Doxazosin Treatment Alters Stromal Cell Behavior and Increases Elastic System Fibers Deposition in Rat Prostate

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Fluorescence and confocal laser scanning microscopy imaging of elastic fibers in hematoxylin-eosin stained sections

We have studied the possibility of associating fluorescence microscopy and hematoxylin-eosin staining for the identification of elastic fibers in elastin-rich tissues. Elastic fibers and elastic laminae were consistently identified by the proposed procedure, which revealed itself to be easy and useful for the determination of such structures and their distribution. The fluorescence properties of stained elastic fibers are due to eosin staining as revealed by fluorescence analysis of the dye in solution, with no or only minor contribution by the elastin autofluorescence. The main advantage of this technique resides in the possibility of studying the distribution of elastic fibers in file material without further sectioning and staining. The use of the confocal laser scanning microscope greatly improved the resolution and selectivity of imaging elastic fibers in different tissues. The determination of the three-dimensional distribution and structure of elastic fiber and laminae using the confocal laser scanning microscope was evaluated and also produced excellent results.

Induction and secretion of elastinolytic and proteolytic activity in cultures of Paracoccidioides brasiliensis

P. brasiliensis parasitizes various human tissues and proteinases exported by this fungus may allow it to metabolize and invade host tissues. The influence of the culture medium on the production of proteinases by P. brasiliensis isolates was studied and the export of these enzymes was followed as a function of culture time. The fungus was grown in neopeptone, BSA, elastin or collagen medium. The culture medium was assayed for azocollytic, elastinolytic and caseinolytic activity. Proteolytic activity was also analysed by electrophoresis of the culture medium on gelatin and casein substrate gels. P. brasiliensis expressed relatively high levels of azocoll, elastin and casein degrading activity in all types of medium, except in neopeptone medium. Generally, expression of azocollytic activity peaked during the third week of culture and caseinolytic activity during the fourth week of culture. Azocollytic activity was highest at pH 4.0 and caseinolytic activity at pH 8.0. Elastinolytic activity was also highest at pH 8.0. This activity, as well as the others, may provide the fungus with a source of carbon and nitrogen and may also be responsible for the invasion of host tissues, such as pulmonary elastic fiber, by P. brasiliensis.

Desenvolvimento e caracterização de compósitos poliméricos reforçados com fibras lignocelulósicas: HIPS / fibra de casca do coco verde e bagaço de cana de açucar

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Degradabilidade in situ e observações microscópicas de volumosos em bovinos suplementados com enzimas fibrolíticas exógenas

Avaliou-se o efeito de enzimas fibrolíticas (celulase e xilanase) sobre a degradabilidade in situ da MS, PB, FDN, FDA e hemicelulose do feno de Tifton-85 (Cynodon spp.) cortado aos 30 e 90 dias e do bagaço de cana, utilizando-se seis bovinos com cânula no rúmen. As enzimas foram extraídas dos fungos Aspergillus niger e Trichoderma longibrachiatum e fornecidas, na quantidade de 0,75 g/kgMS.dia, por meio da cânula ruminal. Os tempos de incubação ruminal foram de 0, 3, 6, 12, 24, 48, 72 e 96 horas. Os resíduos de incubação foram avaliados por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV). O efeito da adição de enzimas sobre a degradação da MS e PB variou em função do volumoso estudado. A degradabilidade efetiva da MS do feno Tifton cortado aos 30 e 90 dias e do bagaço de cana sem a adição de enzimas foi de 61,85; 42,35 e 28,22%, respectivamente, e de 63,51; 40,64 e 31,43%, respectivamente, com a adição das enzimas. Não houve efeito das enzimas sobre a degradação da fibra. As observações ao MEV indicaram aumento da colonização bacteriana sobre a parede celular com a suplementação enzimática. A adição de enzimas fibrolíticas na dieta de ruminantes apresentou efeito pouco expressivo sobre os parâmetros de degradação ruminal dos volumosos estudados.

