Oocyte activation and preimplantation development of bovine embryos obtained by specific inhibition of cyclin-dependent kinases

Realizaram-se dois experimentos para avaliar a eficiência da bohemina e roscovitina associadas à ionomicina para ativação partenogenética e desenvolvimento embrionário inicial de bovinos. No primeiro, foram testadas diferentes concentrações (0, 50, 75 ou 100µM) e diferentes tempos de exposição (2, 4 ou 6 horas) à bohemina ou à roscovitina na ativação de oócitos bovinos maturados in vitro (MIV) pré-expostos à ionomicina. Os melhores tratamentos, bohemina 75µM e roscovitina 50µM, ambos por seis horas, foram utilizados no segundo experimento, no qual oócitos bovinos MIV foram expostos à ionomicina seguido ou não pelo tratamento com inibidores específicos das quinases dependentes de ciclina (CDKI), e avaliados quanto à configuração nuclear, taxa de ativação e desenvolvimento até blastocisto. Os tratamentos combinados (ionomicina+CDKI) apresentaram melhor taxa de ativação (77,3%) e desenvolvimento embrionário inicial (35,2%) do que a ionomicina sozinha (69,4% e 21,9%, respectivamente), e também promoveram ativação mais uniforme (aproximadamente 90% de formação de um pronúcleo). Estes resultados demonstram que os CDKIs potencializam o efeito da ionomicina na ativação e desenvolvimento embrionário inicial e podem auxiliar na obtenção de protocolos de ativação mais eficientes, aumentando a capacidade de desenvolvimento de embriões produzidos por meio de biotécnicas reprodutivas.

Tolerância à dessecação e influência do tegumento na germinação de sementes de citrumelo 'swingle' (Citrus paradisi MACF X Poncirus trifoliata (L) RAF.)

O trabalho teve como objetivo estudar a tolerância à dessecação e a influência do tegumento na germinação de sementes de citrumelo 'Swingle'. As sementes foram extraídas manualmente e, em seguida, foi determinado o grau de umidade das sementes. Foi retirada uma amostra referente ao tratamento com o maior grau de umidade (48%) a ser estudado, e as demais foram submetidas à secagem em estufa com circulação forçada de ar (32±2ºC), visando à obtenção dos outros tratamentos com diferentes graus de umidade. O teste de germinação foi instalado em delineamento experimental inteiramente casualizado, num fatorial 6x2 (grau de umidade x presença ou ausência de tegumento), com quatro repetições de 25 sementes por parcela. Após a obtenção de cada tratamento as sementes foram tratadas com o fungicida Thiabendazole (0,4g.kg-1), semeadas em folhas de papel toalha umedecidas e confeccionados rolos que foram mantidos em câmara de germinação a 25ºC sob luz constante. As avaliações foram realizadas a cada sete dias até o 35º dia, sendo determinadas as porcentagens de germinação na primeira contagem, plântulas anormais, sementes mortas, sementes dormentes e germinação total. Também foram calculados o tempo médio e o índice de velocidade de germinação (IVG). Os dados foram submetidos à análise de variância, e as médias, comparadas pelo teste Tukey, a 5% de probabilidade. As sementes toleraram a dessecação até baixos níveis de umidade (16%), e a retirada do tegumento favoreceu o processo germinativo em sementes de citrumelo 'Swingle'.

Influence of different levels of aluminum on the development of citrus rootstock swingle citrumelo (Citrus paradisi mcf. x Poncirus trifoliata raf.) in nutrient solution

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Structural bioinformatics study of cyclin-dependent kinases complexed with inhibitors

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Isoenzymatic polymorphism in Citrus spp. and Poncirus trifoliata (L.) Raf. (Rutaceae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Leukocyte and thrombocyte reference values for channel catfish (Ictalurus punctatus Raf), with an assessment of morphologic, cytochemical, and ultrastructural features

Background: Hematology tests are useful to evaluate physiologic disturbances in fish and can provide important information for the diagnosis and prognosis of disease. Objectives: the primary purpose of this study was to define reference intervals for thrombocytes and leukocytes in healthy channel catfish (Ictalurus punctactus). In addition, the morphologic, cytochernical, and ultrastructural features of blood cells were assessed. Methods: Blood samples (0.5 mL were collected into EDTA from 40 clinically healthy catfish on a commercial fish farm in Jaboticabal, Brazil. Thrombocyte, total WBC, and differential WBC counts were determined and reference intervals were calculated as the 25-95th percentiles of data. Thrombocyte and leukocyte morphology was assessed in blood smears stained with May Griinwald-Giemsa-Wright and ultrastructurally by transmission electron microscopy. Cytochemical staining patterns were described using periodic acid-Schiff (PAS), peroxidase, nonspecific esterase, alkaline phosphatase, and toluidine blue. Results: Reference intervals were as follows: thrombocytes 58,802-99,569/mu L; total WBCs 27,460-41,523/mu L; lymphocytes 5380-11,581/mu L; monocytes 2949-7459/mu L; neutrophils 12,529-22,748/mu L, and basophils 736-2003/mu L. Neutrophils were positive for peroxidase and PAS; monocytes were positive for nonspecific esterase; and basophils were positive with toluidine blue. Conclusion: the morphologic and staining features of neutrophils and monocytes of channel catfish are similar to those of mammals, and the presence of basophils in this species was verified. These reference intervals and morphologic findings provide a foundation for future investigations on the functions and alterations of blood cells in channel catfish.

