Alterações vasculares em ratos obesos por dieta rica em gordura: papel da Via L-arginina/NO Endotelial

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

The tricyclic antidepressants amitriptyline, nortriptyline and imipramine are weak antagonists of human and rat alpha(1B)-adrenoceptors

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Expression and processing of recombinant sarafotoxins precursor in Pichia pastoris

Sarafotoxins are peptides isolated from the Atractaspisw snake venom. with strong constrictor effect on cardiac and smooth muscle. They are structurally and functionally related to endothelins. The sarafotoxins precursor cDNA predicts an unusual structure 'rosary-type', with 12 successive similar stretches of sarafotoxin (SRTX) and spacer, in the present work, the recombinant precursor of SRTXs was sub-cloned and expressed in the yeast Pichia pastoris. and secreted to the culture medium, Characterization by SDS-PAGE, immunoblot, mass spectrometry and biological activity, suggests that intact precursor was expressed but processing into mature toxins also occurred. Furthermore, our results indicate that the correct proportion of sarafotoxin types as contained in the precursor, is obtained in the yeast culture medium. Contractile effects of the expressed toxins, on rat and Bothrops jararaca isolated aorta, were equivalent to 5 X 10(-10) M and 5 x 10(-11) M of sarafotoxin b, respectively. The enzymes responsible for the complete maturation of sarafotoxins precursor are still unknown. Our results strongly suggest that the yeast Pichia pastoris is able to perform such a maturation process. Thus, the yeast Pichia pastoris may offer an alternative to snake venom gland to tentatively identify the molecular process responsible for SRTXs release. (C) 2001 Elsevier B.V. Ltd. All rights reserved.

Reactivity of mesenteric and aortic rings from trained rats fed with high caloric diet

A strong association between the benefits of physical exercise on the cardiovascular disease with an improvement of the endothelium-derived relaxing factor production has been consistently shown. The purpose of this study was to evaluate the effect of exercise training associated with high caloric diet in the reactivity of rat mesenteric and aortic rings. Experimental protocol consisted of 4 weeks of high caloric diet consumption previous to 4 weeks of run training (1.2 km/h, 0% grade, in sessions of 60 min, 5 days/week). Concentrations of triglycerides, glucose, insulin and nitrite/nitrate levels were measured and atherogenic index was calculated. Concentration-response curves to acetylcholine (10 nM-100 mu M), sodium nitroprusside (100 pM-100 nM) and phenylephrine (1 nM-3 mu M) were obtained. Exercise training reduced body mass (6%) and triglyceride levels (about 54%), without changes in glucose and insulin concentrations. An improvement of endothelium-dependent relaxation responses to acetylcholine in mesenteric and aortic rings was observed in trained group. No changes were seen for sodium nitroprusside and phenylephrine. In conclusion, our study is the first to show clearly that run training promotes an improvement of the endothelium-dependent relaxing response in aorta and mesenteric rings from rats fed with high caloric diet and that is associated with increase of NO production. (c) 2006 Elsevier B.V. All rights reserved.

Red blood cells from the South American rattlesnake (Crotalus durissus terrificus) regulate volume incompletely following osmotic shrinkage and swelling in vitro

The ability of rattlesnake (Crotalus durissus terrificus) red blood cells to volume regulate in vitro has been investigated. Blood was drawn through a catheter inserted in the dorsal aorta and equilibrated to gas mixtures of different composition. Cells shrunken osmotically by increasing the extracellular osmolarity from approximate to 291 mosm l(-1) (n = 3) to approximate to 632 mosm l(-1) (calculated) only partially regulated their volume back towards the original volume either at pH 7.51 +/- 0.05 (mean +/- S.D., n = 5) or pH 7.20 +/- 0.06 (mean +/- S.D., n = 3), There was no improvement of the regulatory volume increase at low haemoglobin oxygen saturation. The limited volume restoration was inhibited by separate additions of amiloride (10(-4) M) or DIDS (10(-4) M) suggesting involvement of the Na+/H+ and Cl-/HCO3- exchangers. Cells that were swollen osmotically by an approximate to 30% dilution of the extracellular medium also exhibited a limited ability to recover their volume. Therefore, these cells show little ability to volume regulate when exposed to in vitro conditions that shrink or swell the cell. (C) 2000 Elsevier B.V. All rights reserved.

