Specificity of the rapid rK39 antigen-based immunochromatographic test Kalazar Detect(r) in patients with cutaneous leishmaniasis in Brazil

The aim of this study was to evaluate the specificity of a rapid immunochromatographic test that was developed to detect antibodies against the rK39 antigen for the diagnosis of visceral leishmaniasis (VL). This evaluation was performed using sera from patients with a confirmed diagnosis of active cutaneous leishmaniasis. The sera from 272 patients with a confirmed diagnosis of localised cutaneous leishmaniasis (CL) who resided in an area endemic for Leishmania braziliensis in Brazil were obtained before the initiation of antileishmanial treatment. Kalazar Detect(r)(InBios, Seattle, WA) recombinant K39 antigen-based immunochromatographic strips were used according to the manufacturer's instructions. The test results were evaluated independently by two examiners in sequential order. The positive controls for the test included five serum samples from five patients with parasitologically confirmed diagnosis of VL caused by Leishmania infantum in Brazil. Overall, 100% of the samples obtained from patients with CL were negative, confirming the absence of a serological cross-reaction for individuals with cutaneous disease when these patients were evaluated using the rapid test. The lack of a cross-reaction in patients who were infected by parasites of the same genus highlights the specificity of the rK39 antigen for the diagnosis of VL in areas with the sympatric circulation of L. braziliensis and L. infantum.

Polymerase chain reaction detection of LeishmaniaDNA in skin biopsy samples in Sri Lanka where the causative agent of cutaneous leishmaniasis is Leishmania donovani

Leishmania donovani is the known causative agent of both cutaneous (CL) and visceral leishmaniasis in Sri Lanka. CL is considered to be under-reported partly due to relatively poor sensitivity and specificity of microscopic diagnosis. We compared robustness of three previously described polymerase chain reaction (PCR) based methods to detectLeishmania DNA in 38 punch biopsy samples from patients presented with suspected lesions in 2010. Both, Leishmaniagenus-specific JW11/JW12 KDNA and LITSR/L5.8S internal transcribed spacer (ITS)1 PCR assays detected 92% (35/38) of the samples whereas a KDNA assay specific forL. donovani (LdF/LdR) detected only 71% (27/38) of samples. All positive samples showed a L. donovani banding pattern upon HaeIII ITS1 PCR-restriction fragment length polymorphism analysis. PCR assay specificity was evaluated in samples containing Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium leprae, and human DNA, and there was no cross-amplification in JW11/JW12 and LITSR/L5.8S PCR assays. The LdF/LdR PCR assay did not amplify M. leprae or human DNA although 500 bp and 700 bp bands were observed in M. tuberculosis samples. In conclusion, it was successfully shown in this study that it is possible to diagnose Sri Lankan CL with high accuracy, to genus and species identification, using Leishmania DNA PCR assays.

Cytokine profile and pathology in human leishmaniasis

The clinical spectrum of leishmaniasis and control of the infection are influenced by the parasite-host relationship. The role of cellular immune responses of the Th1 type in the protection against disease in experimental and human leishmaniasis is well established. In humans, production of IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> is associated with the control of infection in children infected by Leishmania chagasi. In visceral leishmaniasis, an impairment in IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> production and high IL-4 and IL-10 levels (Th2 cytokines) are observed in antigen-stimulated peripheral blood mononuclear cells (PBMC). Moreover, IL-12 restores IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> production and enhances the cytotoxic response. IL-10 is the cytokine involved in down-regulation of IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> production, since anti-IL-10 monoclonal antibody (mAb) restores in vitro IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> production and lymphoproliferative responses, and IL-10 abrogates the effect of IL-12. In cutaneous and mucosal leishmaniasis, high levels of IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> are found in L. amazonensis-stimulated PBMC. However, low or absent IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> levels were observed in antigen-stimulated PBMC from 50% of subjects with less than 60 days of disease (24 ± 26 pg/ml). This response was restored by IL-12 (308 ± 342 pg/ml) and anti-IL-10 mAb (380 ± 245 pg/ml) (P&lt;0.05). Later during the disease, high levels of IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> and TNF-<FONT FACE="Symbol">a</font> are produced both in cutaneous and mucosal leishmaniasis. After treatment there is a decrease in TNF-<FONT FACE="Symbol">a</font> levels (366 ± 224 pg/ml before treatment vs 142 ± 107 pg/ml after treatment, P = 0.02). Although production of IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> and TNF-<FONT FACE="Symbol">a</font> might be involved in the control of parasite multiplication in the early phases of Leishmania infection, these cytokines might also be involved in the tissue damage seen in tegumentary leishmaniasis

Investigação epidemiológica de um caso de leishmaniose visceral autóctone da Grande São Paulo, Brasil

Foi descrita uma investigação epidemiológica realizada na zona urbana de Diadema, município da Grande São Paulo (Brasil), com a finalidade de elucidar a fonte de infecção e o mecanismo de transmissão de um caso de leishmaniose visceral autóctone da área. Foram realizados inquéritos sorológicos através da reação de imunofluorescência indireta na população humana (591 soros) e na população canina (55 soros), e levada a efeito pesquisa entomológica no local da residência do doente e em uma área de reserva florestal situada a 500m desta residência.