TEGDMA-induced oxidative DNA damage and activation of ATM and MAP kinases

The development of strategies for the protection of oral tissues against the adverse effects of resin monomers is primarily based on the elucidation of underlying molecular mechanisms. The generation of reactive oxygen species beyond the capacity of a balanced redox regulation in cells is probably a cause of cell damage. This study was designed to investigate oxidative DNA damage, the activation of ATM, a reporter of DNA damage, and redox-sensitive signal transduction through mitogen-activated protein kinases (MAPKs) by the monomer triethylene glycol dimethacrylate (TEGDMA). TEGDMA concentrations as high as 3-5 mm decreased THP-1 cell viability after a 24 h and 48 h exposure, and levels of 8-oxoguanine (8-oxoG) increased about 3- to 5-fold. The cells were partially protected from toxicity in the presence of N-acetylcysteine (NAC). TEGDMA also induced a delay in the cell cycle. The number of THP-1 cells increased about 2-fold in G1 phase and 5-fold in G2 phase in cultures treated with 3-5 mm TEGDMA. ATM was activated in THP-1 cells by TEGDMA. Likewise, the amounts of phospho-p38 were increased about 3-fold by 3 mm TEGDMA compared to untreated controls after a 24 h and 48 h exposure period, and phospho-ERK1/2 was induced in a very similar way. The activation of both MAPKs was inhibited by NAC. Our findings suggest that the activation of various signal transduction pathways is related to oxidative stress caused by a resin monomer. Signaling through ATM indicates oxidative DNA damage and the activation of MAPK pathways indicates oxidative stress-induced regulation of cell survival and apoptosis. (C) 2008 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Comparação de dois métodos de aplicação de fungicidas, irrigação por gotejamento e pulverização convencional no controle do mofo cinzento (Botrytis cinerea Pers.: Fr.) em vasos com plantas de lisianthus (Eustoma grandiflorum (Raf.) Shinn.)

Plan disease control techniques are used through the irrigation water, which reduces the labor and it improves application uniformity with smaller contact of the operator with toxic products, lower environmental impact and lower production cost. In order to control Botrytis cinerea the lisianthus culture, this work aimed to evaluate two fungicide application methods with different treatments. The fungicides were: thiophanate methyl (50 g i.a. L-1), thiophanate methyl + chlorothalonil (50 g i.a. L-1 + 35 g i.a. L-1) and iprodione (50 g i.a. L-1). Number of lesions, number of diseased floral buttons and height of the lisianthus plants were evaluated. It was possible to deduce, that in the growth stage (number of lesions in the plant) as well as in the final stage (number of floral buttons) of the lisianthus culture, the most efficient treatments were 2 (thiophanate methyl + chlorothalonil) and 3 (iprodione). Considering that treatment 2 is a mixture of two fungicides, a systemic and a contact one, independently of application methods, the mixture increased efficiency in relation to treatment 1 (thiophanate methyl). Thus, chemigation was as efficient as spreading technique.

Fungigação por irrigação localizada e pulverização convencional, para controle do mofo cinzento (Botrytis cinerea Pers.: Fr.) em plantas de lisianthus (Eustoma grandiflorum (Raf.) Shinn.)

Pós-graduação em Agronomia (Irrigação e Drenagem) - FCA

Fertirrigação com diferentes doses de nitrogênio, em plantas de lisianthus (Eustoma grandiflorum (Raf.) Shinn.)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Diversidade genética de Xanthomonas citri subsp. citri, caracterização molecular e patogênica de Xanthomonas fuscans subsp. aurantifolii e detecção de Xanthomonas alfalfae em citrumelo ‘Swingle’ (Citrus paradisi Macf. x Poncirus trifoliata L. Raf.) no Brasil

Pós-graduação em Microbiologia Agropecuária - FCAV

Glyphosate has low toxicity to citrus plants growing in the field

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)