Diet of the colubrid snake, Thamnodynastes strigatus (Günther, 1858) from Paraná State, Brazil, with field notes on anuran predation

São apresentados dados da dieta de Thamnodynastes strigatus (Serpentes: Colubridae), a partir da dissecção de 44 espécimes. No tubo digestivo dos exemplares examinados foram encontrados anfíbios anuros (71,4% da amostra), roedores (14,3%), peixes (10,7%) e lagartos (3,6%). A maioria das espécies de anuros (Bufo sp., Leptodactylus sp., Physalaemus cuvieri e Scinax fuscovarius) encontradas no exame de conteúdo estomacal de T. strigatus, utiliza o solo ou o nível d'água como sítio de vocalização. Também são apresentados dados sobre a observação de eventos de predação na natureza.

Anatomia de um caso de dextrocardia com Situs Solitus

Apresentamos um caso raro de dextrocardia em um cadáver feminino com idade aproximada de um ano, apresentando situs solitus. Normalmente, os casos de dextrocardia relatados na literatura descrevem múltiplas malformações cardíacas associadas. No presente estudo, tem grande relevância o fato de não ter sido encontrada uma completa imagem especular do coração e dos vasos da base. Não foram encontradas discordância atrioventricular ou outras malformações intra e extracardíacas que são comumente incidentes em casos de dextrocardia. No entanto, foram encontradas a presença de um grande ducto arterioso, bem como uma posição anômala da parte direita do coração.

End-systolic pressure-diameter relation of the left ventricle during transient and sustained elevations of blood pressure

OBJECTIVE: To assess the effect of transient and sustained variations in cardiac load on the values of the end-systolic pressure-diameter relation (ESPDR) of the left ventricle. METHODS: We studied 13 dogs under general anesthesia and autonomic blockade. Variations of cardiac loads were done by elevation of blood pressure by mechanical constriction of the aorta. Two protocols were used in each animal: gradual peaking and decreasing pressure variation, the transient arterial hypertension protocol (TAH), and a quick and 10 min sustained elevation, the sustained arterial hypertension protocol(SAH). Then, we compared the ESDR in these two situations. RESULTS: Acute elevation of arterial pressure, being it transitory or sustained, did not alter the heart frequency and increased similarly the preload and after load. However, they acted differently in end systolic pressure-diameter relation. It was greater in the SAH than TAH protocol, 21.0±7.3mmHg/mm vs. 9.2±1.2mmHg/mm (p<0.05). CONCLUSION: The left ventricular ESPDR values determined during sustained pressure elevations were higher than those found during transient pressure elevations. The time-dependent activation of myocardial contractility associated with the Frank-Starling mechanism is the major factor in inotropic stimulation during sustained elevations of blood pressure, determining an increase in the ESPDR values.

Tolerância ao esforço em ratos com estenose aórtica e disfunção ventricular diastólica e/ou sistólica

FUNDAMENTO: A Tolerância ao Esforço Físico (TEF) é uma medida de condicionamento cardiorrespiratório. A capacidade aeróbica é reduzida na Insuficiência Cardíaca (IC), embora não haja dados disponíveis sobre esse parâmetro em animais com disfunção ventricular e sem sinais de IC. OBJETIVO: Avaliar a TEF em ratos com disfunção ventricular diastólica isolada ou associada com disfunção sistólica induzida pela Estenose da Aorta ascendente (EAo). MÉTODOS: Ratos Wistar machos jovens (20-30 dias de idade) foram divididos em Grupo Controle (GC, n = 11) e Grupo EAo (n = 12). Os animais foram avaliados em 6 e 18 semanas após a cirurgia para EAo. O teste ergométrico foi feito até a exaustão e foram avaliadas a velocidade da esteira e a concentração de lactato [LAC] no limiar de lactato, velocidade da esteira e [LAC] na exaustão, e tempo total do teste. RESULTADOS: Dados ecocardiográficos revelaram remodelação do átrio esquerdo e hipertrofia concêntrica ventricular esquerda em 6 e 18 semanas. A fração de encurtamento endocárdico mostrou-se maior no grupo EAo do que no GC em 6 e 18 semanas. A fração de encurtamento da parede média mostrou-se maior no grupo EAo do que no GC em 6 semanas. O índice cardíaco mostrou-se semelhante no GC e no grupo EAo em 6 e 18 semanas, tendo diminuído entre 6-18 semanas em ambos os grupos. A razão entre a onda E a onda A foi maior no GC do que no grupo EAo em ambos os períodos e não se alterou em ambos os grupos entre a semana 6 e a semana 18. Os parâmetros do teste de esforço na esteira foram semelhantes nos dois grupos tanto na semana 6 quanto na semana 18. CONCLUSÃO: Embora a EAo promova a disfunção diastólica isolada ou associada à disfunção sistólica, em 6 ou 18 semanas, ela não é suficiente para alterar a tolerância ao esforço físico.