Leishmaniose visceral adquirida no Estado de São Paulo (Brasil)

Foi descrita a notificação de um caso de leishmaniose visceral em uma criança com dois anos de idade, tendo sempre residido em Capão Redondo, localidade situada na Grande São Paulo (Brasil). Apesar de transmissão congênita ou por transfusão de sangue ter sido cogitada, é provável que a infecção tenha decorrido de mecanismo habitual, consubstanciando ocorrência autóctone relativa do Estado de São Paulo.

Investigação epidemiológica de, um novo caso de leishmaniose visceral ocorrido na Grande São Paulo, Brasil

Descreve-se uma investigação epidemiológica realizada em zona urbana do município de São Paulo, Brasil, para esclarecer um caso de leishmaniose visceral ocorrido em criança de 2 anos de idade, nascida e sempre residente no local. Afastou-se a possibilidade de transmissão por via transfusional e por vetor biológico, tendo como base os dados levantados da anamnese do doente, os resultados de inquéritos realizados na área em população humana, utilizando testes de imunofluorescência indireta, hemaglutinação passiva e intradermoreação de Montenegro, em população canina com o teste de imunofluorescência indireta, além de pesquisa entomológica em mata residual.

Ecological aspects of American cutaneous leishmaniasis: 4. Observations on the endophilic behavior of the sandfly and the vectorial role of Psychodopygus intermedius in the Ribeira Valley region of the S.Paulo State, Brazil

The invasive tendency of Psychodopygus intermedius in the home environment, observed initially by Forattini et al. (1976), has now been confirmed by the demonstration of its high endophilic ability and by the use of human residences for shelter. Populations such as Lutzomyia migonei and Pintomyia fischeri were also present in that environment, though their low densities registered during this investigation could be an indication of their poor ability to overcome the barriers raised by the artificial environment. An objective epidemiological analysis based on the variables here given showed that human infection takes place in the extraforest environment, and the principal vectorial function falls, without doubt, on P. intermedius.

Epidemia de leishmaniose visceral no Estado do Piauí, Brasil, 1980-1986

Analisou-se a epidemia de calazar ocorrida no Estado do Piauí, no período de 1980-1986. Os dados foram coletados pela SUCAM-Piauí, órgão do Ministério da Saúde para o controle de endemias, pela busca ativa na rede de assistência à saúde do Estado. A epidemia iniciou-se em municípios do centro e do norte, em 1980. No interior, ao contrário do período endêmico, quando predominou em áreas de maior altitude e clima semi-árido, a epidemia grassou nos vales de rios e em região mais úmida, de clima tropical. A capital do Piauí, Teresina, foi atingida em 1981, com pico epidêmico em 1984 e tendo sido responsável por mais de 60% dos 1.509 casos de todo o Estado. Foram feitas tentativas de controle pelo uso intensivo de inseticidas e eliminação de cães. Nas outras regiões do Piauí, borrifadas intensivamente para o controle da doença de Chagas e da malária, a epidemia foi pouco importante e cedeu espontaneamente. Nem a casuística e nem a população flebotomínica de Teresina apresentaram variações sazonais significativas, mas estiveram moderadamente correlacionadas entre si. Houve maior prevalência em menores de cinco anos, principalmente nos anos de maior incidência, e menor em maiores de 40 anos. A distribuição geográfica do processo epidêmico e a concomitância de seu início com seca prolongada acompanhada de emigração de pessoas e animais domésticos procedentes de regiões endêmicas para aquelas epidêmicas, sugerem que estes movimentos migratórios desencadearam a epidemia. O fato de o processo epidêmico ter cedido espontaneamente em áreas onde não se tentou o seu controle indica que não se pode atribuir apenas às medidas de controle o fim da epidemia. A partir da análise dos coeficientes de incidência específicos por faixa etária, é discutida a possiblilidade da progressiva redução na proporção de suscetíveis, determinada tanto por um grande número de infecções assintomáticas como pela ocorrência de imunidade duradoura, ter contribuído para a extinção da epidemia.

