Digestibilidade da matéria seca in vitro de haste e folha da Galactia striata (Jacq.) Urb., em função de duas Épocas de semeadura em um latossolo vermelho escuro alico na reglao de ilha solteira, S.P.

O experimento foi conduzido em um solo Latossolo Vermelho Escuro álico, textura média, na Fazenda Experimental da UNESP - Campus de Ilha Solteira, SP. O trabalho teve como objetivo estudar o comportamento, da Galactia striata(Jacq.) Urb., quanto ao aspecto do valor nutritivo, em duas épocas de semeadura (28/09/79 e 25/03/80) e épocas de coleta (de 28 em 28 dias após emergência das plantas). O delineamento experimental foi em blocos casualizados com parcelas subdivididas, considerando as épocas de semeadura, as parcelas,e as épocas de coleta , as subparcelas. A aplicação de calcário se processou 30 dias antes de cada época de semeadura e a adubação fundamental na semeadura consistiu na aplicação de 20 kg/ha de nitrogênio na forma de sulfato de amônio(21% N), 120 kg de P2O5 na forma de cloreto de potássio (49,8% K). As semeaduras foram realizadas em linhas espaçadas de 0,30 m, com dez linhas de 5 m por subparcela, a uma profundidade de 2,5 cm, sendo deixada após o desbaste 10-15 plantas por metro linear. No material coletado separaram-se as folhas de hastes e efetuou-se a análise de digestibilidade in vitro da matéria seca. Conclui-se que: em função do decréscimo da digestibilidade in vitro da matéria seca por ser lento com o desenvolvimento vegetativo, a época de corte da Galactia striata pode ser determinada em função da produção de matéria seca. A Galactia striata é capaz de prover forragem de alto valor nutritivo, tanto no período de verão corno no de inverno.

Efeitos da escarificação química e da concentração de nitrogênio sobre a germinação e o desenvolvimento in vitro de Vanilla planifolia Jack ex Andr. (Orchidaceae: Vanilloideae)

Vanilla planifolia é uma espécie com grande valor comercial, porém sua propagação é dificultada devido à baixa germinação de suas sementes. No presente estudo procurou-se avaliar a influência da escarificação destas sementes por meio da imersão em H2SO4 concentrado durante 60, 120 e 180 segundos, bem como de diferentes concentrações de nitrogênio sobre a germinação e o desenvolvimento das plântulas. Sessenta segundos de escarificação e 25% de nitrogênio no meio de cultura proporcionaram os melhores resultados sobre a germinação e desenvolvimento de V. planifolia, constituindo-se em um procedimento viável para a produção comercial dessa espécie.

Degradabilidade do capim-elefante em diferentes estágios de maturidade avaliada pelo método in vitro/gás

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avaliação do sistema de monitoramento computadorizado de digestão in vitro: 1. Testes preliminares

O objetivo deste trabalho foi testar o sistema de monitoramento computadorizado da produção de gás in vitro. Essa técnica facilita estudos da degradação das frações solúveis e insolúveis das forragens, quantificadas pela produção de gás (CO2 e CH4) oriunda do metabolismo microbiano e medida por sensor de pressão. Diversas quantidades de amostras (50 a 110 mg de feno de alfafa) e outros alimentos foram testadas. Também, a influência da quantidade de líquido ruminal (2,0 ou 3,0 mL), com ou sem barras magnéticas agitadoras nos frascos incubatórios, na digestibilidade de 100 mg de feno de alfafa, foi estudada. A quantidade de 100 mg de amostra, 2,0 mL de líquido ruminal e sem barra magnética agitadora, proporcionou os menores coeficientes de variação na produção de gás. em conclusão, 2,0 mL de líquido ruminal, sem barra e com 100 mg de amostra, apresentaram maior precisão na curva de digestão.

Comparação do sistema de monitoramento computadorizado de digestão in vitro com os métodos in vivo e in situ: 2. Uso do resíduo da matéria seca de forragens

RESUMO - O objetivo deste trabalho foi comparar o sistema de monitoramento computadorizado da produção de gás in vitro com os métodos in vivo e in situ. Nas comparações, foram utilizadas silagens de milho com alto/baixo teores de matéria seca, com/sem inoculante. A digestibilidade das silagens com alto teor de matéria seca (MS), com/sem inoculação, não apresentou diferenças entre os métodos analisados. Quando avaliadas separadamente do efeito do inóculo, essas silagens diferiram nos métodos in vitro/gás e in situ, mas não no in vivo. Entretanto, quando analisadas somente sob efeito do inoculante, apenas no método in situ houve diferença. Não foram encontradas diferenças na digestibilidade da fibra em detergente neutro (FDN) das silagens com alta ou baixa MS, inoculadas ou não, bem como em relação ao pH ao final da digestão. em conclusão, o desaparecimento da MS e FDN quantificada pelo resíduo no sistema in vitro/gás foi semelhante aos demais métodos avaliados.

