Conjugação e validação de controle isotípico IgG1-FITC para uso em citometria de fluxo

Em meados da década de 50 iniciou-se o desenvolvimento da citometria de fluxo, tecnologia que permite verificar características físico-químicas de células ou partículas suspensas em meio fluido. Esta tecnologia utiliza anticorpos monoclonais marcados com fluorocromos como ferramenta de investigação em diversas análises e necessita de controles isotípicos para definição da região negativa (background). Estes controles são constituídos por imunoglobulinas de mesmo isotipo e fluorocromo dos anticorpos testes, sendo o isotiocianato de fluoresceína (FITC) o marcador fluorescente mais utilizado na conjugação de anticorpos. Os controles isotípicos têm como função definir a fluorescência inespecífica (células negativas) e as regiões fluorescentes (células positivas). No presente estudo foi selecionado anticorpo monoclonal murino (AcMm) dirigido contra antígeno eritrocitário canino, produzido no Laboratório de Anticorpos Monoclonais do Hemocentro de Botucatu, o qual reage positivamente com hemácias de cães, mas nunca com leucócitos humanos, tendo, portanto, potencial utilidade como controle negativo em citometria de fluxo. A purificação do AcMm da subclasse IgG1 foi feita por cromatografia de afinidade em Proteína-A Sepharose, e o controle da purificação realizado por eletroforese em géis de ágarose e poliacrilamida (SDS-PAGE). A imunoglobulina purificada foi conjugada ao FITC e filtrado em coluna de Sephadex G-25 para separação das proteínas marcadas e não-marcadas. O AcMm conjugado foi testado contra hemácias de cães, e o êxito da conjugação comprovado por testes de fluorescência, sendo a mediana de positividade de 94,70. Frente a leucócitos humanos a mediana de positividade foi 0,03 contra 0,50 dos reagentes comerciais. Os testes estatísticos não-paramétricos de Wilcoxon e correlação de Spearman comprovaram a eficiência e validam o controle isotípico produzido em comparação aos reagentes comerciais testados.

Desenvolvimento e aperfeiçoamento de protocolos de conjugação de nanomarcadores luminescentes com sistemas biológicos para aplicação em imunoensaios

Pós-graduação em Química - IBILCE

Espumas cerâmicas produzidas pela conjugação dos processos sol-gel, aeração e emulsificação

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Estudo do peptídeo lítico Hecate e sua conjugação com ácido gálico: atividade contra o carcinoma cervical humano, mecanismo de ação e toxicidade

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Sirocladium robustum, uma nova espécie de Zygnemataceae (Chlorophyta)

Sirocladium foi descrito por Randhawa (espécie tipo Sirocladium kumaoense) a partir de amostras de uma alga que crescia sobre o solo úmido às margens de uma queda d'água na Índia. O gênero é considerado terrestre e é caracterizado pela presença de apenas dois cloroplastos de forma laminar, bem como pela ocorrência de conjugação sem a formação de tubos. Atualmente, Sirocladium conta com mais três espécies, S. maharashtrense Randhawa, S. vandalurense Randhawa encontradas em solos úmidos da Índia, e S. cubense Rieth que é conhecida de solos úmidos de Cuba. O presente estudo descreve S. robustum, uma nova espécie deste gênero pouco conhecido de Zygnemataceae, cujos espécimes foram coletados crescendo sobre o solo úmido de uma poça permanente na região noroeste do Estado de São Paulo, no Brasil. As maiores dimensões do comprimento e diâmetro das células, a forma e dimensão dos zigósporos são as características mais distintivas de S. robustum das outras quatro espécies deste gênero.

Características dos enunciados dispersos de uma criança com diagnóstico fonoaudiológico de distúrbio de linguagem

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

A emergência do marcador discursivo assim sob a óptica da gramaticalização: um caso de multifuncionalidade e (inter)subjetivização

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

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Sobre interações escalares e vetoriais na teoria de Duffin-Kemmer-Petiau

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Formalismo de Feshbach-Villars: incorreções e correções

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Síntese e caracterização de polipirrol (PPy) obtido pelo processo químico convencional e microemulsão

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Avaliação da glutationa e suas enzimas, e do estresse oxidativo como marcadores prognósticos e preditivos de neoplasia mamária em cadelas

Pós-graduação em Genética - IBILCE

Padronização da reação de imunofluorescência direta para detecção de oocistos de cryptosporidium parvum em amostras fecais de bezerros

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Os fundamentos da interpretação musical: aplicabilidade nos 12 estudos para violão de Francisco Mignone

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