Fatores de risco associados à infecção por Cryptosporidium spp. e Giardia duodenalis em bovinos leiteiros na fase de cria e recria na mesorregião do Campo das Vertentes de Minas Gerais

Este estudo observacional do tipo transversal foi realizado com o objetivo avaliar os fatores de risco associados à infecção por Cryptosporidium spp. e Giardia duodenalis em bezerras provenientes de 20 propriedades leiteiras, localizadas na mesorregião do Campo das Vertentes de Minas Gerais. As propriedades foram divididas igualmente em dois grupos de acordo com o tipo de leite produzido: Grupo I = Leite B e Grupo II = Leite cru refrigerado. Amostras fecais de 356 bezerras foram coletadas no período de setembro de 2008 a agosto de 2009 e analisadas utilizando-se os métodos de Ziehl-Neelsen e flutuação em sulfato zinco a 33% para detecção, respectivamente, dos oocistos de Cryptosporidium spp. e cistos de G. duodenalis. Dados sobre práticas de manejo e condições sanitárias de criação dos bovinos foram obtidos por meio de entrevistas durante a visita a cada propriedade, no momento em que foi coletada uma única amostra de fezes de bezerras de 1 dia a 12 meses de idade. A frequência média global de bezerras infectadas por Cryptosporidium spp. foi de 21,62%, sendo a faixa etária de 7- 21 dias de idade a que apresentou o maior número de animais eliminando oocistos. Para G. duodenalis, a frequência média global foi de 25,56% e a faixa etária de 60-90 dias de idade foi a com maior número de animais com cistos nas fezes. Os resultados deste estudo indicam que infecções por Cryptosporidium spp. e G. duodenalis estão amplamente distribuídas entre fêmeas bovinas na fase de cria e recria provenientes de rebanhos leiteiros na mesorregião do Campo das Vertentes de Minas Gerais. Dentre os fatores associados a um maior risco de infecção por Cryptosporidium spp. e G. duodenalis em bezerras, discutidos neste estudo, se destacam os seguintes: a permanência no piquete maternidade por mais de 12h após o nascimento; o fornecimento de colostro a partir de 7h de vida; o primeiro fornecimento de água e concentrado entre 1 e 7 dias de idade; e a manutenção em instalação coletiva e/ou localizada próxima ao curral.

Evolução clínica e avaliação de parâmetros leucocitários e de proteínas de fase aguda na pododermatite infecciosa ovina

Neste artigo realizou-se a avaliação de ovinos mestiços Santa Inês com pododermatite infecciosa, verificando as alterações no leucograma e proteínas de fase aguda. No primeiro experimento, 70 fêmeas foram separadas em três grupos de acordo com o seu escore podal: Grupo controle (G1) com escore 0; Dermatite interdigital (G2) com escore 1 ou 2 e Pododermatite necrosante (G3) com escore 3, 4 ou 5. Durante dois meses observou-se a evolução clínica e efeitos no leucograma em cinco momentos: M1 (dia 0), M2 (dia 15), M3 (dia 30), M4 (dia 45) e M5 (dia 60). A intensidade do resultado do leucograma foi de baixa magnitude, observando-se alterações significativas (p<0,05) como uma leve leucocitose (G3, M4), atribuída a neutrofilia e um discreto aumento no número total de monócitos (G3, M2 e M3) apesar do extenso dano e necrose tecidual existentes na última fase da doença. No segundo experimento, utilizaram-se 105 animais de sete propriedades com objetivo de isolar o agente etiológico e avaliar os efeitos da doença sobre proteína plasmática total e proteínas de fase aguda. Os animais também foram separados em três grupos: controle, dermatite interdigital e pododermatite necrosante. Em todas as propriedades foi realizado o isolamento de Dichelobacter nodosus. Não houve correlação significativa (p<0,05) das diferentes fases da doença sobre as proteínas estudadas, porém a haptoglobina dos grupos com animais doentes apresentou médias superiores ao grupo controle. De acordo com a metodologia utilizada e resultados obtidos, conclui-se que as proteínas de fase aguda estudadas não foram eficientes na caracterização das fases da pododermatite infecciosa ovina e que a resposta leucocitária foi branda, tornando difícil sua utilização para este fim.

