Avaliação do metabolismo oxidativo em cepas de Trypanosoma cruzi naturalmente resistentes ao benzonidazol

O agente etiológico da doença de Chagas, Trypanosoma cruzi, é responsável pela infecção de milhões de pessoas na América Latina. No momento há apenas dois fármacos disponíveis, o nifurtimox (5-nitrofurano), teve o uso descontinuado no Brasil, e o benzonidazol (2-nitroimidazole), embora ambos possuam ações limitadas, visto que dependem da fase da doença, das condições fisiológicas do hospedeiro, da suscetibilidade e variabilidade genética da cepa. Assim, a busca de novas moléculas torna-se urgente e necessária, bem como a compreensão do mecanismo de resistência aos fármacos tripanocidas. Alguns estudos relatam aumento na produção de enzimas que atuam na defesa celular, as quais, provavelmente, poderiam ser responsáveis pela resistência de certas cepas do parasita. Tais enzimas têm funções importantes na sobrevivência e crescimento dos parasitas: superóxido dismutase (SOD), uma metaloenzima que elimina radicais superóxido ao convertê-los em peróxido de hidrogênio e oxigênio molecular; old yellow enzyme (OYE), que é uma NADPH flavina oxidoredutase e pode estar envolvida na redução de substâncias tripanocidas; e, peroxiredoxina (Prx), que catalisa a redução de peróxidos. O objetivo deste projeto é avaliar a suscetibilidade de diferentes cepas ao benzonidazol, clonar, sequenciar e expressar enzimas possivelmente envolvidas na resistência a este fármaco e realizar análises morfológicas serão nos parasitos após serem expostos à substância em questão. Futuramente os anticorpos policlonais obtidos a partir das proteínas recombinantes de Prx, SOD e OYE serão empregados para avaliar o nível de expressão das mesmas em parasitas tratados e não tratados com o benzonidazol.

Efeitos da injeção intracerebroventricular de peróxido de hidrogênio ou de ATZ sobre a resposta pressora da angiotensina II centralmente

As espécies reativas de oxigênio podem participar de mecanismos envolvidos em respostas fisiológicas, como os efeitos hipertensores e dipsogênicos da angiotensina II (ANG II) central, que seriam pelo menos em parte devidos a produção de radical superóxido (O2 −). Por isso, uma superexpressão da enzima superóxido dismutase que reduz a disponibilidade de O2 − convertendo-o em peróxido de hidrogênio (H2O2) inibiria o efeito pressor da ANG II administrada centralmente. Porém, alguns resultados de nosso laboratório demonstram que H2O2 injetado intracerebroventricularmente (icv) reduz a ingestão de água induzida pela ANG II em ratos normotensos. Portanto, no presente trabalho propomos estudar os efeitos de injeções de H2O2 ou de ATZ (inibidor da catalase) sozinhos ou combinados no ventrículo lateral (VL) e também os efeitos do ATZ injetado intravenosamente (i.v.) sozinho ou combinado com H2O2 no VL sobre a resposta pressora da ANG II também injetada no VL em ratos normotensos, espontaneamente hipertensos (SHRs) ou em ratos com hipertensão renovascular do tipo 2 rins 1 clipe (2R1C). Foram utilizados ratos Holtzman normotensos, SHRs e ratos com hipertensão renovascular 2R1C com cânulas de aço inoxidável previamente implantadas no VL. A pressão arterial e a freqüência cardíaca foram registradas em sistema computadorizado diretamente da aorta em ratos não anestesiados por uma cânula de polietileno introduzida pela artéria femoral e a injeção i.v. foi realizada por meio de uma cânula de polietileno introduzida na veia femoral. A pressão arterial e freqüência cardíaca foram registradas continuamente desde 30 minutos antes da primeira injeção (veículo, salina, H2O2 ou ATZ) até 30 minutos após a injeção de ANG II. Os resultados demonstraram que a injeção icv de H2O2 (5 μmol/1 μL) reduziu fortemente a reposta pressora produzida pela injeção... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Síntese e estudo da diapocinina como um inibidor da NADPH Oxidase em neutrófilos e células mononucleares de sangue periférico

Apocynin, a methoxy-catechol originally extracted from the root of Picrorhiza kurroa, has been used as an inhibitor of the NADPH oxidase complex in phagocytic and nonphagocytic cells. Its mechanism of inhibition is linked to their prior activation through the action of peroxidases leading to oxidation of the dimeric product, diapocynin. In this study, dipocinina was synthesized and investigated its effect as an inhibitor of activation NADPH oxidase in neutrophils (PMN) and peripheral blood mononuclear cells (PBMC). The synthesis of diapocinina was performed by oxidation of apocinina by potassium persulphate in the midst of water for 5 minutes at room temperature. The precipitate was filtered and washed with water and methanol. Diapocinina was characterized by mass spectrometry. PMN and PBMC were obtained from peripheral blood of healthy donors and purified for gelatin sedimentation, or centrifugation with Histopaque ®, the red cells were lysed with ice water or ammonium chloride. Diapocinina or apocinina were incubated with opsonized zymosan, activation of PMNs and release of superoxide anion, these monitored by chemiluminescent assay dependent lucigenina. We found that diapocinina inhibitor was no better than the apocinina in PMN. However, diapocinina was more efficient than apocinina as an inhibitor of NADPH oxidase in PBMC. In conclusion, whereas PBMC are relatively poor compared with peroxidases PMN, our results are consistent with the need for oxidation apocinina for its effect as an inhibitor of NADPH oxidase