Parâmetros ruminais e desaparecimento da FDN da forragem em bovinos suplementados em pastagem na estação das águas

O objetivo do presente trabalho foi determinar o efeito de suplementos concentrados com diferentes degradabilidades da proteína (alta-75%, média-55% e baixa-35%) e o efeito da quantidade dos mesmos (0,5, 1,0 e 1,5 kg de MS/dia) sobre os parâmetros ruminais (pH e N-NH3) e o desaparecimento da FDN da forragem em bovinos pastejando Brachiaria brizantha cv. Marandu no período das águas. Foram utilizados dez bovinos canulados no rúmen com peso médio de 463 kg num esquema fatorial 3 x 3 com três repetições (blocos). A técnica do saco de náilon e a simulação do pastejo foram usadas para alcançar a cinética de degradação da FDN da forragem. Foram determinadas as concentrações N-NH3 e o pH ruminais durante dois dias, em vários horários. Não houve efeito dos suplementos, tampouco da quantidade destes sobre o desaparecimento da FDN da forragem, mas houve para os diferentes tempos de incubação, alcançando o potencial máximo de degradação (67,58%) às 96 horas de incubação. O pH ruminal variou de 5,7 a 7,4 com média de 6,48, não havendo efeito de tratamento e nem interação tratamento x tempo. Já para os horários de determinação houve diferenças significativas. Para o N-NH3 ruminal houve diferença significativa entre os tratamentos, sendo as maiores concentrações observadas para aqueles que apresentavam maior degradabilidade da proteína. Os primeiros horários após a suplementação apresentavam um maior pico de N-NH3 e os picos do período da manhã foram maiores que os da tarde. As diferentes concentrações de N-NH3 ruminal não alteraram a degradação da fibra.

Degradabilidade da Matéria Seca e Fibra em Detergente Neutro da Cana-de-açúcar (Saccharum spp) com Diferentes Fontes de Proteína

Foram utilizados cinco bovinos fistulados no rúmen para se determinar a degradação da cana-de-açúcar em dietas com diferentes fontes de proteína degradável, por meio do método de incubação de sacos de náilon. Os tratamentos estudados foram: cana e uréia; cana e farelo de soja; cana, farelo de soja e uréia; cana e glúten de milho; cana, glúten de milho e uréia. Após um período de adaptação de 14 dias, iniciou-se a incubação dos sacos de náilon, nos tempos de 3, 6, 12, 24, 48, 72, 96 e 120 horas. Após o período de incubação, foram determinados o pH e a concentração de amônia no fluido ruminal, em amostras retiradas 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18 e 21 horas após a alimentação. O delineamento estatístico utilizado foi o de blocos casualizados, com tratamentos como parcelas e tempos como subparcelas. A concentração de amônia foi mais elevada nos tratamentos com maior quantidade de proteína degradável, porém não houve efeito significativo para os tratamentos. Para os valores de pH, houve significância, apresentando valores mais elevados para os tratamentos com maior quantidade de proteína degradável. Não se observou efeito significativo das diferentes fontes de nitrogênio sobre a degradação da matéria seca e da fibra em detergente neutro da cana-de-açúcar, sendo que a degradabilidade dessas duas frações variou apenas com o tempo de incubação. Os resultados do experimento não comprovaram o princípio de que a maior quantidade de proteína degradável no rúmen possa induzir maior degradação da FDN da dieta.