Hemograma e proteínas de fase aguda de bezerros sadios do nascimento aos 30 dias de idade

O conhecimento da dinâmica das alterações nos parâmetros hematológicos e na cinética das proteínas de fase aguda em animais saudáveis nas primeiras semanas de vida é essencial para a interpretação correta dessas avaliações em situações de morbidez e para diferenciar animais sadios e enfermos de forma confiável. Com o intuito de avaliar a cinética desses parâmetros no primeiro mês de vida de bezerros de corte sadios, filhos de vacas primíparas ou pluríparas, amostras de sangue foram coletadas antes da ingestão de colostro e 1, 2, 7, 15 e 30 dias após o nascimento. Os parâmetros eritrocitários foram influenciados pelo número de partos das vacas e o leucograma mostrou alterações características de influência do cortisol fetal liberado por ocasião do nascimento. O teor sérico de proteína total aumentou significativamente após a ingestão do colostro. As concentrações de ceruloplasmina, haptoglobina e proteínas de pesos moleculares 33 kDa e 23 kDa aumentaram significativamente no primeiro dia de vida, seja pela resposta ao nascimento ou pela ingestão do colostro, enquanto os teores de transferrina, albumina e α1-glicoproteína ácida mantiveram-se relativamente estáveis nos primeiros dias de vida, aumentando gradualmente até os 30 dias de idade.

Desempenho e morfologia intestinal de frangos de corte na fase de crescimento, com e sem adição de nucleotídeos na dieta, em diferentes níveis proteicos

O experimento foi conduzido com o objetivo de avaliar o desempenho e a morfologia intestinal de frangos de corte na fase de crescimento, com e sem adição de nucleotídeos na dieta, em diferentes níveis proteicos. Foram utilizados 868 pintos de cortes machos de 21 dias de idade, da linhagem Cobb, submetidos a um delineamento inteiramente casualizado. As dietas foram compostas por dois controles, de alta e baixa proteína bruta, com 18,86% e 16,80% respectivamente, com a exigência de 1,062% de lisina digestível. Tendo como base a dieta controle de baixa proteína foram traçados mais cinco tratamentos com adição de 0,5 kg de nucleotídeos/ton de ração, e diferentes níveis de lisina digestível: 1,262%, 1,162%, 1,062%, 0962% e 0,862%, com quatro repetições cada. O consumo alimentar (g) diminuiu linearmente (P≤0,05) no período de 20 a 27, de 20 a 35 e de 20 a 42 dias de idade, em que aumentando os níveis de lisina digestível na dieta, observou-se diminuição no consumo de ração. A conversão alimentar teve efeito quadrático (P≤0,05) para as aves do período de 20 a 27, de 20 a 35 e de 20 a 42 dias de idade, diminuindo à medida que os níveis de lisina digestível aumentaram, atingindo o mínimo com 1,119, 1,187 e 1,132% de lisina digestível, respectivamente. A dieta com 1,062% de lisina digestível não diferiu (P>0.05) da dieta controle com alta proteína, para altura das vilosidades e profundidade de cripta, no duodeno, ilustrando então efeito benéfico do uso de nucleotídeos em dietas com baixa proteína bruta.

Fitotoxidade de herbicidas aplicados em pós-emergência na fase inicial da cultura do milho

A aplicação de herbicidas em pósemergência inicial e em pós-emergência dirigida pode causar injúrias às plantas de milho, quando estas são atingidas por produtos não totalmente seletivos. Como esses herbicidas são basicamente bloqueadores de processos metabólicos, surge a dúvida de quais serão os efeitos dessas injúrias na produção final de grãos de milho. Assim, o objetivo deste trabalho foi estudar o efeito da fitotoxidade causada pela aplicação de herbicidas na fase inicial e na pós-emergência tardia da cultura e o seu efeito na produção de grãos. Foi utilizado o híbrido BRS 3123, em 12 tratamentos repetidos 4 vezes. Esses tratamentos consistiram da aplicação dos seguintes herbicidas: cyanazine + simazine + assist, aplicados nos estádios de crescimentos de 4 e 6 folhas e paraquat + extravon e ametryn + assist, aplicados no estádio de 12 folhas, em jato dirigido. Foram incluídos também testemunhas com e sem capinas, além dos tratamentos com retirada mecânica das folhas do 1o e do 1o ao 3o pares de folha. Foram avaliados: área foliar, matéria seca, teor de clorofila nas folhas, altura da planta e da inserção de espigas, diâmetro do colmo, índice de espigas, peso de 1000 grãos e produção de grãos. Observou-se que no no primeiro ano agrícola (94/95), as variáveis de crescimento não foram afetadas pelos tratamentos, ao passo que no ano seguinte, o melhor desenvolvimento das plantas foi obtido com a aplicação de cyanazine + simazine, enquanto que paraquat + extravon, ametryn + assist e testemunha sem capina, (devido ao efeito de matocompetição), resultaram nos piores tratamentos até a floração do milho. A maior produção de espigas e grãos no primeiro ano foi obtida com o tratamento cyanazine + simazine + assist, enquanto que, no segundo ano, paraquat + extravon e ametryn + assist proporcionaram as maiores produções, apesar das injúrias observadas na área foliar.

