Impact of 24-h Cooling Prior to Freezing on the Survival of Domestic Cat (Felis catus) Epididymal Sperm

The aim of this study was to investigate the impact of a 24-h cooling period prior to freezing on domestic cat epididymal sperm viability. Fifteen tomcats were submitted to routine orchiectomy and sperm samples were retrieved from both epididymides in a Tris-glucose-20% egg yolk extender. For each tomcat, the diluted sperm was split into two equal volumes and cooled to 5 degrees C at a rate of 0.5 degrees C/min; one sample for 60 min (control) and the other for 24 h (cooled). After the cooling period, samples from both groups were frozen using an identical freezing protocol. Sperm samples were evaluated in three different periods: immediately after harvesting, after cooling at 5 degrees C for 24 h (cooled group) and after freezing thawing of control and cooled groups. Evaluations consisted of sperm motility and progressive status, sperm morphology and plasma membrane integrity (PMI) using two fluorescent probes. After cooling for 24 h, a decrease (p < 0.05) in sperm motility, progressive status and PMI was observed when compared to sperm samples immediately after collection. Comparing the results obtained after thawing, no difference (p < 0.05) was found regarding sperm motility, progressive status, PMI and sperm morphology between control and cooled groups. The results from the present study show that cooling cat epididymal spermatozoa at 5 degrees C for 24 h prior to freezing does not lead to major damage of spermatozoa impairing the freeze-thaw process.

Effect of refrigeration systems upon frozen bull sperm viability assessed by computer-assisted sperm analysis and fluorescent probes

Sperm cryopreservation success depends upon the maintenance of spermatozoa fertility potential. Sperm cells must preserve both integrity and functionality of several cell structures. The stabilization phase must allow the exit of water from the sperm cells via osmosis. This study aimed to compare the effect of refrigeration in the commercial refrigerator (CR) and the transport/refrigeration box (TRB) upon the viability of frozen bull sperm diluted in three different extenders (A, B and C). Ten Nellore bulls, Bos taurus indicus maintained in Artificial Insemination Center were used and the spermatozoa samples was assessed for Plasma Membrane Integrity and CASA evaluation. The stabilization phase (5 degrees C/4 hours) was performed in the CR as well as in the TRB, and then samples were exposed to nitrogen vapor during 20 minutes and then plunged into nitrogen. The statistical analysis was done using the variance analysis and the significance level was set at 5%. In the CR the post-thawing parameters for PM and ALH were higher (p < 0.05) in the extender A (glicine egg-yolk) and extender B (glicine egg-free) when compared with extender C (TRIS egg-yolk). As for BCF, STR and LIN, the parameters were higher (p < 0.05) in extender B than in C. Samples that were stabilized in the TRB presented higher post-thawing parameters (p < 0.05) for PM and LIN in extender A and extender B when compared with C. BCF and STR parameters were higher (p < 0.05) in extemder B when compared with C. Extender B samples had higher (p < 0.05) PMI when stabilized in CR. The findings in this experiment enable us to say that both CR and TRB were effective in keeping the viability of post-thawing bull semen.

Comparação dos padrões de atratividade de Hermetia illucens (Diptera, Stratiomyidae) associada a carcaças de Rattus norvergicus enterradas e tratadas com hormônios esteróides

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Taxa de desenvolvimento de Chrysomya albiceps(Wiedemann) (Diptera: Calliphoridae) em dieta artificial acrescida de tecido animal para uso forense

Forensic entomology uses biological and ecological aspects of necrophagous insects to help in criminal investigations to estimate the post-mortem interval (PMI) or to determine the cause of death. Recent papers demonstrated that the presence of toxins in decomposing tissues may alter the insect developmental rate of insects exploiting such tissues as food. Thus, preliminary tests with artificial diets in laboratory are necessary to create a database to investigate and quantify the modifications that can occur with the collected insects from a criminal scene, avoiding any errors on the PMI estimates. The present study aimed to evaluate the developmental rate of Chrysomya albiceps (Wiedemann) reared on: a) artificial diets containing animal tissues: bovine liver (D1), raw muscle (D2), stomach (D3), and chicken heart (D4); b) artificial diet without animal tissue (D5); and c) a control group (C), which had only meat. The efficiency of each substrate was assessed by immature weight gain (mg), larval developmental time, larval and pupal survival, emergence interval and adult size. D1 to D4 diets did not restrict C. albiceps development; however, larvae reared on D1 and D2 diets presented a lower adult emergence rate. D3 and control group showed similarities regarding the efficiency parameters (rate and emergence interval). Thus, the use of diet D3, artificial diet with stomach, is the most recommended.

A review of postfeeding larval dispersal in blowflies: implications for forensic entomology

Immature and adult stages of blowflies are one of the primary invertebrate consumers of decomposing animal organic matter. When the food supply is consumed or when the larvae complete their development and migrate prior to the total removal of the larval substrate, they disperse to find adequate places for pupation, a process known as postfeeding larval dispersal. Several important ecological and physiological aspects of this process were studied since the work by Green (Ann Appl Biol 38:475, 1951) 50 years ago. An understanding of postfeeding larval dispersal can be useful for determining the postmortem interval (PMI) of human cadavers in legal medicine, particularly because this interval may be underestimated if older dispersing larvae or those that disperse longer, faster, and deeper are not taken into account. In this article, we review the process of postfeeding larval dispersal and its implications for legal medicine, in particular showing that aspects such as burial behavior and competition among species of blowflies can influence this process and consequently, the estimation of PMI.

