Canine visceral leishmaniasis due to Leishmania (L.) infantum chagasi in Amazonian Brazil: comparison of the parasite density from the skin, lymph node and visceral tissues between symptomatic and asymptomatic, seropositive dogs

A leishmaniose visceral canina (LVC) é reconhecida pelas características clínicas da doença e é altamente letal. A infecção, entretanto, pode ser totalmente assintomática em alguns cães soropositivos, o que tem levantado questão polêmica sobre a possibilidade desses animais, serem ou não uma fonte importante da infecção para o flebotomíneo, Lutzomyia longipalpis, o principal vetor da leishmaniose visceral americana (LVA). Neste estudo foram examinados 51 cães com LVC aguda, provenientes de área endêmica de LVA no Estado do Pará, Brasil, e a carga parasitária, formas amastigotas de, na pele, linfonodo poplíteo e vísceras (fígado e baço) foi comparada com a de nove cães assintomáticos soropositivos (IFAT-IgG). Fragmentos de biópsia desses tecidos obtidos post-mortem foram processados para análise através de imunohistoquímica, usando um anticorpo policlonal contra Leishmania sp. Os testes do Qui-quadrado (X²) e Mann Whitney foram usados para avaliar as médias da densidade de macrófagos infectados (p < 0,05). Os resultados mostraram que não houve diferença (p > 0,05) na densidade de macrófagos infectados da pele (10,7/mm² x 15,5/mm²) e do linfonodo (6,3/mm² x 8,3/mm²) entre cães assintomáticos e sintomáticos. Entretanto, a densidade de macrófagos infectados da víscera de cães sintomáticos (5,3/mm²) foi maior (p < 0,05) que a de cães assintomáticos (1,4/mm²). Estes resultados sugerem, fortemente, que cães naturalmente infectados por L. (L.) i. chagasi, assintomáticos ou sintomáticos, podem servir como fonte de infecção, principalmente, considerando-se que a densidade de macrófagos infectados da pele (10,7/mm² x 15,5/mm²), local onde o flebotomíneo vetor Lu. longipalpis realiza a hematofagia, foi maior (p < 0,05) que as do linfonodo (6,3/mm² x 8.3/mm²) e vísceras (1,4/mm2x 5,3/mm2).

Immunohistochemistry of the uterine cervix of rats bearing the Walker 256 tumor treated with copaiba balsam

ABSTRACT: PURPOSE: To investigate the immunohistochemistry of the uterine cervix of 20 Wistar rats (Rattus norvegicus) bearing the Walker 256 tumor, treated with copaiba oil (Copaifera officinalis). METHODS: The animals were grouped into four subgroups, with five rats each: the GCT and GCopT received distilled water and topically copaiba, respectively, while the GCG and GCopG received distilled water and copaiba by gavage, respectively. The substances were administered for nine days. On the 12th day, after euthanasia, the tumor pieces were sent to the identification of T CD4+, T CD8+ and Natural Killer cells. RESULTS: It was found that the pattern of expression for specific markers of phenotypes of cells involved in tumor immune response was similar in all groups, regardless the administration way of copaiba oil (topical or gavage). CONCLUSION: Copaiba balsam, administered either topically or by gavage, did not alter the pattern of tumor immune response in rats bearing Walker 256 Tumor.

Direct detection of Mycobacterium tuberculosis complex in bovine and bubaline tissues through nested-PCR

Post-mortem bacterial culture and specific biochemical tests are currently performed to characterize the etiologic agent of bovine tuberculosis. Cultures take up to 90 days to develop. A diagnosis by molecular tests such as PCR can provide fast and reliable results while significantly decreasing the time of confirmation. In the present study, a nested-PCR system, targeting rv2807, with conventional PCR followed by real-time PCR, was developed to detect Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) organisms directly from bovine and bubaline tissue homogenates. The sensitivity and specificity of the reactions were assessed with DNA samples extracted from tuberculous and non-tuberculous mycobacteria, as well as other Actinomycetales species and DNA samples extracted directly from bovine and bubaline tissue homogenates. Regarding the analytical sensitivity, DNA of the M. bovis AN5 strain was detected up to 1.5 pg by nested-PCR, whereas DNA of M. tuberculosis H37Rv strain was detected up to 6.1 pg. The nested-PCR system showed 100% analytical specificity for MTC when tested with DNA of reference strains of non-tuberculous mycobacteria and closely-related Actinomycetales. A clinical sensitivity level of 76.7% was detected with tissues samples positive for MTC by means of the culture and conventional PCR. A clinical specificity of 100% was detected with DNA from tissue samples of cattle with negative results in the comparative intradermal tuberculin test. These cattle exhibited no visible lesions and were negative in the culture for MTC. The use of the nested-PCR assay to detect M. tuberculosis complex in tissue homogenates provided a rapid diagnosis of bovine and bubaline tuberculosis.

Ovarian and uterine periovulatory Doppler ultrasonography in bitches

Este trabalho teve como objetivo descrever as características ultrassonográficas uterinas e ovarianas, e dopplervelocimétricas das suas artérias nos dias periovulatórios em cadelas. Quinze ciclos estrais em 10 animais foram avaliados. As características ultrassonográficas, índices de resistência (IR) e índices de pulsatilidade (IP) do útero e dos ovários em cada animal foram registrados 5 dias antes e depois da ovulação (D0). Os dados foram analisados estatisticamente e os resultados foram expressos em média ± erro padrão da média (P<0,05). Como resultados as características ultrassonográficas uterinas foram semelhantes em todos os ciclos e dias avaliados, tendo o corpo uterino um diâmetro médio de 0,85±0,02cm. Foi observado um aumento no volume dos ovários e nos diâmetros dos folículos, tendo os ovários um volume de 0,64±0,06cm³, e a cavidade dos folículos um diâmetro de 0,46±0,01cm no dia da ovulação. Após a ovulação, foi observado colapso dos folículos somente em alguns ciclos. A perfusão sanguínea uterina diminuiu dois dias antes da ovulação e permaneceu inalterada até a ovulação. Após a ovulação, houve um aumento gradual na perfusão das artérias uterinas e ovarianas, direcionando o fluxo de sangue para os ovários e aumentando a perfusão da artéria intra-ovariana um dia após a ovulação. Conclui-se que características específicas são observadas na imagem ultrassonográfica uterina e ovariana, e dopplervelocimétricas de suas artérias nos dias periovulatórios, e quando associadas permitem estimar com mais precisão o dia da ovulação.