Fitotoxicidade causada por herbicidas na fase inicial de desenvolvimento da cultura do sorgo

A utilização de herbicidas em pós-emergência inicial ou tardia em jato dirigido à cultura de sorgo cresceu muito com o aumento da área plantada da cultura. No entanto, estes herbicidas podem causar injúrias às plantas de sorgo, quando não são totalmente seletivos. Como esses herbicidas são basicamente bloqueadores de processos metabólicos, surge a dúvida sobre quais serão os efeitos dessas injúrias na produção final de grãos de sorgo. Assim, o objetivo deste trabalho foi estudar o efeito da toxicidade à cultura causada pela aplicação de herbicidas na fase inicial e em pós-emergência tardia em jato dirigido e o seu efeito na produção de grãos. Este estudo foi conduzido durante os anos agrícolas 1994/95 e 1995/96, utilizando-se o híbrido BR 700, no delineamento experimental de blocos ao acaso, com 12 tratamentos e quatro repetições. Os tratamentos consistiram da aplicação da combinação dos seguintes herbicidas em diferentes doses: cyanazine + simazine com e sem óleo mineral, aplicados nos estádios de crescimentos de 4 e 6 folhas, e paraquat + espalhante adesivo e ametryn + óleo mineral , aplicados em jato dirigido no estádio de 12 folhas. Foram incluídas também testemunhas com e sem capina, além da retirada mecânica das folhas do 1º, 2º e 3º pares de folhas. Foram avaliados área foliar, peso da matéria seca da parte aérea, teor de clorofila nas folhas, altura da planta, diâmetro do colmo, estande, peso de 1.000 grãos, peso de panículas e produção de grãos. A aplicação de cyanazine + simazine + óleo mineral, no estádio de 4 folhas, reduziu drasticamente o estande das plantas de sorgo, nos dois períodos avaliados. O desenvolvimento das plantas, medido pela área foliar e pelo diâmetro do caule, foi pouco afetado, sendo os piores desempenhos verificados na testemunha sem capina e com a aplicação da mistura cyanazine + simazine. A redução no estande afetou diretamente a produção de panículas e de grãos. Os tratamentos que proporcionaram os mais altos rendimentos foram: paraquat + espalhante adesivo, ametryn + óleo mineral, retirada mecânica de folhas e cyanazine + simazine aplicados no estádio de 6 folhas. À exceção do tratamento cyanazine + simazine aplicado no estádio de 4 folhas, o uso de herbicidas em pós-emergência inicial e área total na cultura do sorgo mostrou-se seletiva . Mesmo quando houve injúrias, decorrentes da ação dos herbicidas, elas não foram suficientes para prejudicar a produção. O bom controle das plantas daninhas proveniente do uso dos herbicidas possibilitou ao sorgo expressar melhor seu potencial produtivo.

