Acute phase proteins: a potential approach for diagnosing chronic infection by Trypanosoma vivax

O objetivo do presente estudo foi verificar possíveis alterações nas proteínas de fase aguda em ovinos infectados experimentalmente com Trypanosoma vivax. Para tanto, foram utilizados oito ovinos machos, sendo quatro usados como controle e quatro infectados com 10(5) tripomastigotas de T. vivax. Colheram-se amostras de sangue em dois tempos antes da infecção e, posteriormente, aos 5, 7, 9, 11, 13, 15, 20, 30, 45, 60, 75, 90, 105 e 120 dias após a infecção (dpi); após centrifugação e aliquotização das amostras. As proteínas de fase aguda foram separadas por eletroforese em gel de acrilamida, contendo dodecil sulfato de sódio, e suas concentrações foram determinadas através de densitometria computadorizada. A dosagem de proteína total foi realizada pelo método colorimétrico do biureto. A contagem dos tripanossomas foi realizada diariamente, utilizando-se uma alíquota de 5 µL de sangue disperso em lâmina de microscopia, sob lamínula de 22 × 22 mm, contando-se os parasitos em 100 campos microscópicos, com objetiva de 40×, multiplicados pelo fator de correção do microscópio, e o resultado expresso em parasitos por mL de sangue. Para a análise estatística, empregou-se o teste de Wilcoxon a 5% de probabilidade. Foi observada a diminuição de diversas proteínas de fase aguda e aumento de antitripsina e transferrina que podem ser utilizadas para auxiliar no diagnóstico da infecção por T. vivax, principalmente na fase crônica da infecção.

Proteinogramas séricos de ratos Wistar experimentalmente infectados com Trypanosoma evansi

Estabeleceu-se o perfil eletroforético de proteínas séricas de ratos Wistar experimentalmente infectados com Tripanosoma evansi, utilizando-se 40 ratos, distribuídos em oito grupos de cinco animais cada. Um grupo foi mantido como testemunho (G1), e os demais (G2 a G8) foram inoculados, via intraperitoneal, com cerca de 10³tripomastigota de T. evansi. Amostras de sangue para obtenção de soro foram coletadas no quinto (G2), 10º (G3), 15º (G4), 30º (G5), 45º (G6), 60º (G7) e 75º (G1 e G8) dia após as inoculações. O fracionamento das proteínas foi realizado pela técnica SDS-PAGE. Foram identificadas 31 proteínas, sendo sete de fase aguda: ceruloplasmina (101KD), hemopexina (83KD), transferrina (75KD), albumina (66KD), antitripsina (60KD), haptoglobina (44KD) e glicoproteína ácida (38KD). As proteínas com pesos moleculares 12KD; 22KD; 25KD; 28KD; 32,5KD; 35KD; 53,5KD; 63KD e 72KD apareceram apenas nos ratos inoculados com T. evansi.

Proteinograma sérico de bovinos da raça Curraleir

Estudou-se o perfil eletroforético das proteínas séricas de bovinos sadios da raça Curraleiro por meio da técnica de eletroforese em gel de acrilamida contendo dodecil sulfato de sódio. Utilizaram-se amostras de soro sanguíneo de 228 bovinos da raça Curraleiro, 51 machos e 177 fêmeas, com idades entre sete meses e 12 anos, pertencentes a dois rebanhos localizados nos Estados de Goiás e Tocantins. Foram quantificadas proteína total e concentração plasmática de fibrinogênio. Verificaram-se variações nas concentrações das diferentes frações proteicas. Foram detectadas 26 proteínas e identificadas 10 delas. A ceruloplasmina esteve ausente em 78,1% dos indivíduos, e a α-antitripsina não foi detectada em nenhum animal. Proteína total, globulina, IgA, IgG e fibrinogênio aumentaram com a idade e houve correlação positiva entre os níveis séricos de haptoglobina e α1-glicoproteína ácida.

