Characterization of a new platelet aggregating factor from crotoxin Crotalus durissus cascavella venom

In this article we investigated the platelet aggregating activity of whole crotoxin and its subunits isolated from Crotalus durissus cascavella venom. During the purification protocols of the venom, using HPLC molecular exclusion, we detected the presence of two different serine protease activities in the gyroxin fraction, and another in the crotoxin fraction, which induced strong and irreversible platelet aggregation, in addition to blood coagulation. From crotoxin, we isolated PLA(2), crotapotin (both fractions corresponding approximately 85% of whole crotoxin) and another minor fraction (F20) that exhibited serine protease activity. After a new fractionation on reverse phase HPLC chromatography, we obtained three other fractions named as F201, F202 and F203. F202 was obtained with high degree of molecular homogeneity with molecular mass of approximately 28 kDa and a high content of acidic amino residues, such as aspartic acid and glutamic acid. Other important amino acids were histidine, cysteine and lysine. This protein exhibited a high specificity for BApNA, a Michaelis-Menten behavior with Vmax estimated in 5.64 mu M/min and a Km value of 0.58 mM for this substrate. In this work, we investigated the ability of F202 to degrade fibrinogen and observed alpha and beta chain cleavage. Enzymatic as well as the platelet aggregation activities were strongly inhibited when incubated with TLCK and PMSF, specific inhibitors of serine protease. Also, F202 induced platelet aggregation in washed and platelet-rich plasma, and in both cases, TLCK inhibited its activity. The N-terminal amino acid sequence of F202 presented a high amino acid sequence homology with other thrombin-like proteins, but it was significantly different from gyroxin. These results showed that crotoxin is a highly heterogeneous protein composed of PLA(2), thrombin-like and other fractions that might explain the diversity of physiological and pharmacological activities of this protein.

Transmission electron microscopy for characterization of acrosomal damage after Percoll gradient centrifugation of cryopreserved bovine spermatozoa

The objective of this study was to characterize acrosomal ultrastructure following discontinuous Percoll gradient centrifugation of cryopreserved bovine sperm. Semen was collected from six bulls of different breeds and three ejaculates per bull were evaluated. Frozen semen samples were thawed and the acrosomal region of sperm cells was evaluated by transmission electron microscopy (TEM) before (n = 18) and after (n = 18) Percoll centrifugation. The evaluation of 20 sperm heads from each of the 36 samples analyzed ensured that a large number of cells were investigated. The data were subjected to analysis of variance at a level of significance of 5%. Percoll centrifugation reduced the percentage of sperm exhibiting normal acrosomes (from 61.77 to 30.24%), reduced the percentage of sperm presenting atypical acrosome reactions (from 28.38 to 4.84%) and increased the percentage of sperm exhibiting damage in the acrosome (from 6.14 to 64.26%). The percentage of sperm with typical acrosome reactions was not significantly different before (3.70%) and after (0.67%) centrifugation. TEM distinguished four different types of acrosomal status and enabled ultrastructural characterization of acrosomal injuries. The percentage of sperm exhibiting normal acrosomes decreased and damage in the acrosome was the most frequent acrosomal injury with the Percoll gradient centrifugation protocol utilized.

Energetic efficiency programs and power quality

This paper presents the results of the investigations that were done to identify and to quantify the power quality problems resultant from the actions done to improve the efficiency on electric energy consumption. The efficiencies of several electric devices were evaluated, among them: fluorescent bulb, electronic ballast, soft-starter, temperature controller for showers, dimmer and others. This evaluation allowed to establish a cause/effect analysis of the power quality.

Extração e caracterização de amido de jacatupé (Pachyrhizus ahipa)

O gênero Pachyrhizus tem sido estudado como fonte de matéria-prima amilácea devido ao considerável teor de amido nas raízes de suas espécies. Neste trabalho objetivou-se caracterizar raízes de P. ahipa, processar em laboratório para a extração do amido e analisá-lo quanto à composição centesimal, teor de amilose, formato e tamanho de grânulos em microscópio eletrônico de varredura e viscosidade das pastas (RVA). As raízes de P. ahipa apresentaram 18% de massa seca sendo 7,68% amido. O rendimento obtido de amido foi baixo (4,28%), apontando para a necessidade de estudos que melhorem o processo de extração. O produto obtido apresentou 12,3% de umidade, 84% de amido com 13% de amilose e baixos teores de outros componentes (base úmida). A análise em microscópio eletrônico de varredura mostrou grânulos de amido de formas circular e poligonal, com tamanho variando entre 10 e 25mm. O perfil de viscosidade apresentado por este amido mostrou baixa temperatura de pasta (56ºC) e pico de viscosidade a 272 RVU, estando este último valor próximo ao observado para amido de mandioca, sob as mesmas condições. O amido de P. ahipa apresentou ainda, baixa estabilidade da pasta a quente e tendência à retrogradação com o resfriamento.