Interferência de Raphanus sativus sobre cultivares de soja durante a fase vegetativa de desenvolvimento da cultura

A caracterização da habilidade competitiva da soja, em função da resposta diferencial dos cultivares, pode fornecer subsídios valiosos tanto para o melhoramento genético como para o manejo de plantas daninhas. Várias características da cultura podem associar-se com a competitividade; contudo, em soja, poucos estudos foram realizados com a finalidade de identificá-las. Com os objetivos de avaliar a variabilidade existente em cultivares de soja quanto à competitividade com plantas concorrentes e identificar aqueles portadores de habilidade competitiva superior, foi conduzido experimento a campo, em Cruz Alta-RS, na safra 2000/01. Testaram-se duas condições de competição (ausência ou presença de nabo-forrageiro durante a fase de desenvolvimento vegetativo da soja), combinadas com 11 cultivares da cultura. A presença do nabo durante os primeiros 60 dias do ciclo da soja reduziu estatura de planta, área foliar, massa da parte aérea seca, emissão e crescimento de ramos. Os cultivares de soja responderam diferentemente à interferência do nabo, indicando existir variabilidade genética para competitividade, o que permite selecionar genótipos de soja portadores de habilidade competitiva superior. De outra parte, ocorreu maior supressão do crescimento de plantas de nabo em função da presença dos cultivares de soja 'CD 201' e 'Fepagro RS 10'.

Seletividade de herbicidas residuais ao feijão-comum durante o período inicial da fase vegetativa

Avaliou-se neste trabalho a seletividade de herbicidas residuais, aplicados em doses crescentes, na condição de pré-emergência, sobre o crescimento do feijão-comum (Phaseolus vulgaris) durante o início da fase vegetativa da cultura. O estudo foi conduzido em casa de vegetação, em delineamento inteiramente ao acaso e com tratamentos arranjados em esquema fatorial, utilizando-se cinco repetições. O cultivar de feijão utilizado para avaliar os efeitos dos tratamentos foi o IPR Graúna. O fator A foi composto de cinco herbicidas de aplicação em pré-emergência do feijoeiro comum, e o fator B, de doses crescentes desses herbicidas. Os herbicidas foram alachlor, dimethenamid, S-metolachlor, pendimethalin e trifluralin, e as doses corresponderam a 0, 100, 150, 200 e 300% da dose máxima registrada para uso na cultura do feijão-comum. As variáveis avaliadas foram emergência de plântulas, intoxicação visual das plantas e massa seca das plantas, aos 05, 20 e 25 dias após a emergência, respectivamente. Alachlor não foi seletivo ao feijão-comum, ao passo que dimethenamid, S-metolachlor, pendimethalin e trifluralin o foram, quando aspergidos até a máxima dose registrada. O nível de seletividade dos herbicidas dimethenamid e S-metolachlor variou de acordo com a dose aplicada, enquanto o de pendimethalin e trifluralin não se modificou.

Alterações morfoanatômicas foliares da cana-de-açúcar na fase de estabelecimento em condições de matocompetição

Com o objetivo de avaliar parâmetros de produção e possíveis alterações morfoanatômicas de tecidos foliares da cana-de-açúcar, variedade RB 86 7515, na fase de estabelecimento, em condições de matocompetição, foi conduzido um experimento em vasos em Dracena, Estado de São Paulo, entre os meses de abril e junho de 2010, na Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho. Foram utilizadas as espécies Brachiaria brizantha e Brachiaria decumbens, consideradas como invasoras. Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado, sendo sete tratamentos e cinco repetições, totalizando 35 parcelas ou vasos. Os tratamentos variaram de acordo com o número de sementes de Brachiaria brizantha e Brachiaria decumbens, sendo: T1 - ausência de matocompetição; T2 - baixa ocorrência de matocompetição com Brachiaria brizantha; T3 - média ocorrência de matocompetição com Brachiaria brizantha; T4 - alta ocorrência de matocompetição com Brachiaria brizantha; T5 - baixa ocorrência de matocompetição com Brachiaria decumbens; T6 - média ocorrência de matocompetição com Brachiaria decumbens; e T7 - alta ocorrência de matocompetição com Brachiaria decumbens. Após 60 dias do plantio da cana-de-açúcar e das espécies invasoras, foram avaliados: peso da matéria seca total das plantas; espessura da epiderme da face superior ou adaxial; espessura da epiderme da face inferior ou abaxial; espessura do mesofilo; espessura do limbo; diâmetro dos vasos xilemáticos; e diâmetro dos vasos floemáticos. A matocompetição das espécies Brachiaria brizantha e Brachiaria decumbens, consideradas como invasoras, provocou redução das características morfoanatômicas e de produção da cana-de-açúcar. De maneira geral, Brachiaria decumbens foi a espécie que mais influenciou negativamente a espessura foliar da cana-de-açúcar.

