Endophytic microorganisms from coffee tissues as plant growth promoters and biocontrol agents of coffee leaf rust

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Bioprospection of yeasts as biocontrol agents against phytopathogenic molds

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Detection of Listeria sp in meat and meat products using TECRA Listeria visual immunoassay and biocontrol visual immunoprecipitate assay for Listeria immunoassays and a cultural procedure

The routine methods for detecting Listeria sp. in foods are time consuming and involve using selective enrichments and plating on agars. In this study, the presence of Listeria sp. in 120 meat and meat product samples was investigated by two rapid immunoassays (TECRA Listeria Visual Immunoassay [VIA] and BioControl Visual Immunoprecipitate Assay [VIP] for Listeria) and a cultural procedure. The cultural method of detecting Listeria sp. followed Canada's Health Protection Branch Method, and the rapid tests followed the manufacturers' instructions. The agreement between the cultural and the rapid tests was established at a confidence limit of 95%. Seventy-nine samples (65.8%) were Listeria sp. positive in at least one of the three tests. There was no statistically significant difference between the cultural procedure and any of the rapid immunoassays. The agreement rates between the VIA and the cultural method and between the VIP and the cultural method were 87 and 84%, respectively. Both tests - the VIA and VIP - proved to be rapid, efficient and easy to perform.

Rhizospheric streptomycetes as potential biocontrol agents of Fusarium and Armillaria pine rot and as PGPR for Pinus taeda

Pinus taeda is one of the main timber trees in Brazil, occupying 1.8 million ha with an annual productivity of 25-30 m(3) ha(-1). Another important species is Araucaria angustifolia, belonging to the fragile Rainforest biome, which for decades has been a major source of timber in Brazil. Some diseases that affect the roots and/or the stem of these trees and cause "damping-off" of the seedlings, with economic and environmental losses for the forest sector, are caused by the plant pathogenic fungi Fusarium sp. or Armillaria sp. This research project intended to isolate actinobacteria from the Araucaria rhizosphere, which present an antagonistic effect against these fungi. After the selection of the best pathogen inhibitors, morphologic characteristics, enzyme production, and their effect on the growth of Pinus taeda were studied. The actinobacteria were tested for their antagonistic capacity against Fusarium sp. in Petri plates with PDA as substrate. The inhibition zone was measured after 3, 5, 7, and 10 days. Of all the isolates tested, only two of them maintained inhibition zones up to 4 mm for 10 days. The inhibition of Armillaria sp. was tested in liquid medium and also in Petri dishes through the evaluation of the number of the fungal rhizomorphs in dual culture with the actinobacteria. It was found that all five isolates were able to inhibit the rhizomorph production, with the best performance of the isolate A43, which was capable of inhibiting both fungi, Fusarium and Armillaria. In a greenhouse experiment, the effect of five isolates on the growth of Pinus taeda seedlings was tested. Plant height, stem diameter, root and shoot dry matter were determined. The Streptomyces isolate A43 doubled plant growth. These results may lead to the development of new technologies in the identification of still unknown bacterial metabolites and new management techniques to control forest plant diseases.

Endophytic microorganisms isolated from coffee leaves, roots and branches as plant growth promoters and biocontrol agents of coffee leaf rust

Suppression of plant diseases and growth promotion due to the action of endophytic microorganisms has been demonstrated in several pathosystems. Experiments under controlled conditions involving 234 endophytic bacteria and fungi isolated from coffee leaves, roots and branches were conducted with the objective of evaluating the germination inhibition of Hemileia vastatrix urediniospores, the control of coffee leaf rust development in tests with leaf discs and on plastic bags seedling, and to promote growth of coffee seedlings. None of the fungal isolates induced plant growth or reduced disease severity. The bacterial isolates (identified by the fatty acids profile analysis) 85G (Escherichia fergusonii), 161G, 163G, 160G, 150G (Acinetobacter calcoaceticus) and 109G (Salmonella enterica) increased plant growth, the maximum being induced by 85G. This isolate produced in vitro phosphatase and indol acetic acid. In assay to control rust on coffee leaf disc, nine bacterial isolates, 64R, 137G, 3F (Brevibacillus choshinensis), 14F (Salmonella enterica), 36F (Pectobacterium carotovorum), 109G (Bacillus megaterium), 115G (Microbacterium testaceum), 116G and 119G (Cedecea davisae) significantly reduced disease severity, when applied 72 or 24h before challenging with the pathogen. In seedling tests most disease severity reduction was achieved by the isolates 109G and 119G. There was no correspondence between the organisms that promoted seedling growth and those that reduced rust severity on seedlings or leaf discs.