Nocardiosis: an overview and additional report of 28 cases in cattle and dogs

A caracterização fenotípica, perfil de sensibilidade aos antimicrobianos e aspectos clínico-epidemiológicos foram avaliados em 28 linhagens de Nocardia isoladas de 19 casos de mastite, oito lesões tegumentares e um caso de pneumonia em cão. Foram utilizados no diagnóstico métodos microbiológicos, bioquímicos, citológicos e microscopia eletrônica de varredura. Nocardia asteroides tipo IV, N. otitidiscaviarum,N. nova (tipo III) e N. farcinica (tipo V) foram isoladas do leite de vacas com mastite, de material de lavado transtraqueal e de lesões cutâneas de cães. Nocardiose mamária bovina foi diagnosticada predominantemente sob a forma clínica, em propriedades com precárias condições de higiene na pré e pós-ordenha, e inadequado procedimento de terapia intramamária. Nocardiose canina foi diagnosticada comumente em animais co-infectados com o vírus da cinomose. Sulfametoxazole/trimetoprim (92,8%), amicacina (92,8%) e ceftiofur (92,8%) foram os antimicrobianos mais efetivos frente às linhagens de Nocardia. Resistência múltipla a três ou mais e cinco ou mais antimicrobianos foram observadas, respectivamente, em dez (35,7%) e três (10,7%) linhagens, notadamente frente à cloxacilina, cefoperazona e ampicilina. A caracterização de espécies (tipo), aspectos clínico-epidemiológicos, diagnóstico, resistência múltipla aos antimicrobianos e reflexos em saúde pública de linhagens de Nocardia isoladas de bovinos e cães no Brasil foram discutidos. Foi destacada a similaridade entre as espécies de Nocardia isoladas de animais e do homem, e a primeira descrição no Brasil de N. otitidiscaviarum na etiologia da mastite bovina.

Indigestible cellulose and lignin in determining feces production and apparent digestibility in horses

Foram utilizados quatro cavalos castrados sem raça definida, distribuídos em blocos casualizados. Objetivou-se estudar a viabilização dos indicadores internos, celulose (CELi) e lignina indigestíveis (LIGi), para predizer a digestibilidade em cavalos. Os tratamentos consistiram na determinação da digestibilidade por método direto com a coleta total de fezes (CT) e indireto pelo uso CELi e LIGi obtidos pelas técnicas in situ (IS) na cavidade ruminal de bovinos e in vivo (IV) nos equinos por meio do saco de náilon móvel (SNM). A produção fecal e taxa de recuperação (p > 0,05) médios encontrados foram de 2,80 kg na MS e 101%, respectivamente. As estimativas dos CD dos nutrientes (p > 0,05) foram adequadamente preditos pela CELi e LIGi, obtidos in situ e in vivo, no qual os valores médios observados foram de 52,63, 54,17, 64,90, 43,73 e 98,28% para MS, MO, PB, FDN e Amido, respectivamente. Concluiu-se que a CELi e LIGi podem ser obtidas in vivo por meio do SNM em equinos, para predizer os coeficientes de digestibilidade de nutrientes, consumindo dieta mista.

Aplicação de escória siderúrgica calcário e ureia em latossolo cultivado com arroz

A escória de siderurgia é um silicato de cálcio e fonte de silício, que tem ação corretiva da acidez do solo semelhante à do calcário. Apesar do seu grande potencial de uso como corretivo e fertilizante, existem poucas informações sobre seus efeitos nos atributos químicos do solo. O estudo foi realizado com a cultura do arroz, objetivando-se avaliar os efeitos da aplicação da escória de siderurgia, calcário e ureia nas alterações dos atributos químicos de um Latossolo Vermelho distrófico. Os tratamentos constaram da combinação de duas fontes de materiais corretivos (calcário e escória de siderurgia), em três doses (1,3 g dm-3 2,6 g dm-3 e 5,2 g dm-3; três doses de N (80 mg dm-3 160 mg dm-3e 320 mg dm-3, aplicadas na forma de ureia; e uma testemunha, dispostas em blocos casualizados, em esquema fatorial, com quatro repetições. Após o período de 90 dias de incubação do solo e 120 dias de cultivo da cultura do arroz, coletaram-se amostras do solo, para análise química. A escória de siderurgia foi viável como corretivo de acidez do solo e a adubação nitrogenada em arroz contribuiu para incrementos na acidez do solo, diminuindo a saturação por bases e o teor de Ca e Mg. A aplicação de escória de siderurgia favoreceu a disponibilidade de silício, entretanto, quando associada à adubação nitrogenada, não alterou o teor deste elemento no solo.

