171 resultados para NADH Tetrazolium Reductase


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Alcoholism is rampant in modern society and some antioxidant compound could perhaps be useful to reduce the damage done by alcohol consumption and abstinence. The present study was undertaken to investigate the association of N-acetylcysteine (NAC) intake, alcoholism, and alcohol abstinence on lipid profile, in vivo low-density lipoprotein (LDL) oxidation, oxidative stress, and antioxidant status in serum and liver of rats. Initially, male Wistar 30 rats were divided into two groups: (C, N = 6) given standard chow and water; (E, N = 24) receiving standard chow and aqueous ethanol solution in semi-voluntary research. After 30 days of ethanol exposure, (E) group was divided into four subgroups (N = 6/group): (E-E) continued drinking 30% ethanol solution; (E-NAC) drinking ethanol solution containing 2 g/L NAC (AB) changed ethanol solution to water; (AB-NAC) changed ethanol to aqueous solution 2 g/L NAC. After 15 days of the E-group division, E-E rats had higher serum alanine transaminase, lower body weight, and surface area, despite higher energy intake than C. E-E rats had also lower feed efficiency, dyslipidemia with enhanced triacyl glycerol, very low-density lipoprotein (VLDL), lipid hydroperoxide (LH) and in vivo oxidized-LDL (ox-LDL). AB, E-NAC, and AB-NAC rats ameliorated serum oxidative stress markers and normalized serum lipids. E-E rats had higher hepatic LH and lower reduced glutathione (GSH)/oxidized glutathione (GSSG) ratio than C, indicating hepatic oxidative stress. AB and E-NAC rats normalized hepatic LH, GSSG, and the GSH/GSSG ratio, compared to E-E. AB-NAC rats had the lowest serum ox-LDL, hepatic LH levels, and the highest GSH reductase activity in hepatic tissue. In conclusion, the present study brought new insights into alcohol consumption, because ethanol exposure enhanced serum in vivo ox-LDL, as well as serum and hepatic oxidative stress. N-acetylcysteine offers promising therapeutic value to inhibit ethanol-induced adverse effects. Ethanol withdrawal had beneficial effects on serum lipids, but was more effective when coupled with NAC supplementation. Ethanol abstinence and NAC intake interact synergistically, improving serum lipids and hepatic antioxidant defenses. (c) 2009 Elsevier B.V. All rights reserved.

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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

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A colorimetric method has been developed and optimized to measure L-malic acid in samples of fruit juices and wine. This method is based on oxidation of the analyte, catalyzed by malate dehydrogenase (MDH) from dry baker's yeast, and in combination with the reduction of a tetrazolium salt (MTT: 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide). In the present study, the method exhibited sensitivity in the range of 500-4000 mu M of L-malic acid in the reaction cuvette, with the lower detection limit of 6.7-10(-2) g/L, the upper limit of 53.6.10(-2) g/L and a maximum standard deviation of only 2.5 % for the analyzed samples. The MDH activity from baker's yeast was also optimized, the enzyme showed a high stability at pH=8.0-9.0 and the activity was maintained completely at temperatures up to 40 degrees C for 1 hour. The results show that the colorimetric method using enzymatic preparations from dry baker's yeast is a simple and low-cost method with possibility of wide application.

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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Resistance in Mycobacterium tuberculosis to isoniazid (INH) is caused by mutations in the catalase-peroxidase gene (katG) , and within the inhA promoter and/or in structural gene. A small percentage (~ 10%) of INH-resistant strains do not present mutations in both of these loci. Other genes have been associated with INH resistance including the gene encoding for NADH dehydrogenase (ndh) . Here we report the detection of two ndh locus mutations (CGT to TGT change in codon 13 and GTG to GCG change in codon 18) by analyzing 23 INH-resistant and in none of 13 susceptible isolates from Brazilian tuberculosis patients. We also detected two isolates without a mutation in ndh, or any of the other INH resistance-associated loci examined, suggesting the existence of additional, as yet to be described, INH resistance mechanisms.