Serum protein concentrations in calves with experimentally induced pneumonic pasteurellosis

Foram examinados 10 bezerros da raça Holandesa com duas a quatro semanas de idade, distribuídos aleatoriamente em dois grupos, controle e infectado. Os bezerros do grupo-controle foram inoculados por via intrabronquial com 5ml de solução salina fosfato-tamponada Dulbecco (DPBSS). Os do grupo infectado receberam um inóculo contendo 5x10(9) unidades formadoras de colônia-UFC de Mannheimia (Pasteurella) haemolytica, suspensas em 5ml de DPBSS. As amostras de sangue foram colhidas 15 minutos antes e uma, duas, quatro e seis horas após a inoculação. O proteinograma sérico foi obtido por eletroforese em gel de acrilamida. As concentrações séricas das proteínas de pesos moleculares 125.000 D (ceruloplasmina), 60.000 D (a1-antitripsina), 45.000 D (haptoglobina) e 40.000 D (glicoproteína ácida) foram significativamente maiores em bezerros infectados do que nos do grupo-controle. Os resultados indicam que as concentrações das proteínas de fase aguda se elevaram mais rapidamente que o previamente imaginado. O proteinograma sérico pode ser útil no monitoramento da evolução da pneumonia de bezerros causada por M. haemolytica.

Serum protein concentrations, including acute phase proteins, in calves with hepatogenous photosensitization

Foram examinados 100 bezerros da raça Nelore com 6 a 12 meses de idade, distribuídos em: grupo controle (G1; 50 bezerros sadios) e grupo fotossensibilização (G2; n= 50). As amostras de sangue foram coletadas 12 a 24 horas após o início da dermatite (M1) e 15 a 30 dias após (M2), época da cura das lesões cutâneas. O proteinograma sérico foi obtido por eletroforese em gel de acrilamida. em todos os bezerros foram identificadas 18 proteínas com pesos moleculares (PM) entre 16.000 a 189.000 dáltons (Da). em M1 e M2, as concentrações séricas das proteínas de PM 115.000Da (ceruloplasmina), 61.000Da (1-antitripsina), 45.000Da (haptoglobina) e 40.000Da (glicoproteína ácida) foram significativamente maiores em bezerros com fotossensibilização hepatógena em comparação com aquelas dos animais do grupo-controle. A determinação dos teores séricos de proteínas de fase aguda pode ser útil no monitoramento da progressão da fotossensibilização hepatógena em bovinos, inclusive orientando possíveis alterações em procedimentos terapêuticos.

Proteinograma sérico de bezerros recém-nascidos da raça Holandesa obtido por eletroforese em gel de poliacrilamida

The serum protein concentration of newborn Holstein calves determined by means of sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide (SDS-PAGE) was studied. Blood samples from 40 healthy newborn calves were obtained 48 hours after birth. Calves had been given 3 liters of colostrum within 2 hours after birth, following by dose corresponding by 15% of animal weight each 24 hours. The results showed three different proteinograms: 19 calves had 14 proteins with molecular weights (MW) ranging from 28,000 D to 170,000D (proteinogram 1); 11 calves had 14 proteins with MW ranging from 18,000 to 170,000 D (proteinogram 1); and 10 calves had 12 proteins with MW ranging from 28,000 D to 170,000 D (proteinogram 3). The three groups presented similar IgG levels. The highest serum concentration of ceruloplasmin were verified in proteinogram 3, which had the lowest serum level of protein with MW 58,000D. It was verified a1-antitrypsin only in proteinogram 2, which had no proteins with MW of 42,000 D and 37,000D. The highest serum concentrations of IgA and protein with MW 58,000 D, and the lowest serum levels of transferrin, haptoglobin, and acid glycoprotein were verified in proteinogram 3. Measurement of serum protein concentrations by SDS-PAGE may be useful in monitoring the occurrence of hypogammaglobulinemia and the neonatal disease in calves.