Karyotypic Data on 28 Species of Scinax (Amphibia: Anura: Hylidae): Diversity and Informative Variation

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Stock assessment and fishery management of the pink shrimp Farfantepenaeus brasiliensis Latreille, 1970 and F. paulensis Pérez-Farfante, 1967 in Southeastern Brazil (23° to 28° S)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Controle biológico da podridão radicular (Pythium aphanidermatum) e promoção de crescimento por Pseudomonas chlororaphis 63-28 e Bacillus subtilis GB03 em alface hidropônica

Podridões radiculares causadas por espécies de Pythium são um importante problema em cultivos hidropônicos. Sintomas de subdesenvolvimento são observados nas plantas parasitadas pelo patógeno, sendo muitas vezes não diagnosticados pelo produtor. O objetivo do trabalho foi avaliar o controle biológico da podridão radicular causada por Pythium aphanidermatum e a promoção de crescimento por Pseudomonas chlororaphis 63-28 e Bacillus subtilis GB03, reconhecidos agentes de controle biológico de doenças de plantas. A inoculação das plantas com P. aphanidermatum ocasionou o subdesenvolvimento, sendo essa diminuição de 20%. A adição dos agentes de biocontrole na solução nutritiva teve um efeito positivo no aumento da massa (6% a 13%), no número de folhas (4% a 7%) e no teor de clorofila (3%) das plantas de alface. Entretanto, maiores estudos devem ser realizados para melhorar a capacidade de controle da doença e de promoção de crescimento pelos agentes de biocontrole estudados no cultivo de alface hidropônica.

Idade materna como fator de risco: estudo com primigestas na faixa etária igual ou superior a 28 anos

Trata-se de estudo transversal, cujo objetivo foi analisar a idade materna como fator de risco ou não, através da verificação de intercorrências na gestação, parto e puerpério de primigestas com idade igual ou superior a 28 anos e das condições de nascimento e alta de seus recém-nascidos, comparando-as com o grupo de primigestas na faixa etária de 20 a 27 anos. Foi realizado em Botucatu/S.P., no período de janeiro de 1990 a junho de 1995. A análise estatística, discutida ao nível de 5% de significância, foi realizada através da prova de Mann-Whitney, teste de Goodman e avaliação do risco relativo e risco relativo corrigido, através da técnica de Mantel-Haenszel. Concluiu-se que a idade materna igual ou superior a 28 anos não constituiu fator de risco gestacional, puerperal e intra-parto mas, por outro lado, foi fator de risco, mesmo após controlado o tipo de parto, para as seguintes intercorrências perinatais: taquipnéia transitória do recém-nascido, cianose generalizada ao nascer e infecção neonatal.

Mineral trioxide aggregate as a root canal filling material in reimplanted teeth. Microscopic analysis in monkeys

This study analyzed mineral trioxide aggregate (MTA) as a root canal filling material for the immediate reimplantation of monkey teeth. Four adult capuchin monkeys Cebus apella were used, which had their maxillary and mandibular lateral incisors on both sides extracted and reimplanted after 15 min. During the extra-alveolar period, the teeth were kept in saline solution and after reimplantation retention was performed with a stainless steel wire and composite resin for 14 days. After 7 days, the reimplanted teeth were submitted to endodontic treatment with biomechanics up to file n. 30 and irrigation with a saturated solution of calcium hydroxide [Ca(OH)(2)], and then divided into two study groups: group I - root canal filled with a Ca(OH)(2) paste, and group II - root canal filled with MTA. Radiographic follow up was performed at 30, 60 and 90 days postoperatively, and after 180 days the animals were killed and specimens were processed for histomorphological analysis. The results revealed that most specimens of both groups presented organized periodontal ligament with no inflammation. The resorptions observed were surface resorptions and were repaired by cementum. Both MTA and Ca(OH)(2) were good root canal filling materials for immediately reimplanted teeth, providing good repair and also allowing biological sealing of some lateral canals. There was no significant difference between the study groups (alpha = 29.60%).