Long-lasting mnemotropic effect of substance P and its N-terminal fragment (SP1-7) on avoidance learning

We investigated the long-lasting effect of peripheral injection of the neuropeptide substance P (SP) and of some N- or C-terminal SP fragments (SPN and SPC, respectively) on retention test performance of avoidance learning. Male Wistar rats (220 to 280 g) were trained in an inhibitory step-down avoidance task and tested 24 h or 21 days later. Immediately after the training trial rats received an intraperitoneal injection of SP (50 µg/kg), SPN 1-7 (167 µg/kg) or SPC 7-11 (134 µg/kg). Control groups were injected with vehicle or SP 5 h after the training trial. The immediate post-training administration of SP and SPN, but not SPC, facilitated avoidance behavior in rats tested 24 h or 21 days later, i.e., the retention test latencies of the SP and SPN groups were significantly longer (P<0.05, Mann-Whitney U-test) during both training-test intervals. These observations suggest that the memory-enhancing effect of SP is long-lasting and that the amino acid sequence responsible for this effect is encoded by its N-terminal part

N-terminal amino acids of bovine alpha interferons are relevant for the neutralization of their antiviral activity

The structure-function relationship of interferons (IFNs) has been studied by epitope mapping. Epitopes of bovine IFNs, however, are practically unknown, despite their importance in virus infections and in the maternal recognition of pregnancy. It has been shown that recombinant bovine (rBo)IFN-alphaC and rBoIFN-alpha1 differ only in 12 amino acids and that the F12 monoclonal antibody (mAb) binds to a linear sequence of residues 10 to 34. We show here that the antiviral activities of these two IFNs were neutralized by the F12 mAb to different extents using two tests. In residual activity tests the antiviral activity dropped by more than 99% with rBoIFN-alphaC and by 84% with rBoIFN-alpha1. In checkerboard antibody titrations, the F12 mAb titer was 12,000 with rBoIFN-alphaC and only 600 with rBoIFN-alpha1. Since these IFNs differ in their amino acid sequence at positions 11, 16 and 19 of the amino terminus, only these amino acids could account for the different neutralization titers, and they should participate in antibody binding. According to the three-dimensional structure described for human and murine IFNs, these amino acids are located in the alpha helix A; amino acids 16 and 19 of the bovine IFNs would be expected to be exposed and could bind to the antibody directly. The amino acid at position 11 forms a hydrogen bond in human IFNs-alpha and it is possible that, in bovine IFNs-alpha, the F12 mAb, binding near position 11, would disturb this hydrogen bond, resulting in the difference in the extent of neutralization observed.

A high-copy T7 Escherichia coli expression vector for the production of recombinant proteins with a minimal N-terminal His-tagged fusion peptide

We report here the construction of a vector derived from pET3-His and pRSET plasmids for the expression and purification of recombinant proteins in Escherichia coli based on T7 phage RNA polymerase. The resulting pAE plasmid combined the advantages of both vectors: small size (pRSET), expression of a short 6XHis tag at N-terminus (pET3-His) and a high copy number of plasmid (pRSET). The small size of the vector (2.8 kb) and the high copy number/cell (200-250 copies) facilitate the subcloning and sequencing procedures when compared to the pET system (pET3-His, 4.6 kb and 40-50 copies) and also result in high level expression of recombinant proteins (20 mg purified protein/liter of culture). In addition, the vector pAE enables the expression of a fusion protein with a minimal amino-terminal hexa-histidine affinity tag (a tag of 9 amino acids using XhoI restriction enzyme for the 5'cloning site) as in the case of pET3-His plasmid and in contrast to proteins expressed by pRSET plasmids (a tag of 36 amino acids using BamHI restriction enzyme for the 5'cloning site). Thus, although proteins expressed by pRSET plasmids also have a hexa-histidine tag, the fusion peptide is much longer and may represent a problem for some recombinant proteins.