Physiological age in Lutzomyia youngi (Diptera: Psychodidae) populations from an endemic area for cutaneous leishmaniasis, Venezuela

Batches of sylvatic females of Lutzomyia youngi (Phlebotominae) captured in a Shannon trap on twelve occasions over one year in a locality where subcutaneous leishmaniasis is endemic, near the city of Trujillo, Venezuela, were used to study: 1) the percentages of parous females according to previously established criteria and 2) the average number of eggs laid spontaneously by isolated females during 7 days after feeding on hamsters. The data on the batches of females captured on nights previous to the rainy period (prepluvial) were compared with those on females captured after the rains (postpluvial) . Significant differences were detected by variation analysis for two variables and different number of N, as also were consistent groupings by Duncan's Test for pre-and postpluvial lots of females. The females captured on nights prior to the rainy periods (January-March and August-September) presented higher rates of nulliparity (86-72%) and contained or laid a greater number of eggs (71-67) than those captured after the rains (March-June and November-December) which presented lower rates of nulliparity (60-24%) and a smaller number of eggs (50-30). The rainfall peaks occurred in April and September-October, respectively. It is considered that these differences can be used by epidemiological studies as a means of estimating the physiological age of female populations of L. youngy.

Estudo de flebotomíneos (Diptera: Psychodidae) em foco de leishmaniose visceral no Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil

INTRODUÇÃO: Nas Américas, Lutzomyia longipalpis tem sido incriminada como vetora da leishmaniose visceral em, praticamente, todas as áreas de ocorrência dessa parasitose. A notificação de casos humanos a partir de 1980 e a presença de cães com aspecto sugestivo de leishmaniose visceral no Município de Corumbá, Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil, levaram a investigações entomológicas na área, com o objetivo de identificar a população de flebotomíneo vetora. MATERIAL E MÉTODO: A pesquisa foi realizada no peri e intradomicílio de três residências urbanas e em ecótopo natural, representado por uma gruta, situado fora do perímetro urbano. As capturas, semanais em sua maioria, foram realizadas com armadilhas automáticas luminosas, no período de 1984 a 1986. Os dados metereológicos desse período foram obtidos junto à Estação Metereológica da cidade e os de 1925 a 1982, de bibliografia. RESULTADOS: A fauna flebotomínea urbana, composta de oito espécies, mostrou-se semelhante à da gruta, porém nesta, a abundância das espécies foi maior. Na área urbana, Lu. cruzi predominou tanto no intra como no peridomicílio: no bairro central, representou 90,3% dos espécimens e nos dois bairros periféricos, os seus percentuais foram menores. Lu. forattinii, também, teve freqüência expressiva em um dos bairros periféricos (39,0 %). Na gruta, Lu. corumbaensis foi a espécie predominante. Comenta-se o impacto das condições climáticas e do inseticida aplicado na área urbana na freqüência das espécies, e da utilização da gruta como criadouro pelos flebotomíneos, com base na evolução da razão entre os sexos ao longo do período. Foram adicionadas informações sobre antropofilia e de coleta com isca canina de Lu. forattinii. CONCLUSÃO: O predomínio de Lu. cruzi na área urbana; a expressiva freqüência de Lu. forattinii na periferia da cidade, bem como a sua antropofilia e o estreito grau de parentesco destas espécies com Lu. longipalpis, a principal vetora da leishmaniose visceral em outras áreas da América, são aspectos que sugerem a participação de ambas na transmissão da doença, em Corumbá.

Vigilância de leishmaniose visceral americana em cães de área não endêmica, São Paulo

Realizou-se inquérito sorológico em cães domiciliados e errantes do Município de São José do Rio Preto, SP, para identificar animais infectados e detectar a possibilidade de transmissão da leishmaniose visceral americana. De novembro de 1998 a junho de 2000, 2.104 amostras de soros foram testadas por meio da reação de imunofluorescência indireta, empregando-se como antígeno formas promastigotas de Leishmania (L.) chagasi. Observaram-se 2.092 amostras não reagentes e 12 reagentes. Dos cães com sorologia positiva foi possível realizar raspados de lesão em três animais. O material fixado em lâminas foi corado por Giemsa e, em apenas um, foram encontradas formas amastigotas características de Leishmania sp. Este resultado indica a necessidade de manutenção da vigilância sorológica canina e entomológica no município de São José do Rio Preto, a fim de detectar, precocemente, qualquer alteração na epidemiologia local.