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Considerando que a palha pode alterar a dinâmica e a eficácia dos herbicidas no sistema de cana-crua e complementar a ação destes, o objetivo deste trabalho foi verificar a eficácia do amicarbazone no controle de plantas daninhas presentes em variadas circunstâncias, incluindo a possibilidade de absorção do herbicida diretamente da palha de cana-de-açúcar. Para isso, conduziu-se um experimento em vasos com quatro repetições, em que, além das testemunhas com e sem palha, o amicarbazone foi aplicado em diferentes situações: sobre 5 t ha-1 de palha; sobre o solo posteriormente recoberto com 5 t ha-1 de palha; sobre o solo sem cobertura de palha e com ou sem simulação de distintas quantidades de chuva aplicada antes ou após aplicação do produto. A dose de amicarbazone aplicada foi de 1.400 g ha-1 de ingrediente ativo (i.a.), com consumo de calda equivalente a 200 L ha-1. As plantas daninhas utilizadas foram Brachiaria plantaginea, Brachiaria decumbens, Ipomoea grandifolia e Cyperus rotundus. Avaliaram-se a porcentagem de controle das plantas daninhas aos 7, 14, 21, 28, 35, 42, 49 e 56 DAA, nos tratamentos em que o amicarbazone foi aplicado em pré-emergência, e aos 3, 10, 17, 24, 31 e 38 DAA, quando o herbicida foi aplicado em pós-emergência; a biomassa seca aos 56 ou 38 DAA; e a viabilidade dos tubérculos de C. rotundus, pelo teste de tetrazólio na última avaliação. Verificou-se que, independentemente da planta daninha avaliada, os maiores índices de controle foram alcançados quando o amicarbazone foi aplicado sobre a palha, simulando-se em seguida precipitação correspondente a 2,5 ou 30 mm de chuva, e nos tratamentos em que o herbicida foi aplicado diretamente no solo desnudo ou recoberto com palha. Dessa forma, para I. grandifolia, B. plantaginea e B. decumbens, patamares mais elevados de controle foram alcançados quando o amicarbazone atingiu o solo, tanto aplicado diretamente como quando lixiviado da palha pela chuva simulada após a aplicação. Já para C. rotundus, as maiores porcentagens de controle foram observadas quando o amicarbazone foi aplicado sobre a palha, com simulação de chuva imediatamente após a aplicação, evidenciando que a lixiviação pode ser um processo fundamental para uma apropriada absorção e eficácia do herbicida avaliado.

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The free form of the iron ion is one of the strongest oxidizing agents in the cellular environment. The effect of iron at different concentrations (0, 1, 5, 10, 50, and 100 µM Fe3+) on the normal human red blood cell (RBC) antioxidant system was evaluated in vitro by measuring total (GSH) and oxidized (GSSG) glutathione levels, and superoxide dismutase (SOD), catalase, glutathione peroxidase (GSH-Px) and reductase (GSH-Rd) activities. Membrane lipid peroxidation was assessed by measuring thiobarbituric acid reactive substance (TBARS). The RBC were incubated with colloidal iron hydroxide and phosphate-buffered saline, pH 7.45, at 37oC, for 60 min. For each assay, the results for the control group were: a) GSH = 3.52 ± 0.27 µM/g Hb; b) GSSG = 0.17 ± 0.03 µM/g Hb; c) GSH-Px = 19.60 ± 1.96 IU/g Hb; d) GSH-Rd = 3.13 ± 0.17 IU/g Hb; e) catalase = 394.9 ± 22.8 IU/g Hb; f) SOD = 5981 ± 375 IU/g Hb. The addition of 1 to 100 µM Fe3+ had no effect on the parameters analyzed. No change in TBARS levels was detected at any of the iron concentrations studied. Oxidative stress, measured by GSH kinetics over time, occurs when the RBC are incubated with colloidal iron hydroxide at concentrations higher than 10 µM of Fe3+. Overall, these results show that the intact human RBC is prone to oxidative stress when exposed to Fe3+ and that the RBC has a potent antioxidant system that can minimize the potential damage caused by acute exposure to a colloidal iron hydroxide in vitro.