Avaliação do sistema de monitoramento computadorizado de digestão in vitro: 3. Desaparecimento da matéria seca e/ou FDN pela produção de gás

RESUMO - Os objetivos deste trabalho foram avaliar o sistema de monitoramento computadorizado da produção de gás in vitro e compará-lo com os métodos in vivo e in situ. Nos métodos de digestibilidade (MS), foram utilizadas amostras de silagens de milho com alto/baixo teor de MS, com/sem inoculante. Avaliando a digestibilidade das silagens, pelo gás produzido na fermentação, os resultados da extensão da degradação (A+D) foram: 21,5; 22,6; 22,1; e 20,9 mL de gás/100 mg MS, sem diferença significativa. Os coeficientes de determinação obtidos na produção de gás total, em relação ao potencial de degradação obtido in situ, mostraram-se elevados para silagem de milho com alta MS inoculada (R²= 0,99), alta MS não-inoculada (R²= 0,98), baixa MS inoculada (R²= 0,94) e baixa MS não-inoculada (R²=0,93). O desaparecimento da MS e/ou fibra em detergente neutro (FDN), quantificada pelo gás produzido no sistema in vitro/gás, apresentou resultados semelhantes aos demais métodos avaliados.

Nutritionally induced changes in endosperm of shrunken-1 and brittle-2 maize kernels grown in vitro

Although mineral nutrition affects maize (Zea mays L.) yield by controlling starch deposition in kernels, the mechanisms involved are largely unknown. Our objectives were to examine this relationship by nutritionally and genetically altering starch production in the endosperm. Kernels of W64A and two starch-deficient mutants, shrunken-1 and brittle-2, were grown in vitro with varying supplies of N (0-50 mM) or P (0-6 mM) to produce different degrees of endosperm starch production, and the levels of enzyme activities and metabolites associated with carbohydrate and N metabolism were examined. In vitro grown kernels exhibited the expected starch phenotypes, and a minimum level of media N (25 mM) and P (2 mM) was required for optimal growth. However, increasing the availability of N or P could not overcome the genetically induced decrease in starch deposition of the mutants. Nitrogen deficiency enhanced sugar accumulation, but decreased amino acid levels, soluble protein, enzyme activity, starch synthesis, and endosperm dry weight. Phosphorous deficiency also decreased starch production and endosperm dry weight, but with only a minimal effect on the activities of ADP-glucose pyrophosphorylase and alanine transaminase. Genotypic differences in endosperm starch, and the increases induced by N and P supply, Here closely associated with the level of endosperm N, but not endosperm P. Thus, while both N and P are crucial for optimal yield of maize grain, they appear to act by different means, and with different importance in governing starch deposition in the endosperm.

In vitro effects of endodontic irrigants on endotoxins in root canals

Objective. The objective of this study was to evaluate the effects of endodontic irrigants on endotoxins in root canals.Study design. Ninety-eight single-root human teeth were used. Escherichia coli endotoxin was inoculated into 84 root canals. All root canals were enlarged and assigned to 7 groups (n = 14), according to solution used. Group 1 (G1): 2.5% NaOCl; G2: 5.25% NaOCl; G3: 2% chlorhexidine; G4: 0.14% calcium hydroxide; G5: polymyxin B; G6: positive control, saline solution; G7: negative control (no endotoxin). Two samplings of root canal were accomplished: immediate and after 7 days. Detoxification of endotoxin was evaluated by Limulus assay and antibody production in B-lymphocyte culture. Results were analyzed by Kruskal-Wallis/Dunn and ANOVA/Tukey.Results. At the immediate and second samplings, groups G4, G5, and G7 presented the best results, significantly different from groups G1, G2, G3, and G6 (P = .05).Conclusions. Calcium hydroxide and polymyxin B detoxified endotoxin in root canals and altered properties of LPS to stimulate the antibody production by B-lymphocytes. Sodium hypochlorite and chlorhexidine did not detoxify endotoxin.