Biodegradation of Coir and Sisal Applied in the Automotive Industry

This paper discusses the results of biodegradability tests of natural fibers used by the automotive industry, namely: coir, coir with latex, and sisal. The biodegradation of coir, coir with latex, and of sisal fibers was determined by monitoring the production of carbon dioxide (CO(2)) (IBAMA-E.1.1.2, 1988) and fungal growth (DIN 53739, 1984). The contents of total extractives, lignin, holocellulose, ashes, carbon, nitrogen and hydrogen of the fibers under study were determined in order to ascertain their actual content and to understand the results of the biodegradation tests. The production of CO(2) indicated low biodegradation, i.e., about 10% in mass, for all the materials after 45 days of testing; in other words, no material inhibited glucose degradation. However, the percentage of sisal fiber degradation was fourfold higher than that of coir with latex in the same period of aging. The fungal growth test showed a higher growth rate on sisal fibers, followed by coir without latex. In the case of coir with latex, we believe the fungal growth was not intense, because natural latex produces a bactericide or fungicide for its preservation during bleeding [1]. An evaluation of the materials after 90 days of aging tests revealed breaking of the fibers, particularly sisal and coir without latex, indicating fungal attack and biodegradation processes.

Experimental poisoning by Senecio brasiliensis in calves: quantitative and semi-quantitative study on changes in the hepatic extracellular matrix and sinusoidal cells

A matriz extracelular (MEC) desempenha um papel importante em lesões hepáticas crônicas e tem sido estudada em modelos de intoxicação experimental. em bovinos, no entanto, não há estudos específicos sobre a MEC hepática normal ou com lesões crônicas. Por isso, foi desenvolvido um modelo de intoxicação experimental hepático usando Senecio brasilliensis, uma planta que contém alcalóides pirrolizidínicos e causa lesão hepática dependente da dose. Cinco bezerros receberam por via oral, 0.38g/kg de folhas secas por 24 dias. Biópsias hepáticas foram obtidas a cada 15 dias durante 60 dias. Sinais clínicos de complicações digestivas surgiram da terceira semana do experimento. Um bezerro morreu aos 45 dias e os outros quatro foram avaliados até os 60 dias. As biópsias hepáticas foram processadas para microscopia óptica, imuno-histoquímica e microscopia eletrônica de transmissão. No trigésimo dia, as lesões hepáticas eram progessivas caracterizadas por vacuolização hepatocelular, necrose, apoptose, megalocitose, e fibrose centrolobular, pericelular e portal. Foram realizadas avaliações quantitativas e semi-quantitativas de componentes da MEC hepática antes e após o aparecimento das lesões. Foi realizada morfometria do colágeno total e do sistema de fibras elásticas. Colágeno total e colágenos tipos I e III aumentaram progressivamente em todos os locais do fígado. Mudanças na localização, quantidade e disposição do sistema de fibras elásticas foram também observadas. Houve um aumento significativo de células de Kupffer aos 30 dias e de células sinusoidais totais aos 45 e 60 dias. As lesões hepáticas neste experimento foram progressivas mesmo após a remoção da planta. Lesões de fibrose severa foram localizadas principalmente nos espaços porta, seguido por fibrose veno-oclusiva e pericelular. Os colágenos tipo I e tipo III foram observados no fígado normal e no fígado dos bezerros afetados, com predomínio do tipo I. Nos bezerros afetados o aumento do colágeno total e do sistema de fibras elásticas foi paralelo ao aumento no número das células sinusoidais.

Architecture of the caudal vena cava wall of the dog at the level of the liver caudate lobe

The vascular segment of the caudal vena cava of the dog at the level of the caudate lobe was shown to be intimately related to hepatic tissue through the hepatic capsule and parenchyma. The tunica adventitia of the caudal vena cava was formed mainly by smooth muscle cells with collagen and elastic fibers arranged in bundles. The thin tunica media of the vein was also formed by smooth muscle cells, collagen and elastic fibers arranged in bundles. The tunica intima presented an elastic sub-endothelial network. The hepatic segment of the caudal vena cava showed a myoconnective architecture and propulsive characteristics in terms of its hemodynamic pattern.