Leucograma e teores plasmáticos de proteínas de fase aguda de eqüinos portadores de abdômen agudo e submetidos à laparotomia

Foram examinados 20 eqüinos adultos portadores de abdômen agudo e submetidos à laparotomia. Dez recuperaram-se sem intercorrência pós-operatória (G1) e 10 foram a óbito sete a 10 dias após a cirurgia, com sinais de choque séptico (G2). Avaliaram-se temperatura retal, freqüências cardíaca e respiratória, tempo de preenchimento capilar e teores plasmáticos das proteínas de fase aguda - fibrinogênio, ceruloplasmina, proteína C-reativa, antitripsina, haptoglobina e glicoproteína ácida -, antes e até sete dias após a laparotomia. As leucometrias às 72h e no sétimo dia pós-operatório dos eqüinos que foram a óbito foram, respectivamente, 34,6% e 57,1%, mais altas que a dos animais curados. Os maiores valores de proteína de fase aguda ocorreram no sétimo dia após a cirurgia; os percentuais de elevação de fibrinogênio, antitripsina, glicoproteina ácida, proteína C-reativa, ceruloplasmina e haptoglobina de eqüinos do G2 em relação ao G1 foram 46,8%, 67,9%, 91,9%, 112,2%, 126,9% e 186,2%, respectivamente.

Proteinograma e teores de cobre, ferro e zinco no soro sanguíneo de ovelhas da raça Santa Inês com mastite experimental por Staphylococcus aureus

Costa N.A., Simao L.C.V., Santos R.A., Afonso J.A.B., Fagliari J.J., Cardoso E.C., Soares P.C. & Mendonca C.L. 2010. [Proteinogram and serum concentrations of copper, iron and zinc in Santa Ines ewes with Staphylococcus aureus experimentally induced mastitis.] Proteinograma e teores de cobre, ferro e zinco no soro sanguineo de ovelhas da raca Santa Ines com mastite experimental por Staphylococcus aureus. Pesquisa Veterinaria Brasileira 30(5):435-442. Clinica de Bovinos, Campus Garanhuns, Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE), Avenida Bom Pastor s/n, Boa Vista, Caixa Postal 152, Garanhuns, PE 55292-901, Brazil. E-mail: carlalopes.mendonca@gmail.comThe aim of the present study was to evaluate the effect of Staphylococcus aureus experimentally induced mastitis on proteinogram and serum concentrations of cupper, iron and zinc levels of Santa Ines primiparous ewes. The right mammary gland of ten healthy ewes was inoculated with 1,0x10(4) UFC/mL of S. aureus. Clinical examination and determination of serum concentrations of proteins by electrophoresis in polyacrylamide gel (SDS-PAGE), cupper, iron and zinc, as well plasma level of fibrinogen were measured before the inoculation (control) and 12h, 24h, 36h, 48h, 60h, 72h, 84h, 96h, 108h, 120h, 132h, 168h, 180h, 288h and 336h after bacteria inoculation. All animals experimentally infected presented clinical mastitis and subsequent loss of mammary gland function. The electrophoretogram allowed the identification of 23 proteins with molecular weights (MW) ranged from 26.000 to 185.000 daltons (Da) including acute-phase proteins, IgG and IgA. A significant increase (P<0,05) in haptoglobin, ceruloplasmin, IgG and IgA concentrations was observed. Antitrypsin and acid glicoprotein concentrations did not alter. The levels of iron and zinc decreased and the cupper concentration increased. A positive correlation between plasma fibrinogen and serum ceruloplasmin (r=0.74), haptoglobin (r=0.62) and IgA (r=0.62) was also identified. Results showed the importance of ceruloplasmin and haptoglobin as acute-phase proteins in ewes with intramammary infections and confirms fibrinogen as an inflammatory marker because its high correlation with specific proteins. The alterations in the serum levels of Cu, Fe and Zn suggest the action of inflammatory mediators triggered by S. aureus.