Avaliação das propriedades antioxidantes da Curcumina em sistemas-modelo in vitro

A curcumina, um pigmento natural extraído do rizoma da Curcuma longa L. é utilizada em alimentos, principalmente aqueles condimentados com curry e açafrão. Vários estudos demonstram seu efeito benéfico em diversas doenças, tais como: diabetes, hepatopatias, câncer, entre outras. Uma de suas propriedades é a atividade antioxidante, pois em pequenas quantidades é capaz de inibir ou retardar processos oxidativos. Para substanciar o estudo desta propriedade, comparou-se a capacidade de captura de espécies reativas radicalares e não radicalares pela curcumina, com padrões (biomoléculas, exceto o trolox) antioxidantes: ascorbato, crocina, glutationa, quercetina, rutina, trolox e urato, em sistemas-modelo in vitro, sobre a captura dos radicais: 2-2'-azino-bis (3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfônico) (ABTS●+ ); 2,2-difenil-1 picril-hidrazila (DPPH● ); ânion radical superóxido (O2 ●-); HOCl/OCl- e H2O2. Investigou-se também seu efeito inibitório na geração do HOCl no sistema, mieloperoxidase (MPO)/H2O2/Cl- (via clorinante) e na inibição da oxidação do guaiacol MPO/H2O2/Guaiacol (via peroxidativa). A curcumina nos ensaios com ABTS●+ ou O2 ●-, apresentou o 3° menor IC50, 4,93 e 99,66 µmol/L, respectivamente; com o DPPH● apresentou o 6° menor IC50, 24,70 µmol/L; com o HOCl/OCl- apresentou o menor IC50, 1,12µmol/L e no ensaio com o H2O2 não atingiu o IC50. No ensaio com o sistema MPO/H2O2/Cl-, observou-se alteração da banda de absorção (bleaching) da curcumina (420 nm), além disso, nos ensaios com a via clorinante (MPO/H2O2/Cl-) e revelados com 3, 3’, 5, 5’- tetrametilbenzidina (TMB) e iodeto de potássio em meio ácido, observou-se aumento da absorbância (650 nm), o que impossibilitou o estudo de sua inibição nesta via. Entretanto, na via peroxidativa, observou-se uma diminuição significativa da absorbância do produto de oxidação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Antioxidantes e biomarcadores da injúria oxidativa na saliva de pacientes com síndrome de down

Vulnerability of patients with Down syndrome (DS) to oxidative stress and damage has been attributed to the overexpression of the superoxide dismutase gene, which is located in the triplicated critical region 21q22.2 of chromosome 21. The objective of this study was to investigate enzymatic and non-enzymatic antioxidant systems and levels of biomarkers of oxidative damage in saliva of patients with DS. Saliva samples were collected from 30 patients with DS and 30 controls, ranging in age from 14 to 24 years. The following parameters were analyzed: superoxide dismutase activity, concentration of malondialdehyde, carbonylated proteins, uric acid, vitamin C and total protein, peroxidase activity, and total antioxidant capacity. Patients with DS presented significantly higher superoxide dismutase activity and malondialdehyde levels than controls (p<0.05). On the other hand, no difference in carbonylated proteins or antioxidants (uric acid, vitamin C, peroxidase, and total antioxidant capacity) was observed between DS patients and controls (p>0.05). Patients with DS also presented higher salivary total protein content (p<0.05). In conclusion, despite similar antioxidant levels patients with DS are more vulnerable to oxidative stress in saliva as indicated by a significant increase in malondialdehyde concentration and superoxide dismutase activity

Avaliação da atividade antioxidante de Qualea parviflora sobre a doença inflamatória intestinal e a úlcera gástrica induzidas em roedores

Pós-graduação em Biologia Geral e Aplicada - IBB

Maturação e aquisição de tolerância à dessecação de sementes de Annona emarginata (Shltdl.) H. Rainer

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Alterações em marcadores do estresse oxidativo ocasionadas por diferentes tempos de tratamento com chá mate (Ilex paraguariensis) no processo de envelhecimento

Pós-graduação em Ciências fisiológicas

Reguladores vegetais e alguns nutrientes minerais no desenvolvimento de plantas de tomateiro Pizzadoro enxertadas e não enxertadas

Pós-graduação em Agronomia (Horticultura) - FCA

Respostas bioquímicas e fisiológicas de plantas jovens de cana-de-açúcar sob diferentes concentrações de NaCl no solo

Pós-graduação em Agronomia (Produção Vegetal) - FCAV

Annona emarginata (Schltdl.) H. Rainer 'araticum-de-terra-fria' cultivada com variação de nitrogênio: produtividade e perfil químico dos voláteis foliares

Pós-graduação em Agronomia (Horticultura) - FCA

Predição de sítios de ligação para a cisplatina e transplatina baseada em ligações de hidrogênio

Pós-graduação em Biofísica Molecular - IBILCE

Effect of potassium sources on the antioxidant activity of eggplant

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Chemical, enzymatic and cellular antioxidant activity studies of Agaricus blazei Murrill

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeito Diabetes mellitus gestacional na modulação de genes relacionados ao metabolismo mitocondrial e a implicação na predisposiçao do recém-nascido à obesidade

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)