Características estruturais da parede das artérias renal e femoral de coelho (Oryctolagus cuniculus)

In the renal and femoral arteries of rabbit was verified that both vessels had walls structured by myostromal components, despite of their different distributive of blood, being the renal artery a visceral blood vessel and the femoral artery a parietal vessel. This wall pattern in these vessels concerned to presence of connective stromal elements (collagen and elastic fibres and lamellae) and smooth muscle cells coexisting with some equilibrium in the wall structure of the renal and femoral arteries, mainly in the medial layer architecture. An intimal folding pattern was verified around the vascular lumen, possibly related to capacitance of the both arteries regarding to variability of pressure levels in cardiac cycle. Furthermore, myostromal relations of connective elements and smooth muscle cells verified in the medial layer and the network formed by connective elements in the adventitial layer of these arteries contributed to maintenance of wall viscoelasticity properties of the vessels.

Acellular dermal tissue study: an ultrastructural evaluation of human and porcine derived tissues in a rat model

The purpose of this study was to evaluate the host response of a human and a porcine derived acellular dermal tissue (ADT) implanted in the subcutaneous tissue of a rat model. Two subcutaneous pockets were surgically created along the dorsal midline of 25 rats (5 rats/group). The human ADT was placed superiorly and the porcine ADT, inferiorly. The animals were sacrificed at 07, 15, 30, 60 and 180 postoperative days (PO) and the ADTs and surrounding soft tissues were assessed for ultrastructural evaluation by transmission electron microscopy. The ultrastructural findings were similar in both materials. Normal collagen and elastic fibers bundles were observed during all experimental moments, as well as macrophages presenting cytoplasmic enlargements digesting cellular portions after 15 PO. From 30 until 180 PO, vacuolar structures filled with an amorphous, electron-transparent substance, were present inside and outside the fibroblasts. Both human and porcine ADT showed similar pattern of ultrastructural response when implanted in the subcutaneous tissue of rats. The porcine ADT appears as a good alternative to be used as a biomaterial.

Lesões hepáticas de bovinos intoxicados experimentalmente por Senecio brasiliensis (Compositae): estudo semi-quantitativo e quantitativo da matriz extracelular e de células sinusoidais

Pós-graduação em Patologia - FMB

Hygrothermal effects on damping behavior of metal/glass fiber/epoxy hybrid composites

Continuous fiber/metal laminates (FML) offer significant improvements over current available materials for aircraft structures due to their excellent fatigue endurance and low density. Glass fibers/epoxy laminae and aluminum foil (Glare) are commonly used to obtain these hybrid composites. The environmental factors can limit the applications of composites by deteriorating the mechanical properties during service. Usually, epoxy resins absorb moisture when exposed to humid environments and metals are prone to surface corrosion. Therefore, the combination of the two materials in Glare (polymeric composite and metal). can lead to differences that often turn out to be beneficial in terms of mechanical properties and resistance to environmental influences. In this work. The viscoelastic properties. such as storage modulus (E') and loss modulus (E'), were obtained for glass fiber/epoxy composite, aluminum 2024-T3 alloy and for a glass fiber/epoxy/aluminum laminate (Glare). It was found that the glass fiber/epoxy (G/E) composites decrease the E' modulus during hygrothermal conditioning up to saturation point (6 weeks). However, for Glare laminates the E' modulus remains unchanged (49GPa) during the cycle of hygrothermal conditioning. The outer aluminum sheets in the Glare laminate shield the G/E composite laminae from moisture absorption. which in turn prevent, in a certain extent, the material from hygrothermal degradation effects. (c) 2005 Elsevier B.V. All rights reserved.

Influence of hygrothermal conditioning on the elastic properties of carall laminates

The influence of hygrothermal conditioning on mechanical properties of Carall laminates have been investigated by tensile and compression tests. The environmental factors can limit the applications of composites by deteriorating the mechanical properties during service. The importance of temperature at the time of conditioning plays an important role in environmental degradation of such composite materials. In this work, the results show that for carbon fiber/epoxy composites tensile and compression values decrease after hygrothermal conditioning. However, the changes on mechanical properties of Carall are negligible, regardless the hygrothermal conditioning.