Initiating structural studies of Lys49-PLA2 homologues complexed with an anionic detergent, a fatty acid and a natural lipid

Lys49-Phospholipase A(2) (Lys49-PLA(2) - EC 3.1.1.4) homologues damage membranes by a Ca2+-independent mechanism which does not involve catalytic activity. Both MjTX-II from Bothrops moojeni and BthTX-I from Bothrops jararacussu are dimeric in solution and in the crystalline states, and a model for the Ca2+-independent membrane damaging mechanism has been suggested in which flexibility at the dimer interface region pert-nits quaternary structural transitions between open and closed membrane bound dimer conformations which results in the perturbation of membrane phospholipids and disruption of the bilayer structure [1]. With the aim of gaining insights into the structural determinants involved in protein/lipid association, we report here the crystallization and preliminary X-ray analysis of the (i) MjTX-II/SDS complex at a resolution of 2.78Angstrom, (ii) MjTX-II/STE complex at a resolution of 1.8 Angstrom and (W) BthTX-I/DMPC complex at 2.72Angstrom. These complexes were crystallized by the hanging drop vapour-diffusion technique in (i) HEPES buffer (pH 7.5) 1.8M ammonium sulfate with 2% (w/v) polyethyleneglycol 400, in (ii) 0.6-0.8 M sodium citrate as the precipitant (pH 6.0-6.5) and in (iii) sodium citrate buffer (pH 5.8) and PEG 4000 and 20% isopropanol, respectively. Single crystals of these complexes have been obtained and X-ray diffraction data have been collected at room temperature using a R-AXIS IV imaging plate system and graphite monochromated Cu Kalpha X-ray radiation generated by a Rigaku RU300 rotating anode generator for (i) and (W) and using using a Synchrotron Radiation Source (Laboratorio Nacional de Luz Sincrotron, LNLS, Campinas, Brazil) for (ii).

Avaliação da regeneração natural em trechos da mata ciliar do rio Moji-Guaçu, Pirassununga-SP

O presente trabalho teve por objetivo analisar e quantificar o banco de plântulas em trechos de Mata Ciliar do Rio Moji-Guaçu situados na Academia da Força Aérea (AFA) em Pirassununga-SP. Os trechos definidos para a amostragem foram relacionados com as condições do entorno e com a estrutura da comunidade local. Foi realizada uma avaliação da diversidade e da dominância de guildas que se encontram presentes nesse compartimento da regeneração natural, o que forneceu informações das espécies que contribuem de forma mais expressiva para a manutenção da comunidade florestal, bem como aquelas respectivas a grupos funcionais que caracterizam as condições sucessionais da estrutura atual dos segmentos de mata analisados. Na análise dos parâmetros fitossociológicos encontrou-se um Índice de Shannon-Wiener (H’) de diversidade de 3,843 nits/ind, índice de equabilidade de Pielou (J’) de 0,84, e índice de dominância de Simpson de 0,034. A síndrome de dispersão zoocórica correspondeu a quase 60% das espécies, no trecho ciliar estudado. A classe sucessional das espécies não pioneiras recebeu maior destaque, representada por 50% das espécies amostradas, mas também as lianas ocorreram com expressão no banco de plântulas analisado. Embora os padrões aqui observados possam ser generalizados, no entanto com cautela, o presente trabalho traz resultados importantes, apesar de primários, pois medidas visando à preservação e à restauração florestal dependem, primeiramente, do conhecimento sobre as espécies com ocorrência na área, sua biologia e histórico de abrangência na paisagem