Interleukin-10 secreted by B-1 cells modulates the phagocytic activity of murine macrophages in vitro

As demonstrated previously in our laboratory, B-1 cells migrate from the peritoneal cavity of mice and home to a distant site of inflammation to become macrophage-like cells. However, the influence that these cells might have on the kinetics and fate of the inflammatory process is not known. Considering that macrophages are pivotal in the inflammatory reaction, we decided to investigate the possible influence B-1 cells could have on macrophage activities in vitro. Our results show that peritoneal macrophages from Xid mice, a mouse strain deprived of B-1 cells, have higher phagocytic indexes for zymozan particles when compared with macrophages from wild-type mice. Moreover, macrophages from wild-type mice have a lower ability to release nitric oxide and hydrogen peroxide when compared with macrophages from Xid mice. Experiments using cocultures of B-1 cells and macrophages from Xid mice in transwell plates demonstrated that B-1 cells down-regulate macrophage activities. These observations also indicate that this phenomenon is not due to a physical interaction between these two cell populations. As B-1 cells are one of the main sources of interleukin (IL)-10, we demonstrate in this study that adherent peritoneal cells from Xid mice produce significantly less amounts of this cytokine in culture when compared with IL-10 production by cells from wild-type mice. When B-1 cells from IL-10 knock-out mice and macrophages from wild-type mice were cocultured in transwell plates, the phagocytic index of macrophages was not altered demonstrating that B-1 cells can influence the effector functions of macrophages in vitro via IL-10 secretion.

Effects of bovine Herpesvirus Type 5 on development of in vitro-produced bovine embryos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Evaluation of developmental changes in bovine in vitro produced embryos following exposure to bovine Herpesvirus type 5

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

In vitro conservation and low cost micropropagation of Cochlospermum regium (Mart. Ex. Scharank)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

IL-12 and neutralization of endogenous IL-10 revert the in vitro antigen-specific cellular immunosuppression of paracoccidioidomycosis patients

Treatment of patients with paracoccidioidomycosis is still a challenge. Patients present defective lymphoproliferation and IFN-γ responses to the main Paracoccidioides brasiliensis antigen (gp43), which correlates with disease severity. Here, we demonstrated that the patients show also a defective synthesis of interleukin (IL)-12. Therefore, we attempted to revert this immune disfunction by adding IL-12 and neutralizing anti-IL-10 antibody to gp-43-stimulated peripheral blood mononuclear cell cultures. Both treatments increased IFN-γ secretion to levels observed with healthy sensitized individuals, but affected proliferation only modestly. When combined, the treatments further increased IFN-γ synthesis and cell proliferation. The addition of suboptimal concentrations of IL-2 also further increased the IL-12-mediated secretion of IFN-γ. Interestingly, the immune modulation was mostly antigen-specific, since the responses to Candida albicans' antigen were not affected. These results suggest that appropriate immune intervention with cytokines and/or anti-cytokines may help in the treatment of PCM. © 2002 Elsevier Science Ltd. All rights reserved.

Biological control of sheep parasite nematodes by nematode-trapping fungi: In vitro activity and after passage through the gastrointestinal tract

The main method used for the control of gastrointestinal nematodes in sheep production is the application of chemotherapeutic agents, which often lead to the selection of parasites resistant to given active principles. Biological control can be considered a promising alternative, contributing to an increase in the efficacy of verminous control. We determined the in vitro activity and in situ survival of the predatory fungi Arthrobotrys musiformis and Arthrobotrys conoides during passage through the gastrointestinal tract of sheep after oral administration of conidia in microencapsulated form and as a liquid in natura. Initial in vitro tests showed that both fungi were efficient in the predation of trichostrongylid L3 larvae present in the faeces of sheep naturally infected with gastrointestinal nematodes. The fungi presented high nematophagous activity, which was 99.3% for A. conoides and 73.7% for A. musiformis. A. conoides did not survive passage through the gastrointestinal tract under the conditions of the present experiment. On the other hand, A. musiformis was reisolated after administration in either microencapsulated or liquid form, suggesting that this species is a promising alternative for the control of nematodes in sheep since it survives without any protection (in natura). © Springer 2005.

Enraizamento in vitro e aclimatização de mudas micropropagadas de Aloe vera L.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)