Aortic aneurysm surgery: problems and innovations

Um longo caminho foi percorrido desde as primeiras intervenções cirúrgicas feitas para o tratamento do aneurisma de aorta abdominal. Ao longo deste tempo, várias inovações foram criadas, no sentido de reduzir a invasividade dos procedimentos e melhorar sua segurança e durabilidade. Nesta revisão, são discutidos os principais e recentes avanços em intervenções sobre aneurismas aórticos, incluindo a restauração aórtica endovascular, a cirurgia aórtica videolaparoscópica, as técnicas híbridas convencionais e endovasculares, as técnicas combinadas videolaparoscópicas e endovasculares, bem como as perspectivas futuras, tanto para aorta torácica como abdominal. Diante de tantas transformações e evolução, o cirurgião vascular moderno terá que ter sua mente aberta para as novidades e desenvolver capacitação ampla com diferentes técnicas para proporcionar a melhor opção terapêutica para seus pacientes.

Cirurgia aorto-ilíaca videolaparoscópica para tratamento de isquemia crítica de membros: relato do primeiro caso no Brasil

A cirurgia videolaparoscópica vem evoluindo como alternativa cirúrgica menos invasiva para o tratamento da doença aterosclerótica oclusiva aorto-ilíaca. O objetivo deste relato é demonstrar os resultados da primeira cirurgia videolaparoscópica realizada no Brasil para o tratamento da doença oclusiva aorto-ilíaca, associada a procedimentos híbridos distais para lesões ateroscleróticas multissegmentares em paciente com isquemia crítica. A técnica videolaparoscópica é mais uma ferramenta minimamente invasiva, viável, segura e eficaz para o tratamento da doença oclusiva aorto-ilíaca extensa. A referida técnica, que nada mais é do que a cirurgia convencional realizada sob visão laparoscópica, tem bons resultados a longo prazo, associados à elegância técnica.

Avaliação manométrica do esôfago distal de coelhos submetidos a fundoplicatura total laparotômica e laparoscópica

Racional - A fundoplicatura total, procedimento empregado no tratamento da doença do refluxo gastroesofágico, pode ser realizada segundo duas técnicas de abordagem: laparotômica e laparoscópica. Objetivo - Analisar o esfíncter inferior do esôfago de coelhos submetidos a fundoplicatura total laparotômica e laparoscópica. Material e Métodos - em 40 coelhos machos foram realizados estudos eletromanométricos do esôfago segundo a técnica de puxada intermitente da sonda e infusão contínua dos cateteres com água destilada. Estes estudos permitiram a análise de dois parâmetros: amplitude da pressão no esfíncter inferior do esôfago (mm Hg) e comprimento do esfíncter inferior do esôfago em condições basais (momento 1). Os 40 animais foram divididos em quatro grupos de 10, na dependência do procedimento cirúrgico realizado: grupo 1: fundoplicatura total laparotômica; grupo 2: laparotomia mediana e dissecção da transição gastroesofágica; grupo 3: fundoplicatura total laparoscópica; grupo 4: pneumoperitônio e dissecção da transição gastroesofágica. No momento 2 (1 semana após os procedimento cirúrgicos) foram realizados estudos eletromanométricos do esôfago em todos os animais. Resultados - Nos animais do grupo 1 (fundoplicatura laparotômica) e do grupo 3, foi observado aumento da amplitude da pressão e do comprimento do esfíncter inferior do esôfago. Naqueles dos grupos 2 e 4, não foi observada alteração da amplitude e do comprimento do esfíncter inferior do esôfago. Conclusões - A fundoplicatura interfere na barreira anti-refluxo gastroesofágica, tornando-a mais eficiente, uma vez que a pressão e o comprimento do esfíncter inferior do esôfago elevam-se no pós-operatório desta intervenção. Este efeito foi observado nas duas técnicas de abordagem estudadas, laparotômica e laparoscópica.