Comparação entre a relação PCR/albumina e o índice prognóstico inflamatório nutricional (IPIN)

Objetivo: Simplificar o cálculo do índice prognóstico inflamatório nutricional (IPIN) empregando número menor de variáveis com conseqüente redução do custo da análise. Materiais e métodos: Foram estudados 54 pacientes e 12 indivíduos-controle com 48 ± 20 (média ± dp) anos de idade. As principais patologias dos pacientes eram: doença arterial periférica (22), pênfigo foliáceo (7), doença inflamatória intestinal (7), trauma (6) e pós-operatório de ortognatia (3). Foram obtidas amostras de sangue periférico, colhidas em jejum para dosagens de proteínas positivas (+) e negativas (-) de fase aguda (PFA) pelo método nefelométrico. Proteína C reativa (PCR), alfa-1-glicoproteína-ácida (alfa-1-GA), alfa-1-antitripsina (alfa-1-AT) e ceruloplasmina (CER) foram as PFA+ e albumina (Alb), transtiretina (TTR), transferrina (TF) e proteína ligadora do retinol (RBP) foram as representantes das PFA-. Esses valores foram analisados quanto à associação de correlação isolada ou associadamente na fórmula do índice prognóstico inflamatório e nutricional (IPIN = PCR + alfa-1-GA / Alb + TTR). de acordo com o índice prognóstico inflamatório e nutricional, os pacientes foram classificados em grupo-controle (G1); pacientes sem infecção/inflamação (IPIN < 1, G2) ou com risco de inflamação/infecção (IPIN > 1, G3). em seguida os pacientes do G3 foram subdivididos em baixo risco (G3A, n = 16); médio risco ( G3B, n = 10); alto risco (G3C, n = 6) e com risco de morte (G3D, n = 11). Os resultados foram correlacionados entre si (teste de Spearman) ou submetidos às comparações entre grupos (teste de Kruskall-Wallis). Resultados: Houve relação significativa entre as variáveis PCR ´ alfa-1-GA (r = 0,49), Alb ´ TTR (r = 0,60), Alb ´ RBP (r = 0,58), Alb ´ TF (r = 0,39), TTR ´ RBP (r = 0,56) e TTR´ TF (r = 0,43) e as melhores relações encontradas entre PFA+ e PFA- foram: PCR ´ Alb (r = - 0,71), PCR ´ TTR (r = - 0,54), PCR ´ TF (r = - 0,39) e alfa-1-GA ´ Alb (r = - 0,35). Os valores do IPIN mostraram a diferenciação G3 > (G1 = G2) e G3 > G3A. Entre todas as proteínas dosadas apenas PCR, Alb e TTR discriminaram os grupos: sendo G3 > (G1= G2) para PCR e G3< (G1= G2) para Alb e TTR. Apenas PCR, TTR e TF discriminaram a morbimortalidade com G3D > G3A (para PCR) e G3D < G3A (para TTR e TF). PCR/Alb e IPIN apresentaram concordância de valores para os riscos de complicações. Conclusão: Assim, conclui-se pela possibilidade de substituição do IPIN pela relação PCR/albumina, mais simples e de menor custo, mantendo-se o mesmo poder e sensibilidade para diagnóstico dos graus de risco de complicações.

Decreased oxidative stress in patients with ulcerative colitis supplemented with fish oil omega-3 fatty acids