N-terminal-pro-brain natriuretic peptide, but not brain natriuretic peptide, is increased in patients with severe obesity

Elevated body mass index (BMI) has been reported as a risk factor for heart failure. Prevention of heart failure through identification and management of risk factors and preclinical phases of the disease is a priority. Levels of natriuretic peptides as well as activity of their receptors have been found altered in obese persons with some conflicting results. We investigated cardiac involvement in severely obese patients by determining N-terminal-pro-brain natriuretic peptide (NT-proBNP) and brain natriuretic peptide (BNP) and attempting to correlate the levels of these peptides in serum and plasma, respectively, with BMI, duration of obesity, waist circumference, and echocardiographic parameters. Thirty-three patients with severe obesity (mean BMI: 46.39 kg/m², mean age: 39 years) were studied. The control group contained 30 healthy age-matched individuals (BMI: <25 kg/m², mean age: 43 years). The t-test and Spearman correlation were used for statistical analysis. Log-NT-proBNP was significantly higher (P = 0.003) in obese patients (mean 1.67, 95% CI: 1.50-1.83 log pg/mL) compared to controls (mean: 1.32, 95% CI: 1.17-1.47 log pg/mL). The Log-NT-proBNP concentration correlated with duration of obesity (r = 0.339, P < 0.004). No difference was detected in the Log-BNP concentration (P = 0.63) of obese patients (mean: 0.73, 95% CI: 0.46-1.00 log pg/mL) compared to controls (mean: 0.66, 95% CI: 0.51-0.81 log pg/mL). NT-proBNP, but not BNP, is increased in severely obese patients and its concentration in serum is correlated with duration of obesity. NT-proBNP may be useful as an early diagnostic tool for the detection of cardiac burden due to severe obesity.

N-terminal prohormone brain natriuretic peptide (NT-proBNP) as a noninvasive marker for restrictive syndromes

Constrictive pericarditis (CP) and restrictive cardiomyopathy share many similarities in both their clinical and hemodynamic characteristics and N-terminal prohormone brain natriuretic peptide (NT-proBNP) is a sensitive marker of cardiac diastolic dysfunction. The objectives of the present study were to determine whether serum NT-proBNP was high in patients with endomyocardial fibrosis (EMF) and CP, and to investigate how this relates to diastolic dysfunction. Thirty-three patients were divided into two groups: CP (16 patients) and EMF (17 patients). The control group consisted of 30 healthy individuals. Patients were evaluated by bidimensional echocardiography, with restriction syndrome evaluated by pulsed Doppler of the mitral flow and serum NT-proBNP measured by immunoassay and detected by electrochemiluminescence. Spearman correlation coefficient was used to analyze the association between log NT-proBNP and echocardiographic parameters. Log NT-proBNP was significantly higher (P < 0.05) in CP patients (log mean: 2.67 pg/mL; 95%CI: 2.43-2.92 log pg/mL) and in EMF patients (log mean: 2.91 pg/mL; 95%CI: 2.70-3.12 log pg/mL) compared with the control group (log mean: 1.45; 95%CI: 1.32-1.60 log pg/mL). There were no statistical differences between EMF and CP patients (P = 0.689) in terms of NT-proBNP. The NT-proBNP log tended to correlate with peak velocity of the E wave (r = 0.439; P = 0.060, but not with A wave (r = -0.399; P = 0.112). Serum NT-proBNP concentration can be used as a marker to detect the presence of diastolic dysfunction in patients with restrictive syndrome; however, serum NT-proBNP levels cannot be used to differentiate restrictive cardiomyopathy from CP.

The N-terminal 33 amino acid domain of Siva-1 is sufficient for nuclear localization

Siva-1 induces apoptosis in multiple pathological processes and plays an important role in the suppression of tumor metastasis, protein degradation, and other functions. Although many studies have demonstrated that Siva-1 functions in the cytoplasm, a few have found that Siva-1 can relocate to the nucleus. In this study, we found that the first 33 amino acid residues of Siva-1 are required for its nuclear localization. Further study demonstrated that the green fluorescent protein can be imported into the nucleus after fusion with these 33 amino acid residues. Other Siva-1 regions and domains showed less effect on Siva-1 nuclear localization. By site-mutagenesis of all of these 33 amino acid residues, we found that mutants of the first 1-18 amino acids affected Siva-1 nuclear compartmentalization but could not complete this localization independently. In summary, we demonstrated that the N-terminal 33 amino acid residues were sufficient for Siva-1 nuclear localization, but the mechanism of this translocation needs additional investigation.