Avaliação ultra-sonográfica do sistema urinário, figado e útero do macaco-prego, Cebus apella

O macaco-prego, Cebus apella, é muito difundido no norte e sul da Amazônia Legal Brasileira e no Cerrado. Estes animais encontram-se rotineiramente submetidos à caça predatória, aumentando assim a necessidade de preservação desta espécie silvestre. Realizou-se um estudo ultra-sonográfico de 10 macacos-prego como forma de descrever a anatomia ultra-sonográfica normal de sua cavidade abdominal. A vesícula urinária apresentou parede com espessura média 0,2cm e em posição anatômica cuja topografia permitiu contato com as paredes do corpo do útero e cólon descendente. À varredura abdominal caudal foi visualizada a aorta, veia cava caudal e veia ilíaca direita. O fígado foi visto em varredura sagital e transversal, possibilitando a observação da vesícula biliar e vasos hepáticos. A varredura renal demonstrou com precisão a pelve, seio renal e relação cortico-medular. O comprimento médio de ambos os rins foi de 6,24±0,31cm, não existindo diferença estatística entre o rim direito e esquerdo (Teste t de Student e ANOVA). O volume renal foi 2,37±0,18cm³. Os coeficientes de Correlação de Pearson entre os comprimentos renais direito e esquerdo e entre volumes renais direito e esquerdo foram dispostos como r = 0,74 e 0,51. As espessuras médias para a região cortical e medular foram 0,75±0,11cm e 0,39±0,06cm, respectivamente. O coeficiente de correlação para a relação cortico-medular entre os rins direito e esquerdo foi de r = 0,19. O exame ultrasonográfico mostrou-se como uma técnica eficiente, nãoinvasiva, rápida e reprodutível, que provê dados importantes aos profissionais da área de clínica e cirurgia de animais silvestres.

The rate of force generation by the myocardium is not influenced by afterload

The influence of afterload on the rate of force generation by the myocardium was investigated using two types of preparations: the in situ dog heart (dP/dt) and isolated papillary muscle of rats (dT/dt). Thirteen anesthetized, mechanically ventilated and thoracotomized dogs were submitted to pharmacological autonomic blockade (3.0 mg/kg oxprenolol plus 0.5 mg/kg atropine). A reservoir connected to the left atrium permitted the control of left ventricular end-diastolic pressure (LVEDP). A mechanical constriction of the descending thoracic aorta allowed to increase the systolic pressure in two steps of 20 mmHg (conditions H1 and H2) above control values (condition C). After arterial pressure elevations (systolic pressure C: 119 ± 8.1; H1: 142 ± 7.9; H2 166 ± 7.7 mmHg; P<0.01), there were no significant differences in heart rate (C: 125 ± 13.9; H1: 125 ± 13.5; H2: 123 ± 14.1 bpm; P>0.05) or LVEDP (C: 6.2 ± 2.48; H1: 6.3 ± 2.43; H2: 6.1 ± 2.51 mmHg; P>0.05). The values of dP/dt did not change after each elevation of arterial pressure (C: 3,068 ± 1,057; H1: 3,112 ± 996; H2: 3,086 ± 980 mmHg/s; P>0.05). In isolated rat papillary muscle, an afterload corresponding to 50% and 75% of the maximal developed tension did not alter the values of the maximum rate of tension development (100%: 78 ± 13; 75%: 80 ± 13; 50%: 79 ± 11 g mm-2 s-1, P>0.05). The results show that the rise in afterload per se does not cause changes in dP/dt or dT/dt

Effect of L-arginine, dimercaptosuccinic acid (DMSA) and the association of L-arginine and DMSA on tissue lead mobilization and blood pressure level in plumbism

Lead (Pb)-induced hypertension is characterized by an increase in reactive oxygen species (ROS) and a decrease in nitric oxide (NO). In the present study we evaluated the effect of L-arginine (NO precursor), dimercaptosuccinic acid (DMSA, a chelating agent and ROS scavenger), and the association of L-arginine/DMSA on tissue Pb mobilization and blood pressure levels in plumbism. Tissue Pb levels and blood pressure evolution were evaluated in rats exposed to: 1) Pb (750 ppm, in drinking water, for 70 days), 2) Pb plus water for 30 more days, 3) Pb plus DMSA (50 mg kg-1 day-1, po), L-arginine (0.6%, in drinking water), and the combination of L-arginine/DMSA for 30 more days, and 4) their respective matching controls. Pb exposure increased Pb levels in the blood, liver, femur, kidney and aorta. Pb levels in tissues decreased after cessation of Pb administration, except in the aorta. These levels did not reach those observed in nonintoxicated rats. All treatments mobilized Pb from the kidney, femur and liver. Pb mobilization from the aorta was only effective with the L-arginine/DMSA treatment. Blood Pb concentrations in Pb-treated groups were not different from those of the Pb/water group. Pb increased blood pressure starting from the 5th week. L-arginine and DMSA treatments (4th week) and the combination of L-arginine/DMSA (3rd and 4th weeks) decreased blood pressure levels of intoxicated rats. These levels did not reach those of nonintoxicated rats. Treatment with L-arginine/DMSA was more effective than the isolated treatments in mobilizing Pb from tissues and in reducing the blood pressure of intoxicated rats.