Effects of different temperatures on the life history of Evania appendigaster L. (Hymenoptera: Evaniidae), a solitary oothecal parasitoid of Periplaneta americana L. (Dictyoptera: Blattidae)

The influence of temperatures on the life parameters of the solitary oothecal parasitoid Evania appendigaster, was investigated in the laboratory. Parasitized oothecae of Periplaneta americana were left to develop under seven constant temperatures: 15, 17, 20, 25, 30, 35, and 40 degrees C. At the end, we found that: (i) E. appendigaster was able to complete development within the temperature range of 17-34 degrees C; (ii) mean adult longevity decreased as temperature increased, with the temperature of 40 degrees C being fatal in a matter of hours; (iii) males lived longer than females between 15 and 30 degrees C; (iv) adult emergence rate was the highest at 25 degrees C, and (v) no wasps emerged at 15 or 40 degrees C. Non-emerged oothecae contained either unhatched eggs or dead larvae. We determined the theoretical lower developmental threshold and thermal constant for the complete development as 12.9 degrees C and 584.8 day-degrees for males, and 13.1 degrees C and 588.2 day-degrees for females, respectively. A good balance between faster development, maximum adult longevity and good egg viability was obtained between 25-30 degrees C, and that would be the best temperature range for rearing E. appendigaster. (C) 2009 Elsevier B.V. All rights reserved.

Germination and mycelial growth of Bipolaris euphorbiae Muchovej & Carvalho as influenced by herbicides and surfactants

Bipolaris euphorbiae Muchovej & Carvalho é um forte candidato para o controle de Euphorbia heterophylla L. (amendoim bravo). Este fungo pode ser aplicado em combinação com herbicidas para controlar um maior espectro de espécies daninhas. Para tanto, experimentos laboratoriais foram realizados para verificar a possibilidade da utilização de mistura de tanque de esporos de B. euphorbiae e herbicidas ou surfatantes recomendados para a cultura da soja. Crescimento micelial e germinação de conídios foram avaliados em meio BDA acrescido dos herbicidas, nas concentrações recomendadas dos produtos comerciais, oxasulfuron (80 g/ha), glifosato (4 L/ha), bentazon (1.5 L/ha), fomesafen (1 L/ha), chlorimuron-ethyl (80 g/ha), lactofen (1 L/ha) e imazetaphyr (1 L/ha) e dos surfatantes Energic (2 ml/L), Aterbane (2,5 ml/L), Silwet L-77Ag (1 ml/L), Herbitensil (2 ml/L) e Natur L'óleo (10 ml/L). Diluições dos herbicidas de 50% e 25% foram avaliadas com um consumo de calda equivalente a 300 L/ha. Os surfatantes foram somente utilizados nas concentrações recomendadas. O crescimento micelial não foi afetado por bentazon e fomesafen e apenas levemente por oxasulfuron. Porém, glifosato, chlorimuron-ethyl, lactofen, Energic, Herbitensil, Silwet, e Aterbane o reduziram drasticamente. A redução observada com imazetaphyr foi intermediária e Natur L' óleo promoveu o crescimento micelial. Na presença dos surfatantes, observou-se que todos permitiram uma porcentagem de germinação equivalente àquela alcançada na presença de água. Energic e Herbitensil causaram um retardamento expressivo. Com Herbitensil, o processo germinativo iniciou somente aos 120 minutos. Com herbicidas, foi observado que somente na presença de glifosato e imazetaphyr a germinação dos conídios não seguiu a tendência observada com água, como ocorreu com os outros produtos testados.