Situação atual da epidemiologia da leishmaniose visceral em Pernambuco

O objetivo do estudo foi descrever a situação epidemiológica atual da leishmaniose visceral no Estado de Pernambuco, Brasil. Para tanto, realizou-se revisão na literatura científica sobre a epidemiologia visceral em Pernambuco, por meio das buscas nas bases MEDLINE, SciELO e LILACS. Adicionalmente, foram consultados outros artigos relevantes que não foram localizados nas bases eletrônicas. Os 18 trabalhos selecionados para a revisão indicam que: a leishmaniose visceral possui ampla distribuição geográfica; os casos humanos estão freqüentemente associados à pressão antrópica sobre o meio ambiente; as crianças têm sido mais freqüentemente afetadas pela doença. Esses resultados mostraram a necessidade de mais estudos sobre os fatores de risco associados à incidência da doença no homem, o papel dos hospedeiros de Leishmania chagasi no ciclo zoonótico de transmissão e o comportamento do vetor nas diferentes regiões geográficas do Estado.

Análise dos registros de leishmaniose visceral pelo método de captura-recaptura

OBJETIVO: Analisar o número de casos, óbitos, incidência e letalidade e estimar a subnotificação da leishmaniose visceral, bem como a cobertura dos sistemas nacionais de informações. MÉTODOS: Foram analisados casos confirmados de leishmaniose visceral com base nos sistemas: Sistema de Informação de Agravos de Notificação (Sinan), Sistema de Informações sobre Mortalidade (SIM) e Sistema de Informações Hospitalares (SIH), nos anos de 2002 e 2003. As variáveis utilizadas no relacionamento para identificação dos pares foram: nome do paciente, nome da mãe, data de nascimento, sexo, município de residência e endereço. Para cálculo das estimativas aplicou-se a metodologia de captura-recaptura, utilizando a fórmula de Chapman. RESULTADOS: A subnotificação estimada para casos de leishmaniose visceral no Sinan, em relação ao SIH e SIM, foi 42,2% e 45,0%, respectivamente. A subnotificação estimada de óbitos no SIM foi 53,0% e 46,5%, quando comparada com Sinan-óbitos e SIH-óbitos, respectivamente. Comparando o Sinan e o SIH, a incidência estimada foi de 2,9 por 100.000 habitantes, 70,5% mais alta que a encontrada utilizando somente os dados do Sinan. Da comparação dos dados do SIM e Sinan-óbitos a letalidade estimada de 8%, representou um incremento de 16% da inicialmente registrada no Sinan-óbitos. CONCLUSÕES: Os resultados mostram elevada subnotificação estimada de casos e óbitos de leishmaniose visceral no Brasil. O relacionamento dos sistemas de informações e aplicação do método captura-recaptura permitiram conhecer e melhorar as estimativas epidemiológicas, sendo factível sua utilização nos serviços de saúde.

Missed opportunities for congenital syphilis and HIV perinatal transmission prevention

OBJECTIVE: To estimate the prevalence of missed opportunities for congenital syphilis and HIV prevention in pregnant women who had access to prenatal care and to assess factors associated to non-testing of these infections. METHODS: Cross-sectional study comprising a randomly selected sample of 2,145 puerperal women who were admitted in maternity hospitals for delivery or curettage and had attended at least one prenatal care visit, in Brazil between 1999 and 2000. No syphilis and/or anti-HIV testing during pregnancy was a marker for missed prevention opportunity. Women who were not tested for either or both were compared to those who had at least one syphilis and one anti-HIV testing performed during pregnancy (reference category). The prevalence of missed prevention opportunity was estimated for each category with 95% confidence intervals. Factors independently associated with missed prevention opportunity were assessed through multinomial logistic regression. RESULTS: The prevalence of missed prevention opportunity for syphilis or anti-HIV was 41.2% and 56.0%, respectively. The multivariate analysis showed that race/skin color (non-white), schooling (<8 years), marital status (single), income (<3 monthly minimum wages), having sex during pregnancy, history of syphilis prior to the current pregnancy, number of prenatal care visits (<6), and last prenatal visit before the third trimester of gestation were associated with an increased risk of missed prevention opportunity. A negative association with missed prevention opportunity was found between marital status (single), prenatal care site (hospital) and first prenatal visit in the third trimester of gestation. CONCLUSIONS: High rates of non-tested women indicate failures in preventive and control actions for HIV infection and congenital syphilis. Pregnant women have been discontinuing prenatal care at an early stage and are failing to undergo prenatal screening for HIV and syphilis.