Association between CD31 expression and histopathologic features in stage IB squamous cell carcinoma of the cervix

This study was undertaken to evaluate the association between the expression of CD31 in the tumor and the histopathologic findings in patients with carcinoma of the cervix. This study included prospectively 30 women, aged 46.6 +/- 10.7 years, with stage IB squamous cell carcinoma of the cervix submitted to radical hysterectomy from November 2001 to September 2002. Samples from the tumor were taken and immunohistochemically evaluated by a monoclonal antibody for CD31. Clinicopathologic characteristics such as stage, tumor size, grade of differentiation, lymphatic vascular space invasion (LVSI), parametrial involvement, and status of pelvic lymph nodes were also recorded. The clinical stage (FIGO) was IB1 in 22 patients (73.3%) and IB2 in 8 patients (26.7%). The expression of CD31 was significantly associated with tumor size and the presence of LVSI, but not with grade of differentiation and vaginal or parametrial involvement (P= 0.03, P= 0.032, P= 0.352, P= 0.208, and P= 0.242, respectively). on univariate analysis, the presence of pelvic lymph node metastasis was influenced by LVSI (P= 0.003) and CD31 expression (P= 0.032). However, on multivariate analysis, the presence of LVSI (P= 0.007) was the only independent predictor of pelvic lymph node metastasis. The CD31 expression in tumor is significantly associated with LVSI and tumor size in patients with early-stage squamous cell carcinoma of the cervix.

Histopathological and immunohistochemical (cytokeratins AE1/AE3) study of the parametrium of patients with early stage cervical cancer

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Familial cancer: depressed NK-cell cytotoxicity in healthy and cancer affected members

Este estudo se reporta às funções de células natural killer (NK), como adesão, lise e citotoxicidade e de subpopulações de células T em uma família com alta prevalência de pacientes com câncer e que apresentaram: glioblastoma, leucemia mielóide crônica, osteoblastoma, melanoma e carcinomas gástrico, pancreático e cólon retal. Quinze membros dessa família foram estudados, sendo 13 sadios, acompanhados por 5 anos e dois com câncer: glioblastoma e leucemia mielóide crônica. Duas pessoas sadias, no momento da avaliação, desenvolveram posteriormente osteoblastoma mandibular ou melanoma maligno. Como controle, foram avaliados 19 indivíduos saudáveis de faixa etária equivalente. A determinação de linfócitos T CD3+ e de suas subpopulações CD4+ e CD8+ foi realizada empregando-se anticorpos monoclonais e a atividade citotóxica de células NK, avaliada pelo teste de single-cell contra células alvo da linhagem eritroleucêmica K562. Os resultados mostraram que as percentagens de células T totais (CD3+), da subpopulação CD4+ e da relação CD4/CD8 foram significativamente menores nos indivíduos da família estudada em comparação aos valores observados no grupo controle. em todos os membros dessa família a percentagem de formação de conjugados entre células NK-células alvo foi inferior ao valor mínimo observado nos controles. Essa alteração poderia estar relacionada a defeito na expressão de moléculas de adesão, presentes na membrana de células NK, como provável causa das alterações funcionais dessas células. A herança dos mecanismos determinantes desta deficiência pode ser um fator de risco, com valor prognóstico para o desenvolvimento de cancer.

CDX2, a highly sensitive and specific marker of adenocarcinomas of intestinal origin - An immunohistochemical survey of 476 primary and metastatic carcinomas

CDX2 is a recently cloned homeobox gene that encodes an intestine-specific transcription factor, expressed in the nuclei of epithelial cells throughout the intestine, from duodenum to rectum. While expression of CDX2 protein in primary and metastatic colorectal carcinomas has been previously documented, neither the sensitivity nor the specificity of CDX2 expression, as determined by immunohistochemistry, for colorectal adenocarcinoma has been determined. We performed an immunohistochemical survey of 476 tumors with a monoclonal antibody, CDX2-88, including 89 tumors from the colon and duodenum and 95 tumors from other gastrointestinal sites, including the esophagus, stomach, pancreatobiliary system, gastrointestinal carcinoids, and liver. CDX2 was expressed uniformly (that is, in 76-100% of tumor cells) in all but one of the evaluated colorectal and duodenal tumors. High-level expression of CDX2 was also found, however, in mucinous ovarian carcinomas and adenocarcinomas primary to the urinary bladder of which 64% and 100% were positive, respectively. Gastric, gastroesophageal, and pancreatic adenocarcinomas and cholangiocarcinomas all showed similar, heterogeneous patterns of CDX2 expression. Most tumors in each group showed CDX2 expression by a minority of cells, whereas a substantial minority of cases in each group was completely negative and a smaller minority was uniformly positive. Gastrointestinal carcinoids gave similarly varied results, but the majority (58%) was negative. Hepatocellular carcinomas showed no expression of CDX2. Only very rare examples of carcinomas of the genitourinary and gynecologic tracts, breast, lung, and head and neck showed significant levels of CDX2 expression. In this study of primary and metastatic epithelial tumors, uniform CDX2 expression is demonstrated to be an exquisitely sensitive and highly, but incompletely, specific marker of intestinal adenocarcinomas. Compared with villin, a previously described marker of GI adenocarcinomas, CDX2 demonstrated superior sensitivity and comparable specificity. CDX2 expression can be seen, however, in selected non-GI adenocarcinomas such as mucinous ovarian carcinomas and adenocarcinomas of the urinary bladder.

