios de ágar Sabouraud, ágar niger e Christensen. As variedades de C. neoformans foram determinadas pela reação de coloração obtida em meio de L-canavanina glicina-azul de bromotimol (CGB). Em todos os pacientes examinados foram isolados C. neoformans, sendo identificados C. neoformans var. neoformans em 47 isolados e C. neoformans var. gattii em 3. Os resultados encontrados mostram que a criptococose em pacientes com AIDS pode também ser causada por C. neoformans var. gatti, apesar de haver predominância de C. neoformans var neoformans nesta população.