OBJECTIVE: the potential pathogenicity of free radicals may have a pivotal role in ulcerative colitis. Fish oil omega-3 fatty acids exert anti-inflammatory effects on patients with ulcerative colitis (UC), but the precise mechanism of the action of fish oil on oxidative stress is still controversial. The aim of the present work was to verify the blood oxidative stress in patients with UC and determine whether the association of sulfasalazine to fish oil omega-3 fatty acids is more effective than isolated use of sulfasalazine to reduce the oxidative stress.METHODS:, Nine patients (seven female and two male; me. an age = 40 +/- 11 y) with mild or moderate active UC were studied in a randomized crossover design. In addition to their usual medication (2 g/d of sulfasalazine), they received fish oil omega-3 fatty acids (4.5 g/d) or placebo for 2-mo treatment periods that were separated by 2 mo, when they only received sulfasalazine. Nine healthy individuals served as control subjects to study the oxidative stress status. Disease activity was assessed by laboratory indicators (C-reactive protein, alpha(1)-acid glycoprotein, alpha(1)-antitrypsin, erythrocyte sedimentation rate, albumin, hemoglobin, and platelet count), sigmoidoscopy, and histology scores. Analysis of oxidative stress was assessed by plasma chemiluminescence and erythrocyte lipid peroxidation, both induced by tert butyl hydroperoxide (t-BuOOH) and by plasma malondialdehyde. Antioxidant status was assayed by total plasma antioxidant capacity (TRAP) and microsomal lipid peroxidation inhibition (LPI). Superoxide dismutase (SOD) and catalase erythrocyte enzymatic activities were also determined.RESULTS: No significant changes were observed in any laboratory indicator or in the sigmoidoscopy or histology scores, with the exception of erythrocyte sedimentation rate, which decreased with both treatments. Oxidative stress was demonstrated by significant decreases in TRAP and LPI levels, increased chemiluminescence induced by t-BuOOH, and higher SOD activity in patients with UC. Treatment with fish oil omega-3 fatty acids reverted the chemiluminescence induced by t-BuOOH and LPI to baseline levels but that did not occur when patients received only sulfasalazine. Levels of plasma malondialdehyde, erythrocyte lipid peroxidation, and catalase were not different from those in the control group.CONCLUSIONS: the results indicated that plasma oxidative stress occurs in patients with UC, and there was a significant decrease when the patients used sulfasalazine plus fish oil omega-3 fatty acids. However, there was no improvement in most laboratory indicators, sigmoidoscopy, and histology scores. The results suggested that omega-3 fatty acids may act as free radical scavengers protecting the patients against the overall effect of oxidative stress. (C)Elsevier B.V. 2003.

Proteínas de fase aguda em cadelas com neoplasia mamária

As proteínas de fase aguda (PFA) apresentam concentrações séricas alteradas mediante processos infecciosos, inflamatórios e neoplásicos. Objetivou-se com este trabalho avaliar as variações séricas das PFA em cadelas portadoras de neoplasia mamária, comparando com a avaliação histológica e leucograma. As PFA foram avaliadas em 45 cadelas com tumor de mama, distribuídas nos grupos neoplasia benigna (n=13), maligna não ulcerada (n=24) e maligna ulcerada (n=8). O grupo controle foi composto por 20 cadelas saudáveis. Foram realizados o teste de eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) para identificar as PFA (albumina, ceruloplasmina, transferrina, haptoglobina Hp, α-1 antitripsina e α-1 glicoproteina ácida) e o teste ultrassensível para proteína C reativa (PCR). As pacientes com neoplasia mamária maligna ulcerada apresentaram elevações sérica para PCR e Hp e redução da albumina (P<0,05, One-Way ANOVA e Teste de Dunn). Nessas pacientes, foi observada correlação positiva entre o leucograma inflamatório e o aumento das PFA (P=0,002, Teste de Fisher) e não foram observadas correlações entre as PFA e os subtipos histológicos. Conclui-se que avaliações conjuntas da PCR, Hp e albumina podem ser utilizadas como ferramenta de auxílio diagnóstico e prognóstico em cadelas com neoplasia mamária.