Expressão antigênica em carcinomas do plexo coróide humano: relato de dois casos

Neoplasias provenientes do epitélio de revestimento do plexo coróide são inco-muns, tendo sido descritos 6 padrões morfológicos. O padrão anaplásico, também denominado carcinoma do plexo coróide, é o de menor freqüência e pode dar metastases fora do SNC. A distinção histológica desses tumores, particularmente da variedade anaplásica, com outras neoplasias primárias e metastáticas no SNC pode ser difícil. O uso de técnicas imunocitoquimicas em parafina tem-se mostrado útil no esclarecimento das linhagens tumorais. Os papilomas do plexo coróide têm, no entanto, sido objeto de controvérsia, por sua complexa expressão antigênica. Usando a técnica de imunoperoxidase (sistema avidina-biotina-peroxidase) pesquisaram-se, em dois casos da variedade anaplásica, os seguintes marcadores: proteína glial fibrilar ácida (GFAP) com anticorpo monoclonal e policlonal; ceratinas de 40-50kDa, ceratinas de 60-70kDa (callus ceratina), enolase neuronal específica (NSE) e proteína S-100, com anticorpos monoclonais. Os dois tumores mostraram positividade para NSE, proteína S-100 e ceratina de 40-50kDa; uma das duas neoplasias mostrou diferenciação glial, revelando positividade para GFAP tanto com anticorpo monoclonal quanto policlonal.

Estudo comparativo entre os métodos LSAB®+ e Herceptest® para a detecção de HER-2/neu em carcinoma de mama

INTRODUÇÃO: A hiperexpressão de human epidermal growth factor receptor (HER-2/neu) e a amplificação do seu gene são indicadores de formas mais agressivas do câncer de mama. A Food and Drug Administration (FDA) aprovou o teste denominado HercepTest® com a finalidade de selecionar pacientes com indicação para o uso de um anticorpo humanizado anti-HER-2/neu (trastuzumab), com efeito terapêutico comprovado. OBJETIVOS: O presente trabalho tem como objetivo comparar os resultados obtidos pelos métodos imuno-histoquímicos LSAB®+ com a utilização de anticorpo A0485 e HercepTest®. Material e métodos: Foram utilizados 50 casos de carcinoma de mama nos quais a pesquisa da hiperexpressão de HER-2 pelo método LSAB®+ já havia sido realizada. Foi repetida a pesquisa da hiperexpessão de HER-2/neu nos mesmos casos, utilizando-se o método do HercepTest®. RESULTADOS: 34 casos foram considerados negativos pelos dois métodos, com escore 0 pelo método HercepTest®. Destes, 12 obtiveram escore 1+ e 22 obtiveram escore 0 pelo método LSAB®+. em oito casos, o escore foi 2+ pelos dois métodos. Escore 3+ foi encontrado também em oito casos pelos dois métodos. DISCUSSÃO: O método mais prático utilizado em laboratório de rotina diagnóstica para investigar a hiperexpressão de HER-2/neu é o estudo imuno-histoquímico. em função de muitas variáveis, como tempo de fixação, tipo de fixador, duração da fixação, método de recuperação antigênica e tipo de anticorpo utilizado, pode haver divergência de resultados. CONCLUSÃO: O presente estudo concluiu que o método HercepTest®demonstrou resultados equivalentes aos resultados obtidos pelo método LSAB®+ em carcinoma de mama.