Influência do fotoperíodo e da temperatura na intensidade de doença causada por Fusarium graminearum em Egeria densa e E. najas

Um isolado de Fusarium graminearum vem sendo estudado na UNESP, campus de Jaboticabal, como agente de controle biológico de Egeria densa e de E. najas, plantas aquáticas submersas que causam problemas em reservatórios de hidrelétricas. O presente trabalho teve por objetivo estudar os efeitos do fotoperíodo e da temperatura no controle dessas plantas em condições de laboratório. A cada dois dias foram avaliados os sintomas nas plantas inoculadas com F. graminearum, atribuindo-se notas de severidade da doença, por um período de oito dias após a inoculação. Também foi avaliado o crescimento das plantas por meio do ganho de massa fresca, expresso em porcentagem. A maior severidade da doença foi observada quando ambas as espécies foram mantidas no escuro, e a menor, em fotoperíodo de 12 horas. A temperatura de 30 ºC proporcionou maior severidade de doença em ambas as espécies. A espécie E. densa apresentou maior produção de massa fresca no regime de 12 horas de luz e de temperaturas abaixo de 25 ºC e menor produção no regime de escuro total e nas temperaturas de 30 e 35 ºC. Por sua vez, E. najas apresentou menor produção de massa fresca no regime de escuro e nas temperaturas de 25 a 35 ºC.

Comparative biology and production costs of Podisus nigrispinus (Hemiptera: Pentatomidae) when fed different types of prey

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Quality of Cotesia flavipes (Hymenoptera: Braconidae) reared at different host densities and the estimated cost of its commercial production

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Influência do fotoperíodo e da temperatura na intensidade de doença causada por Fusarium graminearum em Egeria densa e E. najas

Um isolado de Fusarium graminearum vem sendo estudado na UNESP, Campus de Jaboticabal, como agente de controle biológico de Egeria densa e E. najas, macrófitas aquáticas submersas, muito problemáticas em reservatórios de hidrelétricas. O presente trabalho teve por objetivo estudar os efeitos do fotoperíodo (0; 4; 8 e 12 h diárias de luz) e da temperatura (15 ºC, 20 ºC, 25 ºC, 30 ºC e 35 ºC) no controle destas plantas em condições de laboratório. A cada dois dias foram avaliados os sintomas nas plantas inoculadas com F. graminearum, atribuindo-se notas de severidade de doença, por um período de oito dias após a inoculação. Também foi avaliado o crescimento das plantas por meio do ganho de massa fresca, expresso em porcentagem. A maior severidade de doença foi observada quando ambas as espécies foram mantidas no escuro e a menor em fotoperíodo de 12 h. A temperatura de 30 ºC proporcionou maior severidade de doença em ambas espécies. Egeria densa apresentou maior produção de massa fresca no regime de 12 h de luz e de temperaturas abaixo de 25 ºC e menor produção no regime de escuro total e nas temperaturas de 30 ºC e 35 ºC. Egeria najas apresentou menor produção de massa fresca no regime de escuro total e nas temperaturas de 25 ºC a 35 ºC.

Effect of the insecticides abamectin and lufenuron on eggs and larvae of Chrysoperla externa under laboratory conditions

The side effects of two insecticides/acaricides, abamectin and lufenuron, on the eggs and larvae of Chrysoperla externa (Hagen) were studied in the laboratory (25 +/- 2degreesC, 62 +/- 10% RH and 12-h photophase). The analytical methods used were those proposed by the International Organization for Biological Control (IOBC)-Working Group for 'Pesticides and Beneficial Organisms'. Chrysoperla externa egg viability was not affected by abamectin. Neonate larvae from abamectin sprayed eggs as well as first, second and third instar larvae that were directly treated, developed normally and yielded normal adults. Lufenuron presented no adverse effects on egg survival. However, lufenuron induced high mortality in neonate larvae from treated eggs. These neonates, as well as lufenuron treated first and second instar larvae could not molt. In the third instar, high pupal mortality occurred. The results showed that abamectin is innocuous and that lufenurom is toxic to Chrysoperla externa eggs and larvae.