Changes in plasma protein concentrations in ponies with experimentally induced alimentary laminitis

Objective-To determine whether plasma protein concentrations were altered in ponies with alimentary laminitis.Animals-12 adult ponies.Procedure-Acute laminitis was induced in 6 ponies by oral administration of carbohydrate (85% corn starch, 15% wood flour); the other 6 ponies were used as controls. A physical examination was performed and blood samples were collected immediately before and 4, 8, 12, 24, and 28 hours after administration of carbohydrate. Plasma protein concentrations were determined by means of sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis.Results-19 plasma proteins ranging from a molecular weight of 24,000 to a molecular weight of 350,000 were identified in all 12 ponies. Plasma concentrations of proteins with molecular weights of 350,000 (fibrinogen), 130,000 (ceruloplasmin), 118,000 (c-reactive protein), 67,000 (alpha(1)-antitrypsin I), 65,000 (alpha(1)-antitrypsin II), 50,000 (haptoglobulin), and 45,000 (acid glycoprotein) were significantly increased in ponies with laminitis, compared with concentrations in control ponies.Conclusion-Changes in plasma protein concentrations are detectable within 4 hours after the onset of alimentary laminitis in ponies.Clinical Relevance-Measurement of plasma protein concentrations may be useful in monitoring the progression of laminitis in ponies.

Doença pulmonar obstrutiva crônica

The chronic obstructive lung disease is reviewed with emphasys on its epidemiology and risk factors. The diagnosis, clinical aspects pulmonary, functional alterations and laboratorial findings are discussed. The treatment is also reviewed, based on the actual consensus, considering the following classes of approaches: bronchodilators, inhaled β-agonists, corticoids, methilxanthines, prolonged domiciliar-orygen therapy.

Perfil eletroforético das proteínas de fase aguda em caprinos experimentalmente infectados com Trypanosoma evansi

Considered as one of the main agents of the tripanossomiases, Trypanosoma evansi causes a disease generically know as surra, with wide geographic occurence. This work has the aim to study the electrophoretic profile of the acute phase proteins of goats, experimentally infected with T. evansi. Ten crossbread female goats, around 4 months of age, clinically healthy and serum negative for the presence of antibodies anti-T. evansi (IFAT) were used. The animals were divided in two groups: six were inoculated (G1) intravenously with 2,38 × 10 6 tripomastigotes of T. evansi and four were kept as noninfected controls. The blood for serum was collected daily until the 14 days after inoculation (DAI), weekly up to the 98 th DAI and every two weeks up to the 364 th DAI. The serum proteins were separacted by sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDSPAGE). Twenty-one proteins were found in the serum of the goats, eight were nominally identified; phosphorylase, transferrin, albumin, antitrypsin, acid glicoprotein, haptoglobin, hemoglobin, and light chain immunoglobulin.

Acute Phase Responses of Different Positions of High-Goal (Elite) Polo Ponies

The aim of this study was to investigate the acute phase response (APR) in 15 horses by quantifying physiological venous blood variables and serum acute phase proteins (APP) at 5 minutes and 6 and 12 hours after a training match of high-goal polo. The horses were divided into three experimental groups based on their team positions, including defense (n = 6), midfield (n = 5), and attack (n = 4). Serum proteinograms were obtained by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Data were evaluated using analysis of variance for repeated measures. The match represented a high-intensity stimulus for all positions. Defenders appeared to use the anaerobic pathway more than the other positions, as shown by their lower pH and greater lactatemia. Alterations in muscle membrane permeability were observed in all horses, as seen by the increase in serum creatine kinase activity without a correlation with APR. Significant elevations in total serum protein, albumin, ceruloplasmin, haptoglobin, alpha-1 antitrypsin, and 23-kDa protein were seen only during the course of the physical exertion of the match, although there were no differences in these values among positions of the team. After 6 hours of the match, the concentration of transferrin declined, whereas that of alpha-1 acid glycoprotein remained unaltered at all assessed times. These results demonstrated that the defenders required the most use of the anaerobic pathway during the match, and that equestrian polo exercise triggers an acute phase response of relatively short duration; this APR is characterized as noninflammatory, as APR appears to be a physiological alteration related to the stress inherent in physical exercise. © 2013 Elsevier Inc. All rights reserved.