Isolation and immunophenotypic characterization of mesenchymal stem cells derived from equine species adipose tissue

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Conjugação e validação de controle isotípico IgG1-FITC para uso em citometria de fluxo

Em meados da década de 50 iniciou-se o desenvolvimento da citometria de fluxo, tecnologia que permite verificar características físico-químicas de células ou partículas suspensas em meio fluido. Esta tecnologia utiliza anticorpos monoclonais marcados com fluorocromos como ferramenta de investigação em diversas análises e necessita de controles isotípicos para definição da região negativa (background). Estes controles são constituídos por imunoglobulinas de mesmo isotipo e fluorocromo dos anticorpos testes, sendo o isotiocianato de fluoresceína (FITC) o marcador fluorescente mais utilizado na conjugação de anticorpos. Os controles isotípicos têm como função definir a fluorescência inespecífica (células negativas) e as regiões fluorescentes (células positivas). No presente estudo foi selecionado anticorpo monoclonal murino (AcMm) dirigido contra antígeno eritrocitário canino, produzido no Laboratório de Anticorpos Monoclonais do Hemocentro de Botucatu, o qual reage positivamente com hemácias de cães, mas nunca com leucócitos humanos, tendo, portanto, potencial utilidade como controle negativo em citometria de fluxo. A purificação do AcMm da subclasse IgG1 foi feita por cromatografia de afinidade em Proteína-A Sepharose, e o controle da purificação realizado por eletroforese em géis de ágarose e poliacrilamida (SDS-PAGE). A imunoglobulina purificada foi conjugada ao FITC e filtrado em coluna de Sephadex G-25 para separação das proteínas marcadas e não-marcadas. O AcMm conjugado foi testado contra hemácias de cães, e o êxito da conjugação comprovado por testes de fluorescência, sendo a mediana de positividade de 94,70. Frente a leucócitos humanos a mediana de positividade foi 0,03 contra 0,50 dos reagentes comerciais. Os testes estatísticos não-paramétricos de Wilcoxon e correlação de Spearman comprovaram a eficiência e validam o controle isotípico produzido em comparação aos reagentes comerciais testados.

Distribution and hydrolytic enzyme characteristics of Candida albicans strains isolated from diabetic patients and their non-diabetic consorts

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Snake venom phospholipase A(2) inhibitors: Medicinal chemistry and therapeutic potential

Phospholipases A(2) (PLA(2)s) are commonly found in snake venoms from Viperidae, Hydrophidae and Elaphidae families and have been extensively studied due to their pharmacological and physiopathological effects in living organisms. This article reports a review on natural and artificial inhibitors of enzymatic, toxic and pharmacological effects induced by snake venom PLA(2)s. These inhibitors act on PLA(2)S through different mechanisms, most of them still not completely understood, including binding to specific domains, denaturation, modification of specific amino acid residues and others. Several substances have been evaluated regarding their effects against snake venoms and isolated toxins, including plant extracts and compounds from marine animals, mammals and snakes serum plasma, in addition to poly or monoclonal antibodies and several synthetic molecules. Research involving these inhibitors may be useful to understand the mechanism of action of PLA(2)s and their role in envenomations caused by snake bite. Furthermore, the biotechnological potential of PLA(2) inhibitors may provide therapeutic molecular models with antiophidian activity to supplement the conventional serum therapy against these multifunctional enzymes.

Interleukin-15 augments oxidative metabolism and fungicidal activity of human monocytes against Paracoccidioides brasiliensis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Localization of 5-methylcytosine in metaphase chromosomes of diploid and triploid pacu fish, Piaractus mesopotamicus (Pisces, Characiformes)

The distribution of 5-methylcytosine (5-MeC) was investigated in fish chromosomes by indirect immunofluorescence using a highly specific 5-MeC monoclonal antibody. Diploid and artificially produced triploid specimens of the pacu fish, Piaractus mesopotamicus, were analyzed. The strong immunofluorescent signals were coincident with the heterochromatic regions of both diploids and triploids in a pattern that matched the C-banding pattern. In the euchromatin, heterogeneous labeling was observed along the chromatids. The weakness of this labeling hindered comparison of the fluorescence labeling of homologous chromosomes from diploid and triploid individuals. However, no striking differences were observed. The possibility that the euchromatin labeling by the 5-MeC antibody is related to the occurrence of mildly repetitive sequences in the genome of Piaractus is discussed.

Orchidopexy restores morphometric-stereologic changes in the caput epididymis and daily sperm production in cryptorchidic mice, although sperm transit time and fertility parameters remain impaired

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Ultrastructural characterization of CD133(+) stem cells bound to superparamagnetic nanoparticles: possible biotechnological applications

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Characterization and localization of dynein and myosins V and VI in the ovaries of queen bees

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)