Controle alternativo de Colletotrichum acutatum agente causal da queda prematura dos frutos cítricos

A queda prematura dos frutos cítricos (QPFC), causada por Colletotrichum acutatum, dados os grandes prejuízos que têm causado aos produtores, constitui-se numa doença de grande importância econômica. O controle da doença é feito predominantemente mediante uso de fungicidas, que eleva o custo de produção e afeta negativamente o meio ambiente. Diante disso, este trabalho teve por objetivo buscar um método alternativo de controle da QPFC, mediante o uso de agentes de biocontrole ou de biofertilizantes. Diferentes concentrações de biofertilizantes (originários de duas fontes distintas e denominados de Bio1 e Bio 2); três isolados de Bacillus subtilis (ACB-69; 72 e 77) e três isolados de Trichoderma spp. (ACB-14; 37 e 39) foram testados, isoladamente ou em combinação, sob condições de laboratório, quanto à capacidade inibitória da germinação de conídios de C. acutatum. Estudaram-se, ainda, a produção de metabólitos termoestáveis por B. subtilis e o efeito sobre a germinação do patógeno. Quinze isolados de B. subtilis foram testados quanto à capacidade de prevenir a infecção por C. acutatum em flores destacadas de lima- ácida 'Tahiti' e, no campo, foram instalados dois experimentos, visando a testar ACBs e biofertilizantes no controle da doença. Verificou-se que o isolado ACB-72 (B. subtilis) e ACB-37 (T. pseudokoningii) foram os que mais inibiram a germinação do patógeno. Quanto à produção de metabólitos termoestáveis, ACB-69 e 77 foram os mais eficientes em produzir substâncias antifúngicas, e em quantidades suficientes para inibirem a germinação do patógeno. A mistura dos quatro isolados de Bacillus (ACBs: 69; 72; 77 e AP3) foi o que apresentou maior porcentagem de inibição (73%). Os biofertilizantes (Bio1 e Bio2), em concentrações acima de 10% e, quando em associação com isolados de Trichoderma spp., promoveram maiores inibições na germinação de C. acutatum. em testes com flores destacadas, verificou-se que, onde foram aplicados os ACBs 69; 76; 74 e 77, as porcentagens de pétalas sem sintomas de infecção por C. acutatum foram de 83; 92; 92 e 97%, respectivamente. Mediante avaliações a campo, verificou-se a potencialidade de B. subtilis e de biofertilizantes em controlar a doença.

Controle biológico de Colletotrichum acutatum, agente causal da queda prematura dos frutos cítricos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Relação predador: presa de Chrysoperla externa (Hagen) (Neuroptera: Chrysopidae) para o controle do pulgão-verde em genótipos de sorgo

O uso da resistência de plantas associado a agentes de controle biológico pode ser uma alternativa viável no controle de Schizaphis graminum (Rondani) em sorgo. Objetivou-se estudar diferentes relações predador:presa em genótipos de sorgo resistente (TX 430 x GR 111), moderadamente resistente (GB 3B) e suscetível (BR 007B) para o controle do pulgão-verde por Chrysoperla externa (Hagen). Para isso foram realizadas, em condições de casa-de-vegetação, liberações do crisopídeo nas relações predador:presa de 1:5; 1:10; 1:25 e 1:50. O genótipo TX 430 x GR 111 foi o mais eficiente no controle do pulgão-verde, S. graminum, assim como as relações predador:presa de 1:5 e de 1:10 nos três genótipos. A interação resistência de plantas e controle biológico foi positiva e permitiu controle acima de 80% nas relações predador:presa de 1:5 e 1:10 no material resistente TX 430 x GR 111; no genótipo GB 3B o melhor controle foi obtido com 1 predador: 5 presas.