Study of the combined radial post-feeding dispersion of the blowflies Chrysomya megacephala (Fabricius) and C. albiceps (Wiedemann) (Diptera, Calliphoridae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Estudo da dispersão larval radial pós-alimentar em Chrysomya megacephala (Fabricius) (Diptera, Calliphoridae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Dispersão larval radial pós-alimentar em Lucilia cuprina (Diptera, Calliphoridae): profundidade, peso e distância de enterramento para pupação

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Behavior of the combined radial post-feeding larval dispersal of the blowflies Chrysomya megacephala and Chrysomya albiceps (Diptera, Calliphoridae) and implications for forensic entomology

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Influence of photoperiod on body weight and depth of burrowing in larvae of Chrysomya megacephala (Fabricius) (Diptera, Calliphoridae) and implications for forensic entomology

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeito do tipo de substrato para pupação na dispersão larval pós-alimentar de Chrysomya albiceps (Diptera, Calliphoridae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Occurrence of Hymenoptera on Sus scrofa carcasses during summer and winter seasons in southeastern Brazil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Immunologic aspects of West syndrome and evidence of plasma inhibitory effects on T cell function

OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi determinar o perfil da deficiência imune em um grupo bem definido de epilepsia: crianças com síndrome de West (SW) e seus padrões EEG de evolução, idade-dependentes, como os complexos onda-aguda- onda lenta generalizadas da síndrome de Lenox-Gastaut (SLG) e as pontas multifocais independentes (PMI). MÉTODO: Um grupo de 50 crianças, 33 com SW, 10 com SLG, 7 com PMI e 20 crianças sadias (controle) foram avaliadas em relação aos seguintes parâmetros:determinação de subpopulações de linfócitos T (CD1, CD3, CD4 e CD8), relação CD4/CD8 e resposta proliferativa de linfócitos frente a fitohemaglutinina (PHA), na presença de plasma autólogo ou de plasma AB (homólogo). A prova cutânea de sensibilização ao Dinitroclorobenzeno (DNCB) foi realizada apenas nos pacientes. Os níveis séricos de IgG, IgA e IgM foram comparados aos valores normais em crianças Brasileiras, em diferentes faixas etárias. RESULTADOS: A resposta ao DNCB foi ausente ou fracamente reativa em 76% dos pacientes. Níveis séricos elevados de IgG (45,7%) e de IgM (61,4%) e baixos de IgA (23,9%) foram detectados nos pacientes. A determinação das subpopulações de linfócitos T em sangue periférico mostrou: deficiência nas proporções de células CD3+ (p<0,05) e de CD4+ (p<0,05), aumento de CD8+ (p<0,01) e diminuição da relação CD4 / CD8 (p<0,001). A proporção de células CD1+ no grupo controle manteve-se menor que 3%, enquanto que em 18% dos pacientes esses níveis variaram entre 3 e 11%. A resposta proliferativa de linfócitos frente a PHA revelou índices blastogênicos significativamente mais baixos apenas quando células dos pacientes foram cultivadas na presença do próprio plasma (plasma autólogo). Quando estas células foram cultivadas na presença de plasma AB, não se evidenciou diferença significativa em relação ao grupo controle. CONCLUSÃO: A imunodeficiência na SW caracterizou-se por: anergia, alteração de imunidade mediada por células e dos níveis de imunoglobulinas, presença de timócitos imaturos na circulação periférica e deficiência funcional de linfócitos T induzida por fatores plasmáticos inibidores. Discutem-se as principais evidências de disfunção imune como imunodeficiência e autoimunidade.

Modelos alternativos para detecção de locos de características quantitativas (QTL) de carcaça e crescimento nos cromossomos 4, 5 e 7 de suínos

O conhecimento do genoma pode auxiliar na identificação de regiões cromossômicas e, eventualmente, de genes que controlam características quantitativas (QTLs) de importância econômica. em um experimento com 1.129 suínos resultantes do cruzamento entre machos da raça Meishan e fêmeas Large White e Landrace, foram analisadas as características gordura intramuscular (GIM), em %, e ganho dos 25 aos 90 kg de peso vivo (GP), em g/dia, em 298 animais F1 e 831 F2, e espessura de toucinho (ET), em mm, em 324 F1 e 805 F2. Os animais das gerações F1 e F2 foram tipificados com 29 marcadores microsatélites. Estudou-se a ligação entre os cromossomos 4, 6 e 7 com GIM, ET e GP. Análises de QTL utilizando-se metodologia Bayesiana foram aplicadas mediante três modelos genéticos: modelo poligênico infinitesimal (MPI); modelo poligênico finito (MPF), considerando-se três locos; e MPF combinado com MPI. O número de QTLs, suas respectivas posições nos três cromossomos e o efeito fenotípico foram estimados simultaneamente. Os sumários dos parâmetros estimados foram baseados nas distribuições marginais a posteriori, obtidas por meio do uso da Cadeia de Markov, algoritmos de Monte Carlo (MCMC). Foi possível evidenciar dois QTLs relacionados a GIM nos cromossomos 4 e 6 e dois a ET nos cromossomos 4 e 7. Somente quando se ajustou o MPI, foram observados QTLs no cromossomo 4 para ET e GIM. Não foi possível detectar QTLs para a característica GP com a aplicação dessa metodologia, o que pode ter resultado do uso de marcadores não informativos ou da ausência de QTLs segregando nos cromossomos 4, 6 e 7 desta população. Foi evidenciada a vantagem de se analisar dados experimentais ajustando diferentes modelos genéticos; essas análises ilustram a utilidade e ampla aplicabilidade do método Bayesiano.

Theoretical approaches to forensic entomology: II. Mathematical model of larval development

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)