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O presente trabalho teve o objetivo de avaliar o efeito do tratamento fungicida durante e após a armazenagem, na qualidade fisiológica de sementes de soja. Utilizaram-se sementes da cultivar BR-16, produzidas na safra de 1999/2000 e armazenadas em Marechal Cândido Rondon - PR. Para o tratamento utilizou-se a mistura de carbendazin + thiram, na dosage de 30 e 70g de i.a./100kg de semente, respectivamente. Realizou-se o tratamento de amostras mensalmente, de maio a dezembro de 2000, sendo as sementes analisadas imediatamente após o procedimento. Sementes sem tratamento representaram a testemunha. As amostras tratadas e armazenadas foram analisadas e comparadas com as tratadas e analisadas imediatamente antes da semeadura (dezembro de 2000). A qualidade das sementes foi avaliada através dos testes de germinação, de tetrazólio para vigor e viabilidade e emergência em campo. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com quatro repetições por tratamento para cada teste. Realizou-se a comparação das médias através do teste de Tukey a 5% de probabilidade. O teste de germinação e o de tetrazólio não evidenciaram efeito negativo do tratamento fungicida anterior ao período de armazenagem sobre a qualidade das sementes. As sementes tratadas e não apresentaram decréscimo de viabilidade e de vigor, atingindo valores de germinação inferiores a 75%, em dezembro de 2000. Na emergência em campo, constatou-se que as sementes mantidas tratadas por mais de quatro meses apresentaram desempenho inferior comparativamente às tratadas nas demais épocas.

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Este trabalho teve como objetivos padronizar a metodologia do teste de tetrazólio e avaliar a aplicabilidade deste para estimar a viabilidade de sementes de Gleditschia amorphoides. Inicialmente, foram avaliados os seguintes tratamentos de pré-condicionamento: semente intacta, escarificação mecânica, escarificação seguida de 24 ou 48 horas de embebição em água, com e sem posterior retirada do tegumento. em seguida, as sementes foram submetidas a 1, 3 ou 6 horas de coloração em solução de 2, 3, 5 trifenil cloreto de tetrazólio às concentrações de 0,025; 0,050; 0,075 ou 0,10% a 35ºC, no escuro. Sementes escarificadas e embebidas por 48 horas, com retirada do tegumento, imersas em solução de tetrazólio a 0,075% por 3 horas apresentaram coloração ideal, possibilitando a identificação das sementes em viáveis e inviáveis. Utilizando o protocolo acima descrito, avaliou-se a adequação do teste de tetrazólio em estimar a viabilidade de sementes de Gleditschia amorphoides através da comparação com o teste de germinação. A comparação não resultou em diferenças significativas entre eles. O teste de tetrazólio utilizando solução a 0,075% por 3 horas pode ser utilizado na estimativa da viabilidade de sementes de Gleditschia amorphoides.

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Na avaliação da qualidade de sementes pode ser necessária a hidratação das mesmas, como ocorre no teste de deterioração controlada que requer a uniformização do teor de água na amostra de sementes antes do processo de deterioração. Objetivou-se com o presente trabalho avaliar o potencial fisiológico de sementes de milho após a hidratação pelo método do substrato de papel toalha, sob diferentes temperaturas e quantidades de água no substrato, para elevar o teor de água para 15%, 20% e 25%. Foram avaliadas três quantidades de água no substrato (2,0; 2,5 e 3,0 vezes a massa do papel), sob temperaturas de 20 e 30°C. A qualidade inicial das sementes e após a hidratação foi determinada pelos seguintes testes: teor de água, massa de mil sementes, germinação, massa seca de plântulas, teste de frio, envelhecimento acelerado, condutividade elétrica, tetrazólio, porcentagem e velocidade de emergência das plântulas em campo. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey, a 5%, seguindo o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial (3x2), independentemente para cada teor de água. A hidratação pelo método do substrato de papel toalha não afetou a germinação de sementes de milho, independentemente da temperatura e das proporções de água no substrato. As proporções de 2,0 e 2,5 vezes a massa do substrato papel toalha em água para a temperatura de 30°C e de 3,0 vezes a massa do substrato para a temperatura de 20°C não alteraram o potencial fisiológico das sementes, mostrando-se adequadas para hidratação de sementes de milho para teores de água de 15, 20 e 25%.

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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)